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补肾活血颗粒对自然衰老大鼠骨骼肌组织的保护作用

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福建中医药 2022年第6期53卷 31-33页

作者：訾勇张楚天罗燕李茜羽姚淑红陈小倩蔡晶福建中医药大学附属第三人民医院福建福州350108 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

目的研究补肾活血颗粒对自然衰老大鼠骨骼肌组织的保护作用及其机制。方法将20只12月龄SD大鼠随机分为自然衰老组及补肾活血颗粒组,以10只3月龄大鼠作为青年对照组。将补肾活血颗粒用100℃纯净水配置成371 mg/mL含药溶液,以10 mL/(kg·d... 详细信息

目的研究补肾活血颗粒对自然衰老大鼠骨骼肌组织的保护作用及其机制。方法将20只12月龄SD大鼠随机分为自然衰老组及补肾活血颗粒组,以10只3月龄大鼠作为青年对照组。将补肾活血颗粒用100℃纯净水配置成371 mg/mL含药溶液,以10 mL/(kg·d)灌胃,每周连续6 d,停药1 d,持续6个月,青年对照组及自然衰老组正常饲养未予任何药物干预。6个月后光镜下观察各组大鼠骨骼肌组织形态学改变,Western blot检测腓肠肌组织沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、叉头框转录因子O3(FoxO3)蛋白相对表达量,ELISA法检测SIRT1去乙酰化酶活性。结果与青年对照组比较,自然衰老组及补肾活血颗粒组大鼠腓肠肌组织SIRT1蛋白相对表达量显著增加,FoxO3蛋白相对表达量及SIRT1去乙酰化酶活性明显降低(P均<0.01或<0.05);与自然衰老组比较,补肾活血颗粒组大鼠腓肠肌组织FoxO3蛋白相对表达量及SIRT1去乙酰化酶活性明显增加,腓肠肌组织SIRT1蛋白相对表达量明显降低(P均<0.05)。结论补肾活血颗粒可调节SIRT1、FoxO3蛋白相对表达量及增加SIRT1去乙酰化酶活性,可能通过调节SIRT1/FoxO3信号通路,一定程度上对自然衰老大鼠骨骼肌组织具有保护作用。

关键词：自然衰老大鼠补肾活血颗粒 SIRT1 FoxO3 SIRT1去乙酰化酶活性

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苁蓉舒痉颗粒对帕金森病模型小鼠额叶PPAR-γ/PGC-1α通路的影响

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时珍国医国药 2022年第12期33卷 2889-2892页

作者：袁欣欣张楚天黄佩珍黄妙安李茜羽陈诗雅蔡晶福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建中医药大学附属第三人民医院福建福州350122

目的探究苁蓉舒痉颗粒对PD模型小鼠额叶保护作用及其机制。方法腹腔注射MPTP复制PD模型。实验分组为正常组、模型组、苁蓉组和美多芭组。在造模第7天、给药14天后,对小鼠进行行为学测试;免疫组化检测小鼠黑质TH阳性细胞的表达;透射电镜... 详细信息

目的探究苁蓉舒痉颗粒对PD模型小鼠额叶保护作用及其机制。方法腹腔注射MPTP复制PD模型。实验分组为正常组、模型组、苁蓉组和美多芭组。在造模第7天、给药14天后,对小鼠进行行为学测试;免疫组化检测小鼠黑质TH阳性细胞的表达;透射电镜观察小鼠额叶线粒体损伤情况;qPCR检测小鼠额叶中PPARγ和PGC-1αmRNA含量的表达;Western Blot检测小鼠额叶中TFAM、PPAR、NRf2、PGC-1α蛋白的表达。结果(1)行为学:造模7d后,与正常组比较,模型组悬挂、爬杆评分、抓力值、自主活动次数降低,给药治疗14d后,与模型组比较,苁蓉组、美多芭组悬挂、爬杆得分、自主活动次数增加。(2)免疫组化:与正常组比较,模型组小鼠黑质TH阳性细胞数明显减少;与模型组比较,苁蓉组、美多芭组小鼠黑质TH阳性细胞数明显增多。(3)透射电镜:与正常组比较,模型组额叶线粒体出现肿胀、空泡样,嵴断裂甚至消失;与模型组比较,苁中组与美多芭组额叶线粒体数量有所增加,形态有所改善。(4)qPCR:与正常组比较,模型组小鼠PPARγ、PGC-1αmRNA表达水平明显降低;与模型组比较,苁蓉组、美多芭组小鼠PPARγ、PGC-1αmRNA表达水平明显升高。(5)Western Blot:与正常组比较,模型组TFAM、PPAR、NRf2、PGC-1α蛋白表达量明显降低;与模型组比较,苁蓉组、美多芭组蛋白表达量明显升高。结论苁蓉舒痉颗粒可以减少PD模型小鼠额叶损伤,这种保护作用可能是通过调节PPAR-γ/PGC-1α通路实现。

