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鞣花酸对丙烯酰胺与3-氯丙醇致小肠联合毒性的保护机制研究

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鞣花酸对丙烯酰胺与3-氯丙醇致小肠联合毒性的保护机制研究

作者：郭子妍南昌大学

学位级别：硕士

丙烯酰胺（Acrylamide,AA）是一种在环境中普遍存在的有毒污染物,它存在于各种工业生产中,也可以出现在高温油炸食品中。3-氯-1,2-丙二醇（3-monochloropropane-1,2-diol,3-MCPD）是植物性蛋白在盐酸催化及高温条件下水解后产生的一类... 详细信息

丙烯酰胺（Acrylamide,AA）是一种在环境中普遍存在的有毒污染物,它存在于各种工业生产中,也可以出现在高温油炸食品中。3-氯-1,2-丙二醇（3-monochloropropane-1,2-diol,3-MCPD）是植物性蛋白在盐酸催化及高温条件下水解后产生的一类污染物,存在于各类调味品中。研究表明,虾条及薯片等食品中能同时存在AA和3-MCPD,因此人群面临着AA与3-MCPD共同暴露的风险,膳食摄入能使二者同时对肠道造成损伤。鞣花酸（Ellagic acid,EA）是一种酚酯类化合物,在多种水果中存在,具有抗诱变、抗氧化、抗炎活性以及抗突变性等多种生物活性功能。目前AA和3-MCPD联合毒性致小鼠小肠的影响及机制尚不清楚,EA能否对AA和3-MCPD联合毒性致小鼠小肠损伤具有保护作用尚不了解。因此本文以小鼠和IEC-6细胞为模型,通过体内体外实验,探究EA对AA和3-MCPD联合毒性致小鼠小肠损伤的保护作用机制,并以IEC-6细胞为模型评价AA与3-MCPD联合毒性效应。主要研究内容如下:（1）通过KM小鼠构建AA与3-MCPD联合给药体内模型,并通过不同浓度EA进行干预,同时设置N-乙酰-L-半胱胺酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）阳性对照。结果表明AA及3-MCPD诱导小鼠体重减少,小肠绒毛缩短,隐窝加深,结构破坏,但是EA干预能减轻这种倾向。通过检测肠道通透性指标（DAO和D-Lactic acid）和肠道粘膜蛋白MUC2,发现AA和3-MCPD联合给药会使肠道通透性增加,EA干预能使肠道通透性得到恢复。此外通过免疫组化染色分析,AA和3-MCPD联合给药会使小肠中的肠道干细胞及其分化后的杯状细胞、潘氏细胞和内分泌细胞数量减少,EA干预能使以上细胞数量得到恢复（p<0.05）。进一步分析干细胞分化相关通路Wnt/β-catenin信号通路,AA和3-MCPD联合给药使Wnt-3a和β-catenin的表达显著降低,EA干预能够通过抑制Gsk-3β的表达来激活Wnt/β-catenin信号通路。以上研究结果表明EA能通过调节Wnt/β-catenin维持肠干细胞的稳定与上皮细胞的更新来维持肠道屏障减少AA和3-MCPD对肠道的损害。（2）使用Illumina高通量测序技术分析小鼠肠道菌群及其代谢产物短链脂肪酸的变化。Alpha及Beta多样性分析显示,AA和3-MCPD联合给药显著降低菌群丰度和多样性,改变菌群结构而EA能缓解这种趋势。通过随机森林分析发现,在属水平上,Ruminococcus受影响占比位最高,而在种水平上,Lactobacillus-reutri受影响占比位最高。通过LEf Se分析发现,AA的标志菌群为p-Acidobacteria,AA与3-MCPD的标志菌群为p-Firmicutes。EA标志菌群为g-Barnestella、f-Barnesiellaceae。通过检测短链脂肪酸水平,发现AA、3-MCPD及联合组显著性降低短链脂肪酸含量,且短链脂肪酸成分结构与正常组不同,而EA干预能恢复短链脂肪酸成分结构。综上结果表明,AA和3-MCPD会降低肠道微生物的多样性和丰度,改变菌群组成结构,且主要受到影响的是属水平为Ruminococcus种水平菌为Lactobacillus-reutri,EA干预能缓解这种影响。（3）基于IEC-6细胞模型进一步验证EA对AA和3-MCPD联合毒性的保护机制。AA在给药16 h和24 h的IC50分别为4 m M和3 m M,3-MCPD在给药16 h和24 h的IC50分别为40 m M和30 m M。基于CI值评价联合效应,当联合剂量为IC50比（AA:3-MCPD=1 m M:10 m M）时,给药16 h、24 h随着抑制率的增加,联合毒性效应从加和转向协同;给药48 h,随着抑制率的增加,联合毒性效应从拮抗转向加和再转向协同。联合剂量为膳食暴露比（AA:3-MCPD=2 m M:1m M）时,给药16 h,联合毒性效应为协同;给药24 h和48 h,随着抑制率增加,联合毒性效应从拮抗转向加和再转向协同。检测细胞ROS,GSH水平,相比于AA和3-MCPD联合组,发现EA干预能显著性降低ROS水平,升高GSH水平。通过Western blot分析与细胞迁移实验发现,EA干预能缓解AA与3-MCPD联合毒性导致Wnt/β-catenin信号通路的抑制和伤口愈合率显著性降低,表明EA可能通过降低氧化损伤和调节Wnt/β-catenin信号通路来促进IEC-6细胞的增殖。

