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微生物酶技术在生鲜食物安全检测中的应用

江西农业学报 2022年第9期34卷 176-183页

作者：张锐毅王超四川卫生康复职业学院四川自贡643000

生鲜食品的检验技术关系到我国的食品安全问题,现阶段还需要加强并完善相应的检测技术。微生物酶技术中的酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)可以用于食品中拟除虫菊酯类农药的残留检测。试验利用间接竞争ELISA技术... 详细信息

生鲜食品的检验技术关系到我国的食品安全问题,现阶段还需要加强并完善相应的检测技术。微生物酶技术中的酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)可以用于食品中拟除虫菊酯类农药的残留检测。试验利用间接竞争ELISA技术对拟除虫菊酯类农药及其代谢产物的检测,并对该方法进行了优化。优化后的拟除虫菊酯类检测条件:离子强度10 mmol/L,pH值7.4,10%甲醇,标准曲线的线性范围2.65~28.55 ng/mL,灵敏度为8.69~344.97 ng/mL;优化后的代谢产物检测条件:包被浓度125 ng/mL,抗体稀释倍数1︰2000,pH值6.6,吐温浓度0.005%,离子浓度40 mmol/L,S-HPR稀释倍数1︰4000,标准曲线的线性范围为0.37~7.40 ng/mL,检测限为0.15 ng/mL。结果表明,试验建立的间接竞争ELISA可以有效地进行多种拟除虫菊酯类农药及其代谢产物的残留检测,且准确性和灵敏度高。

关键词：微生物酶技术生鲜食物安全检测酶联免疫分析法拟除虫菊酯

骨髓间充质干细胞来源外泌体对大鼠脊髓损伤后周细胞活化及血脊髓屏障的影响

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骨髓间充质干细胞来源外泌体对大鼠脊髓损伤后周细胞活化及血脊髓...

作者：张锐毅郑州大学

学位级别：硕士

背景与目的脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)是由外伤、缺血、感染、免疫、肿瘤、饮酒等因素导致的脊髓或马尾神经的损伤,往往造成瘫痪、感觉异常、尿便障碍、神经痛、呼吸困难、性功能障碍等暂时或永久性的损伤节段以下神经功能障碍... 详细信息

