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椰子蛋白及多肽的制备研究

椰子蛋白及多肽的制备研究

作者：彭吟雪武汉轻工大学

学位级别：硕士

椰子是一种优质的农产品,既是果品又是油料,在大多数椰子生产国,椰子是最重要的经济和工业作物,因为由椰干制成的椰子油有很大价值,含有珍贵的月桂酸。椰子除了提供油之外,它还具有相当平衡氨基酸的蛋白质,8种必需氨基酸种类齐全,营养... 详细信息

椰子是一种优质的农产品,既是果品又是油料,在大多数椰子生产国,椰子是最重要的经济和工业作物,因为由椰干制成的椰子油有很大价值,含有珍贵的月桂酸。椰子除了提供油之外,它还具有相当平衡氨基酸的蛋白质,8种必需氨基酸种类齐全,营养价值高;并且有降血脂、降低胆固醇、抑制高血脂症等保健功能。然而,目前椰子主要用于生产椰子油及饮品,榨取油脂后的饼粕直接浪费,这造成了椰子蛋白质资源的严重浪费。本文以提高椰子饼粕的利用率,制备高纯度的椰子分离蛋白及筛选出功能性较好的椰子多肽为目的。主要以响应面及正交试验优化制备的工艺条件,检测得到的制品的氨基酸组成和分子量分布,研究对比不同产品的功能性质并为生产应用提供理论依据。主要研究内容和结论如下:(1)以脱脂椰子粉为原料,用磷酸盐缓冲溶液法提取椰子分离蛋白,分析了液料比、pH、温度、时间等因素对椰子分离蛋白提取率的影响,用Plackett-Burman试验对上述影响因素进行筛选;再利用响应面分析法对椰子蛋白提取工艺进行优化,最终确定了椰子蛋白的最佳提取工艺。最优工艺条件为:碱溶时间92.0mim、碱溶pH10.0、酸沉时间116.0min、酸沉pH为4.5,最后通过验证试验,椰子分离蛋白提取率为83.18%。(2)以脱脂椰子粉为原料,研究改良osboren法分级提取椰子清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的工艺。通过单因素实验分析了不同因素对蛋白提取率的影响,再利用正交实验进行优化,得到的最佳提取工艺为:(1)液料比10:1(mL/g),提取时间为4.0h,提取温度为50.0℃,清蛋白的提取率为49.05%。(2)液料比10:1(mL/g),提取时间为4.0h,提取温度为50.0℃,NaCl浓度为2%,球蛋白的提取率为46.65%。(3)液料比12:1(mL/g),提取时间为5.0h,提取温度为55.0℃,乙醇浓度为75%,醇溶蛋白的提取率为18.01%。(4)液料比10:1(mL/g),提取时间为4.0h,提取温度为50.0℃,碱溶pH为10.0,谷蛋白的提取率为26.78%。(3)对椰子四种蛋白进行氨基酸组成分析和SDS-PAGE电泳分析。椰子蛋白必需氨基酸种类丰富。电泳分析得到除了清蛋白有两条谱带相对分子质量较大,其他分子量都相对较小,整体来说是一种较为优质的蛋白质。最后通过比较椰子四种蛋白在不同条件下的功能特性,得到不同环境对其功能特性的影响。(4)通过蛋白酶种类的优化,筛选出碱性蛋白酶和风味蛋白酶进行复配来制备椰子多肽,并确定复配比例为2:1。再在酶解pH、酶解温度、酶解时间三个单因素的试验基础上,以水解度、DPPH、ABTS为响应值,用Central-Composite Design响应面法优化,得到最优多肽制备工艺条件。最佳工艺条件为:水解pH 8.5、水解温度51.0℃、水解时间11.0h,验证得到实际水解度为30.03%、实际DPPH自由基清除率为58.12%、实际ABTS自由基清除率为80.47%。经过优化采用大孔树脂XAD-16对椰子多肽进行层析柱分离,分别用不同浓度的乙醇溶液进行洗脱,得到了五个洗脱峰,对应五个洗脱组分。分别测定不同组分对其DPPH和ABTS自由基的清除能力,XAD-30%的抗氧化性最好,XAD-50%次之。检测分析不同组分的氨基酸组成和分子量分布情况,不同组分的氨基酸组成与分子量分布都有较大的差异,但不同组分的分子量分布主要在2000Da以下。洗脱组分XAD-10%的分子量分布主要集中在500Da以下,占比例64.5%;XAD-30%和XAD-50%的分子量分布主要集中在500000Da之间,XAD-30%和XAD-50%的分子量在500000Da之间分别占比31.4%和41.4%。

