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辣椒素受体TRPV1对牙周炎的调控作用及机制的初步研究

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辣椒素受体TRPV1对牙周炎的调控作用及机制的初步研究

作者：徐小露重庆医科大学

学位级别：硕士

背景:TRPV1也称辣椒素受体,在许多炎症性疾病中出现上调的表现,在牙周炎中也有报道;然而,其在牙周炎中的生物学功能和分子学机制尚未明确。目的:本实验从体内体外两个层面研究辣椒素受体TRPV1在牙周炎中的表达、机制和功能,探讨PI3K/AK... 详细信息

背景:TRPV1也称辣椒素受体,在许多炎症性疾病中出现上调的表现,在牙周炎中也有报道;然而,其在牙周炎中的生物学功能和分子学机制尚未明确。目的:本实验从体内体外两个层面研究辣椒素受体TRPV1在牙周炎中的表达、机制和功能,探讨PI3K/AKT信号通路是否能够介导辣椒素受体TRPV1调控牙周炎症,为临床上该疾病的治疗奠定新的理论和实践基础。材料与方法:第一部分:牙周炎细胞和动物模型中辣椒素受体TRPV1的表达情况分析:酶解组织块法培养HPDLCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原,脂多糖刺激HPDLCs构建牙周炎细胞模型。SD大鼠龈沟内结扎构建实验性牙周炎（Experimental periodontitis,EP）大鼠模型,四周后通过形态学观察、苏木素-伊红（HE）染色以及牙槽骨吸收值检测等方法对大鼠建模情况加以验证。随后,切取牙周炎大鼠及其对照组的牙周组织（包括牙齿）包埋切片,进行TRPV1的免疫组化染色;通过q RT-PCR和WB检测牙周炎细胞、牙周炎大鼠及二者的对照组中TRPV1以及炎症因子的表达情况。第二部分:PI3K/AKT通路介导辣椒素受体TRPV1调控牙周炎的机制探讨:WB检测牙周炎细胞、牙周炎大鼠及二者的对照组中PI3K/AKT信号通路相关蛋白,验证不同状态下该通路表达情况的差异性。随后,SD大鼠牙周注射PI3K/AKT通路抑制剂LY294002（LY）,并同期构建牙周炎模型,建模完成后进行下游炎症因子m RNA、蛋白的检测以及牙槽骨吸收值的测量分析。应用TRPV1激动剂辣椒素（Capsaicin,CPS）和拮抗剂辣椒平（Capsazepine,CPZ）对同期牙周结扎的大鼠进行干预,进一步验证TRPV1调控牙周炎的机制;q RT-PCR和WB检测TRPV1和促炎细胞因子的表达;WB检测PI3K和AKT的磷酸化情况;体式显微镜下图像采集并测量分析各组牙槽骨吸收情况。结果:第一部分:通过酶解组织块法成功获得了HPDLCs,流式检测结果显示CD31、CD45、CD73、CD90、CD105分别为1.34%、1.59%、99.2%、95.2%、93.2%。10ug/ml LPS刺激HPDLCs成功构建了牙周炎细胞模型,q RT-PCR和WB结果显示LPS组HPDLCs中TRPV1、炎症因子的m RNA和蛋白表达均较对照组上升。结扎法构建牙周炎大鼠模型,四周后建模大鼠牙龈红肿出血、附着丧失明显、且牙齿出现了不同程度的松动。q RT-PCR、WB检测TRPV1、炎症因子的表达情况与体外实验结果一致。第二部分:WB结果显示,体内体外牙周炎模型中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的比值较其对照组增加。抑制PI3K/AKT通路后,结扎引起的牙周组织炎症反应明显缓解,炎症因子表达下降,且牙周破坏程度有所减少。另外,牙周局部应用TRPV1激动剂辣椒素上调了PI3K、AKT蛋白的磷酸化水平,加重了牙周炎症反应以及骨丢失情况;而辣椒平产生了相反的作用。结论:TRPV1可能通过调控PI3K/AKT通路影响促炎介质的表达,进而改变牙槽骨的吸收破坏进程。

关键词： TRPV1 人牙周韧带细胞 PI3K/AKT 实验性牙周炎大鼠牙槽骨丢失

一朝误入石道中,从此“清醒”是路人——记津门“石痴”王长河

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宝藏 2011年第6期 74-77页

作者：徐小露

早些年,他是个大厨,烹调美食是他的工作;现在,他还是个"大厨",只不过,此"食"非彼食,菜单换成了石,工作也成了兴趣,他用"石"烹调出的大餐风靡天津,甚至风靡全国,馋得人从全国各地奔来,只为了那道道"美石"——王长河,到底如何演绎"石"这... 详细信息

