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壮药鸡骨草制剂治疗多房棘球蚴感染诱导的肝纤维化效果

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第5期42卷 573-581页

作者：李嘉静黄文君曹得萍桂林医学院基础医学院人体寄生虫学教研室广西桂林541199 桂林医学院病原生物学重点实验室广西桂林541199

目的观察体内和体外壮药鸡骨草制剂(HaF)治疗多房棘球蚴感染诱导的肝纤维化效果。方法取鸡骨草胶囊制备25、50、100、200μg/ml HaF溶液,分别体外处理人肝星状细胞LX2 (HSC-LX2) 72、96、120 h后,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检... 详细信息

目的观察体内和体外壮药鸡骨草制剂(HaF)治疗多房棘球蚴感染诱导的肝纤维化效果。方法取鸡骨草胶囊制备25、50、100、200μg/ml HaF溶液,分别体外处理人肝星状细胞LX2 (HSC-LX2) 72、96、120 h后,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测在HSC-LX2中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)的相对表达量。取0.1 mg/ml多房棘球蚴虫体蛋白刺激HSC-LX2 24 h,加入100μg/ml HaF溶液处理24、48、72 h后,Western blotting检测HSC-LX2中α-SMA和collagen Ⅰ相对表达量。将36只雌性昆明小鼠随机分为对照组(4只)、感染组(4只)、0.5 g/(kg·d) HaF治疗组(5只)、1.0 g/(kg·d) HaF治疗组(5只)、2.0 g/(kg·d)HaF治疗组(6只)、阿苯达唑(ABZ)治疗组(6只)、ABZ+HaF联合治疗组(6只)等7个组,感染组和各治疗组小鼠分别腹腔注射2 000个原头节,对照组注射等体积生理盐水。感染后60 d,治疗组小鼠灌胃相应药物,1次/d。治疗60 d后,取小鼠肝、脾组织称重,计算小鼠肝脏指数和脾脏指数;碱水解法测定肝组织羟脯氨酸(HYP)含量;比色法测定血清天冬氨酸转氨酶(AST)水平;Western blotting检测肝组织α-SMA和collagen Ⅰ相对表达量;苏木精-伊红(HE)染色、Masson染色观察小鼠肝、脾组织病理变化。两组间数据比较采用独立样本t检验。结果 100μg/ml HaF溶液干预96 h后,HSC-LX2中α-SMA和collagen Ⅰ相对表达量分别为0.401±0.218、0.352±0.058,均低于对照组(1.435±0.297、1.340±0.416)(t=2.755、11.120,均P0.05)。经多房棘球蚴虫体蛋白刺激的HSC-LX2在HaF处理48 h后的α-SMA和collagen Ⅰ相对表达量分别为0.326±0.106和0.315±0.076,均低于对照组(0.895±0.417、1.009±0.378)(t=6.359、9.059,均P0.05)。Western blotting结果显示,1.0 g/(kg·d) HaF治疗组小鼠肝组织中α-SMA相对表达量为0.818±0.195,ABZ+HaF联合治疗组小鼠肝组织collagen Ⅰ相对表达量为0.799±0.167,均低于感染组(1.668±0.131、1.341±0.141)(t=3.619、2.486,均P<0.05)。HE染色和Masson染色表明,ABZ+HaF联合治疗组小鼠肝纤维化程度明显改善,肝组织中纤维组织面积为(6.184±1.951)%,低于感染组的(19.916±2.046)%(t=4.703,P<0.01)。结论壮药鸡骨草制剂在体内和体外均可明显减轻多房棘球蚴感染诱导的肝纤维化,为鸡骨草胶囊作为多房棘球蚴病的新型治疗制剂提供了实验依据。