关键词：椰子蛋白 Osboren法多肽酶解分子量分布抗氧化

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超声波辅助提取橡胶籽粕中粗蛋白的研究

粮食与油脂 2017年第8期30卷 55-60页

作者：郭雄彭吟雪何东平胡传荣武汉轻工大学食品科学与工程学院湖北武汉430023 国家粮食局粮油资源综合开发工程技术研究中心湖北武汉430023

以低温浸出橡胶籽粕为原料,通过超声波辅助提取橡胶籽粕中蛋白。在单因素试验结果的基础上,选取提取温度、液料比、超声功率和碱溶pH 4个因素进行Box-Behnken响应面法试验设计,以粗蛋白的提取率为响应值,对提取工艺参数进行优化。在提... 详细信息

以低温浸出橡胶籽粕为原料,通过超声波辅助提取橡胶籽粕中蛋白。在单因素试验结果的基础上,选取提取温度、液料比、超声功率和碱溶pH 4个因素进行Box-Behnken响应面法试验设计,以粗蛋白的提取率为响应值,对提取工艺参数进行优化。在提取时间为60 min时,橡胶籽粕蛋白最佳提取工艺为超声功率315W、提取温度52℃、液料比46∶1(m L/g)、碱溶pH 10、酸沉pH 4.5的条件下,橡胶籽粕蛋白的提取率为82.51%。

关键词：橡胶籽粕超声波辅助 Box-Behnken响应面法粗蛋白优化

不同制油工艺对文冠果油特性及品质影响的研究

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中国油脂 2017年第9期42卷 8-13页

作者：郭雄彭吟雪胡传荣何东平刘零怡武汉轻工大学食品科学与工程学院武汉430023 国家粮食局粮油资源综合开发工程技术研究中心武汉430023

研究了不同制油工艺(浸出法、普通螺旋压榨法、水酶法、超临界CO_2萃取法)对文冠果油特性及品质的影响。结果表明:浸出法的文冠果油得率最高且色泽最浅,水酶法文冠果油水分及挥发物含量最高,普通螺旋压榨法文冠果油酸值最低,水酶法文冠... 详细信息

研究了不同制油工艺(浸出法、普通螺旋压榨法、水酶法、超临界CO_2萃取法)对文冠果油特性及品质的影响。结果表明:浸出法的文冠果油得率最高且色泽最浅,水酶法文冠果油水分及挥发物含量最高,普通螺旋压榨法文冠果油酸值最低,水酶法文冠果油过氧化值最低;文冠果油中不饱和脂肪酸以油酸、亚油酸为主,不饱和脂肪酸含量以水酶法的最高,浸出法文冠果油中生育酚、甾醇含量最高;62℃烘箱实验中,文冠果油的酸值变化均不大,过氧化值呈指数下降,生育酚的含量下降;烘箱实验前后,超临界CO_2萃取的文冠果油的DPPH自由基清除率最大,烘箱实验后,4种方法制取的文冠果油的DPPH自由基清除率都很低。

关键词：文冠果油制油工艺酸值过氧化值不饱和脂肪酸 DPPH自由基清除率

八大核桃产地的核桃理化性质及油脂特性对比研究

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中国油脂 2018年第9期43卷 116-120页

作者：耿鹏飞彭吟雪胡传荣何东平武汉轻工大学食品科学与工程学院武汉430023 国家粮食局粮油资源综合开发工程技术研究中心武汉430023

对贵州、河北、重庆等8个地区的核桃在理化性质、油脂中金属元素和脂肪酸组成等方面进行对比研究。采取冷榨法获得核桃油样,对8种核桃的理化指标,核桃油中金属元素、维生素E和脂肪酸组成进行测定。结果表明:贵州核桃的粗蛋白质含量及核... 详细信息

