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武汉某“985”高校在校大学生食源性寄生虫病知信行调查

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中国病原生物学杂志 2017年第4期12卷 353-358页

作者：马晓雪李艳伟龚鹏举蔡国斌明珍平董惠芬武汉大学基础医学院人体寄生虫学教研室湖北武汉430071

目的了解武汉某高校在校大学生食源性寄生虫病知识、行为及态度情况,为高校开设食源性寄生虫病相关选修课的必要性及其制定大学生的健康教育方案提供依据。方法采用单纯随机抽样的方法,调查武汉某高校大学生共1 460人。通过问卷了解其... 详细信息

目的了解武汉某高校在校大学生食源性寄生虫病知识、行为及态度情况,为高校开设食源性寄生虫病相关选修课的必要性及其制定大学生的健康教育方案提供依据。方法采用单纯随机抽样的方法,调查武汉某高校大学生共1 460人。通过问卷了解其对食源性寄生虫病知识的了解、行为习惯和态度表现,对回答问题情况进行描述性分析和卡方检验。结果本调查大学生对食源性寄生虫病及其危害和传染途径的知晓率分别为66.78%、75.96%和77.7%;知晓食源性寄生虫病的途径主要来源于媒体网络(34.6%);不同居住地学生对食源性寄生虫病及其危害的知晓率差异有统计学意义(P均<0.05);不同专业学生对该疾病危害的知晓情况差异有统计学意义(P<0.05)。"不吃生的或半生不熟食物"、"不喝生水"和"生熟砧板分开"3项的健康行为形成率均低于50%。不同性别的大学生对"饭前便后洗手"、"不吃生的或者半生不熟的食物"和"不喝生水"等健康行为形成率差异有统计学意义(P均<0.01),女同学均高于男同学。不同年级大学生"生熟砧板分开"和"不养宠物"等行为差异有统计学意义(P均<0.05)。不同民族、籍贯、居住地的大学生在"不喝生水"和"生熟砧板分开"方面的健康行为形成率有统计学意义(P均<0.05),来自城镇学生均高于来自农村的大学生。不同学部大学生"不吃生的或者半生食物"和"不养宠物"等行为的差异有统计学意义(P均<0.05)。在正确态度形成方面,58.1%学生表示不会再去吃可能感染食源性寄生虫病的食物,13.4%的学生表示还想去尝尝,46.4%学生表示建议他人不要去吃。82.9%的学生计划改掉一些可能感染食源性寄生虫的饮食习惯。结论大学生对食源性寄生虫病知晓率偏低,并且存在高危行为;在高校开设有关食源性寄生虫病的相关课程十分必要。

关键词：大学生食源性寄生虫病知信行

条件培养基对日本血吸虫童虫培养细胞LDH及AgNORs的影响

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中国血吸虫病防治杂志 2010年第6期22卷 552-556,I0004页

作者：罗超明珍平钟沁萍叶青蒋明森董惠芬武汉大学基础医学院人体寄生虫学教研室武汉430071 咸宁学院基础医学院

目的以乳酸脱氢酶(LDH)及核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)为评价指标,观察条件培养基对日本血吸虫童虫培养细胞的影响。方法灌注法获取21d虫龄的日本血吸虫虫体,冷消化法制备细胞悬液,调细胞为1×106个/ml,联合法接种细胞。将接种于小... 详细信息

目的以乳酸脱氢酶(LDH)及核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)为评价指标,观察条件培养基对日本血吸虫童虫培养细胞的影响。方法灌注法获取21d虫龄的日本血吸虫虫体,冷消化法制备细胞悬液,调细胞为1×106个/ml,联合法接种细胞。将接种于小盖玻片上的血吸虫细胞随机分为对照(0h)组和24、48、72h3个实验组共4组。对照组用常规培养基即RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素(青霉素1×105U/L,链霉素100mg/L)培养,实验组培养基为常规培养基分别与培养24、48、72h的鼻咽癌细胞上清液的条件培养基1∶1的混合液。培养第7天,对培养细胞进行LDH及AgNORs染色;每组随机选取300个LDH染色细胞、50个AgNORs染色细胞输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的吸光度(A)值,并作统计分析。结果日本血吸虫童虫细胞在不同条件培养基作用下,其LDH及AgNORs着色均比对照组深,其中72h组细胞着色最深,其次是48h组,再是24h组,对照组细胞着色最浅,条件培养基培养的各组细胞,LDH含量及AgNORsA值显著大于对照组细胞(q24=8.5287,q48=15.4253,q72=27.6207,P均<0.01;q24=13.5690,q48=18.7288,q72=27.0356,P均<0.01)。72h的条件培养基作用日本血吸虫童虫细胞后,培养细胞的LDH含量及AgNORsA值明显较对照组高(q0/72=27.6207,P<0.01;q0/72=27.0356,P<0.01),亦高于其他组(q24/72=19.0919,q48/72=11.8426,P均<0.01;q24/72=13.5690,q48/72=18.7288,P均<0.01)。结论条件培养基可明显增强日本血吸虫童虫培养细胞LDH的活性及增加AgNORs的含量,且72h的条件培养基对童虫培养细胞的影响最大。