关键词：苁蓉舒痉颗粒帕金森病额叶 PPAR-γ/PGC-1α通路认知障碍

青娥方对自然增龄雌性大鼠血清瘦素、瘦素受体及骨代谢相应指标的影响

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青娥方对自然增龄雌性大鼠血清瘦素、瘦素受体及骨代谢相应指标的...

基于BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路探讨健骨颗粒氯仿萃取部位对体外成骨细胞分化的影响

2019楚天骨科高峰论坛暨第二十六届中国中西医结合骨伤科学术年会

作者：孙攀张媛媛魏振朴张楚天杨娟王志强林燕萍福建中医药大学中西医结合研究院

目的:观察补肾健脾中药青娥方对自然衰老雌性大鼠血清LEP、LEP-R,E2及BALP、TRACP-5b、OC、Cbfa-1、OPG、RANKL等骨代谢指标的影响,旨在从瘦素、瘦素受体角度讨论青娥方调节骨代谢的作用机制,为青娥方防治老年性骨质疏松症提供实验依据... 详细信息

目的:观察补肾健脾中药青娥方对自然衰老雌性大鼠血清LEP、LEP-R,E2及BALP、TRACP-5b、OC、Cbfa-1、OPG、RANKL等骨代谢指标的影响,旨在从瘦素、瘦素受体角度讨论青娥方调节骨代谢的作用机制,为青娥方防治老年性骨质疏松症提供实验依据。方法:6月龄健康清洁级雌性SD大鼠81只,适应性喂养一周后取材9只;随机抽取18只,分为生理盐水组(9只),青娥方组(9只),分别灌服生理盐水和青娥方浸膏,灌胃3月后取材;剩余大鼠分别在9月龄,12月龄,15月龄时再次分组,分组、灌胃、取材方法同6月龄。观察指标:检测大鼠血清LEP、LEP-R、E2、BALP、TRACP-5b、OC、Cbfa-1、OPG、RANKL水平,胫骨骨密度、最大载荷和最大应力。结果:1、生理盐水组血清LEP-R、E2、Cbfa-1、COL-Ⅰ、OC水平随增龄而降低,而血清LEP水平随增龄升高。6月龄到9月龄生理盐水组血清OPG、RANKL、BALP随增龄明显升高(P<0.05或P<0.01),9月龄到18月龄显著下降(P<0.05或P<0.01),血清TRACP-5b随增龄降低。骨密度和骨小梁面积在12月龄达到峰值。2、青娥方组血清LEP、LEP-R、E2、OPG、Cbfa-1、COL-Ⅰ、OC、BALP水平较同月龄生理盐水组均有增加,其中Cbfa-1各月龄均有显著差异(P<0.05,P<0.01),血清RANKL、TRACP-5b水平较同月龄生理盐水组降低,无显著差异。青娥方组骨密度、骨小梁面积百分比、最大载荷和最大应力较同月龄生理盐水组升高。结论:1、自然增龄雌性大鼠6月龄后随着年龄增长,血清雌激素水平下降,血清LEP表达上升,LEP-R表达下降,导致OPG/RANKL比值下降,骨代谢紊乱,骨吸收大于骨形成,从而导致骨质量下降。2、青娥方能通过升高自然增龄衰老大鼠雌激素水平,增加LEP、LEP-R表达,导致OPG/RANKL比值升高,从而调控骨代谢,改善骨质量,延缓骨骼衰老,发挥防治老年性骨质疏松症的作用。

关键词：青娥方瘦素老年性骨质疏松症衰老

来源： cnki会议评论

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康复学报 2022年第3期32卷 224-231页

作者：周芬孙雨晴孙攀张楚天杨娟林燕萍福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

目的:通过观察健骨颗粒氯仿萃取部位对体外培养成骨细胞的影响,研究其调控BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路影响成骨细胞分化的可能机制。方法:选用年龄<3 d的BALB/c小鼠,从其颅盖骨提取原代成骨细胞,并采用碱性磷酸酶染色法对所提取... 详细信息

