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基于物质基础的张仲景经方中附子炮制方法的科学内涵研究

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基于物质基础的张仲景经方中附子炮制方法的科学内涵研究

作者：张先灵北京中医药大学

学位级别：硕士

张仲景用药具“生熟异用”特点,在药物的炮制方法及用法上有独到之处。附子是常用的有毒中药,《伤寒杂病论》对其中使用的附子有“生”和“炮”两种,与现行药典附子均为经胆巴液浸泡后炮制加工为黑顺片、白附片、淡附片和炮附片供临床... 详细信息

张仲景用药具“生熟异用”特点,在药物的炮制方法及用法上有独到之处。附子是常用的有毒中药,《伤寒杂病论》对其中使用的附子有“生”和“炮”两种,与现行药典附子均为经胆巴液浸泡后炮制加工为黑顺片、白附片、淡附片和炮附片供临床使用有本质区别。本项目模拟张仲景的方法,制备生、“炮”附子饮片,以药典炮附片为对照,通过基于物质基础的张仲景附子生用和炮用的科学内涵的阐释,对附子有别于现版药典的经方炮制方法作出客观评价,为中药炮制技术的传承及创新提供实验数据支撑。为了最大程度地还原张仲景所用附子,本研究首次将张仲景主要生活及行医所在地——南阳的野生附子与江油栽培附子进行对比研究。一、附子生用科学内涵的研究采用称重法,对张仲景《伤寒杂病论》中附子的用量“枚”进行客观量化研究确认。分别将江油生附子和南阳生附子按照大中小分三档,每档15枚,对每枚附子鲜品和干品进行称重。结果:江油、南阳的附子的鲜品干燥后的干湿比基本一致,分别为0.37±0.03,0.38±0.13。河南南阳附子大、中、小档的重量分别为5.1g、3.0g、1.3g,四川江油各档附子的重量比河南南阳附子高约3.3-4.4倍。由于采挖过程中发现大档附子较少,而小档附子可能尚“不足气,不堪用”,推测张仲景所用南阳附子多为中档,即《伤寒杂病论》中附子用量每枚应为现代的3.0g左右,结论:南阳野生附子明显小于四川江油栽培附子,张仲景所用附子一般每枚重量约为3g。张仲景《伤寒杂病论》附子去皮科学内涵的研究。对比江油与南阳附子的附子皮占附子总重的比例,检测含水量和3种单酯型、3种双酯型生物碱含量。结果:江油、南阳的附子皮中3种单酯型生物碱总量分别为0.0064%、0.0186%,均低于去皮附子的0.0159%、0.0276%,也低于带皮附子的0.0181%和0.0243%;3种双酯型生物碱总量分别为0.3220%、0.8793%,均高于去皮附子的0.1251%、0.6853%,也高于带皮附子的0.1698%和0.5660%。江油附子皮约占附子总重的10%,而其所含双酯型生物碱总量占到整个附子的近19%;南阳附子皮约占总重的11%,而其所含双酯型生物碱总量占到整个附子的17%左右。结论:附子生用去皮的目的可能是为了降低毒性。二、张仲景《伤寒杂病论》附子“炮”法的挖掘与创新研究。以江油生附片为炮制对象,应用色差仪、质构仪、高效液相色谱仪,以外观性状(颜色、质地——“内外皆黄”、“坼”)、化学成分(单、双酯型生物碱含量,7种水溶性生物碱含量)、操作简便性等为考察指标,从古代干热法、现代烘烤法、清炒法和砂烫法中筛选具有张仲景时期的附子“炮”法相同质量的炮制方法。颜色方面肉眼观察与色差仪检测结果一致,砂烫法和现代烘烤法可达到内外皆黄,且同一批次及不同批次饮片之间的外观性状较接近。清炒法易炒至外焦内生,局部出现焦斑,饮片与粉末差异大。古代干热法重现性较差。质地方面手掰感官与质构仪检测结果一致,现代烘烤法与砂烫法的最大剪切力明显小于古代干热法和清炒法,且不同批次之间RSD值更小,说明炮制出的饮片更酥脆,工艺重现性更好。古代干热法、现代烘烤法、清炒法和砂烫法所制备炮制品双酯型生物碱含量较生品的0.1698%分别降低88.9%、90.5%、91.8%、93.5%,说明4种炮制品较生品毒性均有大幅降低,但古代干热法部分炮制品和清炒品口尝无麻舌感,说明这两种方法存在炮制过度的情况。4种炮制品的单酯型生物碱含量较生品的0.0181%增加297.2%、255.2%、368.0%、385.6%。生附子中7种水溶性生物碱的总量为0.1470%,炮制后除烘制品增加41.8%外,其它3种炮制品分别降低39.6%、52.7%、41.5%。应用综合评分法对4种方法进行比较,结果现代烘烤法0.9197>砂烫法0.8725>清炒法0.7212>古代干热法0.6629。结论:现代烘烤法与砂烫法均能够达到张仲景时期附子“炮”的外观性状,且能减毒增效,砂烫法简便易行,便于控制质量三、张仲景“炮”附子与药典炮附片的比较研究。黑顺片中单、双酯型生物碱,7种水溶性生物碱总量分别为0.0348%、0.0067%、0.0005%,砂烫为炮附片之后单酯型降低65.2%,双酯型则未检出,水溶性生物碱含量增至0.0018%。江油生附片中单、双酯型生物碱,水溶性生物碱含量分别为0.0181%、0.1698%、0.1470%,砂烫为“炮”附子后,单酯型生物碱含量增加168.0%,双酯型生物碱含量降低89.2%,水溶性生物碱含量降低41.5%。南阳生附片中单、双酯型生物碱,水溶性生物碱总量分别为0.0243%、0.5660%、0.1460%,砂烫为“炮”附子后,单酯型生物碱含量增加1028.4%,双酯型生物碱含量降低2371.6%,水溶性生物碱含量降低20.1%。再对

