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几种蛋白酶对文蛤肉的水解效果

食品与发酵工业 2008年第2期34卷 83-86页

作者：张绵松王海鸥江南大学食品学院

在一定的酶解条件下,用Alcalase 2.4L、胰蛋白酶、复合风味酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶等几种蛋白酶对文蛤内进行水解,测定了这几种蛋白酶的水解度,以及其水解物的氨基态氮含量、可溶性蛋白含量和透明度,并用凝胶过滤色谱(Sephedex G-25... 详细信息

在一定的酶解条件下,用Alcalase 2.4L、胰蛋白酶、复合风味酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶等几种蛋白酶对文蛤内进行水解,测定了这几种蛋白酶的水解度,以及其水解物的氨基态氮含量、可溶性蛋白含量和透明度,并用凝胶过滤色谱(Sephedex G-25)对水解物的分子质量分布进行了粗略分析。结果表明,Alcalase水解物分子质量的分布范围较广,适合制备具有一定肽链要求的短肽,酸性蛋白酶水解物分子质量较小,适合制备文蛤调味品,中性蛋白酶水解物分子质量主要集中在1 000 u左右与10 000u左右,胰蛋白酶和复合风味酶的水解物分子质量大部分在1 500 u以上。

关键词：文蛤肉蛋白酶水解物凝胶过滤色谱分子质量分布

仿刺参共附生真菌Aspergillus terreus来源的聚酮类化合物的研究

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现代食品科技 2014年第4期30卷 10-14,62页

作者：夏雪奎齐君刘昌衡张永刚贾爱荣袁文鹏刘新张绵松山东省科学院中日友好生物技术研究中心山东省应用微生物重点实验室山东济南250014 山东省科学院生物研究所山东济南250014

海参是海洋中重要的食物和药物资源,含有丰富的活性物质。海参共附生微生物非常丰富。为了从海参共附生微生物获得具有强生物活性的物质,对山东芝罘岛海域的仿刺参来源的共附生真菌Aspergillus terreus利用分子生物学手段进行了种属鉴定... 详细信息

海参是海洋中重要的食物和药物资源,含有丰富的活性物质。海参共附生微生物非常丰富。为了从海参共附生微生物获得具有强生物活性的物质,对山东芝罘岛海域的仿刺参来源的共附生真菌Aspergillus terreus利用分子生物学手段进行了种属鉴定,并利用固体基进行培养,对其次级代谢产物进行了研究。通过薄层层析、柱层析、高效液相色谱对其化学成分进行了分离和纯化,综合核磁波谱、质谱对其进行结构鉴定。从该菌中获得dihydrogeodin(1)、Territrems A(2)、Territrems B(3)、2,4-二羟基苯乙酮(4)、questin(5)和emodin(6)六种物质。利用人口腔上皮癌细胞株(KB)和多药耐药性的细胞株(KBv200)对1,5和6进行了细胞毒活性测试。本研究首次对化合物1进行了完整的谱图解析,并首次发现海洋环境来源的微生物可以代谢化合物dihydrogeodin(1),以及具有强抑制乙酰胆碱酶活性Territrems(3),而这些物质是海参本体不能够产生的,为开发具有预防和治疗帕金森病相关的功能食品提供了新来源。

关键词：仿刺参共附生真菌聚酮类化合物细胞毒活性抗乙酰胆碱酶活性

魔芋葡甘聚糖-乳清蛋白复配对维生素C W1/O/W2型多重乳液稳定性及缓释性能的影响

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食品工业科技 2024年

作者：毕英豪贾爱荣张绵松刘雪都红芳崔婷婷齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所山东省海洋功能食品技术创新中心威海人生药业集团股份有限公司

研究魔芋葡甘聚糖（Konjac glucomannan，KGM）与乳清蛋白（Whey protein，WP）复配对维生素C多重乳液稳定性和缓释性能的影响，为维生素C多重乳液的应用提供参考。以KGM和WP混合溶液制备负载维生素C的W1/O/W2型多重乳液，考察不同质量... 详细信息

研究魔芋葡甘聚糖（Konjac glucomannan，KGM）与乳清蛋白（Whey protein，WP）复配对维生素C多重乳液稳定性和缓释性能的影响，为维生素C多重乳液的应用提供参考。以KGM和WP混合溶液制备负载维生素C的W1/O/W2型多重乳液，考察不同质量分数的KGM和WP对多重乳液离心乳析率、离心沉淀率、负载率、粒径、Zeta电位、流变特性、维生素C保留率和释放率的影响。结果表明，KGM质量分数为0.10%，WP质量分数为10.00%时，多重乳液的稳定性和缓释性能最好。此时，乳滴分布均匀，粒径为64.38 μm，Zeta电位为-46.50 mV；维生素C的负载率达到93.24%；且在4 ℃、25 ℃和50 ℃下贮藏20 d均未出现明显分层；经模拟消化后乳液中维生素C的释放率为85.64%。上述结果证实了KGM与WP复配具有稳定维生素C W1/O/W2型多重乳液的潜在能力。

