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慢病毒介导的类表皮生长因子域7基因沉默抑制喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭的研究

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2014年第8期49卷 643-648页

作者：黎景佳叶进庄士民王涛王志远常利红张革化中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科广州510630

目的探讨小干扰RNA（siRNA）重组慢病毒介导的类表皮生长因子域7（epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7）基因沉默对体外培养喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭潜能的影响.方法采用RNA干扰技术,构建靶向EGFL7的shRNA重组慢病毒并转染H... 详细信息

目的探讨小干扰RNA（siRNA）重组慢病毒介导的类表皮生长因子域7（epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7）基因沉默对体外培养喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭潜能的影响.方法采用RNA干扰技术,构建靶向EGFL7的shRNA重组慢病毒并转染Hep-2细胞,通过Real-timePCR和Western blot在mRNA及蛋白水平鉴定转染结果;实验分为空白对照组（NC）、空白慢病毒感染组（Lenti-NC）和EGFL7基因沉默慢病毒感染组（Lenti-EGFL7）,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Transwell侵袭实验观察细胞侵袭能力.结果 Real-time PCR检测说明Lenti-EGFL7组mRNA相对表达量较NC组下降达94％（P＜0.001）,Western blot检测证实Lenti-EGFL7组EGFL7蛋白相对表达量为（0.07 ±0.04）较NC组的（0.39 ±0.12）明显减低（P ＜0.001）,表明成功构建稳定沉默EGFL7基因的喉癌Hep-2细胞株.CCK-8细胞增殖实验说明靶向沉默EGFL7表达导致喉癌细胞增殖明显抑制（P＜0.01）,流式细胞术检测证实,与NC组和Lenti-NC组相比,Lenti-EGFL7组S期细胞百分比明显升高（P＜0.01）,G1期细胞百分比下降（P＜0.05）,细胞凋亡检测证实Lenti-EGFL7组细胞凋亡率为（66.2±1.28）％较NC组的（6.09±3.28）％和Lenti-NC组的（9.86±2.13）％明显增加（P ＜0.001）.Transwell侵袭实验发现Lenti-EGFL7组穿过Matrigel到达下室的平均细胞数较NC组和Lenti-NC组均明显减少（P＜0.01）.结论靶向沉默EGFL7基因能抑制体外培养喉癌Hep-2细胞的增殖并降低细胞侵袭能力.

关键词： RNA,小分子干扰喉肿瘤表皮生长因子细胞增殖肿瘤侵润慢病毒属肿瘤细胞,培养的

人EGFL7基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其在人喉癌细胞中的表达

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中国病理生理杂志 2013年第10期29卷 1864-1869页

作者：张革化常利红叶进庄士民王凯黎景佳中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科广东广州510630

目的:构建人表皮生长因子样结构域7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,并建立稳定干扰EGFL7基因表达的喉癌细胞亚系,为研究EGFL7蛋白在喉癌发生发展中的功能奠定基础。方... 详细信息

目的:构建人表皮生长因子样结构域7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,并建立稳定干扰EGFL7基因表达的喉癌细胞亚系,为研究EGFL7蛋白在喉癌发生发展中的功能奠定基础。方法:针对人EGFL7基因序列,设计特异性RNAi靶序列,与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR线性载体定向连接,得到的阳性重组子再与pLenti6.3-MCS/V5-DEST慢病毒载体进行重组,获得真核表达慢病毒干扰载体。在POLOdelivererTM3000介导下将慢病毒包装质粒和EGFL7基因重组慢病毒载体导入293T细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染人喉癌细胞HEp-2,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰EGFL7基因的细胞亚系。结果:成功构建EGFL7 pLenti6.3-EGFL7-miR真核表达慢病毒干扰载体并获得相应慢病毒,经测定病毒滴度为5×1011TU/L,实时荧光定量PCR证实pLenti6.3-EGFL7-miR慢病毒载体对喉癌细胞HEp-2 EGFL7基因的沉默效率为97%。结论:成功构建人EGFL7基因特异性的慢病毒干扰载体,并获得EGFL7基因稳定干扰的喉癌细胞亚系。

关键词： EGFL7蛋白 RNA干扰喉肿瘤慢病毒

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PARP-1在舌鳞癌组织中的表达及意义

肿瘤防治研究 2012年第8期39卷 957-960页

作者：王立萍陈树伟侯景辉庄士民宋明华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心头颈科广州510060