关键词：江油栽培附子南阳野生附子炮附子炮制方法物质基础

UPLC-MS^n法对生川乌、生附片化学成分的比较研究

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药物分析杂志 2017年第9期37卷 1640-1647页

作者：王蕾张先灵王鑫张语凡陈炯谭鹏李飞北京中医药大学北京100102 河北省中医院石家庄050011

目的:比较乌头母根(生川乌)与子根(生附片)化学成分的差异,为阐明川乌与附子功效不同的科学内涵提供依据。方法:采用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS),静电场轨道阱组合式高分辨质谱仪,ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 ... 详细信息

目的:比较乌头母根(生川乌)与子根(生附片)化学成分的差异,为阐明川乌与附子功效不同的科学内涵提供依据。方法:采用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS),静电场轨道阱组合式高分辨质谱仪,ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,质谱在正离子模式下进行检测。结果:生川乌中指认65个成分,生附片中指认60个成分,其中两者共有成分56个,生川乌具有黄草乌碱丁、10-羟基焦乌头碱、印乌头碱等9个特有成分,生附片具有10-羟基焦乌头原碱、14-苯甲酰尼奥灵等4个特有成分。结论:乌头的母根(生川乌)与子根(生附片)的化学成分存在较大差异,该差异可能与川乌和附子的功效不同有关。

关键词：生川乌生附片黄草乌碱丁羟基焦乌头碱印乌头碱超高效液相色谱-质谱特有成分

HPLC-MS法研究川乌炮制前后化学成分的变化

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北京中医药大学学报 2016年第4期39卷 298-303页

作者：秦语欣张先灵王蕾张语凡王鑫谭鹏李飞北京中医药大学中药学院北京100102

目的分析川乌炮制前后化学成分的变化,为深入阐明其炮制机理提供科学依据。方法采用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS),Thermo SCIENTIFIC高效液相色谱仪,Agilent ExtendC18色谱柱,检测波长240 nm,流动相为乙腈和0.2%氨水,梯度洗脱,... 详细信息

目的分析川乌炮制前后化学成分的变化,为深入阐明其炮制机理提供科学依据。方法采用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS),Thermo SCIENTIFIC高效液相色谱仪,Agilent ExtendC18色谱柱,检测波长240 nm,流动相为乙腈和0.2%氨水,梯度洗脱,质谱在正离子模式下进行检测。结果生川乌中检测到99个成分,制川乌中检测到106个成分,炮制前后共有成分53个,炮制后新增成分53个,消失成分46个。川乌生制品中共鉴定成分64个。结论川乌炮制后有多种成分发生改变,本方法较高效液相色谱(HPLC)法检测6种生物碱含量能更全面地反映川乌炮制前后物质基础的变化。

关键词：川乌炮制高效液相色谱-质谱联用技术化学成分

生川乌片炮制过程中生物碱含量随炮制时间变化的规律研究

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中华中医药学刊 2017年第7期35卷 1673-1675页

作者：张先灵秦语欣王蕾王鑫张语凡李飞北京中医药大学北京100102

目的:探寻生川乌片制备制川乌的适宜炮制方法和加热时间。方法:按照药典方法,以生川乌片制备制川乌,采用HPLC法,检测蒸制1~8 h和煮制1~6 h(间隔为1 h)的制川乌中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲... 详细信息