关键词：日本血吸虫条件培养基童虫细胞乳酸脱氢酶核仁组织区相关嗜银蛋白

甲基硝基亚硝基胍诱导日本血吸虫成虫培养细胞增殖条件研究

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华中医学杂志 2001年第2期25卷 85-86页

作者：明珍平董惠芬蒋明森钟沁萍刘晴武汉大学医学院人体寄生虫学教研室

目的　运用正交试验法选择甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)诱导日本血吸虫成虫培养细胞增殖的最佳作用条件。方法　将培养第 3天的日本血吸虫成虫培养细胞按正交表分别在基础培养基RPMI 16 40、TC 199、DMEM/F 12含 2 0 %小牛血清附加常量抗生... 详细信息

目的　运用正交试验法选择甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)诱导日本血吸虫成虫培养细胞增殖的最佳作用条件。方法　将培养第 3天的日本血吸虫成虫培养细胞按正交表分别在基础培养基RPMI 16 40、TC 199、DMEM/F 12含 2 0 %小牛血清附加常量抗生素的培养液 (常规培养液 )中用终浓度为 2、3、6 μg/ml的MNNG各处理 2 4、36、48小时 ;随后换用常规培养液培养 4周 ,再换用含 5 %小牛血清的培养液继续培养 ,以细胞存活时间为指标 ,对基础培养基、MNNG浓度及作用时间等因素进行研究。结果　日本血吸虫成虫培养细胞在基础培养基RPMI 16 40含 2 0 %小牛血清附加常量抗生素的培养液中 ,用3μg/ml的MNNG诱导 ,MNNG的处理时间为 48小时 ,诱导效果最好 ,培养细胞在换用 5 %小牛血清后可存活 2 46天以上 ,并可观察到明显的细胞生长及分裂现象。结论　运用正交试验法选择出的MNNG作用条件可诱导日本血吸虫成虫培养细胞发生一定程度的转化。

关键词：日本血吸虫成虫培养细胞增殖培养条件正交试验甲基硝基亚硝基胍

日本血吸虫成虫培养液中氨基酸及葡萄糖含量的动态变化

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001年第1期19卷 45-47页

作者：范虹董惠芬蒋明森钟沁萍明珍平武汉大学医学院人体寄生虫学教研室和血吸虫病研究室

目的　观察培养过程中日本血吸虫成虫细胞培养液中氨基酸 (AA)、葡萄糖 (Gluc)及甘油三酯 (TG)含量的动态变化。方法　用氨基酸自动分析仪、自动生化分析仪分别测定培养液在培养 0～ 6d过程中AA、Gluc及TG含量变化。结果　精氨酸 (Arg)... 详细信息

目的　观察培养过程中日本血吸虫成虫细胞培养液中氨基酸 (AA)、葡萄糖 (Gluc)及甘油三酯 (TG)含量的动态变化。方法　用氨基酸自动分析仪、自动生化分析仪分别测定培养液在培养 0～ 6d过程中AA、Gluc及TG含量变化。结果　精氨酸 (Arg)、苏氨酸 (Thr)、蛋氨酸 (Met)、赖氨酸 (Lys)及Gluc含量有不同程度下降 ;天门冬氨酸 (Asp)、丙氨酸 (Ala)及游离氨 (Amm)有明显上升 ;TG变化不明显。结论　在日本血吸虫成虫细胞培养液中适当增加Arg、Thr、Met、Lys和Gluc ,同时减少Asp和Ala的含量。

关键词：日本血吸虫成虫细胞培养氨基酸葡萄糖甘油三酯

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隐孢子虫病的实验诊断

中国人兽共患病杂志 2001年第5期17卷 103-106页

作者：明珍平董惠芬蒋明森武汉大学医学院人体寄生虫学教研室武汉430071

隐孢子虫是一种世界性分布的肠道寄生原虫,迄今已发现20余种,其中微小隐孢子虫(Cr yptosporidium parvum Cp)对人及哺乳动物的危害最大.由其所致的隐孢子虫病已是世界六大腹泻病之一,发达国家腹泻人群感染率为0.6%～10.2%,发展中国家为4... 详细信息

隐孢子虫是一种世界性分布的肠道寄生原虫,迄今已发现20余种,其中微小隐孢子虫(Cr yptosporidium parvum Cp)对人及哺乳动物的危害最大.由其所致的隐孢子虫病已是世界六大腹泻病之一,发达国家腹泻人群感染率为0.6%～10.2%,发展中国家为4%～20%,高危人群如婴幼儿、免疫功能抑制者、免疫功能缺陷者尤其是AIDS患者,感染率可高达15%～ 49%[1].免疫功能受损患者感染Cp后可引起霍乱样腹泻综合征 ,常导致患者严重脱水、电解质平衡紊乱,甚至死亡.目前尚无治疗该病的特效药,因此,隐孢子虫病早期的实验诊断对于控制疾病的发展和流行、降低死亡率有着重要的临床及流行病学意义,也是本病防治措施的核心内容.本文就隐孢子虫病的实验诊断技术作一综述.