早些年,他是个大厨,烹调美食是他的工作;现在,他还是个"大厨",只不过,此"食"非彼食,菜单换成了石,工作也成了兴趣,他用"石"烹调出的大餐风靡天津,甚至风靡全国,馋得人从全国各地奔来,只为了那道道"美石"——王长河,到底如何演绎"石"这道大餐,引得众人如此垂涎欲滴、欲罢不能?走进祈年湾,走进王长河的"大厨房"——

关键词：王长河石道观赏石人从大漠奇石天刚就这样天来大快朵颐《石头记》

做喜欢的事自然快乐便足矣——记天津藏家张荣森

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宝藏 2011年第7期 68-71页

作者：徐小露

一分耕耘,一分收获。时光荏苒,张荣森依旧痴心不改。他说,人若如石,保持本性,不攀比、不计较,做自己喜欢做的事,自然快乐便足矣。题记:一个爱石头的商人,走南闯北搜罗一见钟情的爱石,一掷数百万元都毫不犹豫,辛苦、危险也没有阻挡他的步... 详细信息

一分耕耘,一分收获。时光荏苒,张荣森依旧痴心不改。他说,人若如石,保持本性,不攀比、不计较,做自己喜欢做的事,自然快乐便足矣。题记:一个爱石头的商人,走南闯北搜罗一见钟情的爱石,一掷数百万元都毫不犹豫,辛苦、危险也没有阻挡他的步伐,耗资上亿只为提供更好的平台……这一切,只因为"喜欢"一一两个简单的字,却是绝不动摇的坚持。

关键词：时光荏苒如石冥冥之中观赏石人石天外来客人说不知道森泰步移景异

惟有人生多壮志敢叫日月换新天——记福建省盆景艺术家、赏石名家陈志福

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宝藏 2011年第1期 80-83页

作者：徐小露

他有过艰苦的童年生活,因而奋斗创业、发家致富一直是他成长历程中的心志。在收获成功之后,他又把更多的目光投注到盆景艺术上,精心培植出一盆又一盆艺术精品,被中国盆景艺术家协会授予"中国杰出盆景艺术家"的荣誉称号。同时,他又是一... 详细信息

他有过艰苦的童年生活,因而奋斗创业、发家致富一直是他成长历程中的心志。在收获成功之后,他又把更多的目光投注到盆景艺术上,精心培植出一盆又一盆艺术精品,被中国盆景艺术家协会授予"中国杰出盆景艺术家"的荣誉称号。同时,他又是一位奇石收藏家,藏石二十多年,藏品丰富多彩,创办了"志兴盆景园"、"博厚斋",现任中国收藏协会石文化专业委员会副主任、中国观赏石协会理事、福建省花卉协会观赏石分会副会长兼秘书长。他有着怎样的人生经历?《宝藏》带您走进福建省盆景艺术家、奇石收藏家陈志福的壮志人生。

关键词：盆景艺术观赏石中国盆景花卉协会盆景园艺术精品艺术家协会收藏协会盆景展文化专业

千金倾尽搜大化彩玉石美成殿堂——记韦金官的藏石之路

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宝藏 2011年第5期 84-87页

作者：莫雨翼徐小露

早就听说收藏大化石的传奇人物韦金官,直到今年二月底,我们赴大化进行大化石资源市场考察时,才终于见到了这位个子不高、笑容淳朴、长相平凡的人——这就是那个斥资四千多万元建馆、始终固守大化石资源、穷力传播大化石文化的传奇人物?... 详细信息

早就听说收藏大化石的传奇人物韦金官,直到今年二月底,我们赴大化进行大化石资源市场考察时,才终于见到了这位个子不高、笑容淳朴、长相平凡的人——这就是那个斥资四千多万元建馆、始终固守大化石资源、穷力传播大化石文化的传奇人物?我们有点迷惑了,但随着几个小时的长谈,我们终于明白,这就是韦金官——一个穷苦家庭出身的孩子,一个一无所有、白手起家的农民,一个散尽家财只为留住大化石资源的"石癫"……他的故事不长也不短——

关键词：金官化石资源市场考察美成茅草房大化县岩滩在路上投资增值还给我