目的:探寻生川乌片制备制川乌的适宜炮制方法和加热时间。方法:按照药典方法,以生川乌片制备制川乌,采用HPLC法,检测蒸制1~8 h和煮制1~6 h(间隔为1 h)的制川乌中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰乌头原碱等6种生物碱的含量,分析制川乌片中单、双酯型生物碱的总量随炮制时间的变化规律。结果:生川乌片制备的制川乌双酯型生物碱含量均在炮制1 h达到《中华人民共和国药典》规定的不超过0.040%的限量要求,且内无白心,但此时麻舌感强烈,随炮制时间延长,麻舌感逐渐减弱。蒸2~8 h制品单酯型生物碱含量符合《中华人民共和国药典》的0.070%~0.15%的含量要求,在蒸5 h达最高,较生品升高约142%;煮制品均低于《中华人民共和国药典》规定的含量范围。结论:以制川乌传统质量和生物碱含量要求为指标,生川乌片制备制川乌选用蒸法炮制4~6 h为宜。

关键词：生川乌片制川乌生物碱炮制过程控制

多种统计方法比较黄连姜制工序中影响生物碱含量的因素

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第2期20卷 265-271页

作者：王鑫袁金凤彭诗涛张语凡王蕾张先灵李飞北京中医药大学中药学院北京102488

目的:测定黄连不同姜制品中6种生物碱的含量,采用多种统计方法对数据进行分析,找出姜制工序中影响姜黄连质量的因素。方法:采用高效液相色谱法测定黄连不同姜制品中药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱的含量。运用... 详细信息

目的:测定黄连不同姜制品中6种生物碱的含量,采用多种统计方法对数据进行分析,找出姜制工序中影响姜黄连质量的因素。方法:采用高效液相色谱法测定黄连不同姜制品中药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱的含量。运用主成分分析、聚类分析、LSD(Least-Significant Difference)检验、独立t检验对结果进行分析。结果:黄连经姜炙后,表小檗碱、黄连碱含量略有上升,药根碱、非洲防己碱、巴马汀、小檗碱含量略有下降,传统姜炙品中各成分含量均高于烘制品。聚类分析发现榨汁组和煮汁组可以聚为一类;烘法和炙法具有明显不同的聚类,对黄连姜制品中的6种生物碱之和进行LSD检验,亦表明烘法与炙法具有显著性差异。对榨汁组进行独立t检验,结果表明姜汁与黄连饮片拌匀或闷润至透心在6种生物碱上无显著性差异,LSD与独立t检验的结果与聚类分析的结果一致。结论:采用同一批次黄连炮制所得的姜制品中,姜的来源、不同方法制备的姜汁及闷润过程对6种生物碱影响不大,加热方式可能是影响姜黄连质量的因素。考虑到润至透心需加入大量水稀释姜汁,炒干所需工时较长,故辅料姜汁与黄连饮片拌匀吸尽即可。

关键词：黄连姜制工序生物碱含量主成分分析聚类分析 LSD检验独立t检验

基于张仲景学术思想的炮附子4种炮制方法的比较研究

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第5期20卷 716-721页

作者：彭诗涛张先灵袁金凤张语凡王鑫孙美玲李飞北京中医药大学中药学院北京102488

目的:采用综合评分法比较基于张仲景炮制思想的4种炮附子饮片质量,为炮附子的现代炮制方法提供依据。方法:利用CM-5分光测色计、TMS-Pro质构仪等客观量化检测仪器,以颜色、质地、3种单酯型生物碱含量、麻舌感结合3种双酯型生物碱含量、... 详细信息

目的:采用综合评分法比较基于张仲景炮制思想的4种炮附子饮片质量,为炮附子的现代炮制方法提供依据。方法:利用CM-5分光测色计、TMS-Pro质构仪等客观量化检测仪器,以颜色、质地、3种单酯型生物碱含量、麻舌感结合3种双酯型生物碱含量、7种水溶性生物碱含量以及操作简便性为指标,以药典法炮附片为参照,采用综合评分法从古代干热法、现代烘烤法、清炒法和砂烫法中筛选质量较优的炮附子饮片。结果:各指标综合评分结果为:现代烘烤法≈砂烫法>清炒法>古代干热法>药典法。现代烘烤法和砂烫法所制备的炮附子均可达到内外皆黄、质地酥脆的传统质量要求。与生附片比较,3种双酯型生物碱含量降低88.9%~90.5%,3种单酯型生物碱含量增加255.2%~385.6%;与药典炮附片比较,3种单酯型生物碱和7种水溶性生物碱含量均显著增加。结论:现代烘烤法和砂烫法炮附子毒性成分含量低,有效成分含量高,且无胆巴液浸泡工序、操作简便易行、生产周期短。做为秉承张仲景学术思想且便于现代操作的炮附子炮制方法,值得挖掘与传承。

关键词：张仲景炮附子炮附片综合评分法质量评价

基于含水量和单双酯型生物碱含量探究栽培和野生附子去皮的差异

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第2期20卷 260-264页

作者：刘鹏孙美玲张荳彭诗涛张先灵李飞胡慧华北京中医药大学中药学院北京102488

目的:基于含水量和单双酯型生物碱含量,探究栽培附子(江油附子)和野生附子(南阳附子)去皮的差异。方法:测定江油附子和张仲景使用的南阳附子去皮前后含水量,采用药典法测定附子去皮前后单双酯型生物碱的含量。结果:江油附子皮含水量显... 详细信息

