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卡氏肺孢子虫肺炎肺部细胞凋亡及凋亡相关基因caspase-3、TNF-α...

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作者：廖于峰青岛大学

学位级别：硕士

卡氏肺孢子虫肺炎是发生于免疫抑制宿主中的一种致命的机会感染性疾病,尤其好发于艾滋病、白血病、恶性肿瘤、器官移植、接受皮质激素等免疫抑制疗法的患者。人们对卡氏肺孢子虫肺炎的临床表现、诊疗、预后已经有了较深的了解,但对其特... 详细信息

卡氏肺孢子虫肺炎是发生于免疫抑制宿主中的一种致命的机会感染性疾病,尤其好发于艾滋病、白血病、恶性肿瘤、器官移植、接受皮质激素等免疫抑制疗法的患者。人们对卡氏肺孢子虫肺炎的临床表现、诊疗、预后已经有了较深的了解,但对其特异性损伤呼吸器官功能的机制和途径知之甚少。本研究拟探讨卡氏肺孢子虫肺炎肺部细胞凋亡及其凋亡相关基因的表达和意义。目的:探讨卡氏肺孢子虫肺炎肺部细胞凋亡及其凋亡相关基因caspase-3、TNF-α、Fas、Bax的表达和意义。方法:wistar大鼠皮下注射地塞米松建立卡氏肺孢子肺炎模型。用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IFN-γ和sIL-2R表达的水平。采用胰酶消化和免疫黏附法分离、纯化肺泡Ⅱ型上皮细胞,用Hoechst 33258染色荧光显微镜下检测凋亡的细胞。通过光镜、电镜、末端脱氧核糖核酸转移酶依赖的末端标记法来检测肺组织细胞凋亡的情况,同时用免疫组化SABC法来检测凋亡相关基因caspase-3、Fas、Bax的表达。结果:支气管肺泡灌洗液中,卡氏肺孢子虫肺炎阳性组TNF-α、IFN-γ和sIL-2R的含量远高于阴性组和健康对照组（P0.05）。卡氏肺孢子虫肺炎大鼠组中caspase-3和Fas的表达呈正相关（r=0.5641,P≤0.01）。

关键词：卡氏肺孢子虫肺炎细胞凋亡原位末端标记法(TUNEL) 凋亡相关基因肺纤维化

抑癌基因p15反义RNA高表达是急性髓系白血病细胞中的频发事件

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中华医学遗传学杂志 2016年第2期33卷 155-159页

作者：廖于峰乐东海竺展坤浙江省宁波市第二医院检验中心 315010

目的探讨急性髓系白血病（acutemyeloidleukemia，AML）患者中抑癌基因p15反义RNA（p15AS）的表达及其临床意义。方法应用单链特异引物逆转录的实时定量PCR方法验证AML细胞系存在p15AS，分析43例AML患者和21例良性血液病患者（对照组）... 详细信息

目的探讨急性髓系白血病（acutemyeloidleukemia，AML）患者中抑癌基因p15反义RNA（p15AS）的表达及其临床意义。方法应用单链特异引物逆转录的实时定量PCR方法验证AML细胞系存在p15AS，分析43例AML患者和21例良性血液病患者（对照组）骨髓p15AS和p15mRNA的表达水平，并分析p15AS的表达量与AML临床特征的关系。应用流式细胞术检测AML患者和对照组骨髓中p15蛋白的表达。结果急性髓系白血病细胞系中存在p15AS高表达。与对照组相比，AML患者p15AS表达增加而p15mRNA表达下调（t=41．45，P=0．000；t=-24．76，P=0．000）。AML组骨髓细胞中p15蛋白的表达[13．2％（10．2％～18．50％）]较对照组E84．5％（80．25％～86．8％）]显著减少，差异有统计学意义（Z=-6．22，P=0．000）。P15AS表达水平与AML患者的性别、年龄、FAB分型、初诊白细胞计数、血小板数量、骨髓增生程度和细胞遗传学预后分组无相关性（均P〉0．05）。结论p15AS高表达可能是AML的常见事件，并可能在抑癌基因p15表观遗传沉默中具有重要作用。

