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经椎板显微内镜腰椎间盘切除术的临床体会

中华显微外科杂志 2011年第5期34卷 427-428页

作者：赵宙施永彦张功礼湖北医药学院附属人民医院脊柱外科湖北省十堰市442000

目的探讨经椎板显微内镜腰椎间盘切除术（micro endoscopic discectomy，MED）手术方法及临床疗效。方法自1998年10月至2010年3月．对腰椎间盘突出症采用椎板间隙入路显微内镜下腰椎间盘切除术治疗235例，随访观察临床疗效。结果231例得... 详细信息

目的探讨经椎板显微内镜腰椎间盘切除术（micro endoscopic discectomy，MED）手术方法及临床疗效。方法自1998年10月至2010年3月．对腰椎间盘突出症采用椎板间隙入路显微内镜下腰椎间盘切除术治疗235例，随访观察临床疗效。结果231例得到2～24个月随访，平均随访时间为10个月。按照Nakai评定标准评定，结果属优190例，良33例，可6例，差2例。优良率为96．5％。结论经椎板显微内镜腰椎间盘髓核摘除术创伤小、恢复快，神经根减压彻底，疗效肯定。

关键词：腰椎间盘突出症内镜显微手术

红花黄素腹腔注射联合BMSCs移植对大鼠脊髓损伤的保护作用

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中华显微外科杂志 2011年第2期34卷 134-136页

作者：卜志勇李安军施永彦湖北医药学院附属人民医院脊柱外科湖北省十堰市442000

目的探讨红花黄素腹腔注射联合骨髓阳J充质干细胞（BMSCs）移植对大鼠脊髓损伤保护作用及其机制.方法体外分离、培养BMSCs;SD大鼠45只,改良Allen法制备脊髓损伤模型,随机分为3组：A组、B组、C组.A组腹腔注射红花黄素治疗（40 mg/kg）,... 详细信息

目的探讨红花黄素腹腔注射联合骨髓阳J充质干细胞（BMSCs）移植对大鼠脊髓损伤保护作用及其机制.方法体外分离、培养BMSCs;SD大鼠45只,改良Allen法制备脊髓损伤模型,随机分为3组：A组、B组、C组.A组腹腔注射红花黄素治疗（40 mg/kg）,B组和C组注射等体积的生理盐水,每日1次,共14 d;A组和B组损伤局部行BMSCs移植（6×106/60μl）,C组注射等体积的PBS液.于术后1 d、2 d、3 d、4 d、7 d取材检测损伤处超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和细胞凋亡,术后1 d和7 d、14 d、21 d、28 d采用改良BBB评分法进行行为学检查评分.结果术后随着时间的推移,各组BBB评分得分均增高,术后28 d时A组得分为（19.33±1.37）,B组为（15.83±1.17）,C组为（9.0±1.41）,A组高于B组和C组,B组高于C组,差异有统计学意义（P＜0.05）.SOD活性在相同时间点,均有A组高于B组和C组,B组高于C组,差异有统计学意义（P＜0.05）;MDA含量在术后2 d、3 d、4d A组低于B组和C组（P＜0.05）,且有A组低于B组（P＜0.05）.术后3 d时各组细胞凋亡达高峰：A组（72.83±13.38）,B组（96.33±6.35）,C组（219.33±28.64）;之后各组细胞凋亡数逐渐减少,至术后7d：A组（3.67±3.72）,B组（16.33±5.54）,C组（86.17±12.27）;除术后第1天,在相同时间点,细胞凋亡数有A组少于B组和C组,B组少于C组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论红花黄素和BM-SCs移植均能抑制损伤脊髓局部自由基生成、脂质过氧化和细胞凋亡,减轻继发损伤,两者联合具有累加协同效应,有助于脊髓损伤大鼠肢体运动功能的恢复.

关键词：脊髓损伤红花黄素骨髓间充质干细胞细胞凋亡

红花黄素腹腔注射联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠损伤脊髓修复作用的研究

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中华显微外科杂志 2010年第4期33卷 315-317,F0003页

作者：李安军卜志勇施永彦湖北省郧阳医学院附属人民医院脊柱外科 442000

目的研究红花黄素腹腔注射联合骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对SD大鼠脊髓损伤模型的修复作用。方法MSCs体外分离、培养并用GFP标记。把30只用改良Allen法造模的T7平面损伤的SD大鼠随机分为3组：A组和B组损伤局部直接移植标记后的MSCs（... 详细信息

