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糖化血红蛋白检测及其在糖尿病诊疗中的应用

中华检验医学杂志 2018年第11期41卷 800-803页

作者：晋臻刘子杰段勇昆明医科大学第一附属医院医学检验科云南省实验诊断研究所云南省检验医学重点实验室 650032

尽管糖化血红蛋白（HbA1c）在国外广泛应用于糖尿病的诊断和管理，但由于我国各地区检测能力和条件的不平衡，限制了HbA1c在我国的临床应用。HbA1c的检测方法、干扰因素及标准化问题，仍需要检验T作者的持续关注。如何采用最经济、高效... 详细信息

尽管糖化血红蛋白（HbA1c）在国外广泛应用于糖尿病的诊断和管理，但由于我国各地区检测能力和条件的不平衡，限制了HbA1c在我国的临床应用。HbA1c的检测方法、干扰因素及标准化问题，仍需要检验T作者的持续关注。如何采用最经济、高效的方法检测HbA1c为患者提供准确可靠的结果，是推动我国HbA1c用于糖尿病诊断和管理的首要问题。

关键词：血红蛋白A, 糖基化糖尿病临床化学试验参考标准

HbA1c常规工作中引入测量不确定度的意义和存在的困难

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中华检验医学杂志 2014年第12期37卷 884-886页

作者：刘子杰晋臻段勇昆明医科大学第一附属医院检验科 650032

糖尿病已成为21世纪影响人类健康的公共卫生问题，相关的急，慢性并发症严重地威胁着患者的健康甚至生命。糖化血红蛋白A1e（HbA1e）已经成为糖尿病血糖控制的金标准，研究表明HbA1e每降低1％，糖尿病相关的大、小血管发生事件会明显下... 详细信息

糖尿病已成为21世纪影响人类健康的公共卫生问题，相关的急，慢性并发症严重地威胁着患者的健康甚至生命。糖化血红蛋白A1e（HbA1e）已经成为糖尿病血糖控制的金标准，研究表明HbA1e每降低1％，糖尿病相关的大、小血管发生事件会明显下降。因此，HbA1e。检测的准确性在糖尿病患者管理中具有重要价值。测量准确性是一个定性概念，采用测量不确定度可反应测量准确性程度，从而可度量测量的准确性。误差理论在医学检验界得到长期的应用，而测量不确定度是在误差理论上进一步发展而得来的，因此引入测量不确定度对提高检验结果质量应有积极的作用。中华检验医学杂志．2014，37：884-886）

关键词：血红蛋白A,糖基化诊断试验,常规糖尿病测量确定度

黄芪建中汤单煎液与合煎液中铜、铅、镉、汞及砷的含量差异

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中国药房 2019年第5期30卷 661-664页

作者：晋臻夏婷谭晓梅南方医科大学中医药学院/广东省中药制剂重点实验室/广东省中药制剂技术工程实验室广州510515

目的:研究黄芪建中汤(由黄芪、桂枝、白芍、炙甘草、生姜、大枣6味中药材组成)单味药材水煎液(简称"单煎液")与各药材合煎液(简称"合煎液")中铜、铅、镉、汞、砷的含量差异,为中药的临床安全应用提供参考。方法:取黄芪建中汤各药材制备... 详细信息

目的:研究黄芪建中汤(由黄芪、桂枝、白芍、炙甘草、生姜、大枣6味中药材组成)单味药材水煎液(简称"单煎液")与各药材合煎液(简称"合煎液")中铜、铅、镉、汞、砷的含量差异,为中药的临床安全应用提供参考。方法:取黄芪建中汤各药材制备药材样品、单煎液样品及合煎液样品;采用原子吸收分光光度法测定各样品中铜、铅、镉、汞及砷的含量;并将测定结果与2015版《中国药典》和《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》中铜(<20 mg/kg)、铅(<5 mg/kg)、镉(<0.3 mg/kg)、汞(<0.2 mg/kg)及砷(<2mg/kg)的含量限度进行比较,同时比较单煎液与合煎液中5种元素的含量差异。结果:6味药材中,桂枝和生姜的镉含量超标,分别为0.32、0.74 mg/kg(铜、铅、汞、砷均符合要求),其余药材中5种元素的含量均符合要求;6味药材单煎液及合煎液中铜、铅、镉、汞及砷的含量均符合要求;与各味药材比较,单煎液中铜、铅、镉、汞及砷含量更低(P<0.01);与各药材单煎混合液比较,合煎液中铜、汞的含量更低(P<0.01),铅、镉、砷的含量更高(P<0.01)。结论:黄芪建中汤各药材合煎会减少铜、汞的溶出,增加铅、镉、砷的溶出;推测合煎过程中各药材之间的相互作用改变了铜、铅、镉、汞及砷的溶出。