背景与目的脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)是由外伤、缺血、感染、免疫、肿瘤、饮酒等因素导致的脊髓或马尾神经的损伤,往往造成瘫痪、感觉异常、尿便障碍、神经痛、呼吸困难、性功能障碍等暂时或永久性的损伤节段以下神经功能障碍。在全世界范围内,自1995年以来,脊髓损伤在世界各国的发病率约从每年10.4/百万到83/百万不等,我国约每年新增脊髓损伤患者60000例。其中,绝大多数脊髓损伤患者是由于交通事故、高空坠落、暴力伤害等外伤所致,而此类创伤性脊髓损伤往往遗留永久性神经功能障碍,致残率极高,对于个人和家庭生活的幸福以及国家和社会的安宁繁荣都带来了极大的负担。全世界范围内的各大科研院所、医疗机构也都在动用大量人力物力持续不断地投入脊髓损伤相关的研究,以期寻找更为有效的治疗方法,帮助更多患者恢复健康。而在众多有前景的研究方向中,干细胞相关的治疗手段无疑是帮助脊髓损伤患者减少急性期损害、促进神经功能恢复的明日之星,具有较大的研究价值与潜力。在诸多应用于脊髓损伤的干细胞移植实验治疗中,间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)因其来源多样、便于获取、易于培养、能够分泌多种保护性神经营养因子且具有一定的分化能力,成为应用最为广泛的干细胞之一,在治疗过程中也取得了一定的效果。但直接移植MSCs仍存在诸如存活时间较短、难以抵达损伤区域、排异反应、过敏反应、癌变可能、异常分化、难以大量重复应用等弊端。另有研究表明,移植干细胞的旁分泌作用在其治疗功能中占据主导地位,而其分化成神经元和神经胶质细胞的数量十分有限。因此,应用由MSC主动分泌的包含多种DNA、RNA、蛋白质及神经营养因子的直径约40～100nm的均一囊泡,即MSC来源外泌体进行SCI的治疗,不仅能避免细胞移植的弊端,还能够根据需要调控、筛选并批量生产具有特定功能的外泌体。因此,应用MSC来源的外泌体治疗脊髓损伤具有更加广阔的前景,也具有更大的科研和临床价值。周细胞(Pericyte,PC)在许多生理和病理生理过程中起着关键作用,其对各种器官系统地血管稳定性具有重要意义,如中枢神经系统的血脑屏障(Blood brain barrier,BBB)、血脊髓屏障(Blood spinal cord barrier,BSCB)和冠状动脉的分支等,更重要的是,周细胞与中枢神经系统的微血管内皮细胞、神经胶质细胞、神经元共同组成了神经血管单元。通过调节中枢神经系统内毛细血管直径以及微血管灌注,周细胞调节和维持着血脑屏障的正常功能。中枢神经系统内周细胞的缺失将会引起血脑屏障破坏、神经炎症及动脉瘤的形成。此外,有研究表明周细胞具有向周围细胞和细胞基质分泌生长因子和营养因子的功能。在脊髓损伤时,脊髓微血管周细胞的损坏、缺失、迁移将引起血脊髓屏障破坏,加剧炎症和水肿;其异常分化可能加剧瘢痕生成,影响预后;其异常的旁分泌功能可能提高血脊髓屏障的通透性。因此,周细胞在脊髓损伤以及中枢神经系统疾病中扮演了关键角色,然而对于周细胞的认识还较浅,关于其功能与机制的研究相对较少,亟待进一步探索,有望成为诸多疾病的治疗新靶点。本研究通过试剂盒法提取骨髓间充质来源外泌体(Bone marrow mesenchymal stem cell-exosome,BMSC-exo),原位注射于SCI大鼠模型的损伤部位,在组织学和行为学观察移植外泌体对周细胞覆盖率、血脑屏障稳定性以及神经功能恢复的影响。在体外细胞模型中,观察外泌体治疗后对内皮屏障的作用,并对其潜在的分子机制进行初步探索。材料与方法:全骨髓培养法分离BMSCs后于适宜条件下进行培养及传代,使用外泌体提取试剂盒提取外泌体,透射电镜、粒径分析、流式细胞术鉴定外泌体。外泌体原位注射于SCI大鼠,7天时进行步态分析后取材进行免疫荧光染色观察PDGFβ、CD31、NFκB等,evens blue检测血脑屏障通透,western blot测定组织匀浆中紧密连接蛋白。将外泌体加入TNFα处理的大鼠脊髓原代周细胞,Luminex assay检测其对周细胞分泌细胞因子的影响。将周细胞培养基上清加入大鼠脊髓血管内皮细胞,观察其对内皮屏障的影响。结果1.由大鼠骨髓提取的骨髓间充质干细胞利用western blot检测呈CD90+,CD34-。2.由大鼠骨髓间充质干细胞分离出的外泌体电镜下呈大小相对均一的类圆形或圆形模型结构,直径约40-100nm,western blot示CD9+,CD63+。3.术后28天时,BBB评分及步态分析示治疗组后肢运动功能恢复较损伤组好,其组间差异存在统计学意义。4.术后7天取材的脊髓标本示治疗组血脊髓屏障通透性较低,内皮紧密连接蛋白水平较高,周细胞覆盖率较高,与损伤组之间的差异有统计学意义。5.由大鼠脊髓提取的原代

关键词：脊髓损伤周细胞外泌体血脊髓屏障血管内皮生长因子

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全程旱养马冈鹅早期生长性能测定与分析

全程旱养马冈鹅早期生长性能测定与分析

作者：张锐毅广东海洋大学

学位级别：硕士

我国是养鹅大国,而且养鹅历史悠久,还拥有大量的地方品种。马冈鹅是我国著名的地方优良品种,也是广东四大名鹅之一,市场占有率达70%,是制作广东烧鹅的主要品种。但传统的马冈鹅饲养模式为傍水而养,对养殖水体污染大,也存在食品安全风险... 详细信息