目的:通过观察健骨颗粒氯仿萃取部位对体外培养成骨细胞的影响,研究其调控BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路影响成骨细胞分化的可能机制。方法:选用年龄<3 d的BALB/c小鼠,从其颅盖骨提取原代成骨细胞,并采用碱性磷酸酶染色法对所提取的细胞进行鉴定;取生长状态良好的第3代成骨细胞作为实验对象,将健骨颗粒氯仿萃取部位稀释至不同的浓度梯度,即设置0、2、4、8、16、32、64 ng/mL 7个药物浓度组对细胞进行干预,采用MTT法筛选健骨颗粒氯仿萃取部位促进成骨细胞增殖的最佳浓度,作为最佳药物干预浓度进行后续实验。取第3代细胞,将其分为空白组、抑制剂组(BMP2抑制剂Noggin干预)、药物组(健骨颗粒氯仿萃取部位干预)和抑制剂加药物组(Noggin加健骨颗粒氯仿萃取部位干预),按组别干预后进行后续实验。采用RT-PCR检测各组BMP2、Smad1、Runx2、Osterix及成骨细胞分化相关基因ALP、CollagenⅠmRNA的表达水平;采用Western blot法检测各组BMP2、Smad1、Runx2、Osterix及ALP、CollagenⅠ的蛋白表达,观察健骨颗粒氯仿萃取部位对成骨细胞分化的影响。结果:经碱性磷酸酶染色法鉴定,所提取的原代细胞阳性率高达90%为成骨细胞;采用MTT法检测发现健骨颗粒氯仿萃取部位在药物浓度为32 ng/mL时,成骨细胞增殖速度最快,在干预2 d时达到增殖高峰,故选用32 ng/mL干预2 d作为健骨颗粒氯仿萃取部位最佳干预浓度进行后续实验;RT-PCR与Western blot检测结果显示,与空白组相比,抑制剂组BMP2、Smad1、Runx2、Osterix及ALP、CollagenⅠ各指标基因表达水平显著降低,蛋白相对表达量明显降低(P<0.01或P<0.05);与空白组相比较,药物组6个指标基因表达水平显著升高,蛋白相对表达量也明显升高(P<0.01或P<0.05);抑制剂加药物组与抑制剂组比较,各指标基因表达水平和蛋白相对表达量均显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:(1)使用Noggin抑制细胞内BMP2的表达后,Smad1、Runx2、Osterix的基因和蛋白的表达明显下降,与此同时成骨细胞分化相关指标ALP、CollagenⅠ基因和蛋白表达也明显下降,提示BMP2通路与成骨细胞分化密切相关。(2)健骨颗粒氯仿萃取部位干预原代成骨细胞后能够升高细胞内BMP2、Smad1、Runx2、Osterix与成骨细胞分化相关指标ALP、CollagenⅠ基因和蛋白的表达,促进成骨样细胞分化;提示健骨颗粒氯仿萃取部位可以通过调控BMP2/Smad1/Runx2/Osterix通路,促进成骨细胞分化,从而达到防治绝经后骨质疏松症的作用。

关键词：健骨颗粒 BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路成骨细胞细胞分化氯仿萃取部位

帕金森病患者腔隙性脑梗死患病率的Meta分析

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神经疾病与精神卫生 2024年第11期24卷 789-796页

作者：刘颖张楚天夏金言李珣林凡张宏伟蔡晶福建中医药大学中西医结合学院福州350122 香港中文大学中医学院中国香港999077 福建中医药大学附属第三人民医院老年病科福州350122

目的系统评价帕金森病患者腔隙性脑梗死的患病率。方法计算机检索PubMed、Web of Science、The Cochrane Library、Embase、中国知网、万方数据库、维普网和中国生物医学文献数据库,搜索有关腔隙性脑梗死与帕金森病相关的研究,检索时限... 详细信息

目的系统评价帕金森病患者腔隙性脑梗死的患病率。方法计算机检索PubMed、Web of Science、The Cochrane Library、Embase、中国知网、万方数据库、维普网和中国生物医学文献数据库,搜索有关腔隙性脑梗死与帕金森病相关的研究,检索时限均为建库至2024年9月。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Stata 17.0软件进行帕金森病患者腔隙性脑梗死患病率的Meta分析。结果共纳入12篇文献,涉及1335例帕金森病患者。Meta分析结果显示,帕金森病患者的腔隙性脑梗死总患病率为26.2%(95%CI:17.9%~34.6%)。亚组分析结果显示:3.0T MRI诊断的腔隙性脑梗死患病率(28.1%)高于1.5T MRI(20.9%);按照国际运动障碍协会标准诊断的帕金森病腔隙性脑梗死患病率(33.4%)高于英国脑库标准(20.8%);中国帕金森病患者腔隙性脑梗死患病率(32.6%)高于日本和韩国(13.3%);2021—2023年帕金森病患者腔隙性脑梗死患病率(28.3%)高于2015—2020年(24.2%);队列研究帕金森病患者腔隙性脑梗死患病率(47.2%)高于横断面研究(31.6%)和病例对照研究(11.6%)的结果。结论帕金森病患者腔隙性脑梗死患病率较高,故应重视帕金森病患者并发脑小血管病变的诊疗。

