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Retronectin诱导自体CIK细胞联合IFN-α治疗中晚期肝癌的护理

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护士进修杂志 2011年第20期26卷 1849-1850页

作者：范瑞华杨茂君徐本玲张旭华高全立郑州大学附属肿瘤医院中心实验室河南郑州450008

目的探讨重组纤维连接蛋白(RN Retronectin)诱导自体CIK(Cytokine induced killer)细胞联合IFN-α(α-干扰素)治疗中晚期肝癌的规范化护理。方法根据患者的具体情况制定科学、规范的护理计划,其中,包括心理护理、饮食护理、IFN-α药物... 详细信息

目的探讨重组纤维连接蛋白(RN Retronectin)诱导自体CIK(Cytokine induced killer)细胞联合IFN-α(α-干扰素)治疗中晚期肝癌的规范化护理。方法根据患者的具体情况制定科学、规范的护理计划,其中,包括心理护理、饮食护理、IFN-α药物应用的护理、CIK的护理等环节,并加以实施和评估疗效。结果接受Retronectin诱导自体CIK细胞联合IFN-α治疗的12例患者,有1例患者在第一次回输CIK后出现38℃的发热,12例患者应用IFN-α后均出现发热及流感样综合征。患者肝肾功能治疗前后未见明显变化,未见骨髓抑制。患者生活质量均有不同程度的改善。结论实施科学、规范的护理程序是CIK细胞联合IFN-α治疗中晚期肝癌的前提和保证。

关键词：肝癌重组纤维连接蛋白 CIK细胞 α-干扰素护理

特异性靶向PD-1分子的PD-15融合蛋白联合G15Ra-K562滋养细胞快速扩增NK/T细胞

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中华微生物学和免疫学杂志 2021年第6期41卷 466-472页

作者：李铁鹏王瑶张放赵玲娣杨勇豪徐本玲高全立郑州大学附属肿瘤医院免疫治疗科 450008

目的探讨anti-PD-1(scFv)/hIL-15(简称PD-15)融合蛋白体外特异性结合PD-1的能力及联合GF-hIL-15Ra-K562(简称G15Ra-K562)滋养细胞对自然杀伤细胞(NK)/T细胞增殖能力的影响。方法Overlap PCR构建G15Ra表达载体,电穿孔仪转染K562,极限稀释法获取G15Ra-K562滋养细胞单克隆株。酶切连接构建PD-15表达载体,Lipofectamine^(TM)2000瞬时转染HEK293T细胞并获取包含PD-15融合蛋白的条件培养液。密度梯度离心获取人外周血单个核细胞,CFSE染色标记活跃增殖细胞。流式细胞术检测PD-15特异性结合PD-1的能力和对人外周血单个核细胞的增殖及不同淋巴亚群比例的影响。结果成功构建高表达融合蛋白G15Ra的滋养细胞单克隆株G15Ra-K562。添加hIL-15能够将G15Ra-K562滋养细胞扩增人外周血淋巴细胞能力提升5倍以上(P<0.05)。PD-15融合蛋白具有PD-1特异性结合能力(P<0.001),联合G15Ra-K562滋养细胞能够在体外高效扩增人外周血来源的NK/T细胞(P<0.05),扩增得到的细胞产品中以NK、CD8^(+)T和CD4^(+)T细胞为主。结论PD-15融合蛋白能够特异性靶向PD-1分子且在联合G15Ra-K562滋养细胞后具有强的人外周血来源的NK/T细胞扩增能力,建立了分步、靶向递送IL-15/IL-15Ra复合物至PD-1+细胞的细胞培养方案,为后续选择性扩增PD-1+细胞提供实验资料。

关键词：过继免疫细胞疗法程序性死亡受体1 IL-15 IL-15Ra 肿瘤特异性T细胞

CFSE/PI双标法检测CIK细胞对顺铂预处理肿瘤细胞的杀伤活性

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基础医学与临床 2011年第6期31卷 721-722页

