检索结果-南通市图书馆

非洲马瘟病毒VP2蛋白的截短表达及免疫原性分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2024年

作者：王轩莹范亚亚户鑫兵徐婧张鸿歌田占成苟惠天郑玉姝关贵全罗建勋殷宏独军政中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃农业大学动物医学院河南科技学院动物科技学院甘肃省病原生物学基础学科研究中心

为评价非洲马瘟病毒VP2截短蛋白的免疫原性，以人工合成的含有AHSV S2全长基因为模板，分别构建重组表达质粒pRSF-S2-502(编码1～502 aa)和pRSF-S2-1056(编码503～1056 aa)，分别将其转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行表达。将纯... 详细信息

为评价非洲马瘟病毒VP2截短蛋白的免疫原性，以人工合成的含有AHSV S2全长基因为模板，分别构建重组表达质粒pRSF-S2-502(编码1～502 aa)和pRSF-S2-1056(编码503～1056 aa)，分别将其转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行表达。将纯化后的重组蛋白免疫小鼠后，采用间接ELISA法测定小鼠血清中特异性抗体水平，用流式细胞术检测小鼠脾脏T细胞亚群、CD4+和CD8+T细胞表达IFN-γ的水平。结果显示，与PBS对照组相比，各免疫组小鼠的血清中特异性抗体水平均显著升高，脾内CD4+T和CD8+T细胞水平均显著升高；免疫组小鼠脾CD4+T和CD8+T细胞表达IFN-γ的水平均升高。结果表明，以重组AHSV VP2截短蛋白对小鼠具有较好的免疫原性，为进一步研究VP2蛋白生物学功能及非洲马瘟亚单位疫苗奠定了理论基础。

关键词：非洲马瘟病毒 VP2蛋白截短表达免疫原性

非洲马瘟病毒NS1蛋白在昆虫细胞中的表达及抗原性分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2024年第3期54卷 350-356页

作者：户鑫兵王轩莹宋昱庆田占成关贵全苟惠天罗建勋殷宏独军政中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室兰州大学动物医学与生物安全学院甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

非洲马瘟(African horse sickness,AHS)是一种由媒介昆虫传播感染马属动物的病毒性疾病,为了在杆状病毒表达系统中表达AHSVNS1蛋白并评估其作为亚单位疫苗组分的抗原性,本研究参考GenBank上公布的AHSV基因序列,人工合成NS1全长基因序列... 详细信息

非洲马瘟(African horse sickness,AHS)是一种由媒介昆虫传播感染马属动物的病毒性疾病,为了在杆状病毒表达系统中表达AHSVNS1蛋白并评估其作为亚单位疫苗组分的抗原性,本研究参考GenBank上公布的AHSV基因序列,人工合成NS1全长基因序列,利用PCR方法扩增完整的开放阅读框后将其克隆到转座载体pFastBacTMHTb上,将成功构建的重组质粒pFastBac-AHSVNS1转化到DH10Bac感受态细胞中,获得了含有AHSVNS1基因的重组杆粒Bacmid-AHSVNS1,将其转染到Sf9昆虫细胞内获得了表达AHSVNS1蛋白的重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western-blot结果显示,表达的重组AHSV NS1蛋白大小为65 ku,且获得了纯化的重组AHSV NS1蛋白。将其免疫BALB/c小鼠,细胞免疫荧光和Western-blot试验显示获得了特异性的抗AHSV NS1蛋白多克隆抗体,其效价达1∶51 200。流式细胞分析显示,AHSV NS1蛋白免疫小鼠能够刺激CD4+和CD8+T淋巴细胞的增加。上述研究结果表明,AHSV NS1蛋白作为AHSV亚单位疫苗的组成成分具有一定应用前景。本试验实现了AHSV NS1蛋白在昆虫细胞中成功表达并验证其具有良好的抗原性,这为进一步研究AHSV NS1蛋白的生物学功能和亚单位疫苗开发奠定了基础。

关键词：非洲马瘟病毒 AHSV NS1蛋白昆虫细胞表达抗原性

荧光素酶免疫吸附法高灵敏检测蓝舌病病毒抗体方法的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2024年第7期54卷 881-887页

