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细胞器靶向型荧光探针的设计、合成及成像研究

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细胞器靶向型荧光探针的设计、合成及成像研究

作者：戴晓雨济南大学

学位级别：硕士

荧光成像技术作为生物体内的一种非侵入性分析技术,能够实时原位观察活细胞中细胞器和生物活性分子的微环境变化,因而亦是在研究细胞器功能和生物活性物质方面是一个重要的分子工具。真核细胞中的细胞器具有独特的生理学功能,同时又相... 详细信息

荧光成像技术作为生物体内的一种非侵入性分析技术,能够实时原位观察活细胞中细胞器和生物活性分子的微环境变化,因而亦是在研究细胞器功能和生物活性物质方面是一个重要的分子工具。真核细胞中的细胞器具有独特的生理学功能,同时又相互协作共同维持细胞的稳态环境。脂滴作为一种低极性细胞器,是细胞中储存脂类和控制脂类代谢的中心点,脂滴功能受损时会引起肥胖症、脂肪肝和癌症等疾病;内质网是参与蛋白质合成和转运的重要中心,同时也是脂滴生成的主要场所。线粒体作为有氧呼吸的主要场所,具有独特的碱性微环境（p H=8.0）,当线粒体发生自噬时,p H可以作为一种线粒体结构和功能变化的指示剂,对监测线粒体微环境变化具有重要意义。因此,基于各种细胞器结构和组成成分的差异以及微环境的不同,设计靶向不同细胞器的荧光探针,用于研究细胞器动态变化及活性物质变化,这对于揭示细胞器的稳态和机制调控起到至关重要的作用。本文设计并合成了三类靶向脂滴、线粒体和内质网的荧光探针,分别用于监测细胞器异常生理功能下的极性、p H和羧酸酯酶活性,并对它们进行了光谱检测和生物成像研究,研究内容如下:（1）设计并合成了一种具有D-π-A-π-D结构框架的极性荧光探针LP,用于脂滴（绿色荧光和红色荧光）和内质网（红色荧光）的双色成像。该探针实现了在不同极性溶剂中对极性环境的灵敏响应,探针LP的最大荧光发射峰从570 nm红移到625 nm处,使得探针具有双色通道的荧光发射特性,具有高稳定性和高选择性等优点。此外,探针LP具有双色荧光成像脂滴和内质网的特性,尤其能够用于实时检测由油酸和饥饿刺激引起的脂滴和内质网的动态行为变化过程。该探针LP为研究细胞活动中脂滴和内质网之间相互作用关系提供了重要的分子工具。（2）设计并合成了一种用于检测线粒体微环境的p H荧光探针MP。选择4-羟基苯甲醛与半花菁偶联构成整个荧光团,酚羟基作为p H响应位点,实现对p H的响应测试。该探针实现了p H在2.08-9.49范围内的灵敏性响应,且p Ka为5.3,探针具有高选择性、高稳定性和可逆性的优点。此外,探针MP能够用于活细胞内不同p H的检测,同时能够用于可视化监测线粒体自噬和膜电位变化过程中的线粒体形态的动态变化。该探针MP为进一步研究线粒体生理和病理性的变化而引起的线粒体微环境变化提供了一种有效的分子监测工具。（3）设计并合成了一种基于ICT机理检测内质网中羧酸酯酶的“turn-on”型荧光探针CR,该探针具有快速响应羧酸酯酶的特性（<10 s）、较高的灵敏性(LOD=5.1×10 U/m L)和优良的选择性等优点。在Hep G2细胞成像实验中,探针CR能够特异性靶向内质网,能够用于检测奥立司他酯酶抑制剂处理过程中羧酸酯酶活性的变化。更重要的是,探针CR具备检测内质网应激下羧酸酯酶含量的波动。该探针CR能够成功标记内质网并在不同生理环境下实现羧酸酯酶的灵敏检测。

关键词：荧光探针细胞器微环境酯酶细胞成像

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“互联网+”时代下艺术产业发展路径探究

经济研究导刊 2022年第1期 37-39页

作者：亢心言戴晓雨南京邮电大学传媒与艺术学院南京210023

进入到“互联网+”时代,互联网与艺术产业的结合并经过更加深入的融合迎来了新的发展机遇。从“互联网+”时代背景出发,分析我国新兴艺术产业发展的现状,结合实际提出相应的发展路径与优化对策,并以约拍平台为例,对如今艺术市场的环境... 详细信息

进入到“互联网+”时代,互联网与艺术产业的结合并经过更加深入的融合迎来了新的发展机遇。从“互联网+”时代背景出发,分析我国新兴艺术产业发展的现状,结合实际提出相应的发展路径与优化对策,并以约拍平台为例,对如今艺术市场的环境进行分析与探索,旨在促进新兴艺术产业在“互联网+”时代下的发展。