关键词：鞣花酸丙烯酰胺三氯丙醇肠道菌群肠干细胞分化

黑龙江省域主体功能区协调发展研究——以重点开发区为例

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商业经济 2014年第9期 8-9页

作者：郑双双慕妍花哈尔滨商业大学经济学院黑龙江哈尔滨150028

构建主体功能区有利于实现空间管制,优化资源配置以及促进人与自然的和谐发展。黑龙江省主体功能区的国家级和省级重点开发区域发展良好,是全国重要的能源、石化、电力、煤化工、医药和重型装备制造基地。近年,黑龙江省在建设重点开发... 详细信息

构建主体功能区有利于实现空间管制,优化资源配置以及促进人与自然的和谐发展。黑龙江省主体功能区的国家级和省级重点开发区域发展良好,是全国重要的能源、石化、电力、煤化工、医药和重型装备制造基地。近年,黑龙江省在建设重点开发区的过程中仍面临着不能满足地方经济发展指标的需求、对环境和公共建设造成很大压力等问题。黑龙江省应充分利用各种政策,对主体功能区的重点开发区域进行合理规划,以加快全省重点开发区的建设,促进经济的快速健康发展。

关键词：黑龙江省主体功能区重点开发区域协调发展研究

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基于偏振敏感光学相干层析术的脑胶质瘤成像

中国激光 2024年第9期51卷 254-262页

作者：王玮珂胡慕芸杨迪袁卓群贾晓花杨建凯梁艳梅南开大学现代光学研究所天津市微尺度光学信息技术科学重点实验室天津300350 中国科学院自动化研究所中国科学院分子影像重点实验室北京100190 河北医科大学第二医院神经外科河北石家庄050000

脑胶质瘤是一种侵袭性的恶性原发性脑肿瘤,术中准确区分胶质瘤和正常脑组织极具挑战性。基于高分辨偏振敏感光学相干层析术(PS-OCT)对正常小鼠脑和胶质瘤模型小鼠脑进行成像,计算了强度、累积相位延迟和累积光轴信息。结果表明,从PS-OC... 详细信息

脑胶质瘤是一种侵袭性的恶性原发性脑肿瘤,术中准确区分胶质瘤和正常脑组织极具挑战性。基于高分辨偏振敏感光学相干层析术(PS-OCT)对正常小鼠脑和胶质瘤模型小鼠脑进行成像,计算了强度、累积相位延迟和累积光轴信息。结果表明,从PS-OCT图像中可以清楚地显示出鼠脑中的纤维结构及其取向;借助PS-OCT图像中丰富的偏振信息,可以准确区分鼠脑胶质瘤区和正常区;基于计算的光轴标准差可以有效区分胶质瘤和正常脑组织。研究结果表明,高分辨PS-OCT在脑组织成像及脑胶质瘤识别方面具有很大的临床应用潜力。

关键词：医用光学偏振敏感光学相干层析术脑成像胶质瘤

基于ChatGPT的学生辅助学习系统设计与实现

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电脑编程技巧与维护 2024年第7期 52-54页

作者：陈慕花临夏现代职业学院甘肃临夏731100

在当今的教育领域,技术的快速发展为传统学习方式带来了革命性的变化。ChatGPT作为一种先进的自然语言处理技术,在辅助教育方面有巨大潜力。研究探讨的主题集中在如何有效利用ChatGPT这一人工智能技术,为学生提供一个全面的学习辅助系统... 详细信息