关键词：急性髓系白血病 p15基因反义RNA

直接化学发光法检测抗环瓜氨酸肽抗体的应用评估

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中国卫生检验杂志 2012年第4期22卷 809-810,817页

作者：余秋云戴金华廖于峰浙江省宁波市第二医院检验中心浙江宁波315010

目的:评估直接化学发光免疫分析法(CLIA)检测血清抗环瓜氨酸肽(抗CCP)抗体的临床应用。方法:用直接CLIA、酶联免疫吸附试验(ELISA)同时检测RA患者56例、非RA其他疾病患者69例和正常对照35例血清中的抗CCP抗体。结果:直接CLIA法检测抗CC... 详细信息

目的:评估直接化学发光免疫分析法(CLIA)检测血清抗环瓜氨酸肽(抗CCP)抗体的临床应用。方法:用直接CLIA、酶联免疫吸附试验(ELISA)同时检测RA患者56例、非RA其他疾病患者69例和正常对照35例血清中的抗CCP抗体。结果:直接CLIA法检测抗CCP抗体的批内变异系数为2.5%～3.8%、批间变异系数为2.8%～5.2%,明显低于ELISA法(5.6%～6.9%,6.7%～8.2%)。直接CLIA法检测抗CCP抗体的平均回收率为99.5%。对RA诊断的敏感性为73.2%,特异性为96.2%,与ELISA法检测结果总体符合率达96.9%。结论:采用直接CLIA法检测抗CCP抗体具有较高的敏感性和特异性,可满足临床需要。

关键词：化学发光法酶联免疫吸附试验抗环瓜氨酸肽抗体类风湿性关节炎评估

成人急性淋巴细胞白血病p15和p73基因启动子异常甲基化及临床意义

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实用医学杂志 2014年第21期30卷 3458-3461页

作者：廖于峰戴金华马建波竺展坤徐瑾浙江省宁波市第二医院检验中心 315010

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者p15和p73基因启动子Cp G岛的甲基化状况及其临床意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)的方法检测43例ALL患者骨髓p15和p73基因启动子甲基化频率,同时以40例缺铁性贫血患者作为对照。卡方检验分... 详细信息

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者p15和p73基因启动子Cp G岛的甲基化状况及其临床意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)的方法检测43例ALL患者骨髓p15和p73基因启动子甲基化频率,同时以40例缺铁性贫血患者作为对照。卡方检验分析其甲基化程度与ALL临床参数之间的关系。结果:ALL中p15和p73基因甲基化频率分别为41.9%(18/43)和25.6%(11/43),两基因同时甲基化频率为18.6%(8/43)。p15和p73基因同时甲基化的B-ALL患者比未甲基化者有较高的初诊外周血白细胞总数(χ2=6.431,P=0.011)。单一p15或p73基因甲基化与完全缓解(CR)率无相关性(均P>0.05),但两基因同时甲基化的患者CR率明显低于未甲基化者(25.0%vs 86.4%,χ2=10.52,P=0.001)。p15和p73基因甲基化在不同年龄、不同细胞谱系、标危和高危组间其差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:p15和p73基因甲基化是成人ALL的常见事件,p15和p73甲基化与初诊白细胞总数、治疗反应等临床预后指标相关,基因异常甲基化可作为ALL预后的分子标志物。

关键词：急性淋巴细胞白血病 p15基因 p73基因 DNA甲基化

血清CA72-4水平与2型糖尿病的相关性研究

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中国卫生检验杂志 2013年第16期23卷 3250-3252页

作者：廖于峰戴金华马建波余秋云茅奇峰宁波市第二医院检验中心浙江宁波315010

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者CA72-4水平和代谢状况的相关性。方法以320例经临床确诊的T2DM患者和同期年龄、性别、体重指数相匹配的379例健康对照为研究对象。检查项目包括CA72-4、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白HbA1c和血脂等。分析糖... 详细信息