目的研究红花黄素腹腔注射联合骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对SD大鼠脊髓损伤模型的修复作用。方法MSCs体外分离、培养并用GFP标记。把30只用改良Allen法造模的T7平面损伤的SD大鼠随机分为3组：A组和B组损伤局部直接移植标记后的MSCs（GFP—MSCs）6×10^6／60μl，C组注射同等体积PBS。A组术后按40mg／kg的剂量腹腔注射红花黄素，B组和C组注射同等剂量的生理盐水，每日1次，共用2周。术后1周、2周、3周和4周采用BBB评分法进行后肢功能评分；荧光显微镜观察移植的MSCs；免疫组化检测GFAP、NeuN和NGF的表达。结果术后1周时的BBB评分得分A组（1．67±0．41），B组（1．21±0．28），C组（0．86±0．21），差异无统计学意义（P〉0．05），随着时间的推移，所有组别的BBB评分得分均增高，术后4周时A组评分得分为（19．67±1．21），B组为（15．83±1．17），C组为（10．04±1．48），差异有统计学意义（P〈0．05）；损伤的脊髓节段可见GFP阳性细胞；免疫组化结果显示所有组别的GFAP、NeuN和NGF的表达随时间的推移而增高，术后3周时A组、B组和C组GFAP的阳性面积分别为（46410±3128）、（32594±2335）和（2299±225），NeuN的阳性面积分别为（57494±3121）、（25338±2484）和（5204±262），NGF的阳性面积分别为（51614±3348）、（32586±1998）和（5240±180），A组和B组各项指标阳性面积达高峰；术后4周时A组、B组和C组GFAP的阳性面积分别为（45006±4606）、（31629±2065）和（2480±171），NeuN的阳性面积分别为（53546±3103）、（23280±1750）和（5263±384），NGF的阳性面积分别为（50755±3023）、（31869±1930）和（5835±453），C组各项指标阳性面积达高峰，但仍低于同期A组和B组的水平，相同时间点相同指标比较，A组和B组的表达水平明显高于C组，A组的表达水平又高于B组和C组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MSCs移植可以促进大鼠后肢功能恢复，红花黄素腹腔注射和MSCs移植联合应用具有协同作用。

关键词：脊髓损伤红花黄素骨髓间充质干细胞

LAMP与ACHDF治疗多节段脊髓型颈椎病对C_(2-7) Cobb、C_(2-7) SVA、T_(1)-slope的影响

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湖北医药学院学报 2022年第4期41卷 376-381页

作者：付威威王彬杰邓险峰李锐施永彦湖北医药学院附属随州医院脊柱外科湖北随州441300

目的:探讨两种不同术式治疗多节段脊髓型颈椎对颈椎矢状位平衡参数的影响。方法:连续收集本院2019年6月至2021年3月收治多节段脊髓型颈椎病63例,均行手术治疗。其中,35例接受颈椎前路椎体次全切联合椎间盘切除融合内固定术(anterior cer... 详细信息

目的:探讨两种不同术式治疗多节段脊髓型颈椎对颈椎矢状位平衡参数的影响。方法:连续收集本院2019年6月至2021年3月收治多节段脊髓型颈椎病63例,均行手术治疗。其中,35例接受颈椎前路椎体次全切联合椎间盘切除融合内固定术(anterior cervical hybrid decompression and fusion, ACHDF);28例接受颈椎后路单开门椎管扩大椎板成形术(posterior single open-door laminoplasty, LAMP),分别于术前、术后1年随访时对所有患者行颈椎正、侧位X线片检查并颈椎矢状位平衡参数测量,进行神经功能性评价。结果:两组术前与末次随访时VAS和NDI评分显著降低(P0.05);两组间术后末次随访的T1倾斜角比较差异无统计学意义(P>0.05);与术前比较,ACHDF组患者术后末次随访CCobb角增大(P<0.05),LAMP组患者术后末次随访CCobb角减小(P<0.05);ACHDF组患者术后末次随访时CCobb角大于LAMP组(P<0.05);与术前比较,ACHDF组患者术后末次随访时的C矢状面轴向距离减少(P<0.05),LAMP组患者术后末次随访时C矢状面轴向距离增加(P<0.05);ACHDF组患者术后末次随访时的C矢状面轴向距离小于LAMP组(P<0.05)。结论:颈椎前路椎体次全切联合椎间盘切除融合内固定术较颈椎后路单开门椎管扩大椎板成形术治疗多节段脊髓型颈椎病,术后短期恢复及维持颈椎生理曲度效果更为显著。