在当今的教育领域,技术的快速发展为传统学习方式带来了革命性的变化。ChatGPT作为一种先进的自然语言处理技术,在辅助教育方面有巨大潜力。研究探讨的主题集中在如何有效利用ChatGPT这一人工智能技术,为学生提供一个全面的学习辅助系统。ChatGPT技术能够理解和生成类人般的文本,这为创建能够与学生进行互动式学习对话的系统提供了基础。在教育领域,这种系统能够提供个性化学习建议、管理课堂内容、监督练习和考试,从而帮助学生以更有效的方式学习。

关键词： ChatGPT技术学生辅助学习系统设计系统规划

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七叶树Dof转录因子家族鉴定及表达分析

中国中药杂志 2024年

作者：秦晨解雪华李路李俊米要磊曹惠妍孙伟马伟万会花刘秀波黑龙江中医药大学药学院中国中医科学院中药研究所道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室广东药科大学药学院黑龙江中医药大学佳木斯学院

七叶树是重要的药用及园艺植物，其干燥成熟种子为著名中药娑罗子，七叶皂苷是其主要活性成分，具有消炎、抗渗出等药理活性，广泛用于腰椎间盘突出、术后水肿、运动损伤等疾病治疗，近年来市场需求持续增加。Dof（DNA binding with one... 详细信息

七叶树是重要的药用及园艺植物，其干燥成熟种子为著名中药娑罗子，七叶皂苷是其主要活性成分，具有消炎、抗渗出等药理活性，广泛用于腰椎间盘突出、术后水肿、运动损伤等疾病治疗，近年来市场需求持续增加。Dof（DNA binding with one finger）家族是植物界独有的转录因子，在植物的生长发育、抗逆境胁迫以及调控次生代谢等方面发挥重要作用，然而目前关于七叶树Dof基因家族的研究却相对匮乏。该研究从七叶树的基因组中鉴定出36个AcDof基因家族成员，并分析其理化性质、染色体定位、系统发育关系、基因结构、顺式作用元件以及在不同组织部位的表达模式。结果显示：AcDof家族成员的蛋白为81～493个氨基酸，相对分子质量为9 270.38～55 015.68，等电点为4.84～10.2；亚细胞定位分析表明，34个AcDof蛋白定位于细胞核，其余2个AcDof蛋白定位于叶绿体；系统进化分析将AcDof基因划分为9个亚群，基因结构分析表明所有AcDof基因均拥有C2-C2型单锌指结构域；利用转录组新数据进行基因表达分析发现，AcDof家族成员的表达具有组织特异性，其中AcDof04、AcDof02和AcDof03在种子中具有特异性高表达，表明这些基因可能参与七叶皂苷的合成调控。本研究不仅丰富了我们对七叶树Dof基因家族的认识，更为后续对七叶树中Dof基因的功能和相关调控机制的深入研究提供了重要的基因资源。

关键词：七叶树 Dof转录因子基因家族鉴定生物合成调控

谷氨酸棒杆菌3-磷酸甘油酸脱氢酶的定向进化改造研究

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食品与发酵工业 2024年

作者：黄新燕孙慕娇杜穆花潘越张心语张瑶函徐宁刘君鞠建松魏亮中国科学院天津工业生物技术研究所天津科技大学食品科学与工程学院天津科技大学生物工程学院河北师范大学生命科学学院

3-磷酸甘油酸脱氢酶（3-phosphoglycerate dehydrogenase， PGDH）是L-丝氨酸生物合成途径的限速酶，是影响L-丝氨酸高效合成的关键。该研究以来源于谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)的PGDH为研究对象，通过对其酶学性质进行... 详细信息

3-磷酸甘油酸脱氢酶（3-phosphoglycerate dehydrogenase， PGDH）是L-丝氨酸生物合成途径的限速酶，是影响L-丝氨酸高效合成的关键。该研究以来源于谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)的PGDH为研究对象，通过对其酶学性质进行测试分析发现，Cg-PGDH的酶活性仅为1.98 U/mg，而且热稳定性较差，严重制约了L-丝氨酸的高效生物合成。针对这一关键问题，该研究采用定向进化和高通量筛选的方法对Cg-PGDH进行改造，提高酶的催化活性和热稳定性。通过多轮筛选，最终获得了5个催化活性显著提升的突变体，P85Q、D365Y、A389T、A183V、I231V。其中，突变体P85Q的酶活性提升了2.55倍，并显著提高了酶的温度稳定性，最适催化温度达到60℃。随后该研究对P85Q、D365Y、A389T、A183V、I231V等5个突变体的突变位点进行组合突变，获得了温度稳定性进一步提高的突变体P85Q-D365Y。通过对Cg-PGDH突变位点的三维结构解析和分子动力学模拟实验发现，尽管突变体P85Q与D365Y的突变位点不位于Cg-PGDH催化活性中心，但是可通过蛋白结构形变增强Cg-PGDH活性中心130-140区间loop的稳定性，从而增加了酶的底物亲和性和催化活性。相关研究成果为进一步解析PGDH催化机制，提高PGDH催化活性提供了重要的研究基础和方向。

