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miR-1293促进非小细胞肺癌耐药分子机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2020年第4期27卷 256-261页

作者：刘炜尤青海方浩徽牛华安徽医科大学第一附属医院呼吸与危重症科安徽合肥230000 安徽省胸科医院呼吸二科安徽合肥230000

目的microRNA与非小细胞肺癌耐药性密切相关,但miR-1293在非小细胞肺癌中的作用机制仍不清楚。本研究探讨miR-1293调控Akt信号通路促进非小细胞肺癌耐药的分子机制。方法培养人肺癌A549与耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR检测miR-1293和抑癌... 详细信息

目的microRNA与非小细胞肺癌耐药性密切相关,但miR-1293在非小细胞肺癌中的作用机制仍不清楚。本研究探讨miR-1293调控Akt信号通路促进非小细胞肺癌耐药的分子机制。方法培养人肺癌A549与耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR检测miR-1293和抑癌基因RUNX3 mRNA表达,蛋白质印迹检测RUNX3蛋白表达。采用脂质体法将miR-1293抑制物(miR-1293inhibitor)和阴性对照RNA(miR-NC)转染A549/DDP。MTT检测细胞IC50;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质印迹检测凋亡相关蛋白Bcl-2和RUNX3;荧光素酶报告基因检测miR-1293能否调控RUNX3;qPCR检测miR-1293和RUNX3的mRNA表达;蛋白质印迹检测MDR1/ABCB1、ABCC1、RUNX3、Akt和p-Akt蛋白表达。结果A549/DDP细胞对DDP的耐药指数为7.23。miR-1293在耐药细胞株A549/DDP的表达(3.89±0.08,W=0.946,P=0.698)与A549组(1.01±0.05,W=0.938,P=0.622)相比升高,差异有统计学意义,t=74.78,P<0.001;而RUNX3 mRNA和RUNX3蛋白在耐药细胞株A549/DDP的表达与A549组相比降低,tmRNA=7.74,t蛋白=20.04,均P<0.001。与miR-NC比较,miR-1293 inhibitor组IC50降低,t=94.49,P<0.001。miR-1293 inhibitor组MDR1/ABCB1、ABCC1蛋白表达低于miR-NC,tMDR1/ABCB1=10.61,tABCC1=39.57,均P<0.001。与miR-NC比较,miR-1293 inhibitor组细胞凋亡增加,t=7.15,P<0.001。促凋亡蛋白RUNX3在miR-1293 inhibitor组表达更高,t=33.63,P<0.001;凋亡抑制蛋白Bcl-2表达更低,t=11.62,P<0.001。荧光素酶报告实验显示,在野生型RUNX33′UTR中,miR-1293 inhibitor的荧光素酶活性(6.24±0.04,W=0.911,P=0.399)高于miR-NC(3.21±0.07,W=0.879,P=0.221),t=92.06,P<0.001;提示RUNX3是miR-1293靶基因。miR-1293 inhibitor组RUNX3蛋白表达高于miR-NC,t=17.75,P<0.001;Akt1、p-Akt低于miR-NC组,tAkt1=67.55,tp-Akt=16.98,均P<0.001。结论在耐药细胞株A549/DDP中miR-1293高表达,抑制细胞凋亡,促进细胞耐药,其机制可能与靶向下调RUNX3,促进Akt信号通路激活有关。

关键词： miR-1293 RUNX3 Akt 非小细胞肺癌耐药

机械通气治疗重症钩端螺旋体病肺弥漫性出血临床观察

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临床荟萃 2003年第2期18卷 77-78页

作者：余定红方浩徽李福平岳阳市第一人民医院呼吸内科湖南岳阳414000 安徽省肺科医院安徽合肥230022

钩端螺旋体病(钩体病)是流行于我国南方诸省及多数省市自治区的自然疫源性急性传染病,为农民中的常见病及多发病,其中肺钩体病弥漫性出血型是以肺部弥漫性出血为主要表现的一种临床类型.