关键词：多节段脊髓型颈椎病颈椎矢状位平衡参数颈前路联合手术颈后路手术

一期经前后路脊柱重建治疗下颈椎骨折脱位并关节突交锁

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骨科 2022年第5期13卷 391-394页

作者：王彬杰付威威邓险峰施永彦李锐湖北医药学院附属随州市中心医院湖北随州441300

目的探讨一期经前后路脊柱重建治疗下颈椎骨折脱位并关节突交锁的临床疗效。方法回顾性分析2018年1月至2020年12月我院收治的15例下颈椎骨折脱位并关节突交锁病人的临床资料,均采用一期经前后脊柱重建的手术方式治疗。采用日本骨科协... 详细信息

目的探讨一期经前后路脊柱重建治疗下颈椎骨折脱位并关节突交锁的临床疗效。方法回顾性分析2018年1月至2020年12月我院收治的15例下颈椎骨折脱位并关节突交锁病人的临床资料,均采用一期经前后脊柱重建的手术方式治疗。采用日本骨科协会(JOA)评分、颈椎功能障碍指数(NDI)评价术后恢复情况,采用美国脊柱损伤协会(American Spinal Injury Association,ASIA)神经功能分级评价脊髓神经改善情况,通过影像学检查(X线/CT/MRI)评价椎体复位及邻近节段椎间盘退变情况。结果本组病人术后随访6~12个月。术后及末次随访的JOA评分[(14.01±1.22)分、(15.11±1.08)分],NDI(20.1%±1.2%、15.1%±1.8%),椎体间位移[均为(1.52±0.04)mm]和半脱位伴成角度数(2.03°±0.08°、2.04°±0.07°)均较术前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05)。术后及末次随访ASIA分级均有不同程度改善。末次随访时,手术节段上、下位邻近节段椎间盘均有一定程度退变,且上位较下位严重,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一期经前后路脊柱重建治疗下颈椎骨折脱位并关节突交锁,复位效果好,稳定性强,脊髓神经功能得到改善,但远期存在邻近节段椎间盘退变风险。

关键词：脊柱重建关节突交锁骨折脱位

红花黄素体外诱导BMSCs分化为神经元样细胞的实验研究

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中华显微外科杂志 2013年第5期36卷 482-483页

作者：王祥强卜志勇李安军涂圣旭施永彦湖北中医药大学针灸骨伤学院2011级研究生班湖北省勋阳市442000 湖北医药学院附属人民医院脊柱外科湖北医药学院第三临床学院2009级临床本科

目的探讨红花黄素在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）转变为神经元样细胞的效果。方法2012年8月至2013年4月，采用全骨髓贴壁培养法培养大鼠BMSCs，取P3代BMSCs接种培养板，分3组，每组6孔：A组（红花黄素组）和B组（对照组1）待... 详细信息

目的探讨红花黄素在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）转变为神经元样细胞的效果。方法2012年8月至2013年4月，采用全骨髓贴壁培养法培养大鼠BMSCs，取P3代BMSCs接种培养板，分3组，每组6孔：A组（红花黄素组）和B组（对照组1）待细胞接近50％融合后，每孔内加入10μg／L的bFGF预诱导24h，PBS洗涤2次后，A组再加入含红花黄素的无血清DMEM诱导液诱导24h后弃掉诱导液，加入DMEM培养基继续培养；B组直接加入DMEM培养基继续培养；C组（对照组2）始终用含15％DMEM培养基培养。各组于倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化。各组待细胞达90％融合时，采用免疫荧光法检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、神经丝蛋白M（NFM）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达来鉴定分化后细胞。结果A组BMSCs呈渐进性地向神经元样细胞转化；NSE、NFM染色呈强阳性：NSE阳性细胞率为（63．36±1．26）％；NFM阳性细胞率（56．19±3．64）％；B、C组为阴性；3组GFAP表达均为阴性。结论红花黄素在体外诱导大鼠BMSCs可分化为神经元样细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞红花黄素诱导分化

腺病毒介导神经生长因子在绿色荧光蛋白基因标记的间充质干细胞中表达及意义

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中华实验外科杂志 2006年第5期23卷 623-624,F0003页

作者：施永彦喻爱喜张功礼余永桂邓长康潘国栋武汉大学中南医院骨科 430071 郧阳医学院附属人民医院骨科

目的为提高间充质干细胞(MSCs)表达神经生长因子(NGF)的能力,同时使MSCs 被绿色荧光蛋白(GFP)稳定标记,探讨通过病毒载体将NGF和GFP基因高效转染到MSCs的方法。方法取2个月龄100～150 g Wistar大鼠,全骨髓法分离培养纯化大鼠MSCs,利用... 详细信息

