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应用代谢途径流量模型探讨FDP合成机理

化工学报 2000年第3期51卷 313-319页

作者：应汉杰欧阳平凯南京化工大学生物工程与科学系南京210009

首次建立了 1 ,6-二磷酸果糖 (FDP)累积的代谢途径流量模型 .应用该模型求解FDP累积过程中不同时期的代谢流量分配 ,详细分析了各时期代谢流量分配发生改变的原因 ,并探讨FDP累积的机理 .细胞膜通透性的改变是FDP积累于胞外的前提条件 ... 详细信息

首次建立了 1 ,6-二磷酸果糖 (FDP)累积的代谢途径流量模型 .应用该模型求解FDP累积过程中不同时期的代谢流量分配 ,详细分析了各时期代谢流量分配发生改变的原因 ,并探讨FDP累积的机理 .细胞膜通透性的改变是FDP积累于胞外的前提条件 ;而代谢网络中HK、PFK、Ald和PK等酶活的调节使主要结点处代谢流量分配发生重大改变 ,则是FDP在胞外大量积累的关键 .

关键词： FDP 代谢流量合成模型制糖发酵

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亲和层析研究进展

离子交换与吸附 2001年第3期17卷 276-280页

作者：陈勇徐燚应汉杰欧阳平凯南京化工大学制药与生命科学学院!南京 210009

亲和层析具有高选择性、高活性回收率和高纯度等特点已成为纯化蛋白质等生物大分子最有效的技术之一。本文综述了亲和层析的类型、配基的种类、选择方法以及亲和层析技术的最新研究进展，重点介绍了多肽作为亲和配基的制备及筛选方法... 详细信息

亲和层析具有高选择性、高活性回收率和高纯度等特点已成为纯化蛋白质等生物大分子最有效的技术之一。本文综述了亲和层析的类型、配基的种类、选择方法以及亲和层析技术的最新研究进展，重点介绍了多肽作为亲和配基的制备及筛选方法及其在生物大分子中的应用，并比较了不同亲和层析方法的优缺点及其发展趋势。

关键词：亲和层析配基研究进展

聚唾液酸高产菌株的高通量诱变选育及发酵工艺优化

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生物加工过程 2022年第3期20卷 292-298页

作者：施明雨郭亭魏荷芬应汉杰张宿义陈勇唐成伦江苏集萃工业生物技术研究所有限公司江苏南京211800 南京高新工大生物技术研究院有限公司江苏南京211800 南京工业大学国家生化工程技术研究中心江苏南京211800 泸州老窖股份有限公司四川泸州646000

从自然水体中筛选得到1株产聚唾液酸的微生物菌株SA-1,经Biolog生化和分子生物学分析,鉴定其为大肠杆菌。以大肠杆菌SA-1为出发菌株,通过常压室温等离子体(ARTP)诱变育种,借助酸碱透明圈和高通量自动挑选仪筛选获得高产聚唾液酸的突变菌... 详细信息

从自然水体中筛选得到1株产聚唾液酸的微生物菌株SA-1,经Biolog生化和分子生物学分析,鉴定其为大肠杆菌。以大肠杆菌SA-1为出发菌株,通过常压室温等离子体(ARTP)诱变育种,借助酸碱透明圈和高通量自动挑选仪筛选获得高产聚唾液酸的突变菌株SA-18。摇瓶发酵结果显示,大肠杆菌突变株SA-18的聚唾液酸产量可达0.95 g/L,是出发菌株产量(0.20 g/L)的4.75倍;进一步,通过调控优化K_(2)HPO_(4)浓度实现了突变大肠杆菌SA-18的高密度发酵:当K_(2)HPO_(4)质量浓度为5.0 g/L时,在10 L发酵罐中,36 h时聚唾液酸产量达到12.20 g/L,继续补料发酵,至60 h时,聚唾液酸产量最高可达16.10 g/L。

关键词：大肠杆菌聚唾液酸常压室温等离子体高密度发酵

小麦中提取的α-淀粉酶抑制剂调节血脂及抗动脉粥样硬化的实验研究

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中国药科大学学报 2005年第6期36卷 572-576页

作者：张琪杜宇陈国广李学明应汉杰南京工业大学制药与生命科学学院南京210009

目的:研究小麦中提取的α-淀粉酶抑制剂(简称-αAI)调节血脂及抗动脉粥样硬化的作用。方法:预防性给药时,给高脂饲料造模的同时连续给药9周,于第63天测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、MDA、SOD及肝脏TC、TG含量,同时观察其对大鼠血液... 详细信息

