检索结果-南通市图书馆

作者：曹淳江苏大学

学位级别：硕士

背景:肿瘤抑制因子LKB1(Liver kinase B1)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。生殖系细胞LKB1功能的缺失或突变诱发一种常染色体显性遗传病—Peutz-Jeghers综合征,其以胃肠道息肉、皮肤与口腔色素斑形成和癌变高发为主要特征。大量临床病理... 详细信息

背景:肿瘤抑制因子LKB1(Liver kinase B1)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。生殖系细胞LKB1功能的缺失或突变诱发一种常染色体显性遗传病—Peutz-Jeghers综合征,其以胃肠道息肉、皮肤与口腔色素斑形成和癌变高发为主要特征。大量临床病理学研究表明Peutz-Jeghers综合征患者的胃肠道息肉具有典型的炎性症状,常伴随着T淋巴细胞等炎症细胞浸润。同时利用Cre/Lox P技术建立T淋巴细胞特异性LKB1敲除的转基因杂合子小鼠也形成炎性胃肠道息肉,提示T淋巴细胞中的LKB1具有调控炎症反应功能,但其中分子机制尚无研究。长期研究发现,当细胞处于营养/能量缺失状态下,AMP:ATP比例失调,蛋白激酶LKB1通过活化AMPK复合体抑制蛋白质合成、脂类合成等耗能途径,促进糖酵解、谷氨酰胺分解等产能途径,维持胞内ATP的含量与基本生命活动。但LKB1-AMPK对炎症信号的调节作用与分子机制尚有待探究。T细胞受体(TCR)信号诱导的CARD11-BCL-10-MALT1(CBM)复合体组成,进而激活NF-κB炎症信号通路,启动下游靶基因转录表达,参与了T细胞增殖、分化与免疫应答,在T细胞免疫活化与炎症反应过程中发挥关键作用。长久以来,对于T细胞中LKB1-AMPK的信号研究集中于营养缺失条件下或TCR信号活化后的代谢重编程作用,在营养缺失条件下对于炎症信号尤其是NF-κB信号的调控机制尚无研究。因此探索LKB1-AMPK对T细胞NF-κB信号的影响,为理解营养代谢对T细胞功能与炎症反应的调节作用提供了全新的视角与思路。方法:(1)在LKB1缺失的细胞系(He La、A549)中回输LKB1或利用重组慢病毒介导的sh RNA静默T细胞系(Jurkat)中敲低LKB1,通过Western Blot(WB)检测NF-κB信号的变化(IκB-α蛋白水平),研究LKB1能否调控NF-κB炎症信号。(2)使用葡萄糖饥饿或二甲双胍处理两种LKB1激活条件刺激Jurkat细胞,通过WB与q PCR分别检测IκB-α蛋白水平与TNF-α的m RNA水平。(3)在利用CD3,CD28单克隆抗体活化Jurkat细胞TCR信号的同时,使用二甲双胍同时刺激Jurkat细胞LKB1-AMPK信号,通过q PCR检测NF-κB信号所调控的下游分子IL-2,TNF-α的m RNA水平变化。(4)利用葡萄糖饥饿或二甲双胍刺激LKB1、BCL-10或MALT1静默的Jurkat细胞株,通过WB比较这三株与野生型细胞的NF-κB信号的差别,分析这三个分子在营养/能量缺失状态下对NF-κB信号的调控作用。(5)利用免疫共沉淀检测葡萄糖饥饿条件下BCL-10与MALT1结合作用的变化,研究BCL-10与MALT1复合体形成是否接受营养信号调控;(6)在AMPK-α1/2敲除的MEF细胞中通过免疫共沉淀检测BCL-10与MALT1结合变化,研究两者结合是否接受AMPK调控。(7)在AMPK-α1/2敲除的MEF细胞中通过重组逆转录病毒回输野生型AMPK-α1或蛋白激酶失活突变的AMPK-α1-K45R,然后通过免疫共沉淀研究BCL-10与MALT1结合是否依赖AMPK蛋白激酶活性。(8)利用免疫共沉淀验证AMPK各个亚基与BCL-10是否存在结合,探究AMPK直接调控BCL-10的可能性。(9)通过Phos-tag研究葡萄糖饥饿时BCL-10的磷酸化水平。(10)通过BCL-10定点突变与体外蛋白激酶实验探究BCL-10的磷酸化位点与上游蛋白激酶。(11)通过免疫共沉淀检测BCL-10S138位点的磷酸化对与MALT1结合的影响。结果:(1)LKB1基因在多种细胞中抑制NF-κB信号:在He La、A549与Jurkat中LKB1的表达水平与IκB-α蛋白水平呈正比。(2)LKB1-AMPK活化抑制T细胞的NF-κB信号:葡萄糖饥饿或二甲双胍处理刺激Jurkat后IκB-α蛋白水平上升同时TNF-α的m RNA水平下降;利用CD3,CD28单抗与二甲双胍共同刺激Jurkat细胞时,IL-2与TNF-α的m RNA水平受到显著抑制。(3)营养/能量缺失条件抑制T细胞NF-κB信号依赖于LKB1、BCL-10与MALT1的存在:LKB1、BCL-10或MALT1静默Jurkat细胞株利用葡萄糖饥饿或二甲双胍处理后,IκB-α蛋白增长水平与野生型相比显著下降。(4)营养信号激活的LKB1-AMPK信号调控BCL-10与MALT1复合体的形成:葡萄糖饥饿、AMPK-α1/2敲除与AMPK-α1激酶活性缺失均抑制BCL-10与MALT1复合体的形成。(5)AMPK复合体与BCL-10存在直接结合:胞内BCL-10与AMPK-α1、AMPK-β1、AMPK-γ1均存在结合作用。(6)LKB1-AMPK活化时BCL-10受到磷酸化修饰:葡萄糖饥饿时BCL-10磷酸化水平升