关键词：魔芋葡甘聚糖乳清蛋白维生素C W /O/W 型多重乳液稳定性缓释性能

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新型壳聚糖-岩藻聚糖硫酸酯纳米粒子研究

中国食品学报 2021年第5期21卷 41-47页

作者：刘雪姜竹茂毕浩然贾爱荣刘新张绵松史亚萍刘昌衡齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所济南250103 烟台大学生命科学学院山东烟台264005

以羊栖菜为原料,经热CaCl_(2)溶液提取得到岩藻聚糖硫酸酯(SFP)。采用高效液相色谱法(HPLC)、高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、化学法测定岩藻聚糖硫酸酯的单糖组成、分子质量、理化性质,对其结构进行初步表征。以岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖为... 详细信息

以羊栖菜为原料,经热CaCl_(2)溶液提取得到岩藻聚糖硫酸酯(SFP)。采用高效液相色谱法(HPLC)、高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、化学法测定岩藻聚糖硫酸酯的单糖组成、分子质量、理化性质,对其结构进行初步表征。以岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖为原料,采用聚电解质自组装方法制备不同体积比的岩藻聚糖硫酸酯/壳聚糖(Fuc/Cs)纳米粒子(岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖的质量浓度均为1 mg/mL),测定纳米粒子的理化性质并研究其在人工胃、肠液中的稳定性。结果表明,羊栖菜岩藻聚糖硫酸酯主要由甘露糖、氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖和岩藻糖组成,物质的量比分别为3.96%,0.37%,0.42%,27.20%,68.05%;分子质量在101.5~701.0 ku范围内;总糖含量56.42%;蛋白质含量1.56%;硫酸基含量21.07%;化学法未检测到糖醛酸。不同Fuc/Cs比例(0.6∶1~1.4∶1)的纳米粒子粒径在330~450 nm之间。当Fuc/Cs比例为1.4∶1时,粒径最小;当Fuc/Cs比例为0.6∶1时,粒径最大。Zeta电位的范围为27~31 mV,多分散系数(PDI)的范围0.2~0.29,表明纳米溶液体系稳定。岩藻聚糖硫酸酯复合率在85%~93%范围内,且随着Fuc/Cs比例的增大而降低。不同比例的纳米粒子在人工胃液中均表现出良好的稳定性,随着消化时间的延长,粒径、Zeta电位、PDI、Fuc复合率变化不大。在人工肠液中,纳米粒子的粒径显著增大,Zeta电位均为负值且绝对值减小,PDI变大,表明纳米粒子发生膨胀、解聚。当Fuc/Cs比例为0.6∶1,0.8∶1,1.4∶1时,Fuc复合率显著降低,尤其是比例为1.4∶1时,复合率降至36%。结论:当羊栖菜岩藻聚糖硫酸酯/壳聚糖纳米粒子Fuc/Cs比例为0.6∶1,0.8∶1,1.4∶1时,在人工胃液中表现出良好的稳定性,在人工肠液中表现出良好的解聚性,可作为潜在的口服药物运载体系。

关键词：羊栖菜岩藻聚糖硫酸酯纳米粒子

食品检测中革兰氏阳性菌DNA提取新方法的研究

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食品工业 2011年第12期32卷 104-107页

作者：贾爱荣张永刚王萍孟秀梅张绵松刘昌衡山东省科学院生物研究所济南250014 山东省应用微生物重点实验室济南250014 山东省科学院中日友好生物技术研究中心济南250014 山东中医药大学济南250355

探索食品检测中快速高效提取革兰氏阳性菌基因组DNA的新方法。采用改良交替冻融法、CTAB法、苯酚氯仿法及试剂盒法等4种不同的方法提取金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)以及芽... 详细信息

探索食品检测中快速高效提取革兰氏阳性菌基因组DNA的新方法。采用改良交替冻融法、CTAB法、苯酚氯仿法及试剂盒法等4种不同的方法提取金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)以及芽孢杆菌(Bacillus sp)的基因组DNA,并进行琼脂糖凝胶电泳检测及16S rDNA扩增检测。结果显示,以改良交替冻融法提取的基因组DNA为模板,可灵敏有效的扩增16S rDNA基因。该方法用时短,操作简单,成本低,能在短时间内完成大量样品的处理,满足普通的PCR扩增反应。