目的:研究小麦中提取的α-淀粉酶抑制剂(简称-αAI)调节血脂及抗动脉粥样硬化的作用。方法:预防性给药时,给高脂饲料造模的同时连续给药9周,于第63天测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、MDA、SOD及肝脏TC、TG含量,同时观察其对大鼠血液流变学及动脉、肝脏病变的影响。治疗性给药时,给高脂饲料造模成功后连续给药3周,测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C及肝脏TC、TG含量。结果:预防性给药时,中、高剂量-αAI能显著降低血清TC、TG、LDL-C及肝脏TC、TG含量,显著升高HDL-C,还可以使MDA含量显著降低,SOD活性显著升高,同时可以改善血液流变学,缓解动脉及肝脏病变情况。治疗性给药时,高剂量-αAI能显著降低血清TC、TG、LDL-C及肝脏TC、TG含量,显著升高HDL-C。结论:-αAI能调节血脂平衡,预防高脂血症及动脉粥样硬化的生成,对已形成的高脂血症也有一定的治疗效果。

关键词： α-淀粉酶抑制剂高脂血症动脉粥样硬化血脂调节作用

果糖二磷酸锶对糖皮质激素诱导的大鼠骨质疏松症的治疗作用

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中国药科大学学报 2008年第5期39卷 442-446页

作者：张琪马博白文霞成砚萍应汉杰南京工业大学制药与生命科学学院南京210009 南京工业大学江苏省药物研究所南京210009

目的:研究果糖二磷酸锶盐(Sr-FDP)对糖皮质激素诱导的大鼠继发性骨质疏松症的治疗作用。方法:应用肌肉注射地塞米松方法,建立大鼠继发性骨质疏松模型。口服不同剂量的Sr-FDP治疗8周,观察骨密度、骨生物力学、骨形态计量及骨代谢相关血... 详细信息

目的:研究果糖二磷酸锶盐(Sr-FDP)对糖皮质激素诱导的大鼠继发性骨质疏松症的治疗作用。方法:应用肌肉注射地塞米松方法,建立大鼠继发性骨质疏松模型。口服不同剂量的Sr-FDP治疗8周,观察骨密度、骨生物力学、骨形态计量及骨代谢相关血清生化指标,综合评价Sr-FDP对糖皮质激素诱发的骨质疏松症的治疗效果。结果:肌肉注射地塞米松大鼠的骨密度、骨生物力学较正常组显著性下降,表明诱导大鼠骨质疏松模型成立。不同剂量Sr-FDP治疗均能显著增加模型大鼠的股骨与腰椎的骨密度、股骨干重与灰重,提高股骨和腰椎的骨强度,提高腰椎的骨小梁面积百分比及矿化沉积率,同时Sr-FDP对糖皮质激素引起的血清碱性磷酸酶及血抗酒石酸酸性磷酸酶5b活性的升高均有拮抗作用。结论:Sr-FDP能够促进骨形成,抑制骨吸收,对糖皮质激素诱导的大鼠骨质疏松症有明显的治疗作用。

关键词：果糖二磷酸锶(Sr—FDP) 糖皮质激素骨质疏松地塞米松

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红球菌属菌株lawq发酵及脱硫应用研究

南京工业大学学报（自然科学版） 2003年第6期25卷 11-15,53页

作者：熊健刘波吕浩应汉杰南京工业大学制药与生命科学学院江苏南京210009

红球菌属菌株lawq是专一性脱硫菌,其脱硫酶系由dszA、dszB和dszC组成,其中关键酶是dszC。以脱硫活力作为产脱硫酶系的基准,研究了C、N和S对产酶的影响,实验结果发现甘油是最佳的碳源,适宜的质量浓度为2g L;氯化铵是合适氮源,适宜质量浓... 详细信息

红球菌属菌株lawq是专一性脱硫菌,其脱硫酶系由dszA、dszB和dszC组成,其中关键酶是dszC。以脱硫活力作为产脱硫酶系的基准,研究了C、N和S对产酶的影响,实验结果发现甘油是最佳的碳源,适宜的质量浓度为2g L;氯化铵是合适氮源,适宜质量浓度为2g L;二苯并噻吩(DBT)是最佳硫源,适宜浓度为0.2mmol L;以DBT为唯一硫源考察了pH、温度和装液量对lawq生长的影响,结果表明该菌的最适生长pH为7.0,最适生长温度为33℃,溶氧对菌体生长有较大影响。利用该菌体对油品进行脱硫实验,发现32h可以将油品中硫脱除50.47%,说明该菌具有工业应用前景。