作者：徐本玲高全立袁龙张旭华范瑞华刘雪郭金东河南省肿瘤医院中心实验室河南郑州450008 河南省肿瘤医院生物治疗科河南郑州450008 河南省肿瘤医院普外科河南郑州450008

细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子共同培养一段时间后获得的一群异质细胞,具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广等优点。如何对CIK细胞的效应功能进行客观准确的评价... 详细信息

细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子共同培养一段时间后获得的一群异质细胞,具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广等优点。如何对CIK细胞的效应功能进行客观准确的评价,如何使CIK和化疗有机地结合在一起,对CIK的临床应用具有重要的意义。本实验建立并优化了CFSE／PI双标法检测CIK细胞及联合顺铂（DDP，DS platin）对肺癌A549细胞的杀伤功能，方法简便易行、灵敏度高，对CIK细胞的临床应用具有重要的借鉴意义。

关键词： CIK细胞肿瘤细胞双标法细胞因子诱导的杀伤细胞杀伤活性顺铂检测预处理

腹腔镜经肛拖出直肠癌根治术超低位保肛65例回顾分析

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中国现代医学杂志 2011年第17期21卷 2043-2046页

作者：袁龙李智徐本玲吴惠泽韩广森河南省肿瘤医院普外科河南郑州450000

目的探讨腹腔镜下经肛拖出直肠癌根治术超低位保肛的可行性、安全性、根治性及短期临床疗效。方法回顾该院运用腹腔镜经肛拖出直肠癌根治术行超低位保肛的65例直肠癌患者资料,分析术中、术后及预后各项指标。结果 65例患者手术均获成功... 详细信息

目的探讨腹腔镜下经肛拖出直肠癌根治术超低位保肛的可行性、安全性、根治性及短期临床疗效。方法回顾该院运用腹腔镜经肛拖出直肠癌根治术行超低位保肛的65例直肠癌患者资料,分析术中、术后及预后各项指标。结果 65例患者手术均获成功。平均手术时间(138±71.6)min,出血量(107.5±86.5)mL,平均淋巴结清除数(11.0±4.3)个,术后肠道功能恢复时间(2.3±0.6)d,止痛药物使用时间(1.8±0.7)d,住院时间(12.3±2.4)d,吻合口漏6例,吻合口出血2例,吻合口狭窄2例;术后随访中位数33个月(24～46个月),复发4例,转移6例,总生存率84.6%(55/65),目前未发现有穿刺孔转移及大便失禁。结论该手术方式符合肿瘤学根治性原则,安全可行,更微创,术后恢复快,适合用于超低位直肠癌保肛。

关键词：直肠肿瘤肛门外科手术腹腔镜

抗PD-1抗体对小鼠结直肠癌移植瘤组织中免疫细胞的影响

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郑州大学学报（医学版） 2020年第1期55卷 33-36页

作者：徐本玲陈广玉袁龙杜雪相高全立郑州大学附属肿瘤医院免疫治疗科郑州450008 恶性肿瘤免疫细胞治疗河南省工程实验室郑州450008 郑州大学附属肿瘤医院普外科郑州450008

目的:探讨抗PD-1抗体对小鼠结直肠癌移植瘤组织中免疫细胞的影响。方法:构建BALB/c小鼠CT26结直肠癌模型,随机分为抗PD-1抗体治疗组(PD-1组)和对照组(PBS组)。PD-1组在荷瘤后第6天和第9天分别腹腔注射抗PD-1抗体(0.2 mg/只),对照组给予... 详细信息