我国是养鹅大国,而且养鹅历史悠久,还拥有大量的地方品种。马冈鹅是我国著名的地方优良品种,也是广东四大名鹅之一,市场占有率达70%,是制作广东烧鹅的主要品种。但传统的马冈鹅饲养模式为傍水而养,对养殖水体污染大,也存在食品安全风险。近年来,水禽旱养已成趋势,但有关马冈鹅旱养的研究未见报道。基于此,本试验采用全程旱养的方式,探究马冈鹅在旱养条件下的早期生长发育规律及对肉品质的影响,旨在为马冈鹅的规模化生产和旱养养殖模式提供技术支撑。试验鹅苗选自马冈鹅原产地广东省开平市马冈镇,从2000只1日龄鹅苗中随机选取500只混合苗,翻肛鉴别公母并佩戴翅号和脚号进行标记,最终选择400只健康的雏鹅(公母各半),将其随机分为4组,每组各100只,分养于四个栏,每周选两栏测量它们的生长发育情况,饲养期为13周。每周一早晨7点定时进行空腹个体称重和体尺测量,计算周平均体重,并使用Logistic、Von Bertalanffy和Gompertz三种生长曲线模型对其进行生长曲线的拟合,探究适合旱养马冈鹅早期发育规律的模型。在试验第10、11、12、13周龄,分别随机选取健康一致的马冈鹅40只(其中公鹅20只、母鹅20只)进行屠宰测定。在12周龄选取体重中位数马冈鹅12只(6♂+6♀),采血并进行血液生化指标分析,研究结果如下:1.全程旱养马冈鹅早期生长性能旱养马冈鹅10周龄和12周龄公母体重分别为4066g、3509g和4206g、3993g。Gompertz模型可以很好的模拟旱养马冈鹅的体重生长曲线(R≥0.995),其中公鹅拐点周龄为4.62周,拐点体重是1740.71g,母鹅拐点周龄为4.5周,拐点体重是1423.47g,6周龄前生长迅速,相对生长率都在20%以上,10周龄后体重增长缓慢。2.全程旱养马冈鹅屠宰性能及相关性分析12周龄马冈公鹅的屠宰率为91.89%、半净膛率为80.26%、全净膛率为73.60%、胸肌率为5.49%、腹脂率为7.67%;母鹅的屠宰率为92.26%,半净膛率为85.04%、全净膛率为72.17%,胸肌率为6.84%,腹脂率为9.15%。无论公母鹅,12周龄体重均与屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腹脂重呈极显著正相关(P<0.01)。3.全程旱养马冈鹅肉品质及相关性分析12周龄旱养马冈公鹅的胸肌剪切力为45.58N、p H为6.06、滴水损失为2.69%,马冈公鹅的体重与肉品质的剪切力呈极显著正相关(P<0.01);马冈母鹅的胸肌剪切力为43.97N、p H为6.81、滴水损失为2.61%,马冈母鹅的体重与肉品质的剪切力、p H、胸肌横切面积呈极显著正相关(P<0.01),马冈母鹅的半潜水长与肉品质的剪切力呈极显著正相关(P<0.01)。周龄(10wk vs 12wk)显著影响马冈鹅的胸肌剪切力、p H值和横切面积(P<0.05),但不影响滴水损失,且公母之间呈现出相同的规律。不同性别的马冈鹅在胸肌、腿肌的组织形态上没有显著的差异。体尺性状与肉品质之间有着紧密的相关性,相关程度或大或小,有正相关也有负相关。4.全程旱养马冈鹅血液生化指标及相关性分析性别不影响血液生化指标,12周龄的马冈公鹅和母鹅的血液生化指标ALT、AST、BUN、CRE、TP、GLU均无显著差异。旱养马冈鹅血液中的葡萄糖与总蛋白、天冬氨酸氨基转移酶与胫长呈极显著正相关(P<0.01),葡萄糖与胸宽呈极显著负相关(P<0.01),与胸深呈显著正相关(P<0.05);胸宽与丙氨酸转移酶、肌酐与天冬氨酸转移酶呈显著正相关(P<0.05),肌酐、尿素氮含量与胸肌纤维横截面积呈显著负相关(P<0.05)。5.全程旱养马冈鹅最适上市周龄的研究10～13周龄马冈鹅胸肌的感官评价均较好,从10周龄开始,马冈公鹅随着周龄的变化胸肌感官评价较为一致,而马冈母鹅随着周龄的增加其胸肌的感官评价依次升高。10～11周龄旱养马冈鹅的活体羽毛外观均已生长良好,但屠体上还残留有较多的黑色针羽;12周龄时公鹅的屠体上针羽较少,而母鹅的针羽仍较多;13周时公母鹅屠体上的针羽已经很少,能够满足屠宰上市要求。根据屠体针羽和肌肉感官评价综合分析,13周龄是旱养马冈鹅最适的上市周龄,屠体针羽少,肉质好。

