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构建及表达小麦高分子量容蛋白基因5′端调控序列缺失突变体嵌合质粒

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中国科学技术大学学报 1997年第3期27卷 333-336页

作者：鲍时来徐乃正曾君祉鲁润龙中国科学技术大学生物系中国科学院遗传研究所

通过定点突变，在小麦高分子量（ＨＭＷ）谷蛋白基因５′上游调控序列的ＴＡＴＡｂｏｘ与基因翻译起始密码子ＡＴＧ之间，改变三个碱基，产生新的ＢａｍＨⅠ内切酶位点．在调控序列中，选择四个合适的内切酶，对上游序列进行缺失，分离... 详细信息

通过定点突变，在小麦高分子量（ＨＭＷ）谷蛋白基因５′上游调控序列的ＴＡＴＡｂｏｘ与基因翻译起始密码子ＡＴＧ之间，改变三个碱基，产生新的ＢａｍＨⅠ内切酶位点．在调控序列中，选择四个合适的内切酶，对上游序列进行缺失，分离到四个大小分别为２４００、６１０、４４０和１１０ｂｐ的含有不同调控元件的ＨＭＷ谷蛋白基因启动子，与质粒ｐＢＩ１０１．１的报告基因ＧＵＳ重组，构建了四个嵌合质粒ｐＷＧ２４００、ｐＷＧ６００、ｐＷＧ４４０和ｐＷＧ１００．经基因枪、微束激光和ＰＥＧ等方法将ｐＷＧ２４００转化玉米胚乳悬浮细胞，ＧＵＳ基因获得表达．这为进一步研究ＨＭＷ谷蛋白基因的调控机理奠定了基础．

关键词：小麦调控序列 HMW 麦谷蛋白基因缺失突变体

聚合酶链反应(PCR)对未知序列DNA的扩增技术

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植物生理学通讯 1993年第2期29卷 116-118,123页

作者：种康谭克辉黄桦樑徐乃正兰州大学生物系兰州730000 中国科学院植物研究所北京100044 中国科学院遗传研究所北京100101

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是由引物介导,在体外将特异性DNA序列利用酶促作用进行扩增的方法。双链DNA热变性,然后在低温下与引物退火,再在中等温度下进行延伸,三步为一循环。一般经30～35次循环,很容易将目的基因... 详细信息

正> 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是由引物介导,在体外将特异性DNA序列利用酶促作用进行扩增的方法。双链DNA热变性,然后在低温下与引物退火,再在中等温度下进行延伸,三步为一循环。一般经30～35次循环,很容易将目的基因或DNA片段特异地扩增至少10~6～10~7倍。它已是分子生物学研究中常用的、不可缺少的一项基本技术。但常规PCR需在待扩增的已知序列两端分别设计两个寡核苷酸引物。

关键词：聚合酶链反应 DNA 扩增序列

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用花粉管途径获得小麦转基因植株

中国科学（B辑） 1993年第3期23卷 256-262页

作者：曾君祉王东江吴有强张健周文娟朱小平徐乃正中国科学院遗传研究所 100101

本文将带GUS标记基因的质粒pBI121用花粉管途径转化普通小麦(T. aestivum L)品种小山3号的小花。从结实的106粒种子中,经点杂交初步筛选,再经Southern分子杂交鉴定,选出5株转基因小麦,转化率为4.7％。同时用荧光法和X-Gluc染色法测试,... 详细信息

本文将带GUS标记基因的质粒pBI121用花粉管途径转化普通小麦(T. aestivum L)品种小山3号的小花。从结实的106粒种子中,经点杂交初步筛选,再经Southern分子杂交鉴定,选出5株转基因小麦,转化率为4.7％。同时用荧光法和X-Gluc染色法测试,检测到这些植株中有GUS基因的表达产物β-葡糖苷酸酶(GUS)存在,证明GUS基因已整合到小麦植株中,并能在植物体中表达。

关键词：小麦花粉管途径转基因植株

中国林蛙输卵管蛋白及其基因的研究——Ⅰ.中国林蛙输卵管蛋白的分析

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Journal of Genetics and Genomics 1982年第5期 367-374页

作者：王苏生褚婕林友刚徐乃正中国科学院遗传研究所天津市药物研究所中国科学院遗传研究所北京

本文用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了中国林蛙输卵管可溶性蛋白,发现其中主要含有四种蛋白质多肽链。与黑斑蛙和中华大蟾蜍输卵管蛋白比较有明显差别。四种主要蛋白的分子量分别为17.0、15.7、12.8和4.9万道尔顿。其中12.8万分子量的... 详细信息