目的:探讨抗PD-1抗体对小鼠结直肠癌移植瘤组织中免疫细胞的影响。方法:构建BALB/c小鼠CT26结直肠癌模型,随机分为抗PD-1抗体治疗组(PD-1组)和对照组(PBS组)。PD-1组在荷瘤后第6天和第9天分别腹腔注射抗PD-1抗体(0.2 mg/只),对照组给予相同体积的PBS。荷瘤后第7天开始采用游标卡尺每隔1 d对肿瘤进行测量、记录,计算肿瘤体积。末次给药后2周根据治疗效果和肿瘤体积大小将PD-1组小鼠分为有效组(n=3)和无效组(n=5),取其脾脏和肿瘤组织,流式法检测脾脏与肿瘤微环境中T细胞(CD3、CD4、CD8)、髓源性抑制细胞(MDSC)、调节T细胞(Tregs)等细胞比例及肿瘤细胞中PD-L1的表达。结果:治疗有效组小鼠肿瘤体积小于治疗无效组;治疗有效组小鼠脾脏和肿瘤组织中CD3^+、CD4^+和CD8^+T细胞占总细胞的比例均高于无效组,MDSC细胞的比例均低于无效组(P<0.05)。治疗有效组小鼠肿瘤组织中PD-L1的表达高于无效组(P<0.05)。抗PD-1抗体治疗后肿瘤组织中PD-L1的表达与肿瘤组织中浸润的CD3^+、CD4^+和CD8^+T细胞的比例均呈正相关(P<0.05)。结论:小鼠CT26结直肠癌模型中抗PD-1抗体的治疗效果与肿瘤组织中浸润T细胞和MDSC比例的改变密切相关,其可能成为预测和改善抗PD-1抗体治疗效果的检测指标。

关键词：抗PD-1抗体结直肠癌髓源性抑制细胞 PD-L1 小鼠

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人内皮抑素小环载体在真核细胞中的生物活性

山东医药 2010年第28期50卷 66-68页

作者：徐本玲袁龙赵鹏吴江雪黄文林河南省肿瘤医院郑州450008 华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心

目的通过对人内皮抑素小环载体在真核细胞中的表达和生物学效应的研究,探讨小环载体作为生物治疗载体的可行性。方法将mc-hES、pcDNA-hES分别转染人肝癌细胞HepG2后,通过ELISA、RT-PCR和Westernblot观察hES表达。MTT法检测其对人脐静脉... 详细信息

目的通过对人内皮抑素小环载体在真核细胞中的表达和生物学效应的研究,探讨小环载体作为生物治疗载体的可行性。方法将mc-hES、pcDNA-hES分别转染人肝癌细胞HepG2后,通过ELISA、RT-PCR和Westernblot观察hES表达。MTT法检测其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖抑制作用。结果 mc-hES和pcDNA-hES均能表达hES,mc-hES能明显抑制HUVEC的生长,而对HepG2无明显作用(P<0.05)。在相同条件下,小环较常规质粒在体外能快速介导转基因的表达,且较传统质粒高6～8.3倍。结论 mc-hES较普通质粒pcDNA-hES在肝癌细胞中能高效表达转基因,为小环载体进一步研究提供了很好的实验基础。

关键词：小环DNA载体内皮抑素非病毒载体质粒

动态监测PML-RARα融合基因对急性早幼粒细胞白血病的临床意义

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山东医药 2009年第44期49卷 13-14页

作者：刘敏吕晓东魏旭东岳寒范瑞华徐本玲姚金晓黄琛郑州大学第一附属医院郑州450052 河南省肿瘤医院

目的动态监测急性早幼粒细胞白血病(APL)特有的PML-RARα基因,并探讨其临床意义。方法15例APL患者用全反式维甲酸(ATRA)和其他化疗药物进行诱导缓解、巩固和维持治疗,并进行随访,在病程的不同阶段采集骨髓标本进行形态学检查,并采用实... 详细信息