目的:基于含水量和单双酯型生物碱含量,探究栽培附子(江油附子)和野生附子(南阳附子)去皮的差异。方法:测定江油附子和张仲景使用的南阳附子去皮前后含水量,采用药典法测定附子去皮前后单双酯型生物碱的含量。结果:江油附子皮含水量显著高于南阳附子,南阳附子皮占整个附子的重量比例显著高于江油附子,江油附子去皮前含水量显著高于去皮后,南阳附子去皮后含水量显著高于去皮前。南阳附子皮单双酯型生物碱含量均显著高于江油附子。江油和南阳附子去皮前和去皮后单酯型生物碱含量均无显著差异,但江油附子双酯型生物碱含量去皮前显著高于去皮后,南阳附子双酯型生物碱含量去皮前显著低于去皮后。结论:江油附子去皮原因可能与附子皮中含有较高的双酯型生物碱和含水量有关,张仲景使用南阳附子去皮可能与其占比高,含有较高的双酯型生物碱,去皮后能降低毒性且便于生物碱溶出有关。

关键词：附子炮制生物碱含水量

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微尺度下润湿性表面对双气泡传热特性的影响

化学工程 2024年第5期52卷 13-18,38页

作者：战洪仁纪柏辰刘东灵刘德彬张先珍李帅沈阳化工大学机械与动力工程学院辽宁沈阳110142

为探究混合润湿表面双气泡生长过程的特点和传热特性,利用格子Boltzmann方法研究混合润湿性表面不同因素对生长和传热过程的影响规律。结果表明:对于纯润湿性表面,随着润湿性的降低,气泡成核时间减少,气泡脱离表面时间呈增加趋势,双气... 详细信息

为探究混合润湿表面双气泡生长过程的特点和传热特性,利用格子Boltzmann方法研究混合润湿性表面不同因素对生长和传热过程的影响规律。结果表明:对于纯润湿性表面,随着润湿性的降低,气泡成核时间减少,气泡脱离表面时间呈增加趋势,双气泡生长过程的平均热流密度呈减少趋势。混合表面可以实现相比纯润湿性表面更高的脱离频率和更好的换热效果,混合润湿表面整体脱离频率在(L_(q)/△x)>0.37(△x0.37(△x0.37(△x<30)时呈降低趋势,L_(s)=3(L_(s)/L_(q)=0.27)是最佳换热尺寸,在(L_(q)/△x)≤0.37(△x≥30)时呈先增加后降低趋势,L_(s)=5(L_(s)/L_(q)=0.45)为最佳换热尺寸。

关键词：格子Boltzmann 混合润湿性生长过程换热效果脱离时间

吴茱萸不同炮制品中挥发油成分气相色谱-质谱分析

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中国中医药信息杂志 2016年第12期23卷 91-95页

作者：陈炯高悦谭鹏王蕾张先灵张语凡王鑫李飞北京中医药大学北京100102

目的分析吴茱萸生品、清水炙品及不同辅料炮制品(甘草炙、姜炙、醋炙、盐炙、黄酒炙、黄连炙)挥发油的化学成分,探讨炙法及辅料对吴茱萸挥发油成分的影响。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用气相色谱-质谱法检测并鉴定生品及各炮制品... 详细信息

目的分析吴茱萸生品、清水炙品及不同辅料炮制品(甘草炙、姜炙、醋炙、盐炙、黄酒炙、黄连炙)挥发油的化学成分,探讨炙法及辅料对吴茱萸挥发油成分的影响。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用气相色谱-质谱法检测并鉴定生品及各炮制品中的挥发油成分。结果吴茱萸生品、清水炙品及各炮制品挥发油含量由高到低依次为:生品(0.71%)>姜炙品(0.69%)>黄连炙品(0.65%)>黄酒炙品(0.63%)=清水炙品(0.63%)>醋炙品(0.59%)=盐炙品(0.59%)>甘草炙品(0.51%)。生品较清水炙品减少了13个成分,增加了12个成分;盐炙品较清水炙品减少了8个成分,增加了3个成分,醋炙品较清水炙品减少了6个成分,增加了6个成分;黄酒炙品较清水炙品减少了9个成分,增加了10个成分;姜炙品较清水炙品减少了10个成分,增加了11个成分;黄连炙品较清水炙品减少了11个成分,增加了13个成分;甘草炙品较清水炙品减少了19个成分,增加了16个成分。结论炙法及辅料均会对吴茱萸挥发油类成分组成及含量产生影响,不同辅料的影响不同。

关键词：吴茱萸炮制挥发油气相色谱-质谱法