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盐藻类胡萝卜素合成调控相关的转录因子基因DpAP2的作用分析

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盐藻类胡萝卜素合成调控相关的转录因子基因DpAP2的作用分析

作者：庞冰冰广西师范大学

学位级别：硕士

类胡萝卜素是盐藻的重要生物活性物质,具有提高免疫力、抗氧化、清除自由基、抑制心脑血管疾病、预防癌症等作用,在医药、保健、食品、化妆品等行业应用广泛。但其含量较低,极大地限制了盐藻保健价值的开发。如何提高微藻中类胡萝卜素... 详细信息

类胡萝卜素是盐藻的重要生物活性物质,具有提高免疫力、抗氧化、清除自由基、抑制心脑血管疾病、预防癌症等作用,在医药、保健、食品、化妆品等行业应用广泛。但其含量较低,极大地限制了盐藻保健价值的开发。如何提高微藻中类胡萝卜素含量是现阶段面临的重要问题。前期克隆了盐藻类胡萝卜素合成途径的3个基因及其启动子,研究了这些基因对盐振荡和限氮胁迫的响应,同时发现一些顺式作用元件在这些启动子中广泛存在,但与这些元件相结合的转录因子对盐藻类胡萝卜素生物合成的调控机理尚未明确。AP2/ERF超家族是植物最大的转录因子（TFs）家族之一,包括AP2、CBF/DREB、ERF和RAV等4个亚家族,它与植物的生长发育、类胡萝卜素代谢和对各种胁迫的响应有关。深入探讨DpAP2的作用机制,对于阐明盐藻类胡萝卜素分子机制具有重要的科学意义。该研究从分子生物学,生物信息学、生化技术手段研究盐藻转录因子基因DpAP2对类胡萝卜素合成的影响,以挖掘类胡萝卜素合成途径重要的关键酶和调控基因。对差异表达基因中获得调控类胡萝卜素合成途径相关的DpAP2的核心片段,进行RACE扩增获得DpAP2全长序列,并进行生物信息学分析;构建盐藻c DNA文库以及酵母双杂交系统诱饵载体,进行酵母毒性和自激活检测,利用酵母双杂交技术筛选出转录因子DpAP2互作的蛋白;此外,纯化了DpAP2蛋白,制备了DpAP2抗体,用DpAP2抗体和盐藻的样品进行了染色质免疫共沉淀实验以获得与DpAP2蛋白结合的基因片段,了解受DpAP2蛋白调控的下游靶标基因;利用Genome Walking方法获得盐藻DpAP2启动子序列并对其活性功能进行验证;为了提升类胡萝卜素的生物合成含量,构建了高产类胡萝卜素藻种植株,并通过PEG、Ca Cl、GA3、Me JA处理盐藻从而提高藻种类胡萝卜素的合成含量,进一步解析微藻类胡萝卜合成的响应机制。研究结果如下:DpAP2基因的c DNA全长为3129 bp,开放阅读框（ORF）为2331 bp,编码776个氨基酸,3′非翻译区（UTR）为582bp,5′UTR为216bp,DpAP2基因登录号为ON548537。通过生物学信息分析,DpAP2蛋白等电点为9.14,相对分子质量83915.48,原子总数为11578。DpAP2蛋白是一种亲水性不稳定蛋白。DpAP2包含两个AP2域（AP2-R1和AP2-R2）,与拟南芥的结构域高度相似,为下一步互作蛋白和靶基因的鉴定奠定了基础。初级文库的库容达到了2.9x10～8pfu/m L,远高于标准文库的库容;克隆子的基因重组率均为99%,利用酵母双杂交技术筛选DpAP2的互作蛋白（可能与类胡萝卜素合成相关的蛋白质）,筛选出了3个无重复的互作蛋白。通过生物信息学分析,预测它们分别具有DNA结合转录因子活性、蛋白激酶活性和α-D-磷酸已糖变位酶活性。然而,目前还缺乏对其功能的详细了解。通过Ch IP-Seq分析共鉴定出902个DpAP2的结合基因。基因富集分析表明,这些结合基因与RNA转运、碳代谢、次生代谢产物生物合成、脂肪酸代谢等功能相关。尤其是DpAP2调控的部分重要的靶基因可能通过参与糖类代谢（包括淀粉和蔗糖代谢、光合作用、糖酵解/糖异生、三羧酸循环）和类胡萝卜素生物合成（如Z-ISO、CRTISO、AOG）,从而影响类胡萝卜素含量。对DpAP2进行超表达,工程藻种细胞培养9d时类胡萝卜素含量达到3.17 mg/g DW,与WT细胞（2.16 mg/g DW）相比,类胡萝卜素含量提高了46.76%,PEG（80 ppm）和Ca Cl2（40 ppm）处理后类胡萝卜素的含量显著提升,分别达到3.1mg/g DW和2.78mg/g DW。且处理组类胡萝卜素的抗氧化活性（超氧化物歧化酶、还原能力）及蛋白质含量明显高于对照组,通过荧光定量分析,PDS、ZDS的相对表达量显著上升。对DpAP2启动子进行克隆,获得了1881bp特异启动子片段。通过Plant CARE分析,发现了启动子的基本元件CAAT-box和TATA-box。另外,还包含胁迫诱导元件,如光诱导元件G-box、赤霉素反应元件P-box、脱落酸反应元件ABRE和干旱反应元件MBS等。用不同浓度的Me JA（10、20、50、100μM）和GA3（10、20、50、100μM）处理藻细胞,发现外源物质Me JA存在剂量效应,即高浓度的Me JA（10-100μM）会抑制类胡萝卜素的积累,DpAP2、PSY、PDS、GGPS的相对表达量显著下降,从而抑制类胡萝卜素的积累。相反,当GA处理藻细胞时,DpAP2、PDS、GGPS的相对表达量显著上升,从而促进类胡萝卜素的合成。