关键词：重金属黄芪建中汤单煎合煎原子吸收分光光度法

Coulter-750全自动血细胞分析仪在白血病诊断中的应用

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检验医学 2005年第4期20卷 338-338,341页

作者：孔晋星晋臻沈荣华吴晓青鲍渝霞昆明医学院第一附属医院检验科云南昆明650032

我们对我院新购置Coulter-750全自动血细胞分析仪在白血病诊断中的应用进行初步观察. 一、材料和方法 1.标本一般血液检查正常健康体检者30名,各型血液病患者45例,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)10例,慢性淋巴细胞白血病(CLL)2例,急性粒... 详细信息

我们对我院新购置Coulter-750全自动血细胞分析仪在白血病诊断中的应用进行初步观察. 一、材料和方法 1.标本一般血液检查正常健康体检者30名,各型血液病患者45例,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)10例,慢性淋巴细胞白血病(CLL)2例,急性粒细胞白血病未分化型(M1)1例,部分分化型(M2)13例,急性多颗粒早幼粒细胞白血病(M3)4例,急性粒-单细胞白血病(M4)9例,急性单核细胞白血病(M5)6例,每例取血2ml置于15%EDTA-K2 0.048 ml的真空抗凝管中混匀,取血后2 h完成测试.……

关键词：白血病全自动血细胞分析仪诊断

葛根芩连汤中14种功效成分在大鼠体内的组织分布

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中国实验方剂学杂志 2019年第10期25卷 93-101页

作者：刘昌顺晋臻陈飞龙谭晓梅南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室广东省中药制剂技术工程实验室广州510515

目的:研究葛根芩连汤(GQT)功效成分在大鼠体内的组织分布特征,通过方药功效成分在体内各组织中的靶向性揭示其作用机制。方法:大鼠给予GQT后不同时间点取组织(小肠、大肠、肝、心、脾、肺、肾),样品处理后采用HPLC-MS/MS分析14种功效成... 详细信息

目的:研究葛根芩连汤(GQT)功效成分在大鼠体内的组织分布特征,通过方药功效成分在体内各组织中的靶向性揭示其作用机制。方法:大鼠给予GQT后不同时间点取组织(小肠、大肠、肝、心、脾、肺、肾),样品处理后采用HPLC-MS/MS分析14种功效成分在各组织匀浆液中的含量,Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(2. 1 mm×100 mm,3. 5μm),流动相0. 1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0. 4 m L·min^(-1),电喷雾离子源,正离子模式检测,选择柚皮苷作为内标物。结果:建立了同时测定组织匀浆液中14种GQT主要功效成分的HPLC-MS/MS分析方法,该方法的专属性、标准曲线、回收率、基质效应、精密度、准确度和稳定性良好。在小肠组织中,异黄酮类主要成分葛根素、大豆苷元和3’-羟基葛根素的药时曲线下面积(AUC_(0-10 h))分别为22 174. 9,3 882. 5,15 893. 1 h·mg·L^(-1),黄酮类主要成分黄芩素、汉黄芩素、汉黄芩苷和黄芩苷的AUC_(0-10 h)分别为15 423. 6,15 408. 4,7 017. 3,3 697. 7 h·mg·L^(-1),生物碱类主要成分小檗碱的AUC_(0-10 h)=2 544. 0 h·mg·L^(-1),这些成分在小肠组织的分布水平显著高于其他组织。结论:GQT的功效成分群主要分布于肠道组织,推测其抗炎、止泻的药理作用可能与其成分在肠道组织的作用趋向相关。

关键词：葛根芩连汤功效成分组织分布作用靶向生物碱黄酮类异黄酮类

葛根芩连汤中14种主要成分在大鼠体内的药动学特征研究

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中国中药杂志 2018年第23期43卷 4724-4734页