关键词：机械通气治疗钩端螺旋体病肺弥漫性出血临床观察诊断标准

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肺隐球菌病37例临床病理分析

临床与实验病理学杂志 2017年第9期33卷 1041-1043页

作者：徐建平宋蓉蓉赵洁婷叶伟方浩徽安徽省胸科医院病理科合肥230021

目的探讨肺隐球菌病的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法收集安徽省胸科医院37例确诊为肺隐球菌病组织标本,对其临床病理特征、HE及特殊染色等进行回顾性分析,并复习相关文献。结果37例肺隐球菌病中男性20例,女性17例,年龄12~80岁,中... 详细信息

目的探讨肺隐球菌病的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法收集安徽省胸科医院37例确诊为肺隐球菌病组织标本,对其临床病理特征、HE及特殊染色等进行回顾性分析,并复习相关文献。结果37例肺隐球菌病中男性20例,女性17例,年龄12~80岁,中位年龄45岁。常见临床症状有咳嗽、咳痰、胸痛,部分重症患者有慢性病或激素治疗史,另有15例患者无症状。常见胸部影像学表现有结节影18例,团块状、片状影19例,混合病变10例。4例行乳胶凝集试验检测均阳性,37例行六胺银染色均阳性。结论肺隐球菌病好发于青壮年,多数患者无免疫功能受损;临床及影像学表现无特异性;多数病例通过组织病理学确诊,六胺银等特殊染色有助于病理诊断;乳胶凝集试验可作为肺隐球菌病的首选辅助诊断手段。

关键词：肺隐球菌病影像学表现临床特征病理

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胸内结节病的诊断进展

临床荟萃 1994年第12期9卷 529-530页

作者：方浩徽安徽省肺科医院 230022

结节病是一种原因未明的慢性肉芽肿疾病,可侵犯全身各部位多个器官,以肺和胸内淋巴结发病率最高,达90％以上。近年来,有关结节病的诊断方法日臻完善,笔者复习了近十年有关文献作一综述。

关键词：类肉瘤病诊断胸内结节病

非小细胞肺癌组织WIF1过表达对A549细胞迁移和侵袭影响机制

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中华肿瘤防治杂志 2020年第10期27卷 774-780页

作者：刘嘉林方浩徽牛华张妍蓓安徽医科大学第一附属医院干部呼吸科安徽合肥230022 安徽省胸科医院呼吸二科安徽合肥230022

目的 WNT抑制因子1(WNT inhibitory factor 1,WIF1)与肿瘤的发展与转移密切相关,在多种肿瘤中均发现WIF1表达降低或缺失,但其在非小细胞肺癌中的表达及功能尚不清楚。本研究探讨WIF1在非小细胞肺癌组织的表达及过表达WIF1对A549肺腺癌... 详细信息