关键词：多房棘球蚴感染壮药鸡骨草肝纤维化

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继发性棘球蚴病小鼠体内细胞因子改变的研究

热带医学杂志 2004年第4期4卷 385-386,389页

作者：曹得萍青海医学院病原生物学教研室西宁810001

目的通过利用钙拮抗剂维拉帕米和阿苯哒唑单独及联合用药治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效观察,探讨小鼠体内细胞因子的变化趋势。方法小鼠被随机分成7组(维拉帕米、阿苯哒唑的单用组、维拉帕米和阿苯哒唑的联合用药组、对照组)。给予药物... 详细信息

目的通过利用钙拮抗剂维拉帕米和阿苯哒唑单独及联合用药治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效观察,探讨小鼠体内细胞因子的变化趋势。方法小鼠被随机分成7组(维拉帕米、阿苯哒唑的单用组、维拉帕米和阿苯哒唑的联合用药组、对照组)。给予药物治疗90d后,小鼠眼球取血,检测血清IL-2、IL-10和IgE的含量。结果治疗90d后,小鼠血清IL-2、IgE含量与对照组相比有显著性差异(P<0.05),IL-10的含量与对照组比无明显差异。结论IgE、IL-2和IL-10可以作为判断治疗棘球蚴病疗效的指标。

关键词：棘球蚴维拉帕米阿苯哒唑细胞因子

不同血清学方法对调查现场包虫病人血清的检测及评价

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中国人兽共患病杂志 2000年第6期16卷 67-69页

作者：王虎曹得萍马淑梅江莉柴君杰青海医学院寄生虫病研究所西宁810001 卫生部包虫病防治培训基地

本文应用青海囊型包虫抗原 Dot- EL ISA、IHA和新疆囊型包虫抗原 EL ISA、泡型包虫 EM18抗原 EL IB对流行病学调查现场的 2 0 6例包虫病人血清进行了检测。结果表明青海囊型包虫抗原 Dot- EL ISA和 IHA对囊型包虫病人血清的阳性率分别是... 详细信息

本文应用青海囊型包虫抗原 Dot- EL ISA、IHA和新疆囊型包虫抗原 EL ISA、泡型包虫 EM18抗原 EL IB对流行病学调查现场的 2 0 6例包虫病人血清进行了检测。结果表明青海囊型包虫抗原 Dot- EL ISA和 IHA对囊型包虫病人血清的阳性率分别是 90 .37%和 91.98% ;新疆囊型包虫抗原 EL ISA对囊型包虫病人血清的阳性率为 75 .94% ;三种方法对钙化灶型囊型包虫病人血清的阳性率分别是 77.2 7%、81.82 %和 6 5 .91% ,显著低于其它囊型包虫病人血清的阳性率 ;阴性者主要是单纯性肺脏和肝脏囊型包虫病人血清。3种方法 B超、X线诊断的泡型包虫病人的血清阳性率均为 10 0 .0 %。泡型包虫抗原 EM18-EL IB检测结果表明 ,B超 ,X线诊断的泡型包虫病人血清阳性率为 73.6 8% ;囊型包虫病人血清阳性率为 5 .88% ,其中钙化灶型病人血清阳性率为 15 .91% ;阳性血清数与阴性血清数比例约为 1:7(2 5 :181)。

关键词：囊型包虫病泡型包虫病血清学诊断

细粒棘球绦虫孕节中虫卵数量和活力及大小观测

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地方病通报 1997年第1期12卷 35-37页

作者：曹得萍王虎青海医学院寄生虫学教研室西宁市810001

本文对青海高原藏羊／犬株和牦牛／犬株细粒棘球绦虫孕节中虫卵数量、活力及形态进行了观测。结果显示：①虫卵呈宽椭圆形；②两株细粒棘球绦虫孕节内虫卵含量明显不同，藏羊／犬株孕节内虫卵含量多，牦牛／犬株孕节内虫卵含量少；③对... 详细信息