目的动态监测急性早幼粒细胞白血病(APL)特有的PML-RARα基因,并探讨其临床意义。方法15例APL患者用全反式维甲酸(ATRA)和其他化疗药物进行诱导缓解、巩固和维持治疗,并进行随访,在病程的不同阶段采集骨髓标本进行形态学检查,并采用实时定量PCR(RQ-PCR)技术检测PML-RARα基因表达。结果15例APL患者入院时PML-RARα均为阳性,治疗中死亡1例、完全缓解14例(93%)。14例完全缓解患者中2例复发,13例在病程中PML-RARα转为阴性。2例复发患者中,1例PML-RARα持续阳性,1例在病程中由阴性转为阳性。13例仍生存者中,至少已连续3次PML-RARα为阴性。结论对APL患者跟踪检测PML-RARα融合基因可早期发现复发病例;RQ-PCR检测PML-RARα对APL诊断、疗效判定及微小残留病变监测是一种有力手段。

关键词：白血病早幼粒细胞急性 PML—RARα 实时定量PCR 复发

膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin表达的临床意义

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临床泌尿外科杂志 2009年第11期24卷 839-842页

作者：袁龙王剑松徐本玲袁鹏韩广森吴惠泽河南省肿瘤医院普外科郑州450000 昆明医学院第二附属医院泌尿外科

目的:探讨Survivin对膀胱癌早期发现、常规筛选且无损伤的方法,研究其与肿瘤病理分级(期)的相关性。方法:留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病、10例健康志愿者新鲜中段晨尿,同上53例术后癌组织。利用巢式RT-PCR、实时定量PCR... 详细信息

目的:探讨Survivin对膀胱癌早期发现、常规筛选且无损伤的方法,研究其与肿瘤病理分级(期)的相关性。方法:留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病、10例健康志愿者新鲜中段晨尿,同上53例术后癌组织。利用巢式RT-PCR、实时定量PCR技术检测Survivin的表达,同时行尿脱落细胞学及膀胱镜病检。结果:53例膀胱癌患者尿及癌组织中Su rvivin均有表达,敏感性为100%,特异性为90%。与尿脱落细胞学敏感性比较两者差异有统计学意义(P0.05)。癌组织中Survivin的量与肿瘤病理分级(期)正相关(P<0.01)。结论:检测尿脱落细胞中Survivin的表达有望成为临床诊断、筛检膀胱癌的较可靠方法。Survivin在膀胱的演进过程中可能起重要作用,可望作为检测膀胱癌恶化进展的指标。

关键词：膀胱肿瘤移行上皮癌巢式RT—PCR 实时定量PCR 基因表达

慢性粒细胞白血病Ph染色体和bcr-abl mRNA定量检测的临床意义

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西安交通大学学报（医学版） 2010年第3期31卷 325-327页

作者：吕晓东范瑞华胡杰英徐本玲张旭华郭金东宋云峰宋永平河南省肿瘤医院中心实验室河南郑州450008

目的探讨Ph染色体和bcr-abl mRNA在慢性粒细胞白血病诊断、分期、治疗及微小残留病变监测中的意义。方法同时检测437份慢粒标本的Ph染色体和bcr-abl mRNA的表达情况。结果慢性期、加速期和急变期的bcr-abl mRNA定量结果逐渐增高(P<0.05)... 详细信息

目的探讨Ph染色体和bcr-abl mRNA在慢性粒细胞白血病诊断、分期、治疗及微小残留病变监测中的意义。方法同时检测437份慢粒标本的Ph染色体和bcr-abl mRNA的表达情况。结果慢性期、加速期和急变期的bcr-abl mRNA定量结果逐渐增高(P<0.05);异基因造血干细胞移植后的bcr-abl mRNA定量结果随时间逐渐降低,一般在移植6月后转阴,服用格列卫与异基因造血干细胞移植病程相似,但融合基因转阴所用时间较长。结论实时定量PCR技术检测bcr-abl mRNA较Ph染色体的检测更为敏感,对于疾病分期、评价疗效、监测微小残留病变以及预测疾病进展具有重要的临床应用价值。

关键词：慢性粒细胞白血病实时定量PCR Ph染色体 bcr-abl