关键词：转录调控活性物质类胡萝卜素合成转录因子基因盐藻

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魔方公寓资产支持证券的风险评价

魔方公寓资产支持证券的风险评价

作者：庞阿杰上海师范大学

学位级别：硕士

2016年6月3日,国务院办公厅发布的《关于加快培育和发展住房租赁市场的若干意见》中指出“支持符合条件的住房租赁企业发行债券、不动产证券化产品,稳步推进房地产投资信托基金试点”。政策出台,各大房地产商纷纷计划发行长期住房租赁... 详细信息

2016年6月3日,国务院办公厅发布的《关于加快培育和发展住房租赁市场的若干意见》中指出“支持符合条件的住房租赁企业发行债券、不动产证券化产品,稳步推进房地产投资信托基金试点”。政策出台,各大房地产商纷纷计划发行长期住房租赁资产证券化产品。魔方公寓率先推出了第一支长期住房租赁资产证券化产品,随后新派公寓、保利地产和招商蛇口分别推出了自己长期住房租赁资产证券化产品。随着资本市场的不断壮大和完善,资产证券化在我国发展非常的迅速,截至2019年6月27日,共计历史发行3,159个,涉及金额64,244.34亿元;现存续的2,157个,涉及金额30,850.37亿元。资产证券化产品本身是一种风险较低的证券,但是由于这样一种融资模式的复杂性,我们对这样一种产品的低风险的构成认识不够深入。本文通过案例对产品的结构、定价和基础资产所涉及的风险进行深入分析,将风险结构量化,深入认识和了解资产证券化产品的风险结构和低风险的程度,为资产证券产品的投资和管理提供支持,具有一定的现实意义。首先,本文介绍了我国资产证券化的基本情况,并介绍了资产证券化的基本理论。在此基础上根据典型性和新颖性原则选择了本文的案例-魔方公寓资产支持计划,通过魔方公寓资产支持计划的结构、定价和基础资产进行分析,对魔方公寓资产支持计划的风险进行识别,建立一个三层的风险评价指标体系。目标层是魔方公寓资产支持证券的风险,第二层包括结构风险、定价风险、基础资产风险和其他风险构成,第三层是21个具体风险。然后,利用熵的原理对综合模糊评价法进行完善,指标的权重通过熵权法确定,克服主观性,增强客观性。利用构建的基于熵权法的模糊综合评价法模型对魔方公寓资产支持计划风险进行分层评价。对评价的结果进行分析,探究魔方公寓资产支持证券的风险结构以及风险高低,通过与实际情况进行比较分析,说明模型能较为合理的评价该产品的风险水平。最后,本文在对魔方公寓资产支持计划的风险评价的基础上,对长期住房租赁资产证券化产品的管理和投资提出风险控制措施的建议,并结合魔方公寓资产支持证券进行有针对性的分析。着重表述了在结构设计各方以及定价的风险控制,参与各方应该保持中立勤勉推动产品的正常运作,服务中介机构保持一定的质量控制,保证信息的准确和完整,以期降低资产证券化产品风险事件的发生,保障项目的顺利进行。