本文对青海高原藏羊／犬株和牦牛／犬株细粒棘球绦虫孕节中虫卵数量、活力及形态进行了观测。结果显示：①虫卵呈宽椭圆形；②两株细粒棘球绦虫孕节内虫卵含量明显不同，藏羊／犬株孕节内虫卵含量多，牦牛／犬株孕节内虫卵含量少；③对两株虫体孕节中虫卵进行大小测量，表明两株棘球绦虫孕节中虫卵大小有显著性差异，牦牛／犬株的虫卵大于藏羊／犬株的虫卵，提示棘球绦虫孕节中虫卵的含量与虫卵的大小成反比，含量越多，虫卵越小，反之，则虫卵越大；④两株棘球绦虫孕节内均含有死卵，这是首次发现，其发生机理及其意义有待进一步研究。

关键词：细粒棘球绦虫绦虫孕节虫卵虫体

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细粒棘球绦虫延伸因子1生物信息学分析

中国公共卫生 2017年第4期33卷 607-610页

作者：李超群樊海宁张耀刚曹得萍青海大学医学院病原生物学教研室西宁810001 青海大学包虫病重点实验室

目的利用生物信息学技术对细粒棘球绦虫的延伸因子1(EF-1)进行分析,探讨其诊断价值。方法通过Expasy系统预测EF-1的理化性质,使用DNAStar软件分析蛋白亲水性、柔性区域、抗原指数及表面可及性,利用ABCpred与IEDB软件综合预测B细胞线性... 详细信息

目的利用生物信息学技术对细粒棘球绦虫的延伸因子1(EF-1)进行分析,探讨其诊断价值。方法通过Expasy系统预测EF-1的理化性质,使用DNAStar软件分析蛋白亲水性、柔性区域、抗原指数及表面可及性,利用ABCpred与IEDB软件综合预测B细胞线性抗原表位,通过DNAStar软件预测T细胞表位,使用SOPMA软件预测二级结构,SWISS-MODEL网站构建EF-1的三级结构,使用MEGA软件选择neighbor joining法构建EF-1氨基酸序列的系统发育树。结果 EF-1基因序列全长1 412 bp,含有2个内含子;EF-1亲水性得分较高的区域为35~45、52~70、126~140、158~183、301~322、357~380、424~448;柔性区域为26~45、54~71、162~176、300~318、357~381、432~448;抗原性指数得分较高的区域分布与柔性区域一致;表面可及性得分较高的区域较少,主要分布在39~54、62~76、128~132、161~170、220~234、315~329、354~372、424~448;可能的B细胞线性表位的氨基酸序列为120~130、286~295、306~320、365~378;可能的优势性T细胞表位区域为34~48、164~177、222~244、280~290、321~330、396~407;EF-1的二级结构中α螺旋占32.81%、β折叠占22.54%、β转角占10.94%、无规则卷曲占33.71%;系统发育树结果表明多房棘球绦虫为一枝,其余聚于一枝,且内部形成许多梳齿状分枝。结论得到4个可能形成B细胞表位的区域、6个优势性T细胞表位区域,EF-1具有较高的保守性,可作为免疫诊断和药物治疗靶点。

关键词：细粒棘球绦虫延伸因子1(EF一1) 生物信息学

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藏药治疗小鼠继发性棘球蚴超微结构的观察

中国人兽共患病学报 2006年第7期22卷 654-656页

作者：曹得萍马祁生赵海龙青海医学院病原生物学教研室西宁810001

目的通过应用藏药25味铜灰散治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效观察,探讨藏药治疗棘球蚴病的免疫机理及为临床更好的应用药物治疗棘球蚴病奠定一个良好基础。方法给予药物治疗90d后,解剖小鼠,检测各小鼠棘球蚴囊的湿重,对棘球蚴囊进行超微... 详细信息

目的通过应用藏药25味铜灰散治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效观察,探讨藏药治疗棘球蚴病的免疫机理及为临床更好的应用药物治疗棘球蚴病奠定一个良好基础。方法给予药物治疗90d后,解剖小鼠,检测各小鼠棘球蚴囊的湿重,对棘球蚴囊进行超微结构的观察。结果治疗90d后,棘球蚴囊病理及超微结构都有明显的变化。结论藏药25味铜灰散对小鼠棘球蚴有比较好的治疗作用,这将为棘球蚴病的临床治疗提供一个新的前景与思路。