目的 WNT抑制因子1(WNT inhibitory factor 1,WIF1)与肿瘤的发展与转移密切相关,在多种肿瘤中均发现WIF1表达降低或缺失,但其在非小细胞肺癌中的表达及功能尚不清楚。本研究探讨WIF1在非小细胞肺癌组织的表达及过表达WIF1对A549肺腺癌细胞迁移和侵袭的作用。方法选取安徽医科大学第一附属医院干部呼吸科2010-08-01-2014-08-01经病理确诊的50例肺癌及癌旁组织,Real-time PCR、蛋白质印迹检测2种组织中WIF1 mRNA和蛋白的表达水平,同时用癌症基因组图谱(The Cancer Atlas,TCGA)公共数据库的数据进行辅助验证。分析WIF1mRNA表达与临床病理、预后的关系。WIF1过表达载体(WIF1组)或空载转染A549(Vector组),划痕和Transwell实验检测WIF1过表达对细胞迁移和侵袭的影响;蛋白质印迹检测MMP-2、MMP-9、β-catenin和Myc蛋白表达水平。结果 WIF1 mRNA和蛋白的表达在癌组织中表达值分别为0.25±0.06、0.44±0.08,低于癌旁组织的0.56±0.12、0.96±0.12,差异有统计学意义,t值分别为15.509和1.615,均P0.05;但在淋巴结转移(χ^2=19.100,P<0.001)、TNM分期为Ⅲ期(χ^2=8.333,P=0.004)及N分期为N1+N2组(χ^2=8.681,P=0.007),差异有统计学意义;且WIF1高表达组生存期为为38.00(19.00~51.50)个月,高于低表达组的24.00(17.00~35.50)个月,差异有统计学意义,χ^2=4.413,P=0.038。过表达WIF1抑制A549细胞的迁移和侵袭能力,t值分别为6.607和15.650,均P<0.05;与Vector组(0.90±0.05、0.90±0.03、0.60±0.05、0.31±0.04)比较,过表达WIF1能下调肿瘤转移相关标志物MMP-2(0.30±0.05)和MMP-9(0.28±0.02),差异有统计学意义,t值分别为15.459、27.391,均P<0.05;并能抑制Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白β-catenin(0.16±0.08)和Myc(0.12±0.03)的表达,差异有统计学意义,t值分别为7.962和6.124,P值分别为0.001和0.004。结论 WIF1在非小细胞肺癌组织中表达降低,过表达WIF1可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制A459肺腺癌细胞迁移和侵袭。

关键词： WIF1 非小细胞肺癌迁移侵袭 Wnt/β-catenin信号通路

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镜下血尿尿沉渣抗酸杆菌阳性

临床肺科杂志 2007年第2期12卷 193-194页

作者：方浩徽牛华安徽省肺科医院呼吸科 230022

病史介绍:患儿,李某,女,8岁,因镜下血尿反复阳性两年于2004年4月12日住院.

关键词：抗酸杆菌阳性镜下血尿尿沉渣

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呼出气一氧化氮在支气管哮喘诊治中的意义

中国卫生产业 2014年第27期11卷 196-198页

作者：王敏方浩徽安徽省胸科医院安徽合肥230022

支气管哮喘是常见的慢性呼吸道疾病,因其症状的易变性导致临床诊治的困难,而呼出气一氧化氮(Fractional exhaled nitric oxide,FeNO)以其检测的无创、简便、快速、重复性好等特点成为支气管哮喘研究的热点,本文就FENO在支气管哮喘的临... 详细信息

支气管哮喘是常见的慢性呼吸道疾病,因其症状的易变性导致临床诊治的困难,而呼出气一氧化氮(Fractional exhaled nitric oxide,FeNO)以其检测的无创、简便、快速、重复性好等特点成为支气管哮喘研究的热点,本文就FENO在支气管哮喘的临床诊断、治疗和鉴别诊断中的研究进展及意义进行综述。

关键词：呼出气一氧化氮支气管哮喘嗜酸性粒细胞糖皮质激素

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137例次肺部疾病并发真菌感染的临床分析

临床肺科杂志 2001年第1期6卷 59-60页

作者：方浩徽陈连安徽省肺科医院 230022

支气管-肺念珠菌感染在临床上已渐增多,成为院内感染的常见疾病之一,选择我院1996年1月～1999年12月住院病人中痰真菌培养阳性者137例次,现就其临床所见分析如下.

关键词：肺部疾病并发症真菌感染诊断治疗

静滴丹参并肝素雾化吸入治疗慢性肺心病急性期30例

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临床肺科杂志 2003年第1期8卷 56-57页

作者：古立新方浩徽广西中医学院二附院安徽省肺科医院 230022

慢性肺源性心脏病是肺部、胸廓或肺动脉的慢性病变引起的肺循环阻力增高,导致肺动脉高压;伴或不伴有右心衰竭的一类心脏病.笔者采用常规治疗基础上配合静滴丹参和肝素雾化吸入治疗,疗效明显,现报告如下.

关键词：丹参肝素雾化吸入慢性肺心病急性期静脉滴注