关键词：马冈鹅旱养早期生长特性生长曲线模型肉品质

四川卫生康复职业学院考试管理系统设计与实现

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四川卫生康复职业学院考试管理系统设计与实现

作者：张锐毅西南科技大学

学位级别：硕士

在职业学院内部管理业务中,教职员工的培训及评价工作是重要的业务内容,对于提高员工培训评价工作的整体效率,促进职业学院教职员工队伍的整体素质以及培训工作的质量有着重要的作用。作者所在的四川卫生康复职业学院近年来教职员工队... 详细信息

在职业学院内部管理业务中,教职员工的培训及评价工作是重要的业务内容,对于提高员工培训评价工作的整体效率,促进职业学院教职员工队伍的整体素质以及培训工作的质量有着重要的作用。作者所在的四川卫生康复职业学院近年来教职员工队伍快速壮大,在员工培训的效果评价管理业务中出现了工作效率不高、人工参与比重过大、考评过程繁琐以及考评结果信息缺乏集成存储工具等问题,不利于学院教职员工培训工作的有序开展。针对上述问题,本文中重点进行了如下研究工作:(1)结合学院的考试管理活动开展情况,分析考察了具体的工作业务流程,探讨其中存在的不足与问题,并结合学院的内部业务信息化整体规划,提出了员工考试管理系统的功能开发目标和其他需求指标。(2)采用MVC三层设计模式、*** Web开发技术和SQL Server数据库开发技术对系统的整体技术方案进行规划设计与开发,将系统的功能结构划分为用户登录管理、在线考试管理、试卷管理、信息查询以及系统管理等模块。(3)对系统的功能实现效果以及性能表现进行详细测试分析,按照系统测试结果,本系统达到了预定的功能开发目标,并且能够在并发能力、响应时间和资源占用率等方面满足预定性能要求指标。考试管理系统目前已经在学院内部进行了上线应用,解决了系统上线之前学院缺乏考试管理信息化工具以及整体管理业务效率不高的问题。

关键词：考试管理高校信息系统 B/S结构

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基于相对零主观算法的机场智慧化程度评价

交通运输工程学报 2024年第2期24卷 232-242页

作者：张锐黄卫马涛东南大学智能运输系统(ITS)研究中心江苏南京211189 综合交通运输理论交通运输行业重点实验室(南京现代综合交通实验室) 江苏南京211100 东南大学交通学院江苏南京211189

为了解决机场智慧化程度评价过程中遇到的指标类型繁多、覆盖范围广泛,且指标间关系错综复杂、量纲不统一、难以进行定量分析的难题,优选了传统的评价方法,并将改进后的优劣解距离(TOPSIS)法和层次分析法(AHP)进行融合,提出了专门针对... 详细信息