关键词：棘球蚴病藏药超微结构

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人体寄生虫学实验教学改革的探讨

西北医学教育 2009年第6期17卷 1205-1206页

作者：曹得萍青海大学医学院病原生物学教研室青海西宁810001

探讨人体寄生虫学实验教学改革的方法,从教师对实验改革的认识度、实验教材的建设、实验教学方法和手段的改进等方面,阐述了人体寄生虫学实验教学改革的必要性,可充分调动学生的学习兴趣和对学习的积极主动性,在一定程度上提高了教学效果。

关键词：人体寄生虫学实验教学改革教学效果

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细粒棘球绦虫转酮醇酶克隆表达及免疫性分析

中国血吸虫病防治杂志 2018年第2期30卷 155-160页

作者：曹得萍张耀刚李超群刘佳姜博璠青海大学医学院病原生物学教研室西宁810001 青海大学附属医院、青海省包虫病研究重点实验室

目的通过原核表达获得细粒棘球绦虫转酮醇酶(TK)表达产物,分析其作为棘球蚴病诊断抗原分子的价值。方法 PCR扩增TK基因,克隆至原核载体p MD19-Eg TK,随后亚克隆至表达载体p ET-28a,构建目的基因TK原核表达质粒p ET-28a(+)-Eg TK,转入大... 详细信息

目的通过原核表达获得细粒棘球绦虫转酮醇酶(TK)表达产物,分析其作为棘球蚴病诊断抗原分子的价值。方法 PCR扩增TK基因,克隆至原核载体p MD19-Eg TK,随后亚克隆至表达载体p ET-28a,构建目的基因TK原核表达质粒p ET-28a(+)-Eg TK,转入大肠埃希菌BL21,分离纯化蛋白,经SDS-PAGE、Western blotting鉴定后,收集细粒棘球蚴病(CE组)、多房棘球蚴病(AE组)患者及健康人(健康组)血清,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组蛋白作为诊断抗原的价值。结果成功构建p ET-28a(+)-Eg TK质粒,经SDS-PAGE和Western blotting分析,Eg TK蛋白在70 k Da处出现条带,与理论值一致。ELISA显示,CE组、AE组和健康组血清反应吸光度A450值间差异有统计学意义(F=44.47,P0.05)。结论重组TK分子可较好地区分棘球蚴病患者和非棘球蚴病患者,但无法区分细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者。

关键词：细粒棘球绦虫棘球蚴病转酮醇酶重组质粒诊断抗原

PVC—Dot—ELISA和IHA在囊虫病诊断中的应用

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青海医学院学报 2002年第4期23卷 3-4页

作者：曹得萍马淑梅王虎青海医学院寄生虫病研究所青海省地方病预防控制所

目的　本文报告应用不同方法对 80例疑为囊虫病的患者的检测结果。方法　用PVC -Dot-ELISA和IHA检测。结果　在不同民族阳性血清中汉族人群血清阳性率最高为81 .8% ,其他民族血清阳性率次之为 1 .82 % ;在不同职业人群中农民的血清阳性... 详细信息

目的　本文报告应用不同方法对 80例疑为囊虫病的患者的检测结果。方法　用PVC -Dot-ELISA和IHA检测。结果　在不同民族阳性血清中汉族人群血清阳性率最高为81 .8% ,其他民族血清阳性率次之为 1 .82 % ;在不同职业人群中农民的血清阳性率最高为 6 0 .0 0 % ,其他职业的血清阳性率次之为 45 .1 6 % ,学生的血清阳性率为 2 4 .1 4%。这两种血清学方法的阳性符合率为 1 0 0 %。结论　显示这两种血清学方法的敏感性相似。

关键词： PVC-Dot-ELISA IHA 脑囊虫病诊断应用血清学检测