关键词：食品检测革兰氏阳性菌 DNA提取 PCR

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海蜇ACE抑制肽水解用酶的筛选

食品工业 2012年第3期33卷 64-67页

作者：刘新张绵松孟秀梅张永刚王萍刘昌衡山东省科学院中日友好生物技术研究中心/山东省应用微生物重点实验室济南250014 山东省科学院海洋食品生物技术研发平台济南250014 山东省科学院生物研究所/山东省生物传感器重点实验室济南250014 山东中医药大学济南250355

采用肽含量、ACE抑制率和肽的比例等多个指标对六种蛋白酶的水解效果进行评价筛选海蜇ACE抑制肽的酶法制备用酶。试验结果表明,不同的蛋白酶对海蜇的水解效果不同,综合考虑三项指标。

关键词：海蜇 ACE抑制率蛋白酶筛选

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仿刺参肠高抗凝血活性多糖筛选及其结构解析

食品科学 2024年

作者：毕英豪都红芳贾爱荣王凌英张绵松崔婷婷徐振鲁刘雪齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所威海人生药业集团股份有限公司山东省海洋功能食品技术创新中心威海人生药业有限公司

海参多糖的研究主要集中在体壁多糖，参肠多糖的研究相对较少。本论文以仿刺参肠为原料，提取得到粗多糖，经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换色谱柱分离，按照洗脱液离子强度从低到高得到3 种多糖SCG1-SCG3。采用PMP柱前衍生高效液相... 详细信息

海参多糖的研究主要集中在体壁多糖，参肠多糖的研究相对较少。本论文以仿刺参肠为原料，提取得到粗多糖，经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换色谱柱分离，按照洗脱液离子强度从低到高得到3 种多糖SCG1-SCG3。采用PMP柱前衍生高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）对3 种多糖进行单糖组成、分子量分析。采用活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）、凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、纤维蛋白原（Fibrinogen，FIB）含量评价多糖的抗凝血活性，筛选高抗凝血活性多糖并通过理化性质分析、红外光谱分析、核磁共振波谱分析对高抗凝血活性多糖进行结构分析。结果显示，仿刺参肠粗多糖的提取得率为2.75%，经阴离子交换色谱柱分离得到的3 种多糖，按照SCG1-SCG3的顺序，岩藻糖的比例逐渐升高，SCG3时，仅含有岩藻糖；分子量逐渐升高，分别为25.6 kDa，112.4 kDa，171.5 kDa，其中SCG3的分子量最大。3 种多糖对APTT均有显著的延长作用，按照SCG1-SCG3的顺序，延长作用逐渐增强，SCG3的延长作用最强且高于阳性对照低分子量肝素，20 μg/mL时，APTT已达500 s以上；3 种多糖对PT的延长作用有显著差别，SCG1-SCG2对PT的延长作用不明显，SCG3在浓度为200 μg/mL时，PT可达500 s以上；SCG1对TT几乎没有延长作用，SCG2-SCG3对TT均有显著延长作用，且SCG3的延长作用最明显，浓度为50 μg/mL时，TT已达500 s以上。此外，浓度在200 μg/mL以内时，SCG3即可显著降低FIB的含量，因此，SCG3是一种多机制高抗凝血活性多糖。结构分析结果显示，SCG3的总糖含量为50.36%，蛋白含量为0.67%，硫酸基含量为28.31%，表明SCG3是一种硫酸化岩藻多糖，即岩藻聚糖硫酸酯。红外光谱、核磁共振波谱进一步验证SCG3是一种高纯度岩藻聚糖硫酸酯，主要由糖基→3)-α-l-Fucp-（1→，→3）-α-l-Fucp(2SO4)-（1→及→3）-α-l-Fucp(2，4SO4)-(1→组成。

关键词：仿刺参参肠抗凝血岩藻聚糖硫酸酯结构解析

基于铜藻岩藻聚糖硫酸酯的负载岩藻黄质纳米粒子制备与分析

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食品科学 2023年第12期44卷 95-101页

作者：刘雪鞠文明徐静沂张绵松崔婷婷都红芳徐振鲁刘昌衡贾爱荣齐鲁工业大学(山东省科学院) 山东省科学院生物研究所山东济南250103 好当家集团有限公司山东省海洋功能食品技术创新中心山东威海264305 齐鲁工业大学(山东省科学院) 基辅学院山东济南250353 威海人生药业集团股份有限公司山东威海264200

为防止岩藻黄质进入肠道前在胃中分解,以岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖为原料,构建pH值敏感性纳米载体,用于运载岩藻黄质,以实现岩藻黄质在胃肠道环境中的高效递送。本实验从铜藻中提取岩藻黄质、岩藻聚糖硫酸酯,采用高效液相色谱法测定岩藻... 详细信息