目的检测PARP-1在舌鳞癌中的表达水平,分析与舌鳞癌患者临床病理因素及预后的相关性,初步探讨PARP-1在舌鳞癌的预后价值。方法采用免疫组织化学法检测155例舌鳞癌组织及13例邻近正常舌组织的石蜡组织切片中PARP-1的表达水平,分析PARP-1... 详细信息

目的检测PARP-1在舌鳞癌中的表达水平,分析与舌鳞癌患者临床病理因素及预后的相关性,初步探讨PARP-1在舌鳞癌的预后价值。方法采用免疫组织化学法检测155例舌鳞癌组织及13例邻近正常舌组织的石蜡组织切片中PARP-1的表达水平,分析PARP-1的表达水平与舌鳞癌患者的临床病理因素及预后的相关性。结果 155例舌鳞癌组织中,PARP-1阳性表达率为89.0%(138/155),其中58.1%(90/155)呈高表达,41.9%(65/155)呈低表达;13例邻近正常舌组织均无PARP-1表达,两者比较差异有统计学意义(χ2=64.815,P=0.000)。PARP-1的表达水平与患者的T分期(χ2=10.841,P=0.002)、N分期(χ2=8.962,P=0.007)、病理分期(χ2=17.151,P=0.000)呈正相关。PARP-1高表达者总生存时间(P=0.037)与无瘤生存时间(P=0.026)比低表达者短。结论 PARP-1可能是促进舌鳞癌发生发展的癌基因,具有预测舌鳞癌预后的临床价值。

关键词：舌鳞癌 PARP-1 复发预后

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早期口腔鳞癌颈部淋巴结转移的研究进展

国际肿瘤学杂志 2011年第5期38卷 355-357页

作者：庄士民宋明郭朱明中山大学肿瘤防治中心头颈科华南肿瘤学国家重点实验室广州510060

口腔鳞癌具有较高的隐匿性颈淋巴结转移率，然而，临床上对早期患者颈部淋巴结的处理还存在较大争议。从肿瘤原发灶浸润厚度、影像学方面探讨早期口腔鳞癌颈部淋巴结转移的因素。对肿瘤原发灶浸润厚度〉4mm的患者，结合肿瘤影像学检查... 详细信息

口腔鳞癌具有较高的隐匿性颈淋巴结转移率，然而，临床上对早期患者颈部淋巴结的处理还存在较大争议。从肿瘤原发灶浸润厚度、影像学方面探讨早期口腔鳞癌颈部淋巴结转移的因素。对肿瘤原发灶浸润厚度〉4mm的患者，结合肿瘤影像学检查，建议行选择性颈部淋巴结清扫术。

关键词：口腔鳞状细胞癌肿瘤浸润颈部淋巴结转移

最大非毒性剂量汉防己甲素对人鼻咽癌细胞放疗增敏作用的研究

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2014年第3期49卷 227-231页

作者：王凯张革化常利红吴喜福黎景佳庄士民王君 Daqing Li 中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科广州510630 美国宾夕法尼亚大学医学院耳鼻咽喉头颈外科

目的探讨最大非毒性剂量汉防己甲素（tetrandrine,Tet）对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放射增敏作用.方法采用单纯放射线照射和Tet联合放射线照射对CNE1和CNE2细胞株进行处理,中性彗星电泳检测不同方式处理组中CNE1和CNE2细胞DNA损伤,... 详细信息

目的探讨最大非毒性剂量汉防己甲素（tetrandrine,Tet）对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放射增敏作用.方法采用单纯放射线照射和Tet联合放射线照射对CNE1和CNE2细胞株进行处理,中性彗星电泳检测不同方式处理组中CNE1和CNE2细胞DNA损伤,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率.结果单纯放射线照射组CNE1和CNE2细胞平均彗星尾矩（tail moment,TM）分别为（7.13±3.70）（x±s）、（11.52±4.04）,Tet联合放射线照射组平均TM分别为（13.61 ±5.45）、（18.85±6.18）,差异有统计学意义（t值分别为2.784和3.089,P值均＜0.05）.单纯放射线照射组CNE1和CNE2细胞周期以G2期为主,分别为（42.62±2.07）％、（34.82±2.74）％,Tet联合放射线照射组分别为（17.02±1.87）％、（19.64±4.82）％,差异有统计学意义（t值分别为23.173和16.500,P值均＜0.01）.单纯放射线照射组CNE1和CNE2细胞凋亡率分别为（17.24％±0.99）％、（16.68％±0.27）％,Tet联合放射线照射组分别为（19.11±1.24）％、（18.51±2.41）％,差异无统计学意义（P值均＞0.05）.结论最大非毒性剂量Tet能增加人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放射敏感性,其机制可能与去除放射线照射诱导的G2/M期阻滞,降低细胞修复DNA双链断裂能力有关.