关键词：帕金森病腔隙性脑梗死患病率 Meta分析

健骨颗粒含药血清调控miR-141对小鼠BMSCs成骨分化的影响

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健骨颗粒含药血清调控miR-141对小鼠BMSCs成骨分化的影响

健骨颗粒对去卵巢小鼠miR-141及成骨基因Dlx5/Msx2/Runx2的影响

2019楚天骨科高峰论坛暨第二十六届中国中西医结合骨伤科学术年会

作者：张楚天张文明林燕萍魏振朴张志恒杨娟孙攀王志强福建中医药大学中西医结合研究院河南省洛阳正骨医院郑州院区福建中医药大学针灸学院

目的探讨健骨颗粒含药血清调控miR-141对小鼠BMSCs成骨分化的影响。方法去卵巢小鼠BMSCs体外培养,分成两组,3天后分别加入健骨颗粒含药血清和生理盐水血清干预(72小时/次);培养至第8天在显微镜下观察细胞形态;培养至第13天行碱性磷酸酶... 详细信息

目的探讨健骨颗粒含药血清调控miR-141对小鼠BMSCs成骨分化的影响。方法去卵巢小鼠BMSCs体外培养,分成两组,3天后分别加入健骨颗粒含药血清和生理盐水血清干预(72小时/次);培养至第8天在显微镜下观察细胞形态;培养至第13天行碱性磷酸酶染色、定量检测和钙盐结节检测,探究健骨颗粒含药血清对BMSCs成骨能力的影响;实时荧光定量PCR检测DLx5、Msx2、Runx2及miR-141的基因表达情况;Western blot检测DLx5、Msx2、Runx2及miR-141的蛋白表达情况。结果RT-PCR检测Dlx5、Msx2、Runx2及miR-141的基因表达结果:健骨颗粒含药血清组miR-141和Msx2较生理盐水血清组明显下降(P<0.01),而Dlx5、Runx2显著升高(P<0.01);Western-Blot检测DLx5、Msx2、Runx2的蛋白表达结果:健骨颗粒血清组Msx2较生理盐水组有所下降(P<0.05),Dlx5、Runx2显著升高(P<0.01)。结论健骨颗粒血清可以抑制去卵巢小鼠BMSCs细胞中成骨负性调节因子miR-141的高表达,级联调控BMP信号通路Dlx5/Msx2/Runx2信号轴,提高成骨核心因子Runx2等的表达,从而促进成骨细胞分化,达到预防和治疗骨质疏松的目的。

关键词：中医中药绝经后骨质疏松症健骨颗粒 miR-141 Dlx5/Msx2/Runx2 去卵巢小鼠骨髓间充质干细胞

来源： cnki会议评论

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康复学报 2018年第6期28卷 26-31页

作者：张志恒张文明魏振朴张楚天杨娟林燕萍福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 河南省洛阳正骨医院郑州院区河南郑州450018 福建中医药大学针灸学院福建福州350122

目的:观察健骨颗粒对去卵巢小鼠骨组织中miR-141、Dlx5、Msx2、Runx2表达的影响,探讨健骨颗粒防治绝经后骨质疏松的作用机制。方法:30只C57小鼠按照随机数字表法分为假手术组、生理盐水组和健骨颗粒组,每组10只。假手术组只切除卵巢周... 详细信息