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者CA72-4水平和代谢状况的相关性。方法以320例经临床确诊的T2DM患者和同期年龄、性别、体重指数相匹配的379例健康对照为研究对象。检查项目包括CA72-4、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白HbA1c和血脂等。分析糖尿病患者CA72-4水平与代谢状况、微血管病变和治疗方式的相关性。结果T2DM组和对照组CA72-4水平分别为3.6(2.9～4.4)U/ml和3.4(2.7～4.3)U/ml,两者差异无统计学意义。T2DM患者CA72-4水平与年龄、性别、病程、体重指数、空腹血糖、HbA1c、血脂、微血管病变和治疗方式无相关性。结论 CA72-4水平与T2DM无相关性。T2DM患者CA72-4水平升高,应考虑别的良性或恶性疾病。

关键词： 2型糖尿病 CA72—4水平微血管并发症代谢状况

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药表型分析与整合子基因检测的研究

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中华医院感染学杂志 2015年第23期25卷 5301-5304页

作者：陈燕敏廖于峰芮球红宁波市第二医院检验科浙江宁波315010

目的探讨医院ICU产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性、ESBLs基因表型及整合子分布特点,为临床治疗提供参考依据。方法选择2010年1月-2012年1月医院IUC住院患者送检标本中分离出肺炎克雷伯菌共97株,采用VITEK-2系统进行细... 详细信息

目的探讨医院ICU产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性、ESBLs基因表型及整合子分布特点,为临床治疗提供参考依据。方法选择2010年1月-2012年1月医院IUC住院患者送检标本中分离出肺炎克雷伯菌共97株,采用VITEK-2系统进行细菌鉴定,K-B纸片扩散法进行药敏试验,数据采用SPSS 16.0软件进行统计分析。结果 97株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌32株,检出率为33.0%;32株产ESBLs肺炎克雷伯菌株中blaTEM,、blaSHV和blaCTX-M基因检出率分别为53.1%、9.4%和71.9%;头孢唑林、头孢呋辛、哌拉西林、头孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸和哌拉西林/他唑巴坦耐药率在产与非产ESBLs菌株间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ICU分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌流行严重,以携带blaCTX-M和blaTEM为主,整合子基因为intΙ1,未检出intΙ2和intΙ3基因,intΙ1基因可能使部分产ESBLs株肺炎克雷伯菌耐药率增加。

关键词：重症监护病房肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶耐药基因

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玻璃酸钠对翼状胬肉术后眼表修复的效果研究

现代实用医学 2015年第9期27卷 1129-1130页

作者：吴姗姗廖于峰宁波市第二医院宁波315010

目的探讨玻璃酸钠滴眼液对翼状胬肉手术后眼表修复的作用。方法选择原发性翼状胬肉手术患者80例86眼,分为玻璃酸钠组和对照组,各43眼。玻璃酸钠组术后给予氧氟沙星眼膏、妥布霉素地塞米松滴眼液和玻璃酸钠滴眼液滴眼;对照组仅使用氧氟... 详细信息

目的探讨玻璃酸钠滴眼液对翼状胬肉手术后眼表修复的作用。方法选择原发性翼状胬肉手术患者80例86眼,分为玻璃酸钠组和对照组,各43眼。玻璃酸钠组术后给予氧氟沙星眼膏、妥布霉素地塞米松滴眼液和玻璃酸钠滴眼液滴眼;对照组仅使用氧氟沙星眼膏和妥布霉素地塞米松滴眼液滴眼。观察患者术前1 d、术后1、7、14及30 d眼表功能,进行泪膜破裂时间(BUT)监测和基础泪液分泌试验(Schirmer I test)。结果两组BUT术前1 d、术后1 d及术后30 d差异无统计学意义(>0.05);术后7、14 d玻璃酸钠组BUT均明显高于对照组,差异均有统计学意义(均0.05);术后7、14 d玻璃酸钠组Schirmer I test均明显低于对照组,差异均有统计学意义(均<0.05)。结论玻璃酸钠滴眼液具有促进翼状胬肉手术后眼表修复的作用。