关键词： “互联网+” 艺术产业发展路径

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干细胞外泌体在阿尔茨海默病中的研究进展

生物过程 2023年第2期13卷 91-97页

作者：古良康戴晓雨徐志国湖州学院生命健康学院浙江湖州

阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease, AD)是一种病理机制复杂、以进行性认知功能障碍为主的中枢神经系统疾病,目前仍缺乏有效的治疗方法。间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells, MSCs)外泌体已被证实促进抗炎和Aβ降解,针对AD的病理生... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease, AD)是一种病理机制复杂、以进行性认知功能障碍为主的中枢神经系统疾病,目前仍缺乏有效的治疗方法。间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells, MSCs)外泌体已被证实促进抗炎和Aβ降解,针对AD的病理生理分子机制特征从根本上改善AD症状,因其尺寸、形状、材料等特殊性,视为药物递送系统软纳米颗粒候选载体,有助于解决生物利用度问题,有效改善药物药动学和药效学性能。本文主要介绍AD病理研究最新进展、外泌体抑制Aβ蛋白表达水平方式及药物新型运输载体传递系统构建前沿,为AD治疗提供新的视角。

关键词：阿尔茨海默病间充质干细胞外泌体药物递送系统

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贪污贿赂犯罪缺席审判证明模式研究

贪污贿赂犯罪缺席审判证明模式研究

作者：戴晓雨南京大学

学位级别：硕士

《刑事诉讼法》修改后,我国突破“对席审判”的传统审理结构,首次建立严格意义上的缺席审判制度。当前缺席审判制度的立法简陋,修改后的《刑事诉讼法》对刑事诉讼的核心——刑事证明,缺乏具体规定,导致缺席审判依赖于传统证明模式。口... 详细信息

《刑事诉讼法》修改后,我国突破“对席审判”的传统审理结构,首次建立严格意义上的缺席审判制度。当前缺席审判制度的立法简陋,修改后的《刑事诉讼法》对刑事诉讼的核心——刑事证明,缺乏具体规定,导致缺席审判依赖于传统证明模式。口供欠缺的缺席审判制度必然对围绕口供构建的传统刑事证明模式造成颠覆性影响。面对缺席审判中口供欠缺、证据收集困难、庭审辩方力量不足和案件事实认定存在阻碍等现实状况,以及为更加顺利地实现反腐败国际追逃追赃的制度目的,需要对缺席审判程序中刑事证明模式进行合理性重构。除引言部分外,本文共分为三部分。第一部分主要梳理我国贪污贿赂案件中传统证明模式的特征。在贪污贿赂案件中,传统证明模式呈现以口供为中心、间接证据使用不充分、适用印证证明方法以及证明标准客观化等基本特征。第二部分主要叙述缺席审判制度对传统证明模式的冲击。其一,缺席审判程序设置严格的启动条件。缺席审判程序启动的事实成为新的证明对象。其二,在缺席审判中,定案证据缺乏口供,而且由于“由供到证”的侦查模式,其他证据也很难获取。因此,传统证据结构面临改变。与此同时,传统印证证明方法以及围绕口供开展的客观化证明标准判断也将受到冲击。其三,伴随缺席审判中律师强制辩护制度的建立,辩护律师对取证活动的参与将影响传统证据审查与认定方法,其在庭审中对质证活动的参与也将影响法官主观判断。其四,与缺席审判制度同时设立的重新审理程序,主要发挥对缺席审判的纠错作用,其为证明模式应对缺席审判冲击所作出的巨大调整提供了适用空间。在以上基础上,第三部分提出重塑贪污贿赂犯罪证明模式的一些构想。首先,传统“客观真实”的证明目标需要调整为“法律真实”的目标。其次,司法机关应当提升再生证据等间接证据的应用,发挥间接证据独立证明案件事实的作用,并对传统印证证明方法进行完善。再次,立法应当对传统客观化证明标准进行调整,降低客观层面证明标准为“高度盖然性”,并回归主观判断优先的证明标准。此外,针对传统证明模式中存在的其他问题,重塑证明模式还应从增加程序性事实证明、完善证人制度、加强律师辩护权保障以及梳理重新审理程序的证明规则等方面进行。