目的为提高间充质干细胞(MSCs)表达神经生长因子(NGF)的能力,同时使MSCs 被绿色荧光蛋白(GFP)稳定标记,探讨通过病毒载体将NGF和GFP基因高效转染到MSCs的方法。方法取2个月龄100～150 g Wistar大鼠,全骨髓法分离培养纯化大鼠MSCs,利用携带人 NGFβ基因的复制缺陷性重组腺病毒(Ad-hNGFβ)和携带GFP基因的复制缺陷性逆转录病毒(Rt- GFP)转染MSCs,荧光显微镜观察GFP阳性的MSCs,免疫细胞化学和Western blot检测hNGFβ的表达。结果 Rt-GFP转染后,80％～90％MSCs可激发出明亮的绿色荧光,且荧光不随培养时间延长和传代次数增加而衰减。Ad-hNGFβ的转染MSCs中hNGFβ阳性率(90．17±2．14)显著高于阴性对照组(2．17±0．75,P<0．01)和空白对照组(1．83±0．98,P<0．01),转染后MSCs中NGFβ表达量(188．67±8．71)显著高于阴性对照组(25．67±4．08,P<0．01)和空白对照组(27．50± 3．33,P<0．01)。结论 Ad-hNGFβ可以高效转染MSCs,实现NGF在MSCs中高效表达,Rt-GFP 可以使MSCs获得长效标记。

关键词：骨髓问充质干细胞神经生长因子绿色荧光蛋白基因转染

复合BMSCs的异种骨移植材料异位成骨研究

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武汉大学学报（医学版） 2012年第3期33卷 355-358,386页

作者：李锦华王伟李安军赵宙施永彦武汉大学基础医学院湖北武汉430071 湖北医药学院附属人民医院脊柱外科湖北十堰442000

目的:制备兔脱钙骨基质(DBM),研究复合骨髓间充质干细胞(BMSCs)的DBM的异位成骨能力。方法:制备DBM材料,将体外培养的ICR小鼠BMSCs与DBM复合培养后构建的组织工程骨植入ICR小鼠股部肌袋中,以单纯DBM植入组为对照,术后7d及28d行X线检测,... 详细信息

目的:制备兔脱钙骨基质(DBM),研究复合骨髓间充质干细胞(BMSCs)的DBM的异位成骨能力。方法:制备DBM材料,将体外培养的ICR小鼠BMSCs与DBM复合培养后构建的组织工程骨植入ICR小鼠股部肌袋中,以单纯DBM植入组为对照,术后7d及28d行X线检测,并于术后7,14,28d取植入材料作组织学检测、钙含量测定。结果:DBM与BMSCs复合体植入后7d即有成骨细胞出现,随着时间增加成骨细胞增多,术后28d即有较成熟骨质形成,移植物钙含量随时间推移逐渐增高。单纯植入DBM术后14d出现少量成骨细胞,术后28d出现少量类骨质,钙含量持续处于较低水平。结论:DBM与BMSCs复合后具有很好的异位成骨能力,DBM是组织工程骨研究较理想的支架材料。

关键词：脱钙骨基质骨髓间充质干细胞异位成骨组织工程

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尼古丁对体内外成骨活性的影响

中华实验外科杂志 2012年第7期29卷 1265-1267页

作者：李锦华邵琴赵宙王伟施永彦湖北医药学院附属人民医院脊柱外科十堰442000 湖北医药学院医务室

目的观察尼古丁对体外培养的成骨细胞活性和体内成骨活性因子的影响。方法用含不同浓度尼古丁（1×10^-4mol／L）的DMEM培养基体外培养成骨细胞，分别用噻唑蓝（MTT）比色法检测成骨细胞的增殖，并检测尼古丁对成骨细胞的碱性磷酸酶（AL... 详细信息

目的观察尼古丁对体外培养的成骨细胞活性和体内成骨活性因子的影响。方法用含不同浓度尼古丁（1×10^-4mol／L）的DMEM培养基体外培养成骨细胞，分别用噻唑蓝（MTT）比色法检测成骨细胞的增殖，并检测尼古丁对成骨细胞的碱性磷酸酶（ALP）活性和钙结节形成能力的影响，用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定大鼠血清中骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和ALP水平，逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）测量尼古丁作用后大鼠股骨中骨桥蛋白（OPN）、ALP、I型胶原蛋白（COL1）的mRNA表达变化。结果与对照组比较，体外尼古丁处理对成骨细胞的增殖起抑制作用。尼古丁可降低成骨细胞的AIJP活性，抑制成骨细胞钙结节形成，尼古丁可以导致大鼠血清中BMP-2和ALP水平下降，并抑制股骨中OPN、ALP、COL1mRNA表达。结论尼古丁可抑制成骨细胞的活性，并对体内成骨相关因子也有抑制作用。

关键词：尼古丁骨桥蛋白成骨细胞