作者：张鸿歌田占成独军政王琼洁康棣户鑫兵张忠辉关贵全殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了建立一种高效检测动物血清中蓝舌病病毒(BTV)抗体的检测方法,以BTV血清群特异性VP7抗原与荧光素酶蛋白相融合表达的标记蛋白(VP7-NLuc)为检测抗原建立了荧光素酶免疫吸附(VP7-NLuc-LISA)方法,用于检测BTV抗体。结果表明:BTV阳性血... 详细信息

为了建立一种高效检测动物血清中蓝舌病病毒(BTV)抗体的检测方法,以BTV血清群特异性VP7抗原与荧光素酶蛋白相融合表达的标记蛋白(VP7-NLuc)为检测抗原建立了荧光素酶免疫吸附(VP7-NLuc-LISA)方法,用于检测BTV抗体。结果表明:BTV阳性血清能特异性识别VP7-NLuc融合蛋白;监测BTV-1灭活疫苗免疫绵羊血清中BTV抗体动态结果表明,VP7-NLucLISA方法与商品化竞争性ELISA(c-ELISA)试剂盒的检测结果呈高度相关性(R=0.76,P<0.001);对264份田间血清样本的调查结果表明,建立的VP7-NLuc LISA方法与商品化c-ELISA试剂盒的符合率为98.86%,其相对特异性为99.52%,相对敏感性为96.49%。结论:所建立的VP7-NLuc-LISA方法可作为大规模动物BTV流行病学调查和监测的新方法。

关键词：蓝舌病病毒 VP7蛋白荧光素酶免疫吸附试验 c-ELISA 血清学检测

非洲马瘟病毒VP5蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2024年第3期54卷 357-363页

作者：范亚亚王轩莹户鑫兵田占成关贵全罗建勋殷宏郑玉姝独军政河南科技学院动物科技学院河南新乡453003 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

为了确定非洲马瘟病毒(AHSV)VP5蛋白的免疫学特性,通过人工合成非洲马瘟病毒VP5蛋白的S6全长基因序列,经PCR扩增后克隆到转座质粒载体pFastBac HTb上,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑试验筛选出重组杆状病毒质粒Bacmid-AH... 详细信息

为了确定非洲马瘟病毒(AHSV)VP5蛋白的免疫学特性,通过人工合成非洲马瘟病毒VP5蛋白的S6全长基因序列,经PCR扩增后克隆到转座质粒载体pFastBac HTb上,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑试验筛选出重组杆状病毒质粒Bacmid-AHSVS6,转染Sf9昆虫细胞;构建了重组质粒pFastBac-AHSVS6,拯救获得含有AHSV S6基因的重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western-blot鉴定表明,在Sf9昆虫细胞中成功表达分子质量大小为60 ku的AHSV VP5重组蛋白。采用组氨酸标签纯化树脂对重组VP5蛋白进行纯化,将其与弗氏佐剂乳化后3次免疫新西兰大白兔收集血清,获得了针对AHSV VP5蛋白的多克隆抗体,并通过Western-blot和间接免疫荧光试验验证了该抗体的特异性。本试验利用杆状病毒表达系统成功表达了AHSV全长VP5重组蛋白,成功制备出特异的VP5蛋白多克隆抗体,这为进一步研究AHSV VP5蛋白的功能及研制亚单位疫苗奠定了基础。

关键词：非洲马瘟病毒 VP5蛋白杆状病毒表达系统多克隆抗体免疫荧光

非洲马瘟病毒VP7蛋白在昆虫细胞中的表达及其抗体制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2022年第3期52卷 317-323页

作者：户鑫兵高闪电田占成范亚亚关贵全刘光远罗建勋殷宏独军政中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了表达非洲马瘟病毒(AHSV)VP7蛋白并制备其多克隆抗体,参考GenBank中已公开的AHSV基因序列,人工合成编码AHSV-1 VP7蛋白的S7基因全长序列,利用PCR技术扩增得到S7基因片段,将其克隆到p FastBac^(TM)HTb载体上,构建重组载体p FastBac^(T... 详细信息