对贵州、河北、重庆等8个地区的核桃在理化性质、油脂中金属元素和脂肪酸组成等方面进行对比研究。采取冷榨法获得核桃油样,对8种核桃的理化指标,核桃油中金属元素、维生素E和脂肪酸组成进行测定。结果表明:贵州核桃的粗蛋白质含量及核桃油的油酸、维生素E和金属元素含量均较高,其中贵州核桃油中铜、钙、镁和钾的含量居8种核桃之首,核桃油中维生素E含量为662.24μg/kg,居8种核桃的第3位。贵州核桃具有更好的氧化稳定性及营养价值。

关键词：核桃核桃油理化指标金属元素脂肪酸组成维生素E

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椰子分级蛋白制备的研究

中国油脂 2019年第5期44卷 67-72页

作者：马开创黄宏飞彭吟雪何东平胡传荣武汉轻工大学食品科学与工程学院武汉430023 国家粮食局粮油资源综合开发工程技术研究中心武汉430023

通过改良的Osboren法对脱脂椰子粉进行分级提取,得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,并对4种椰子蛋白进行氨基酸组成分析和SDS-PAGE电泳分析。在单因素实验基础上,利用正交实验对4种椰子蛋白提取条件进行优化。结果表明,4种椰子蛋白... 详细信息

通过改良的Osboren法对脱脂椰子粉进行分级提取,得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,并对4种椰子蛋白进行氨基酸组成分析和SDS-PAGE电泳分析。在单因素实验基础上,利用正交实验对4种椰子蛋白提取条件进行优化。结果表明,4种椰子蛋白最佳提取工艺条件为:在液料比10∶1、提取时间4 h、提取温度50℃条件下,清蛋白提取率为49. 05%,纯度为57. 1%;在液料比10∶1、提取时间4 h、提取温度50℃条件下,球蛋白提取率为46. 65%,纯度为70. 8%;在液料比10∶1、提取时间5 h、提取温度55℃、乙醇体积分数75%条件下,醇溶蛋白提取率为18. 01%,纯度为32. 7%;在液料比10∶1、提取时间4 h、提取温度50℃、碱溶p H 10. 0条件下,谷蛋白提取率为26. 78%,纯度为70. 4%。椰子清蛋白、球蛋白和谷蛋白中谷氨酸、精氨酸和天冬氨酸的含量明显高于其他氨基酸。除了清蛋白有2条谱带相对分子质量较大,其他3种椰子蛋白相对分子质量都相对较小,整体来说椰子蛋白是一种较为优质的蛋白质。

关键词：椰子椰子蛋白 Osboren法清蛋白球蛋白醇溶蛋白谷蛋白

超声辅助碱溶酸沉法提取美藤果蛋白的工艺研究

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粮食与油脂 2018年第5期31卷 66-70页

作者：彭吟雪张莹刘祥龙胡传荣武汉轻工大学食品科学与工程学院湖北武汉430023 国家粮食局粮油资源综合开发工程技术研究中心湖北武汉430023

以美藤果油所得到的美藤果粕为原料,通过单因素试验和Box-Behnken响应面法优化,得到响应面法优化超声辅助碱溶酸沉法制备美藤果蛋白的优化工艺条件为p H 9.8、浸提时间1.8 h、浸提温度49℃、液料比10∶1(m L/g),此时的美藤果蛋白质的提... 详细信息

以美藤果油所得到的美藤果粕为原料,通过单因素试验和Box-Behnken响应面法优化,得到响应面法优化超声辅助碱溶酸沉法制备美藤果蛋白的优化工艺条件为p H 9.8、浸提时间1.8 h、浸提温度49℃、液料比10∶1(m L/g),此时的美藤果蛋白质的提取率为75%。通过糖化酶酶解美藤果蛋白,纯化后的蛋白纯度可达90%。