关键词：魔方公寓长期住房租赁资产证券化模糊分析法熵权法

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非线性表面波在不定介质中的传输特性

非线性表面波在不定介质中的传输特性

作者：庞珊上海大学

学位级别：硕士

所谓表面波，就是指在两种介质的界面传播，而在与其垂直的方向上衰减的电磁波。近年来，表面波在负介电常数和负磁导率这种负折射介质中的传播引起了人们的广泛关注。负折射介质丰富了表面波传播的研究领域，也得到了与传统介质中完全... 详细信息

所谓表面波，就是指在两种介质的界面传播，而在与其垂直的方向上衰减的电磁波。近年来，表面波在负介电常数和负磁导率这种负折射介质中的传播引起了人们的广泛关注。负折射介质丰富了表面波传播的研究领域，也得到了与传统介质中完全不同的物理现象。自从2003年实现非线性负折射介质之后，对负折射介质中非线性表面波的研究就成了热点。在单介质界面，负折射介质既可以支持自聚焦非线性表面波，也可以支持自散焦非线性表面波。非线性波导中也可以传播非线性表面波，研究表明负折射介质为芯，被克尔非线性介质包围的波导可以支持一种非线性模式，这种模式是不能在传统波导中存在的。非线性负折射波导还可以传播像亮暗孤子一样的非线性模式。一般而言，人们都假定负折射介质是各向同性的。然而，在实际中，材料都是各向异性的，取决于金属环和金属圆柱的取向。不定介质是各向异性介质中的一种，它的介电常数和磁导率可以随机为正负，这样的介质有4种不同类型的色散，所以就有更多的电磁学性质。研究表明：不定介质和传统介质的单界面可以传播线性表面波;不定介质为中芯的波导可以支持快波导模和慢波表面波;克尔非线性不定介质和线性介质的单界面也可以支持非线性表面波等等。在本论文中，我们主要对非线性传统介质和线性不定介质单界面的非线性表面波做了理论的研究。研究取得了以下的成果：1.根据电磁波介质界面的连续性，我们求出了非线性表面波的色散方程。通过对频率区间进行了分类，分别讨论了每一种情况下的表面波的存在情况。研究发现这种表面波与不定介质中波的传播是不同的，全截止介质可以支持非线性表面波而无截止介质不能支持非线性表面波。2.我们发现在第一种全截止介质中，存在一个非线性表面波的频率奇点，在这一点附近群速度会忽然发生从负到正的转变。这在群速度控制学中有重要的应用。

关键词：表面波不定介质色散群速度

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2型糖尿病中医防治指南

环球中医药 2024年第5期17卷 973-982页

作者：中国医师协会中西结合医师分会内分泌与代谢病专业委员会北京中西结合学会内分泌专业委员会倪青庞晴杨亚男李雨倩中国医师协会中西结合医师分会内分泌与代谢病专业委员会北京中西结合学会内分泌专业委员会

伴随临床医学高质量发展趋势,循证临床已成为临床医生的思维范式。由政府、行业学会引领制定的临床诊疗标准、指南、共识、规范越来越受临床医生的重视。这些诊疗指南还方便了非专业医生的临床决策,对诊疗实践指引,成效显著。应广大读... 详细信息

伴随临床医学高质量发展趋势,循证临床已成为临床医生的思维范式。由政府、行业学会引领制定的临床诊疗标准、指南、共识、规范越来越受临床医生的重视。这些诊疗指南还方便了非专业医生的临床决策,对诊疗实践指引,成效显著。应广大读者建议,经我刊编委会讨论,决定在本刊开设“标准指南共识规范”栏目。期待各行业学会、专业委员会的标准、指南、规范能在我刊发布。把中医学期刊办成临床医师,特别是青年医师、基层医师、广大医学生和中医从业者的良师益友,一直是我刊的办刊宗旨、追求目标。鉴于当前中医RCT研究数量少、质量良莠不齐,而实践经验总结多、证据确凿等特点,本刊鼓励从临床实践出发,基于循证医学原理,采用Cochran手册制定的标准对文献质量进行评价与分析,采用GRADE小组制定的推荐强度分级标准推荐证据等级,按照疾病的临床诊疗需求,根据专家共识分别确定循证病证结合诊断、病证结合治疗和病证结合康复等措施,以更有针对性地指导临床实践。欢迎各学术团体积极组织制定相关标准、指南、共识、规范,本刊及时组织行业专家论证发布。

关键词：临床医生青年医师临床决策基层医师临床诊疗临床医师临床实践学术团体