为防止岩藻黄质进入肠道前在胃中分解,以岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖为原料,构建pH值敏感性纳米载体,用于运载岩藻黄质,以实现岩藻黄质在胃肠道环境中的高效递送。本实验从铜藻中提取岩藻黄质、岩藻聚糖硫酸酯,采用高效液相色谱法测定岩藻黄质纯度,采用高效凝胶渗透色谱法、化学法、高效液相色谱法测定岩藻聚糖硫酸酯的分子质量、理化性质、单糖组成。以岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖为原料,采用聚电解质自组装法按照岩藻聚糖硫酸酯-壳聚糖质量比0.6∶1、0.8∶1、1∶1制备负载岩藻黄质的纳米粒子。测定纳米粒子红外光谱评价岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖的结合状态;测定负载岩藻黄质纳米粒子的理化性质及在模拟胃、肠液中粒径、岩藻聚糖硫酸酯复合率、岩藻黄质负载率的变化,评价其在胃肠道中的稳定性,获得在模拟胃环境中稳定、模拟肠环境中裂解且可实现岩藻黄质高效递送的纳米粒子。结果表明,铜藻岩藻黄质的纯度为13.57%;岩藻聚糖硫酸酯的分子质量为342 kDa,总糖质量分数为52.45%,蛋白质量分数为7.96%,糖醛酸质量分数为9.25%,硫酸基质量分数为19.26%;由岩藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和木糖5种单糖组成,其中岩藻糖和半乳糖的含量最高。红外光谱显示,纳米粒子中岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖存在非共价相互作用,结合状态良好。负载岩藻黄质纳米粒子的粒径为360~430 nm,Zeta电位为26~31 mV,多分散指数为0.23~0.27,表明纳米乳液均匀稳定;岩藻聚糖硫酸酯复合率为87%~90%,岩藻黄质的负载率为87%~91%,表明纳米粒子对岩藻黄质的包裹效果较好。体外模拟消化实验结果显示,随着时间的延长,3种比例的纳米粒子在模拟胃液中粒径、岩藻聚糖硫酸酯复合率、岩藻黄质负载率变化不大,表明纳米粒子在模拟胃环境中稳定性较高;在模拟肠液中,粒径显著增大,岩藻聚糖硫酸酯复合率、岩藻黄质负载率显著降低,表明纳米粒子在模拟肠环境中发生膨胀、解聚。纳米粒子在模拟胃环境中稳定,在模拟肠环境中裂解,实现了岩藻黄质在胃肠道中的高效递送,岩藻聚糖硫酸酯-壳聚糖质量比为1∶1时,效果最佳。

关键词：铜藻岩藻聚糖硫酸酯岩藻黄质纳米粒子

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羊栖菜褐藻糖胶寡糖组分分析及抗凝血活性

食品科学 2022年第12期43卷 260-266页

作者：刘雪任晨瑜刘新张绵松白新峰王令书崔婷婷史亚萍刘昌衡贾爱荣齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所山东济南250103 齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院山东济南250353 潍坊医学院临床医学院山东潍坊261053

为研究褐藻糖胶中具有抗凝血活性的寡糖组分,从羊栖菜中分离纯化得到褐藻糖胶(命名为SFF),通过高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法、化学法测定SFF的单糖组成、分子质量、理化性质。采用盐酸降解法降解SFF,并通过Bio-gel P4凝胶色谱柱... 详细信息

为研究褐藻糖胶中具有抗凝血活性的寡糖组分,从羊栖菜中分离纯化得到褐藻糖胶(命名为SFF),通过高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法、化学法测定SFF的单糖组成、分子质量、理化性质。采用盐酸降解法降解SFF,并通过Bio-gel P4凝胶色谱柱对寡糖组分进行有效分离。采用活化部分凝血酶时间、凝血酶时间、凝血酶原时间评价寡糖组分的抗凝血活性,筛选高活性且低分子质量的寡糖组分,通过质谱法解析其结构,探究抗凝血SFF寡糖的结构特征。结果表明,SFF主要由岩藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖组成,物质的量比为67.11∶26.69∶2.54∶3.66。SFF分子质量较大为708 kDa,总糖、蛋白、硫酸基质量分数分别为56.44%、1.14%和26.22%。盐酸降解产物经凝胶色谱柱分离得到5种寡糖组分P1~P5,这5种寡糖组分均可延长活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT),其中P1、P2、P3对APTT的延长作用高于P4、P5,P3的延长作用尤为明显;对凝血酶时间和凝血酶原时间无延长作用。高抗凝血、低分子质量寡糖组分P3的质谱分析表明,P3是一种高纯度寡糖组分,主要由二硫酸化岩藻三糖组成。本实验筛选出一种具有良好抗凝血活性的高纯度寡糖组分,丰富了抗凝血褐藻糖胶寡糖的研究。

关键词：羊栖菜褐藻糖胶寡糖抗凝血