关键词： LKB1 AMPK BCL-10 MALT1 NF-κB

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吹糖人

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快乐青春（简妙作文）（中学生适读） 2024年第3期 18-19页

作者：曹淳嘉江苏无锡市湖滨中学

开头简妙写法——扣题提示写什么:提起江南水乡,我第一个想到的是家乡的吹糖人中间简妙写法——承头顺写详重点:荡口古镇离我家近得很,儿时,我没少去古镇里玩。吹糖人,是我每次游玩必不可少的项目。许是缘分吧,我总是对吹糖人情有独钟... 详细信息

开头简妙写法——扣题提示写什么:提起江南水乡,我第一个想到的是家乡的吹糖人中间简妙写法——承头顺写详重点:荡口古镇离我家近得很,儿时,我没少去古镇里玩。吹糖人,是我每次游玩必不可少的项目。许是缘分吧,我总是对吹糖人情有独钟。街口,两翼苍苍的老爷爷面前横着一口大锅,金色的糖浆冒着些许气泡,晶莹剔透,行人无不垂涎三尺。

关键词：吹糖人扣题江南水乡写法

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CRISPR-Cas9基因编辑报道系统应用于AAVS1安全港的定点整合

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华中科技大学学报（医学版） 2022年第6期51卷 825-829页

作者：曹淳陈耀何佳佳张毛雪钱正韬周小明江苏大学医学院基础医学与医学技术学院镇江212013

目的利用ZFN与TALEN基因编辑以及同源重组技术将Cas9表达框、基因编辑效率荧光报道系统以及真核细胞筛选标记的DNA超长片段定点插入HEK-293T细胞基因组AAVS1安全港,建立可用于衡量CRISPR-Cas9基因编辑的稳定细胞株。方法利用分子克隆技... 详细信息