作者：王新雨晋臻凌霄刘昌顺谭晓梅南方医科大学中医药学院广东广州510515 广东省中药制剂重点实验室广东广州510515 广东省中药制剂技术工程实验室广东广州510515

该研究采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,研究大鼠单次灌胃葛根芩连汤(15 mL·kg^-1)后血浆中葛根素、3′-羟基葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、小檗碱、药根碱、巴马... 详细信息

该研究采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,研究大鼠单次灌胃葛根芩连汤(15 mL·kg^-1)后血浆中葛根素、3′-羟基葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、小檗碱、药根碱、巴马汀、甘草苷14种主要成分的药动学特征。采用Zorbax SB-18色谱柱以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相对分析物和内标(柚皮苷和泼尼松龙)进行梯度洗脱:0~2.5 min,15%~30%A;2.5~3.5 min,30%~35%A;3.5~5.0 min,35%~40%A;5.0~9.0 min,40%~60%A;9.0~11.0 min,60%~15%A。流速为0.4 mL·min^-1。采用电喷雾电离(ESI)源以多反应监测(MRM)模式进行正负离子检测。结果14种成分的线性相关系数大于0.99,血浆样品反复冻融3次、-20℃放置7 d、室温放置12 h以及血浆样品处理后放置24 h的日内、日间变异系数(RSD)小于10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。表明该方法灵敏、准确,适用于葛根芩连汤中14种成分的药动学研究。采用DAS 3.2.2软件的非房室模型计算药动学参数,结果异黄酮类成分和黄酮类成分的MRT0-t在7.5~11.8,T1/2z主要在11.0~29.7 h,黄酮类AUC0-t大于异黄酮类。而生物碱类成分的MRT0-t在4.3~7.2 h,T1/2z在1.0~5.0 h,AUC0-t小于黄酮类和异黄酮类成分。结果提示黄酮及异黄酮类成分体内血药浓度高、作用时间长,有利于抗炎解热作用的发挥;生物碱类成分体内血药浓度低,作用时间短,可能在肠道内发挥其抑菌作用。

关键词：葛根芩连汤超高效液相色谱-串联质谱药代动力学

葛根与黄芩主要有效成分在大鼠小肠黏膜中的代谢性相互作用研究

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中药新药与临床药理 2019年第4期30卷 452-458页

作者：王新雨晋臻陈飞龙谭晓梅南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室广东省中药制剂技术工程实验室广东广州510515

目的研究葛根芩连汤中君药葛根与臣药黄芩主要成分在大鼠小肠黏膜中的代谢性相互作用,为其配伍的合理性提供科学依据。方法在含葛根主要成分大豆苷和染料木苷的小肠黏膜匀浆液中分别加入黄芩主要成分黄芩苷和汉黄芩苷,根据代谢产物的生... 详细信息

目的研究葛根芩连汤中君药葛根与臣药黄芩主要成分在大鼠小肠黏膜中的代谢性相互作用,为其配伍的合理性提供科学依据。方法在含葛根主要成分大豆苷和染料木苷的小肠黏膜匀浆液中分别加入黄芩主要成分黄芩苷和汉黄芩苷,根据代谢产物的生成速度,判断黄芩苷和汉黄芩苷对大豆苷和染料木苷代谢的影响。采用超高效液-质谱联用(UPLC-MS/MS)法确定代谢产物,高效液相色谱(HPLC)法测定代谢产物含量,EadieHofstee方程鉴别酶促动力学类型,通过Lineweaver-Burk方程拟合表观动力学参数[酶被底物饱和时的反应速度(V_(max))、米氏常数(K_m)]。结果大豆苷和染料木苷在大鼠小肠黏膜匀浆液中分别生成了大豆苷元和染料木素,大豆苷的K_m、V_(max)分别为90.88μmol·L^(-1)、1.70 nmol·min^(-1)·mg^(-1),染料木苷的K_m、V_(max)分别为159.30μmol·L^(-1)、4.50 nmol·min^(-1)·mg^(-1)。在黄芩苷及汉黄芩苷的作用下,大豆苷的代谢速度分别增加了93.40%、14.17%,染料木苷的代谢速度分别增加了44.89%、23.83%。结论黄芩苷和汉黄芩苷均促进了大豆苷和染料木苷的分解代谢,有利于活性更强的大豆苷元和染料木素的吸收,从臣药黄芩促进君药葛根主要有效成分肠道生物转化的角度诠释了葛根与黄芩配伍的合理性。