关键词：隐孢子虫病诊断病原学免疫学分子生物学

亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的影响

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中国地方病学杂志 2006年第1期25卷 50-53页

作者：陈喜珪易同寅明珍平钟沁萍蒋明森董惠芬武汉大学基础医学院人体寄生虫学教研室血吸虫病研究室咸宁学院医学院430071 咸宁学院医学院

目的以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilicnucleolarorganizerregionassociatedproteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用。方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞... 详细信息

目的以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilicnucleolarorganizerregionassociatedproteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用。方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培养基中。接种后第3天,随机分为实验组和对照组。将实验组细胞用无血清培养基配制的终浓度为75μmol/L的Spd处理48h,对照组细胞则用不含Spd的无血清培养基处理,时间相同;PBS清洗3次后换用常规培养基继续培养。于第7、14、21、28、35天分别对培养细胞进行AgNORs染色。使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数及平均吸光值,并作统计分析。结果经Spd处理,各实验组培养细胞AgNORs着色明显深于对照组;但随着培养时间的延长,实验组与对照组细胞着色均逐渐变浅。各实验组细胞AgNORs颗粒数目与平均吸光值高于对照组,二者比较差异有统计学意义(u7=50.95、43.78;u14=55.23、43.54;u21=36.65、32.25;u28=31.6、32.95;u35=28.86、9.54;P0.05),其余差异都有统计学意义(P<0.01)。结论Spd具有促进日本血吸虫培养细胞增殖的能力,每周用Spd处理培养细胞1次,能更大限度地促进血吸虫培养细胞的生长。

关键词：亚精胺血吸虫,日本细胞,培养的核仁组织区相关嗜银蛋白

日本血吸虫培养细胞内糖类物质的动态变化及肝基质对其的影响

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中国地方病学杂志 2005年第5期24卷 513-516页

作者：明珍平董惠芬钟沁萍刘昌军蒋明森张兆仁武汉大学医学院人体寄生虫学教研室血吸虫病研究室430071 武汉市血吸虫病防治办公室

目的研究日本血吸虫成虫培养细胞内糖类物质的动态变化以及肝基质培养对其的影响。方法将虫龄为32d的日本血吸虫成虫细胞随机分为2组,实验1组(普通组)细胞接种于普通小盖玻片上,实验2组(肝基质组)细胞接种于预先铺敷有肝基质的盖玻片上... 详细信息

目的研究日本血吸虫成虫培养细胞内糖类物质的动态变化以及肝基质培养对其的影响。方法将虫龄为32d的日本血吸虫成虫细胞随机分为2组,实验1组(普通组)细胞接种于普通小盖玻片上,实验2组(肝基质组)细胞接种于预先铺敷有肝基质的盖玻片上,细胞培养基为RPMI-1640(含20%小牛血清附加常量抗生素)。每周取各组细胞进行高碘酸雪夫(PAS)染色和淀粉酶处理后的PAS染色,观察培养细胞内糖类物质的水平及分布变化。在培养第1周和第5周分别取2组染色细胞,用HPIAS-2000图像分析仪测定细胞内代表糖水平的A值,并做统计学分析。结果随着培养时间的延长,实验1组的4种类型细胞的糖水平逐渐减少,细胞内不含糖原;而实验2组细胞的糖原和糖类物质逐渐增加。培养第1周,2组细胞几乎均不含糖原,但实验1组细胞的糖水平高于实验2组,差异有统计学意义(u=7.10,P<0.01)。培养第5周,实验1组细胞糖原仍甚少,而实验2组细胞的糖原水平明显增加(u=9.32,P<0.01);并且实验2组细胞的糖水平显著高于实验1组细胞(u=16.89,P<0.01)。培养过程中,实验1组未见分裂细胞,但实验2组可观察到分裂细胞。结论日本血吸虫培养细胞内糖类物质随培养时间的延长逐渐减少;肝基质能增强培养细胞合成糖物质和生长增殖能力。

关键词：血吸虫,日本细胞,培养的碳水化合物组织细胞化学细胞外基质

MNNG诱导日本血吸虫成虫培养细胞的扫描电镜观察

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中国寄生虫病防治杂志 2003年第6期16卷 362-364,C013,C014页