关键词：美藤果蛋白超声辅助碱溶酸沉

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超声辅助酶法制备及纯化菜籽蛋白工艺的研究

粮食与油脂 2018年第6期31卷 31-34页

作者：张莹彭吟雪胡传荣何东平武汉轻工大学食品科学与工程学院湖北武汉430023 国家粮食局粮油资源综合开发工程技术研究中心湖北武汉430023

以脱脂菜籽粕为原料,用超声辅助碱提酸沉法提取菜籽蛋白。通过分别添加碱性纤维素酶、碱性果胶酶及糖化酶对菜籽粕进行酶解处理,有利于菜籽细胞内蛋白的提取,可有效提高菜籽蛋白的纯度(菜籽蛋白提取率达85.6%以上,菜籽蛋白纯度达91.7%)。

关键词：菜籽蛋白纯化超声辅助酶法制备

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氢氧同位素对淮南潘集矿区地下水的指示作用

合肥工业大学学报（自然科学版） 2019年第4期42卷 536-540页

作者：周小平彭吟雪马雷刘满才钱家忠合肥工业大学资源与环境工程学院安徽合肥230009 淮南矿业(集团)有限责任公司安徽淮南232001

地下水是淮南潘集矿区的重要水源,为了查清淮南潘集矿区各含水层组相互关系,分别在孔隙、裂隙含水层组中相应的长观孔、水源井及井下出水点取水样测试氢氧同位素。结合淮北平原现代水和古水分界线,利用氢氧同位素针对性地分析孔隙水和... 详细信息

地下水是淮南潘集矿区的重要水源,为了查清淮南潘集矿区各含水层组相互关系,分别在孔隙、裂隙含水层组中相应的长观孔、水源井及井下出水点取水样测试氢氧同位素。结合淮北平原现代水和古水分界线,利用氢氧同位素针对性地分析孔隙水和裂隙水受采煤活动的影响。分析结果表明:天然状态下,潘集矿区深部水、煤系水、太灰水和奥灰水都属于古水;在开采影响下,开采区域深部水接受浅部水和地表水补给,部分煤系水接受上覆现代水补给;潘集矿区新生界浅部水和奥灰水发生了δ^(18)O漂移,潘北矿存在明显的δD漂移。

关键词：潘集矿区现代水古水氢氧同位素淮北平原

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恩美曲妥珠单抗致不良反应文献分析

中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2024年第1期 159-164页

作者：金晓芬徐吟雪南京医科大学附属江苏盛泽医院药学部江苏苏州215228

分析恩美曲妥珠单抗(Trastuzumab emtansine, TDM1)导致的药物相关不良反应(Drug-Related Side Effects and Adverse Reactions, ADRs)的发生情况及临床特点,以期为临床合理用药提供依据。方法检索中国知网、万方数据库、维普网、Pubme... 详细信息

分析恩美曲妥珠单抗(Trastuzumab emtansine, TDM1)导致的药物相关不良反应(Drug-Related Side Effects and Adverse Reactions, ADRs)的发生情况及临床特点,以期为临床合理用药提供依据。方法检索中国知网、万方数据库、维普网、Pubmed数据库和Web of Science数据库关于曲妥珠单抗的ADR个案报道。检索时间为建库至2023年3月。结果共纳入21篇文献,共计25名患者,发生28例ADR。25名患者皆为女性,51-60岁年龄段的患者居多(32.00%)。原发疾病为乳腺癌的患者用药病例报道最多(24例,96.00%)。用药时间大于120天(13例)出现药物ADR的比例最高(46.43%)。ADR累及器官和系统主要集中在肝胆系统(7例,25.00%)、皮肤系统(5例,17.86%)和呼吸系统(4例,14.29 %)。28例ADR中,14例停用了TDM1,其中2例治疗后好转,12例未治疗但病情好转或稳定。12例未停TDM1,其中10例治疗后好转,2例未治疗但病情稳定;2例减量后病情好转。结论临床应用TDM1时,需要加强用药监测,需特别注意肝胆系统、皮肤系统和呼吸系统的ADR,必要时进行用药干预,及时对症治疗,减少不良反应的发生。

关键词：恩美曲妥珠单抗 TDM1 不良反应文献分析