本文用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了中国林蛙输卵管可溶性蛋白,发现其中主要含有四种蛋白质多肽链。与黑斑蛙和中华大蟾蜍输卵管蛋白比较有明显差别。四种主要蛋白的分子量分别为17.0、15.7、12.8和4.9万道尔顿。其中12.8万分子量的蛋白质约占总输卵管可溶性蛋白的40％,而分子量为4.9万的蛋白质占25％以上。其含量上的优势暗示了它们具有殊特的生理功能。中国林蛙在产卵后输卵管蛋白的组成有明显变化,表现为四种主要蛋白相对含量的显著下降和蛋白种类的增加。由于输卵管组织的重量在产卵后也明显降低,说明上述四种主要蛋白的功能可能与繁殖密切相关。看来是一个作为雌激素对基因表达调控研究的理想材料。本文对上述蛋白的等电点以及与抗血清的免疫反应等也作了测定。

关键词：中国林蛙等电点输卵管子宫附件蛋白基因

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危机沟通中的信息合作:三次地震的数据分析

学习与探索 2024年第4期 141-150页

作者：陈力雄徐乃瑞南方科技大学社会科学中心复旦大学社会发展与公共政策学院北京印刷学院出版学院

自2010年新浪微博兴起以来,中国政府和公众在微博上参与危机沟通的行为发生了深刻变化。通过分析2010年玉树地震、2014年鲁甸地震、2019年宜宾地震的5358条相关微博和41份对微博用户访谈数据集,可以发现政府不仅是信息的发布者,而且日... 详细信息

自2010年新浪微博兴起以来,中国政府和公众在微博上参与危机沟通的行为发生了深刻变化。通过分析2010年玉树地震、2014年鲁甸地震、2019年宜宾地震的5358条相关微博和41份对微博用户访谈数据集,可以发现政府不仅是信息的发布者,而且日益成为危机沟通中平易近人的参与者;公众亦成为更加熟练、更有经验的参与者。在此背景下,政府和公众建立一种创新的“信息合作”机制,有利于促进双方在危机应急响应和风险管理中的合作,进一步提升政府应对危机能力,有效减少危机产生的负面影响。

关键词：社交媒体时代危机沟通新浪微博信息合作

Transgenic Wheat Plants Obtained With Pollen-Tube Pathway Method

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Science China Chemistry 1994年第3期37卷 319-325,386页

作者：曾君祉王东江吴有强张健周文娟朱小平徐乃正 Institute of Genetics Academia Sinica Beijing 100101 PRC

β-glucuronidase (GUS) gene (carried by pBI121 plasmid) has been introduced into hexaploid wheat c. v. Xiaoshan No. 3 with the pollen-tube pathway method. Five transgenic plants are selected from 106 T0 plants. All of these plants are identified by the Southern hybridization, and the GUS activity can be detected by using fluorogenic assay and histochemical stain.

关键词： wheat pollen-tube pathway method GUS gene transgenic wheat plants.

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抗乙型脑炎病毒人-鼠嵌合抗体基因的表达

高技术通讯 1993年第5期3卷 25-28页

作者：黄华梁林晴桂进黄发灿周德旺徐乃正陈伯权熊曦明吴美英中国科学院遗传研究所中国预防医学科学院病毒学研究所

从分泌抗乙型脑炎病毒中和抗体的杂交瘤细胞株51-8的基因文库中筛选出的功能性重链和轻链可变区基因,分别与人y;链恒定区基因和k链恒定区基因连接,构建成人-鼠嵌合的重链和轻链基因,两种嵌合基因共转染骨髓瘤细胞Sp/0,转染率为2.8×10;... 详细信息

从分泌抗乙型脑炎病毒中和抗体的杂交瘤细胞株51-8的基因文库中筛选出的功能性重链和轻链可变区基因,分别与人y;链恒定区基因和k链恒定区基因连接,构建成人-鼠嵌合的重链和轻链基因,两种嵌合基因共转染骨髓瘤细胞Sp/0,转染率为2.8×10;。转染细胞在体外传代30代以上,其上清液能特异地与羊抗人IgG（Fc特异的）抗体反应,并能稳定地表达出抗乙型脑炎病毒的人-鼠嵌合抗体。

关键词：抗体乙型脑炎病毒基因表达