关键词：红球菌菌株 lawq发酵脱硫二苯并噻吩空气污染

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侧链羟基氨基酸保护工艺优化研究

侧链羟基氨基酸保护工艺优化研究

胞磷胆碱生产过程中的关键酶—胆碱激酶的表达优化

第一届全国化学工程与生物化工年会

作者：李鑫朱颐申应汉杰南京工业大学制药与生命科学学院南京工业大学制药与生命科学学院南京工业大学制药与生命科学学院

＜正＞叔丁酯保护侧链羟基的N-9-芴甲氧羰基（Fmoc）-氨基酸是在多肽固相合成中应用广泛的保护氨基酸,本文研究了侧链带有羟基的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的侧链保护合成工艺,着重对工艺进行了优化研究,降低其生产成本,提高反应收率。芴... 详细信息

＜正＞叔丁酯保护侧链羟基的N-9-芴甲氧羰基（Fmoc）-氨基酸是在多肽固相合成中应用广泛的保护氨基酸,本文研究了侧链带有羟基的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的侧链保护合成工艺,着重对工艺进行了优化研究,降低其生产成本,提高反应收率。芴甲氧羰基（Fmoc）保护基对酸稳定,芴甲氧羰基具有很强的紫外吸收。可与用酸脱去的保护基搭配而用于液相和固相的肽合成。Fmoc基团是在NaHCO3或Na2CO3存在环境下,通过以下反应引入到氨基酸中的,它的导入如图所示:

关键词：氨基酸保护侧链羟基工艺优化固相合成

来源： cnki会议评论

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胞磷胆碱生产过程中的关键酶—胆碱激酶的表达优化

中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：王骏之应汉杰南京工业大学国家生化工程技术研究中心生物与制药工程学院

胞磷胆碱是核苷酸类衍生物,药理上有改善脑组织代谢,调节脑血管张力及保护脑神经的作用。生物合成法是目前制备胞磷胆碱的主要方法,然而传统方法是以酵母菌泥为生物酶源催化产胞磷胆碱,其底物转化率低,催化周期长,且有大量中间产物积累... 详细信息

胞磷胆碱是核苷酸类衍生物,药理上有改善脑组织代谢,调节脑血管张力及保护脑神经的作用。生物合成法是目前制备胞磷胆碱的主要方法,然而传统方法是以酵母菌泥为生物酶源催化产胞磷胆碱,其底物转化率低,催化周期长,且有大量中间产物积累,不利于大规模工业化过程中的成本节约。本研究旨在提高胞磷胆碱合成过程中关键酶—胆碱激酶的蛋白表达水平。大肠杆菌蛋白融合表达技术取得了很好的效果,通过融合可溶蛋白标签,如GST(谷胱甘肽S-转移酶)标签或MBP(麦芽糖结合蛋白)标签,胆碱激酶表达水平有了显著提升。其中含有MBP-CKI融合蛋白的重组大肠杆菌*** Rosetta(DE3)/pET42a-CKI中胆碱激酶酶活更是达到了达到1.48 U/mg,是酵母野生型Saccharomyces cerevisia X2180-1A酶活的近80倍。进一步,又构建了胆碱激酶和磷酰胆碱胞苷酸转移酶共表达系统,含有CCT-CKI融合蛋白的*** Rosetta(DE3)/pET28a-CCT-CKI中胆碱激酶酶活达到1.94U/mg,且大部分蛋白以可溶表达的形式存在于细胞内,其胆碱激酶活性高于已报道过的和本研究构建的其他所有基因工程菌株,同时该菌也具有一定的磷酰胆碱胞苷酸转移酶活性。

关键词：胞磷胆碱胆碱激酶蛋白表达水平磷酰胆碱胞苷酸转移酶融合表达

来源： cnki会议评论

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如何从“步步惊心”到柳暗花明

河南教育（基教版）（上） 2020年第10期 38-39页

作者：鲍花萍应汉杰张楠郑州大学第一附属中学

去年5月中旬的一个晚上,天气已经比较炎热,我上完晚自习刚回到家,手机就响了。我拿起手机,接通后里面传来急促而又紧张的声音:"鲍老师,我是张乐,我现在在学校里,不能回家,崔晓领了一群人在大门口等着,要打我。咱班还有几个同学没有走,... 详细信息

去年5月中旬的一个晚上,天气已经比较炎热,我上完晚自习刚回到家,手机就响了。我拿起手机,接通后里面传来急促而又紧张的声音:"鲍老师,我是张乐,我现在在学校里,不能回家,崔晓领了一群人在大门口等着,要打我。咱班还有几个同学没有走,在保护着我……"我吃了一惊,担任这个班的班主任两年多来,第一次碰到打架事件。而张乐、崔晓都是女生,两个女生之间会有多大矛盾,要用拳头来解决呢?怎么办?我即使赶到学校,时间也已经来不及了。

关键词：班主任晚自习步步惊心张乐手机柳暗花明打架事件女生