目的:观察健骨颗粒对去卵巢小鼠骨组织中miR-141、Dlx5、Msx2、Runx2表达的影响,探讨健骨颗粒防治绝经后骨质疏松的作用机制。方法:30只C57小鼠按照随机数字表法分为假手术组、生理盐水组和健骨颗粒组,每组10只。假手术组只切除卵巢周围脂肪,不切除卵巢;生理盐水组和健骨颗粒组均手术切除双侧卵巢,并分别灌服生理盐水和健骨颗粒。干预8周后处死取材,采用micro CT观察胫骨形态并计量;realtime PCR检测骨组织miR-141、Dlx5、Msx2、Runx2等mRNA的表达;Western blot法检测骨组织Dlx5、Msx2、Runx2等蛋白含量。结果:与生理盐水组比较,健骨颗粒组骨小梁数量、宽度、长度、形态和分布部分恢复,密度和联结性有所增加,仍无法恢复到假手术组水平,但皮质骨面积增加,骨髓腔缩小,基本恢复到假手术组水平;骨矿物质含量(BMC)、骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨表面积和骨组织体积比值(BS/TV)、骨小梁数量(Tb.N)均明显升高;骨小梁分离度(***)、结构模型指数(SMI)指标均明显降低;小鼠骨组织miR-141、Msx2相对含量明显降低;骨组织Runx2、Dlx5相对含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:健骨颗粒可以有效降低miR-141的表达,并通过影响骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化BMP信号通路Dlx5/Msx2/Runx2信号轴来提高Dlx5、Runx2等成骨关键因子的表达,提高成骨能力,达到预防和治疗骨质疏松的目的。

关键词：绝经后骨质疏松症健骨颗粒 miR-141 远端缺失同源盒基因5 肌节同源盒基因2 核心结合蛋白因子2

基于Cyclin D1基因敲减探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的机理

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基于Cyclin D1基因敲减探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的机理

2019楚天骨科高峰论坛暨第二十六届中国中西医结合骨伤科学术年会

作者：杨娟贾晓康张楚天黄云梅黄美雅张志恒孙攀吴银生林燕萍福建中医药大学

目的验证Cyclin D1及其下游信号蛋白对成骨细胞增殖的调控作用,并探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法培养成骨样细胞株UMR-106,运用CRISPR/Cas9技术敲减Cyclin D1基因后,将细胞分为基因敲减+生理盐水组(组1)和基因敲减+健骨... 详细信息

目的验证Cyclin D1及其下游信号蛋白对成骨细胞增殖的调控作用,并探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法培养成骨样细胞株UMR-106,运用CRISPR/Cas9技术敲减Cyclin D1基因后,将细胞分为基因敲减+生理盐水组(组1)和基因敲减+健骨颗粒组(组2),病毒空载体细胞(组3)为阴性对照。未行基因敲减的细胞分为正常细胞+生理盐水组(组4)和正常细胞+健骨颗粒组(组5)。分别用生理盐水血清或健骨颗粒含药血清干预各组细胞24、48、72小时,CCK8法检测细胞增殖情况,Real time PCR检测Cyclin D1、Cyclin E、CDK 2、CDK 4、Rb及E2F-1基因的表达水平。结果 Western-bolt检测表明基因敲减的成骨细胞Cyclin D1蛋白表达明显下降。CCK8法检测结果显示,与组4相比,组5增殖速度变快(P0.05),组1和组2增殖速度均减慢(P0.05)。Real time PCR检测结果显示,与组4相比,组5Cyclin D1、CDK2、CDK4、Cyclin E、Rb及E2F-1 mRNA表达明显增高(P0.05),组1和组2表达明显降低(P0.05)。结论 Cyclin D1及其下游信号蛋白是调控成骨细胞增殖的关键因素;健骨颗粒可以通过调节Cyclin D1及其下游信号蛋白促进成骨细胞增殖。

关键词：健骨颗粒成骨细胞 Cyclin D1 基因敲减细胞增殖

来源： cnki会议评论

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小柴

少男少女 2016年第30期 46-46页

作者：张楚天广州市铁一小学五年级

我家楼下,有一只叫小柴的小猫。它是少见的一只放养的家猫,一身白毛,一双绿到灿烂的眼睛,很温顺。它的主人是个老太太,住在一楼,门口的一面墙虽已被青苔爬满,但却看起来生机勃勃。长椅上常常能看到小柴的踪影,绿意盎然的小树上也刻满了... 详细信息

我家楼下,有一只叫小柴的小猫。它是少见的一只放养的家猫,一身白毛,一双绿到灿烂的眼睛,很温顺。它的主人是个老太太,住在一楼,门口的一面墙虽已被青苔爬满,但却看起来生机勃勃。长椅上常常能看到小柴的踪影,绿意盎然的小树上也刻满了小柴的爪印。大院里的人基本都和它很熟,无论春夏秋冬,小柴都在长椅上等着大家,其实说不上是等,就是在你走过来时,淡淡地瞟你一眼,继续打它的盹。有一天,不知道为什么,小柴的主人忽然

关键词：拐杖家猫卡车