为了解决机场智慧化程度评价过程中遇到的指标类型繁多、覆盖范围广泛,且指标间关系错综复杂、量纲不统一、难以进行定量分析的难题,优选了传统的评价方法,并将改进后的优劣解距离(TOPSIS)法和层次分析法(AHP)进行融合,提出了专门针对机场智慧化程度评价的相对零主观(ZR)算法;为确保评价结果的准确,利用专家意见与客观判断结果对机场智慧化程度评价体系中的功能指标权重进行了计算,基于江苏省某机场通过ZR算法进行了机场智慧化程度评价。研究结果表明:2018年某机场智慧化程度评分为65.64,2022年某机场智慧化程度评分为77.08,说明机场内各项智慧智能设备在不断更新迭代,机场智慧化程度也在不断提高;2022年,机场应急保障下的二级安全运行监测指标较2018年提高了65.7%,人身安全检查指标提高了17.1%,应急与安全指标提高了16.2%,主要原因在于某机场近年来大力发展人工智能分析系统,引进了航站楼出入口人脸识别系统,完善了站坪作业安全监控平台,在一定程度上提高了机场安全的智慧化程度;陆侧交通指标2018年评分为2.34,2022年为2.54,评分变化较小,因此,智慧化程度发展迟缓,在未来的建设中需进一步加强资源投入。

关键词：民用机场智慧化程度评价相对零主观算法改进TOPSIS法权重计算

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民用机场智慧化程度评价指标的构建

东南大学学报（自然科学版） 2024年第3期54卷 524-530页

作者：张锐黄卫马涛东南大学智能运输系统(ITS)研究中心南京211189 综合交通运输理论交通运输行业重点实验室(南京现代综合交通实验室) 南京211100 东南大学交通学院南京211189

为了解决民用机场在进行智能化程度评价过程中客运核心业务流基础评价指标种类繁多、覆盖范围广泛、指标间关系错综复杂的难题,从智慧程度、覆盖程度和准确程度进行了多角度耦合的基础评价指标通式构建.在此基础上,以航班流为例分别从... 详细信息

为了解决民用机场在进行智能化程度评价过程中客运核心业务流基础评价指标种类繁多、覆盖范围广泛、指标间关系错综复杂的难题,从智慧程度、覆盖程度和准确程度进行了多角度耦合的基础评价指标通式构建.在此基础上,以航班流为例分别从感知型、预测型和决策型3个方面进行了基础评价指标的构建.研究结果表明,所构建的基础评价指标可根据其所涉及数据的功能属性划分为感知型指标、预测型指标、决策型指标3类,解决了智慧化程度基础评价指标缺失的问题.感知型与预测型指标可从智慧方法、覆盖程度、准确程度3个角度进行刻画,而决策型指标仅需从智慧方法、覆盖程度2个角度进行刻画,构建了多角度耦合的指标通式.从智慧方法角度划分,智慧程度可分为全智慧化管控、半智慧化管控和全人工管控3类状态,而覆盖程度与准确程度可由覆盖率与准确率表征.

关键词：智慧机场航班业务流基础评价指标感知型指标预测指标决策型指标

基于p-n异质结CuO/TiO_(2)复合物高效的载流子分离能力构建超灵敏AFP光电化学分析

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高等学校化学学报 2024年第8期45卷 52-59页

作者：郑德论张锐龙汕头职业技术学院建设生态学院汕头515041

将TiO_(2)纳米粒子与Cu(pta)MOFs复合,通过高温煅烧策略制得CuO/TiO_(2)复合物.在最优实验条件下,基于复合物对可见光更强的吸收利用效率,CuO/TiO_(2)修饰的ITO电极展现出显著的光电化学(PEC)响应信号,其光电流值(59.4μA)分别是单组分T... 详细信息

将TiO_(2)纳米粒子与Cu(pta)MOFs复合,通过高温煅烧策略制得CuO/TiO_(2)复合物.在最优实验条件下,基于复合物对可见光更强的吸收利用效率,CuO/TiO_(2)修饰的ITO电极展现出显著的光电化学(PEC)响应信号,其光电流值(59.4μA)分别是单组分TiO_(2)和CuO粒子的15.5和7.4倍.线性扫描伏安法(LSV)测试结果证实CuO/TiO_(2)/ITO电极比CuO和TiO_(2)材料具有更大的LSV响应强度.这可归因于获得的薄片层状CuO粒子及其兼有的多孔隙特征促进了光的多重散射/反射效应,同时CuO/TiO_(2)复合材料具有的典型p-n异质结构(能级带隙匹配)大幅促进了光生电荷载流子(e^(-)/h^(+))的分离与转移.选用戊二醛(GA)作为交联手臂分子,通过温和的醛胺反应将壳聚糖(CS)和anti-AFP抗体组装于CuO/TiO_(2)/ITO电极表面,再用牛血清蛋白(BSA)封闭活性位点,构建出PEC传感平台(BSA/anti-AFP/GA-CS/CuO/TiO_(2)/ITO),实现了对不同浓度甲胎蛋白(AFP)的高灵敏检测(检出限达到2.63×10^(-4) ng/mL).制备的传感电极同时展示出良好的稳定性和选择性.