关键词：葛根黄芩小肠黏膜代谢相互作用

沉默DNMT1减弱WIF-1基因启动子甲基化对慢性髓系白血病K562细胞生物学行为的影响

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中国实验血液学杂志 2021年第6期29卷 1768-1774页

作者：武坤晋臻李轶勋李昕程沈菊李艳红郭翀昆明医科大学第一附属医院医学检验科云南昆明650032 昆明医科大学第一附属医院云南省检验医学重点实验室云南昆明650032 昆明医科大学第一附属医院医学临床检验诊断省创新团队云南昆明650032

目的:探讨沉默DNA甲基转移酶(DNMT1)对人慢性髓系白血病细胞内抑癌基因wnt抑制因子-1(WIF-1)基因启动子甲基化的影响。方法:构建DNMT1 siRNAi质粒,将DNMT1 siRNAi转染至慢性髓系白血病K562细胞中,采用RT-PCR和Western blot法检测DNMT1... 详细信息

目的:探讨沉默DNA甲基转移酶(DNMT1)对人慢性髓系白血病细胞内抑癌基因wnt抑制因子-1(WIF-1)基因启动子甲基化的影响。方法:构建DNMT1 siRNAi质粒,将DNMT1 siRNAi转染至慢性髓系白血病K562细胞中,采用RT-PCR和Western blot法检测DNMT1基因和相关蛋白的表达,并利用甲基化PCR检测WIF-1基因启动子甲基化水平,台盼蓝拒染法和MTT法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,集落形成实验检测细胞的集落形成能力,Western blot法检测沉默DNMT1基因后Wnt/β-catenin及其下游信号通路蛋白的表达情况。结果:实验组DNMT1 mRNA和相关蛋白表达水平显著低于对照组和阴性对照组(P<0.05);成功转染72 h后,对照组和阴性对照组WIF-1基因处于完全甲基化状态,而实验组WIF-1基因启动子区域甲基化水平显著降低。MSP检测结果显示,实验组未甲基化的WIF-1引物扩增出的PCR产物含量显著增加,而甲基化的WIF-1引物扩增出的PCR产物含量显著降低。转染成功48 h后,实验组的OD值、活细胞数及集落形成数均显著低于阴性对照组和对照组(P<0.05)。实验组的细胞凋亡率显著高于阴性对照组和对照组(P<0.05)。实验组K562细胞中β-actin、myc、cyclin D1和TCF-1蛋白表达水平均显著低于阴性对照组和对照组(P<0.05)。结论:沉默DNMT1基因能够抑制K562细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与逆转WIF-1基因启动子高甲基化水平,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性有关。

关键词： DNA甲基转移酶1 人慢性髓系白血病高甲基化 Wnt抑制因子-1

HPLC-ELSD法同时测定鹿角霜中碳酸钙和磷酸钙

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中成药 2018年第5期40卷 1215-1217页

作者：许云燕王新雨刘昌顺晋臻谭晓梅南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室广东广州510515

目的建立HPLC-ELSD法同时测定鹿角霜中有效成分碳酸钙和磷酸钙的含有量。方法鹿角霜水提液的分析采用Prevail C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液为流动相;漂移管温度l10℃;氮气体积流量2.8 L/min;体积流量0.5 m L... 详细信息

目的建立HPLC-ELSD法同时测定鹿角霜中有效成分碳酸钙和磷酸钙的含有量。方法鹿角霜水提液的分析采用Prevail C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液为流动相;漂移管温度l10℃;氮气体积流量2.8 L/min;体积流量0.5 m L/min;柱温25℃;进样量10μL。结果氯化钙和磷酸分别在0.20~0.45 g/L(r=0.999 1)和0.054~0.122 g/L(r=0.999 0)范围内线性关系良好,平均加样回收率99.69%~100.97%。经过折算药材中碳酸钙和磷酸钙的含有量,5批鹿角霜的碳酸钙平均含有量为26.88±0.58%,磷酸钙平均含有量为66.36±1.40%。结论该方法快速、简便、准确,对鹿角霜及其制剂质量评价体系的建立有重要的参考价值。明确碳酸钙和磷酸钙含有量及比例,为其药理作用提供物质基础参考。

关键词：鹿角霜碳酸钙磷酸钙 HPLC-ELSD