关键词：眼翼状胬肉玻璃酸钠术后

膀胱移行细胞癌尿沉渣RASSF1A基因启动子的甲基化状况及意义

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浙江医学 2010年第6期32卷 843-845,848页

作者：马建波廖于峰魏任雄贾广成宁波市第二医院检验中心 315010 宁波市第二医院泌尿外科

目的探讨膀胱癌患者尿沉渣细胞中RASSF1A基因启动子CpG岛的甲基化状况及其临床意义.方法选取病理确诊的39例膀胱癌标本,采用甲基化特异PCR方法检测膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣RASSF1A基因启动子CpG岛的甲基化异常频率,同时以45例非... 详细信息

目的探讨膀胱癌患者尿沉渣细胞中RASSF1A基因启动子CpG岛的甲基化状况及其临床意义.方法选取病理确诊的39例膀胱癌标本,采用甲基化特异PCR方法检测膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣RASSF1A基因启动子CpG岛的甲基化异常频率,同时以45例非肿瘤性泌尿系疾病患者及14例健康志愿者的相关检测情况作为对照,分析膀胱肿瘤患者RASSF1A基因异常甲基化的情况.结果膀胱癌组RASSF1A基因启动子甲基化阳性率（61.5%,24/39）显著高于非肿瘤组（4.4%,2/45）（P〈0.01）,非肿瘤组与志愿组间（阳性率为0）并无明显差异（P＞0.05）;尿沉渣RASSF1A基因甲基化对膀胱癌诊断的敏感性为61.5%（24/39）,特异性为95.6%（43/45）.性别、年龄、病理分级及临床分期与RASSF1A基因甲基化均无明显相关性（均P＞0.05）.膀胱癌肿瘤组织RASSF1A基因启动子甲基化阳性率为69.2%（27/39）.膀胱癌肿瘤组织和配对的尿沉渣同时出现RASSF1A基因甲基化为20例,同时仅出现非甲基化为8例,两者明显相关（P〈0.05）.结论 RASSF1A基因异常甲基化可能是膀胱癌的早期事件,其异常甲基化状态可能成为非侵入性诊断膀胱癌的分子标志物之一.

关键词：膀胱移行细胞癌 RASSF1A DNA甲基化尿沉渣

循环miRNA-141对前列腺癌的诊断和预后价值研究

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中国病理生理杂志 2014年第10期30卷 1887-1890页

作者：廖于峰戴金华茅奇峰竺展坤贾广成宁波市第二医院检验科浙江宁波315010 宁波市第二医院泌尿外科浙江宁波315010

目的：研究血清miR-141在前列腺癌中的表达及临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR检测75例前列腺癌和52例良性前列腺增生（BPH）患者,以及40例健康对照血清miR-141的相对表达水平。结果：前列腺癌血清miR-141的表达量较BPH和健康对照增... 详细信息

目的：研究血清miR-141在前列腺癌中的表达及临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR检测75例前列腺癌和52例良性前列腺增生（BPH）患者,以及40例健康对照血清miR-141的相对表达水平。结果：前列腺癌血清miR-141的表达量较BPH和健康对照增高,差异有统计学意义（P〈0.01）。但miR-141在BPH组和对照组中的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。ROC曲线显示miR-141能够较好地区分前列腺癌与BPH（或健康对照）,曲线下面积分别为0.785（95%CI∶0.689～0.823）和0.801（95%CI∶0.723～0.868）。血清miR-141表达与Gleason积分、临床分期和骨转移相关（均P〈0.05）,随着临床分期的增加,miR-141的表达水平增加;但miR-141表达量与患者年龄、肿瘤复发和血清前列腺特异性抗原水平无关（均P〉0.05）。结论：循环miR-141可作为非侵入性诊断前列腺癌并且判断其预后的分子标志物。

关键词：前列腺肿瘤良性前列腺增生 miR-141