为了表达非洲马瘟病毒(AHSV)VP7蛋白并制备其多克隆抗体,参考GenBank中已公开的AHSV基因序列,人工合成编码AHSV-1 VP7蛋白的S7基因全长序列,利用PCR技术扩增得到S7基因片段,将其克隆到p FastBac^(TM)HTb载体上,构建重组载体p FastBac^(TM)-AHSVS7,通过蓝白斑试验筛选出重组杆粒BacmidAHSVS7,并转染昆虫细胞,拯救获得重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western-blot结果显示,AHSV-1 VP7重组蛋白在昆虫细胞中获得表达。利用组氨酸标签纯化树脂获得了高纯度的VP7蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备相应的多克隆抗体,该抗体不仅能与杆状病毒重组表达的AHSV-1 VP7蛋白反应,且能识别BHK21细胞中表达的AHSV-1 VP7蛋白,具有很好的特异性。本试验成功利用杆状病毒系统表达了AHSV-1 VP7重组蛋白,并制备了多克隆抗体,这为后续AHSVVP7蛋白功能的研究以及ELISA诊断方法的建立奠定了基础。

关键词：非洲马瘟病毒 VP7蛋白昆虫细胞表达多克隆抗体

非洲马瘟病毒重组VP7蛋白在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备与鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2023年第8期53卷 971-976页

作者：王轩莹户鑫兵罗昭依田占成高闪电殷宏罗建勋关贵全苟惠天独军政甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

非洲马瘟是由非洲马瘟病毒感染马引起的一种以发热、皮下和肺组织水肿及内脏出血为主要特征的烈性传染病。本研究首先通过PCR以合成的AHSV S7基因为模板扩增得到开放阅读框片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pPROEX HTb,成功构建重组质粒p... 详细信息

非洲马瘟是由非洲马瘟病毒感染马引起的一种以发热、皮下和肺组织水肿及内脏出血为主要特征的烈性传染病。本研究首先通过PCR以合成的AHSV S7基因为模板扩增得到开放阅读框片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pPROEX HTb,成功构建重组质粒pPROEX-AHSVS7。转化重组质粒pPROEX-AHS-VS7到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用0.5 mmol/L IPTG进行诱导表达,通过SDS-PAGE和免疫印迹(Western-blot)对表达产物进行鉴定。采用包涵体和亲和层析纯化的方法对表达产物进行纯化,获得纯度较高的重组VP7蛋白,经3次免疫新西兰大白兔收集血清并进行抗体纯化,通过Western-blot、免疫荧光和间接ELISA法进行抗体的鉴定。结果表明,本试验利用大肠杆菌系统成功诱导表达了约为40 ku的重组AHSV VP7蛋白,并成功制备出特异的VP7多克隆抗体。以上结果为进一步研究VP7蛋白的生物学功能、建立诊断方法及亚单位疫苗研发提供了基础。

关键词：非洲马瘟病毒 VP7蛋白多克隆抗体

特殊浸润性纳米纤维素基气凝胶在油水分离中的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复合材料学报 2024年第2期41卷 672-684页

作者：高建南王薇吴建兵孙银银陆鑫常熟理工学院纺织服装与设计学院苏州215500 苏州大学纺织与服装工程学院苏州215000

随着石油化工、纺织工业、钢铁等行业的飞速发展,产生了大量的含油废水而严重破坏了人类的生存环境,并造成了水资源短缺问题的加剧。在碳达峰、碳中和全球共识下,如何有效分离油水混合物成为当前的研究热点。特殊浸润性纳米纤维素基气... 详细信息

随着石油化工、纺织工业、钢铁等行业的飞速发展,产生了大量的含油废水而严重破坏了人类的生存环境,并造成了水资源短缺问题的加剧。在碳达峰、碳中和全球共识下,如何有效分离油水混合物成为当前的研究热点。特殊浸润性纳米纤维素基气凝胶具有对油水两相浸润性不同的特点,同时有高效的油水分离效果,在油水分离领域有广阔的应用前景。本文系统总结了几种浸润模型和基本作用机制,重点围绕纳米纤维素基气凝胶在油水分离领域的应用和制备工艺进行分析和介绍,探讨了当前特殊浸润性纳米纤维素基气凝胶在研发中面临的问题,并对其未来的发展趋势做出展望。