目的利用ZFN与TALEN基因编辑以及同源重组技术将Cas9表达框、基因编辑效率荧光报道系统以及真核细胞筛选标记的DNA超长片段定点插入HEK-293T细胞基因组AAVS1安全港,建立可用于衡量CRISPR-Cas9基因编辑的稳定细胞株。方法利用分子克隆技术构建AAVS1-all-in-one-CRISPR质粒。利用脂质体将识别并切割AAVS1基因组序列的ZFN和TALEN质粒以及AAVS1-all-in-one-CRISPR质粒共转染入HEK-293T细胞。使用嘌呤霉素筛选获得单克隆细胞后,利用杀稻瘟菌素S筛选、红色荧光检测、Cas9 Western blot以及基因组PCR鉴定等方法获得CRISPR-Cas9基因编辑报道系统完整整合入AAVS1安全港的稳定细胞株。继而,将EGFP修复模板单链DNA及EGFP sgRNA瞬时转染入这些稳定细胞株,对失去荧光的EGFP进行基因编辑,恢复其发光功能,并通过荧光检测技术验证基因编辑结果。结果成功获得3株同时具有嘌呤霉素和杀稻瘟菌素S抗性以及表达红色荧光蛋白的单克隆细胞,Western blot证实其成功表达Cas9蛋白,基因组PCR鉴定目的基因成功整合入基因组AAVS1位点。经EGFP基因编辑后,细胞恢复绿色荧光。结论利用ZFN与TALEN将完整的CRISPR-Cas9基因编辑报道系统成功整合入HEK-293T细胞基因组的AAVS1安全港,整合DNA片段长度达11.5 kb,并利用Cas9成功编辑EGFP报道基因。

关键词： AAVS1 CRISPR ZFN TALEN 基因编辑

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基于MIKE11模型的平原城市超标准洪水调度方案研究

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水资源研究 2024年第2期13卷 200-210页

作者：陈瑾仪高成曹淳妍庆丹丹张博尧河海大学水文水资源学院江苏南京河海大学设计研究院有限公司江苏南京

由于全球气候变暖和更频繁的极端降水事件,未来几年平原城市超标准洪水灾害的发生频率和强度预计将会继续增加。聊城市地处黄河下游、鲁西平原,是山东省历史上遭受洪涝灾害最多、最重的地区之一。面对可能发生的超标准洪水灾害,本文建立... 详细信息

由于全球气候变暖和更频繁的极端降水事件,未来几年平原城市超标准洪水灾害的发生频率和强度预计将会继续增加。聊城市地处黄河下游、鲁西平原,是山东省历史上遭受洪涝灾害最多、最重的地区之一。面对可能发生的超标准洪水灾害,本文建立MIKE11河网水动力模型对其进行洪涝模拟,提前制定超标准洪水调度方案,科学利用工程与非工程工程措施在市域范围内形成联合调度模式,保障城市的防洪安全。结果表明,调度方案能够满足聊城市防御目标和保护对象的要求。超标准洪水三道防线和中心城区独立防洪圈建成后,即使遭遇超标准洪水,也可有效保护聊城市及中心城区的防洪安全。同时,调度方案考虑到聊城市未来规划建设,既解决了中心城区现状河道数量较少,调蓄能力不足问题,又布置了闸泵工程设计河道排涝出路,进一步提升了聊城市的防洪排涝能力。本文的研究结果也为我国同类平原城市洪涝调控提供了新的理论依据,具有参考意义。

关键词：平原城市超标准洪水 MIKE11模型调度方案洪涝调控

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聚丙烯纺熔无纺布亲水工艺研究

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中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2023年第4期 43-46页

作者：曹淳董山恒徐颖朱婧雯北自所(常州)科技发展有限公司江苏常州213000

本文论述了聚丙烯纺熔亲水无纺布的发展状况及应用前景,通过使用阴离子表面活性剂对聚丙烯纺熔无纺布进行亲水处理,通过控制变量法调整其中一种工艺条件,分析比较不同的工艺条件下阴离子表面活性剂对纺熔无纺布的液体渗透时间、反渗量... 详细信息