关键词：谷氨酸棒杆菌 3-磷酸甘油酸脱氢酶定向进化和高通量筛选温度稳定性分子动力学模拟

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紫荆花的想念

少男少女 2024年第1期 26-27页

作者：陈欣妍广东省潮州市潮安区东凤镇鳌头中学801班

紫荆花开时，挂满枝头的花苞刹那间全部绽放，在枝头开得灿烂，一大片簇拥着，像好姐妹似的搂在一起。我跑起来，路上起风了，风吹起了我的衣摆，树上的一朵紫荆花也被风吹落了下来，顺着我的头发滑到我身上，接着落在地上。恍惚间，我...

紫荆花开时，挂满枝头的花苞刹那间全部绽放，在枝头开得灿烂，一大片簇拥着，像好姐妹似的搂在一起。我跑起来，路上起风了，风吹起了我的衣摆，树上的一朵紫荆花也被风吹落了下来，顺着我的头发滑到我身上，接着落在地上。恍惚间，我又想起了那年的离别。那年，同样是在紫荆花开时，明媚的阳光透过紫荆花丛，落在地上，花影斑驳，

关键词：

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肺癌免疫治疗相关肺炎生物标志物的研究进展

现代医学 2024年第3期52卷 492-498页

作者：田雨陆元花赵沛妍李慧程颖长春中医药大学临床医学院吉林长春130012 吉林省肿瘤医院博士后工作站吉林长春130012 吉林省肿瘤医院肿瘤转化医学实验室吉林长春130012 吉林省肿瘤医院内一科吉林长春130012

近年来免疫治疗极大地改善了晚期肺癌患者的生存,但是免疫治疗引发的不良反应也逐步凸显。免疫治疗相关肺炎(CIP)是免疫治疗引发的严重肺损伤,在肺癌中发生率高于其他肿瘤,是导致肺癌患者免疫治疗停药甚至死亡的重要因素。在接受免疫治... 详细信息

近年来免疫治疗极大地改善了晚期肺癌患者的生存,但是免疫治疗引发的不良反应也逐步凸显。免疫治疗相关肺炎(CIP)是免疫治疗引发的严重肺损伤,在肺癌中发生率高于其他肿瘤,是导致肺癌患者免疫治疗停药甚至死亡的重要因素。在接受免疫治疗的肺癌患者中通过生物标志物进行预测及实时监测有助于CIP的提前预防、尽早诊断和及时干预,这对肺癌患者的管理和治疗具有重要意义,但目前尚无应用于临床的CIP生物标志物。本文参考国内外相关CIP生物标志物的探索研究进行系统综述,以期对寻找具有临床价值的CIP生物标志物提供依据,为减少肺癌患者免疫治疗副反应的发生提供参考。

关键词：免疫治疗相关肺炎肺癌免疫治疗生物标志物综述

《繁花》在日本的翻译与接受——与日译者浦元里花的对谈

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扬子江文学评论 2024年第2期 68-73,98页

作者：卢冬丽 [日]浦元里花南京农业大学同志社大学

金宇澄的《繁花》作为“海派”文学的代表作,在碎片化的描摹中展现了上海人的生活图景,经由小说、舞台剧、漫画、电视剧多模态传播的加持下,成为中国当代城市文学的一道靓丽风景。2022年初,《繁花》日译本由早川书房出版,译者浦元里花... 详细信息

金宇澄的《繁花》作为“海派”文学的代表作,在碎片化的描摹中展现了上海人的生活图景,经由小说、舞台剧、漫画、电视剧多模态传播的加持下,成为中国当代城市文学的一道靓丽风景。2022年初,《繁花》日译本由早川书房出版,译者浦元里花前后花费近十年时间,完成这一充满挑战而又幸福的翻译工作。浦元里花将金宇澄誉为“二十一世纪的丰子恺”,文艺评论家福嶋亮大认为《繁花》“正如《红楼梦》《海上花列传》一般,折射出中国文学的传统--即在‘支离破碎’的会话和故事的交叠中演绎出丰饶的情感。读者在不知不觉中触碰到中国小说的传统脉搏”。

关键词：《海上花列传》文艺评论家金宇澄《繁花》翻译与接受二十一世纪舞台剧多模态