关键词：纳米纤维素纳米纤维素基气凝胶油水分离特殊浸润性油水混合物

石墨烯/三水醋酸钠复合相变材料界面热阻的分子动力学模拟

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

化工进展 2024年

作者：黄文荻周国兵曹保鑫华北电力大学能源动力与机械工程学院

利用高导热材料复合水合盐是提高水合盐相变材料导热性能的有效途径之一。但不同材料复合时会在界面处产生较大热阻。本研究采用分子动力学方法，分别计算了三水醋酸钠（SAT）/石墨烯复合相变材料在固态、液态时的温度分布、热导率、径... 详细信息

利用高导热材料复合水合盐是提高水合盐相变材料导热性能的有效途径之一。但不同材料复合时会在界面处产生较大热阻。本研究采用分子动力学方法，分别计算了三水醋酸钠（SAT）/石墨烯复合相变材料在固态、液态时的温度分布、热导率、径向分布函数（RDF）、声子态密度（PDOS）以研究两种材料界面处的原子分布、热输运和声子输运，从微观角度探究界面热阻产生的机理。温度计算结果表明，在固态与液态时，石墨烯/SAT界面处都存在较大的温度梯度，交界处的热阻均为其他区域的4.5倍左右。RDF计算结果表明，材料在固态时，石墨烯表面原子之间距离增大，形成真空层；液态时，石墨烯表面反而会出现原子聚集的现象。PDOS计算结果表明，石墨烯的加入会导致界面附近区域的低频声子分布紊乱，从而增加声子散射，降低导热效率；这种紊乱会随着与石墨烯的距离增大而减弱，从30?处基本消失。

关键词：三水醋酸钠石墨烯分子动力学界面热阻声子态密度

锚索丝轴向受力-破断能量聚散演化与吸能防护机理研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

煤炭学报 2024年

作者：涂敏郭福鑫张向阳王传兵淮河能源集团公司平安煤炭开采工程技术研究院有限责任公司安徽理工大学矿业工程学院

针对深部高应力巷道顶板锚索在拉伸、剪切、扭转等复合作用下，积聚应变能瞬间释放，引发锚索抽丝破断弹射事故，严重影响煤矿安全生产。以张集矿1421(3)锚索支护巷道为工程背景，运用理论分析、数值模拟、实验室试验相结合的研究方法... 详细信息

针对深部高应力巷道顶板锚索在拉伸、剪切、扭转等复合作用下，积聚应变能瞬间释放，引发锚索抽丝破断弹射事故，严重影响煤矿安全生产。以张集矿1421(3)锚索支护巷道为工程背景，运用理论分析、数值模拟、实验室试验相结合的研究方法，揭示锚索-围岩能量孕育演化机制与锚索防护装置吸能防护机理。结果表明：由锚索丝单轴拉伸试验与全量本构模型得到锚索丝破断应变能密度为55e6J/m3，锚索丝破断弹射释放能量与锚索丝破断长度、轴力、直径呈正相关。根据数值模拟，锚索距顶板0.6m处剪切应力集中，易发生锚索抽丝破断弹射，长度0.8m锚索丝弹射初速度为102m/s。通过仿真模拟结合强度理论，原方案锚索吸能防护装置冲击荷载极限为30m/s，增加锚索防护装置底座护壁使冲击荷载极限提升至190m/s，有效解决锚索丝冲击防护装置偏转失效问题。基于锚索防护装置静态拉伸试验与自由落体冲击试验对数值模拟结果进行可靠性验证，获得防护装置最大吸能阈值为1189J；无护壁防护装置弹簧底座在冲击力作用下产生侧向偏移，弹簧底部剪切破坏；增加弹簧底座护壁，可有效约束底座偏移，充分发挥弹簧拉伸吸能特性，防止弹簧剪切损伤后失效，试验结果与数值模拟结果相符。研究成果为同规格锚索巷道支护设计、锚索抽丝破断弹射与防护提供借鉴。

关键词：应变能密度巷道支护弹射能量耗散能量吸能防护能量演化