作者：董惠芬蒋明森刘晴明珍平钟沁萍范虹武汉大学医学院人体寄生虫学教研室血吸虫病研究室湖北武汉430071

目的　观察甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)对不同培养时间日本血吸虫成虫培养细胞作用的变化 ,确定培养细胞发生转化进而增殖的最佳诱导时间。　方法　将 2 3～ 2 8d虫龄的日本血吸虫成虫制成细胞悬液 ,接种于小盖玻片上 ,培养于含 2 0 %小牛... 详细信息

目的　观察甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)对不同培养时间日本血吸虫成虫培养细胞作用的变化 ,确定培养细胞发生转化进而增殖的最佳诱导时间。　方法　将 2 3～ 2 8d虫龄的日本血吸虫成虫制成细胞悬液 ,接种于小盖玻片上 ,培养于含 2 0 %小牛血清及常量抗生素的RPMI 164 0常规培养基中。将接种培养第 4、5、6、7、8d的细胞分别设为 5个实验组及其相应的对照组。实验组用含终浓度为 3 μg/mlMNNG的常规培养基处理 48h ,对照组用不含MNNG的常规培养基处理相同时间 ,嗣后换用常规培养基培养 4周 ,再改用含 5 %小牛血清的培养基继续培养。MNNG诱导后每周取各组培养细胞固定、制样 ,每组随机取 3张小盖玻片进行电镜扫描观察 ,连续取样 11周。　结果　经MNNG诱导的日本血吸虫成虫培养细胞表面出现形态各异的结构 ,既有与对照组类似的表面较光滑和有乳突的培养细胞 ,也有表面光滑如玻璃珠状的细胞 ,还有具长纤突、微嵴、皱褶、微绒毛、蜂窝和仙人球状等形态的细胞 ;实验 1组培养至第 5周即出现大量分裂细胞。　结论　MNNG诱导培养第 4d的日本血吸虫成虫细胞培养至第 5周可发生转化而出现分裂、增殖。

关键词：血吸虫日本甲基硝基亚硝基胍 MNNG 细胞培养扫描电镜表面结构

恒稳电磁场对体外培养的日本血吸虫童虫细胞LDH的影响

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中国人兽共患病学报 2007年第8期23卷 769-773页

作者：黄晶晶董惠芬明珍平钟沁萍蒋明森李霞周响玲武汉大学基础医学院人体寄生虫教研室武昌430071

目的以乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)为评价指标,探讨恒稳电磁场对感染21d虫龄的日本血吸虫童虫培养细胞LDH的影响,筛选恒稳电磁场作用的最适强度与时间。方法将虫龄为21d的日本血吸虫童虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培... 详细信息

目的以乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)为评价指标,探讨恒稳电磁场对感染21d虫龄的日本血吸虫童虫培养细胞LDH的影响,筛选恒稳电磁场作用的最适强度与时间。方法将虫龄为21d的日本血吸虫童虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培养基中。接种后第2d,将一部分细胞分别置于强度为0Gs(对照)、5Gs、10Gs、15Gs、20Gs、25Gs的恒稳电磁场中作用48h;另一部分置于20Gs磁场强度中分别作用为0h(对照)、12h、24h、36h、48h、60h、72h。然后运用酶细胞化学方法对日本血吸虫童虫培养细胞进行LDH染色,Olympus-BH2显微镜下观察并拍照,HIPAS-2000图像分析仪测定其含量,并作统计分析。结果日本血吸虫童虫培养细胞经不同强度恒稳磁场处理后其LDH着色均比对照组深,其中20Gs组的着色最深,其次是15Gs组,再是10Gs组,5Gs组与25Gs组细胞的着色相似,为最浅;统计分析显示,恒稳磁场处理后的各组培养细胞其LDH活性与对照组之间的差异均显著(q5/0=32.7054,q10/0=51.1946,q15/0=74.6917,q20/0=82.5062,q25/0=33.5342,P0.05)外,其余各组之间差异均有统计学意义(q5/20=49.5414,q5/15=41.4658,q5/10=18.33163,q10/25=18.1466,q10/20=31.3085,q10/15=23.0460,q15/25=41.5878,q15/20=8.5468,q20/25=49.7640,P<0.01)。相同磁场强度作用不同时间后,随着作用时间的延长,细胞的LDH逐渐变深,48h时达到最深,之后逐渐变浅;统计分析表明,不管磁场作用多长时间,培养细胞的LDH活性均明显强于对照组(P<0.01);各实验组之间两两比较亦然。结论恒稳电磁场可以明显增强日本血吸虫童虫细胞的LDH活性,其最佳作用强度与时间分别为20Gs、48h。

关键词：恒稳电磁场日本血吸虫童虫乳酸脱氢酶(LDH) 培养细胞