关键词：缺席审判贪污贿赂犯罪刑事证明模式间接证据印证

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瞄准镜零位的在线检测

瞄准镜零位的在线检测

作者：戴晓雨南京理工大学

学位级别：硕士

零位及零位走动量检测,是光学瞄具生产和日常使用的重要检测项目,往往作为瞄具质量与验收合格的关键考核参数。复杂战场环境和作战需求衍生出各式瞄具和瞄准分划,而目前一对一的检测方式,通用性不高,工作量较大。因此,本文提出零位在线... 详细信息

零位及零位走动量检测,是光学瞄具生产和日常使用的重要检测项目,往往作为瞄具质量与验收合格的关键考核参数。复杂战场环境和作战需求衍生出各式瞄具和瞄准分划,而目前一对一的检测方式,通用性不高,工作量较大。因此,本文提出零位在线检测的方案,可适用于多种瞄具,规避重复装卡等因素对检测结果的影响,既而提高检测精度和工作效率。本文以通用支架前端面为客观基准,基于自准直光路检测基准在振动、冲击试验前后的变化,通过图像判读修正目标发生器姿态,消除基准偏差,实现纯零位走动检测。基于数字图像处理的检测方案,包括分析图像特征、预处理验证和算法开发,主要算法为设置定时器,分别联合霍夫圆检测和模板匹配,实现对全息瞄具和白光瞄具的零位检测;基于霍夫直线检测原理和灰度重心算法实现自准直标定。同时,基于《GJB 5815-2006》等相关瞄准镜检测标准与规范,完成了复合平行光管、待测产品支架、图像传感器等器件的设计与选型;基于Visual Studio 2017编写具备系统自检、图像检测和数据库存储等功能的MFC工程软件。综上,在完成原理样机的光学性能调校和空间基准标定,提高检测精度和实时性的基础上,对检测结果进行分析,最终对白光瞄具和全息瞄具的检测精度高于0.05mil,检测范围满足0～17mil,达到指标要求,实现项目检测功能。

关键词：瞄准镜全息瞄准镜零位检测自准直系统光轴一致性图像判读

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监察体制改革中的若干证据问题探讨

湖南科技大学学报（社会科学版） 2018年第2期21卷 78-84页

作者：秦宗文戴晓雨南京大学法学院

职务犯罪调查权转移至监察委员会后，由于监察调查不受刑事诉讼法的节制，监察调查获取的证据如何运用在法律上留下不少空白，一些原来刑事诉讼实践中已存在的问题也可能因调查权的转移而呈现新特点。情况说明材料的运用、监察人员出庭... 详细信息

职务犯罪调查权转移至监察委员会后，由于监察调查不受刑事诉讼法的节制，监察调查获取的证据如何运用在法律上留下不少空白，一些原来刑事诉讼实践中已存在的问题也可能因调查权的转移而呈现新特点。情况说明材料的运用、监察人员出庭作证和搜查中的见证是三个突出问题。情况说明材料的运用和监察人员出庭作证应在以审判中心诉讼制度改革的背景下寻找解决方案。搜查中的见证问题应兼顾效率与公正，在完善见证人制度的同时，积极思考以搜查录音录像加以替代的方案。

关键词：监察委员会监察委情况说明出庭作证见证

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小道距高分辨率多道地震系统在渤海海峡地层探测中的应用

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海洋科学进展 2024年

作者：祁晓雨中国铁路设计集团有限公司

渤海海峡横亘于山东半岛和辽东半岛之间，建设一条横跨渤海海峡的跨海通道一直是人们的梦想。为查明渤海海峡拟建桥隧通道第四系沉积层厚度和断裂分布特征，在收集区域地质资料和前人研究的基础上，以大能量等离子体震源为发射源，结合... 详细信息

渤海海峡横亘于山东半岛和辽东半岛之间，建设一条横跨渤海海峡的跨海通道一直是人们的梦想。为查明渤海海峡拟建桥隧通道第四系沉积层厚度和断裂分布特征，在收集区域地质资料和前人研究的基础上，以大能量等离子体震源为发射源，结合小道距高分辨率地震电缆采集系统，进行了海域多道地震反射波法探测试验。首先通过海上试验，选择合适的震源能量和地震记录接收系统参数，以提高原始地震数据质量。再通过分析噪声特点及多次波发育情况，制定了一套适合于研究区的多道地震数据处理流程，最终获得的地震剖面具有较高的信噪比，能够清晰地反映渤海海峡区域的沉积地层展布和基岩起伏特征，其理论垂向分辨率优于1.0 m。本次探测结果为后期渤海海峡跨海通道的设计提供了参考依据。