本文论述了聚丙烯纺熔亲水无纺布的发展状况及应用前景,通过使用阴离子表面活性剂对聚丙烯纺熔无纺布进行亲水处理,通过控制变量法调整其中一种工艺条件,分析比较不同的工艺条件下阴离子表面活性剂对纺熔无纺布的液体渗透时间、反渗量的影响来判断亲水处理的效果,最终得出最优的生产工艺。聚丙烯(Polypropylene)是石油提炼出来的丙烯通过加聚反应而生产的聚合物,是无毒、无色、无味的半透明固态物质,因其具有质量轻、强度高、耐磨、耐热性、耐酸碱性等优异的物理化学性能,因此被广泛的应用于纺粘法非织造布的生产。

关键词：聚丙烯纺熔无纺布亲水工艺液体穿透时间反渗量

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试论我国法官造法的必要性与可行性

试论我国法官造法的必要性与可行性

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作者：曹淳中国政法大学

学位级别：硕士

在大陆法系国家,成文法是法官断案的唯一标准,按图索骥的工作方式要求法官对法律绝对的忠诚。受理性主义的影响,大陆法系国家的立法者对自身认识能力有充分的信心,然而历史和经验告诉我们,最好的法律仍然难免会有漏洞,法律自身的局限性... 详细信息

在大陆法系国家,成文法是法官断案的唯一标准,按图索骥的工作方式要求法官对法律绝对的忠诚。受理性主义的影响,大陆法系国家的立法者对自身认识能力有充分的信心,然而历史和经验告诉我们,最好的法律仍然难免会有漏洞,法律自身的局限性决定了其既不能将所有应调整的社会关系纳入其规范体系,也不能在社会关系发展变化后作出相应的调整。立法的滞后性和法官不得拒绝裁判的义务,使得法官填补法律空白的社会事实有了正当性。以判例法为主的普通法系国家,受经验主义的影响,赋予了法官根据当前社会的共同价值观念来创制判例和阐释判例引出原则和规则的造法权力,随之而来的是法官造法理论随着实践的发展而不断成熟和完善。无论是在大陆法系国家还是在英美法系国家,法律相对稳定而社会不断发展的矛盾使法律留有真空地带成为必然,法官造法对于弥补这种“漏洞”进而平衡立法和司法的关系,起着至关重要的作用。同时,在长期的司法过程中,成文法和判例法都表现出了自身的局限性,两大法系也产生了相互借鉴相互靠拢的发展趋势。因此,大陆法系国家在一定条件下,即在遵循法定方式和限度的条件下,借鉴普通法系国家成熟的理论和经验,给予法官一定自由裁量以及“造法”的权力对于减少或解决其弊端是非常有必要的。受特定历史和国情等因素的影响,我国是一个成文法国家,制定法作为我国主要法律渊源,规范着我国方方面面的社会关系。从二十世纪八十年代以来,中国逐步从传统的封闭社会逐步走向现代、开放的信息社会,一方面我国立法工作取得很大的发展、法律体系也正日趋完善,但另一方面处于转型期的当代中国,经济和社会生活日趋复杂化,不同利益主体的诉求导致大量新型诉讼的产生,法律漏洞大量存在,这不仅导致了法官适用法律的困难,同时也使现实中的法官在不同程度上行使着“造法”的功能。我们若想规制这一事实中的法官“造法”权力,只能通过对法官造法的方法和机制进行深入的研究和分析,积极借鉴大陆法系国家的司法实践和普通法系国家成熟的判例制度,立足我国的国情,建立起符合我国现阶段法治需要的法官造法制度。本文论述了法官造法的原因、含义和途径等一般理论,并在对国外法官造法历史发展分析的基础上,阐述了我国法官造法的现实意义。并通过对我国法官造法必要性和可行性的分析,探讨了中国法官造法存在的若干问题和并对此提出了自己的建议和对策。

关键词：法官造法必要性可行性对策

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