关键词：薄片层CuO粒子 CuO/TiO_(2)复合物 p-n异质结光电化学传感器 AFP检测

基于逻辑-物理框架的智慧机场评价指标量化方法

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航空学报 2024年第10期45卷 35-47页

作者：张锐黄卫马涛东南大学智能运输系统研究中心南京211189 综合交通运输理论交通运输行业重点实验室(南京现代综合交通实验室) 南京211100 东南大学交通学院南京211189

为了解决机场在进行智能化程度评价过程中基础业务流指标无法定量表达的问题,通过对比分析现有评价体系方法,采用面向过程的方法对智慧机场体系框架进行构建,搭建了基于逻辑-物理框架的智慧机场评价体系;在此基础上,对框架内的各个基础... 详细信息

为了解决机场在进行智能化程度评价过程中基础业务流指标无法定量表达的问题,通过对比分析现有评价体系方法,采用面向过程的方法对智慧机场体系框架进行构建,搭建了基于逻辑-物理框架的智慧机场评价体系;在此基础上,对框架内的各个基础指标按定性指标和定量指标2个不同的类别进行了数学上的定义与定量描述。研究结果表明:面向过程的评价体系同样也适用于机场的智能化评价体系构建,且能够从逻辑框架到物理框架对智慧机场的各个业务流和子系统进行全面的反映。对基础指标根据其数学描述采用不同的分类量化有助于对机场的智慧化程度刻画更加精确和全面。对A机场基础指标的量化发现飞行区管理基础指标中百分比型指标占20%,数值型指标占34.3%,是否型指标占45.7%,陆侧交通管理基础指标中百分比型指标占13.3%,数值型指标占13.3%,是否型指标占73.4%,且各个指标能够展现具体的量化分值,说明提出的量化方法能够适用于机场全部业务流的量化处理。

关键词：智慧机场面向过程评价法逻辑框架物理框架量化方法

基于对象-属性双维度的民用机场核心业务流智慧化程度评价方法

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吉林大学学报（工学版） 2024年第5期54卷 1267-1276页

为解决机场在进行智慧化程度评价过程中由于建设内容体量庞大,业务错综复杂,无法做到业务流科学划分并有效评价的难题,本文从面向任务对象角度以及面向功能属性的角度建立了基于对象-属性双维度的机场核心业务流评价体系,并提出了90项... 详细信息

为解决机场在进行智慧化程度评价过程中由于建设内容体量庞大,业务错综复杂,无法做到业务流科学划分并有效评价的难题,本文从面向任务对象角度以及面向功能属性的角度建立了基于对象-属性双维度的机场核心业务流评价体系,并提出了90项基础指标。在此基础上,通过优劣解距法对禄口机场的双维度指标层进行了分值计算。研究结果表明:双维度评价指标体系的建立有助于厘清机场业务流种类多元且流向繁杂的问题,方便后续机场进行智慧化程度评价;从基于任务对象维度的指标层分值可以看出,旅客流的隔离区外智慧化建设程度最高为73.76分。以功能属性维度划分的各指标中,感知类的数量/重量指标评分最高为79.68分,高出平均值21.4%;预测类的时间类指标评分最高为80.26分,高出平均值9.1%;决策类的事件类指标评分最高为76.30分,高出平均值10.2%。预测类和决策类的相关指标智慧化建设程度相对均衡,而感知类指标最低分为54.36分,最高分为79.68分,各业务智慧化建设程度相差较大。

关键词：航空工程对象-属性双维度核心业务流智能化程度评价

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