关键词：渤海海峡跨海通道多道地震高分辨率

基于学习的教师教学发展:美国研究型大学教师发展模式探析

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比较教育研究 2024年第8期46卷 79-88页

作者：沈晓雨华中科技大学教育科学研究院湖北武汉430074

研究型大学教师由于持续的教学与科研冲突,教学发展面临有效性与合法性双重困境。在此背景下,美国研究型大学打破教与学的二元对立,实现从传授范式到学习范式的教学变革,形成“以学习者为中心”的大学教师教学发展理念。在教师教学发展... 详细信息

研究型大学教师由于持续的教学与科研冲突,教学发展面临有效性与合法性双重困境。在此背景下,美国研究型大学打破教与学的二元对立,实现从传授范式到学习范式的教学变革,形成“以学习者为中心”的大学教师教学发展理念。在教师教学发展目标与内容维度,美国研究型大学将教师教学发展和学生学习发展相结合,帮助教师掌握校本化的课程设计能力、“以学习者为中心”的教学能力以及前沿的教学技术。在教师教学发展方式维度,以非正式发展项目作为正式项目的补充,通过融入数字化与信息技术、建设教师一学生学习共同体,助推教师发展关键教学技能。为保证教师教学发展有效性,美国研究型大学引入教学发展项目评估,以学生学习效果作为主要评估工具,为大学教师教学发展不断注入活力。

关键词：研究型大学大学教师教学发展学习中心

ZnSe及其Mn掺杂复合材料光吸收催化性能和高压结构性能研究

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光谱学与光谱分析 2024年第2期44卷 380-385页

作者：王世霞王晓雨胡天意上海理工大学材料与化学学院上海200093

ZnSe半导体材料是制备光电器件和光催化反应催化剂的重要原材料。其单体材料具有强光下易变质、电子-空穴复合等现象。通过元素掺杂制备ZnSe复合材料,并与单体材料对比研究了元素掺杂所提升的ZnSe的光学及结构性能。首先采用水热法实验... 详细信息

ZnSe半导体材料是制备光电器件和光催化反应催化剂的重要原材料。其单体材料具有强光下易变质、电子-空穴复合等现象。通过元素掺杂制备ZnSe复合材料,并与单体材料对比研究了元素掺杂所提升的ZnSe的光学及结构性能。首先采用水热法实验室制备纯ZnSe和Mn∶Zn加入比分别为5%、10%、15%和20%的ZnSe复合材料,对比材料形貌、结构,光吸收和催化性能,结果显示掺杂比为10%的样品结晶度最高,杂质成型量最少,催化性能最佳。采用Mao-Bell型金刚石压腔结合原位拉曼光谱探究纯ZnSe和掺杂比为10%的样品的高压结构相变行为,以探究元素掺杂对样品结构性能的影响。研究结果:(1)扫描电子显微镜(SEM)图显示,加入Mn元素后制得的ZnSe样品形貌为球状,与纯样大致相同,球状颗粒表面有小颗粒负载,且随着Mn加入量的增加,表面负载的物质增多;(2)X射线衍射(XRD)图谱表明,ZnSe样品结构为立方闪锌矿结构,随着Mn加入量的增加,样品MnSe特征峰增强,杂质MnO_(2)成型越完全。掺杂比为10%的样品ZnSe结晶度高,杂质成型量少;(3)固体紫外漫反射(UV-Vis)结果表明,掺杂比为10%的样品对光的吸收边最大,禁带宽度最小,为1.65 eV;(4)光催化实验结果显示,掺杂比为10%的样品催化降解甲基橙的效率最大,6 h降解85.4%。研究表明掺杂Mn元素比为10%的ZnSe复合材料,光吸收和催化性能相对最好。金刚石压腔结合原位拉曼光谱探究ZnSe样品和掺杂比为10%的样品的高压相变结果表明,(1)纯ZnSe的LO声子模在压力上升到12.3 GPa时基本消失,TO声子模在压力上升到20.8 GPa时消失,整个加压过程中没有新峰生成,纯ZnSe发生闪锌矿相向岩盐矿相转变的高压行为;(2)复合材料的TO声子模在6.9 GPa时发生劈裂,在8.0 GPa时208 cm^(-1)处有新峰出现,表明在此压力下部分样品由闪锌矿相转变为辰砂矿相。在10.8 GPa时辰砂矿相的峰消失,体系发生由辰砂矿相向岩盐矿相转变;加压至18.8 GPa,LO声子模非常微弱,几近消失,此时体系中的闪锌矿相完全转化为岩盐矿相。研究了不同条件下ZnSe的光催化性能和相变行为,探究了不同掺杂比对ZnSe光催化性能的影响,确定掺杂比为10%的ZnSe样品为最佳掺杂比复合材料,丰富了极端条件下ZnSe的物理化学性质的多样性研究。

关键词： ZnSe Mn掺杂光吸收性能光催化性能高压相变

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