关键词：苄异喹啉类鼻咽肿瘤辐射耐受性彗星试验细胞凋亡

弥散加权成像对于鉴别舌鳞癌转移淋巴结的价值

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中国肿瘤外科杂志 2014年第2期6卷 84-87页

作者：庄士民张革化吴喜福王志远宋明中山大学附属第三医院耳鼻咽喉-头颈外科广东广州510620 中山大学肿瘤防治中心广东广州510060

目的探讨弥散加权成像(DWI)对于鉴别舌鳞癌转移与非转移淋巴结的价值。方法收集2011年4月1日至2011年11月30日在中山大学肿瘤防治中心初治42例舌鳞癌患者,治疗前行常规MRI及DWI检查,观察并比较舌鳞癌转移淋巴结与非转移淋巴结常规MRI及... 详细信息

目的探讨弥散加权成像(DWI)对于鉴别舌鳞癌转移与非转移淋巴结的价值。方法收集2011年4月1日至2011年11月30日在中山大学肿瘤防治中心初治42例舌鳞癌患者,治疗前行常规MRI及DWI检查,观察并比较舌鳞癌转移淋巴结与非转移淋巴结常规MRI及表观扩散系数(ADC)图表现,测量各淋巴结的长径(L)、横径(S)、T2信号强度、平均ADC值,采用独立样本t检验及χ2检验比较两者差异,利用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析,评价上述各项指标鉴别舌鳞癌及转移与非转移淋巴结的诊断效能。结果转移淋巴结短径(S)、长径(L)、平均ADC值与非转移淋巴结比较,两者差异有统计学意义(P0.05);转移淋巴结S/L、T2信号强度与非转移淋巴结间的差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线面积分析淋巴结ADC值曲线下面积最大,诊断淋巴结阳性准确度最高。结论在常规影像学基础上,定量分析测量ADC值有助于舌鳞癌转移和非转移淋巴结的检出。

关键词：弥散加权成像舌鳞癌淋巴结转移术前诊断

甲状腺微小乳头状癌伴对侧叶微小癌的临床分析

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癌症进展 2021年第4期19卷 377-379,414页

作者：庄士民谢良恩覃海源钟倩怡王涛中山大学附属第六医院耳鼻咽喉头颈外科广州510065 中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科广州5100630

目的探讨甲状腺微小乳头状癌(PTMC)患者伴对侧叶微小癌的发生率及其临床特征。方法选择420例接受甲状腺全切除术的PTMC患者,分析PTMC患者伴对侧叶微小癌的发生率及其临床特征,采用Logistic回归模型分析PTMC患者伴对侧叶微小癌的影响因... 详细信息

目的探讨甲状腺微小乳头状癌(PTMC)患者伴对侧叶微小癌的发生率及其临床特征。方法选择420例接受甲状腺全切除术的PTMC患者,分析PTMC患者伴对侧叶微小癌的发生率及其临床特征,采用Logistic回归模型分析PTMC患者伴对侧叶微小癌的影响因素。结果术后病理证实108例(25.7%)PTMC患者伴有对侧叶微小癌病灶,其中85例(78.7%)患者术前超声引导下细针穿刺活检(US-FNAB)确诊对侧叶微小癌,15例(13.9%)患者术前彩超怀疑对侧叶微小癌,8例(7.4%)患者术前漏诊而术后病理证实伴有对侧叶微小癌。对侧叶阳性和阴性的PTMC患者的多原发灶癌情况和肿瘤原发灶直径比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Logistic多因素分析结果显示,肿瘤原发灶直径﹥5 mm是PTMC患者伴对侧叶微小癌的影响因素(P﹤0.05)。结论PTMC患者伴对侧叶微小癌更倾向于原发灶直径更大的患者中。对于原发灶偏大(直径﹥5 mm)或伴有多原发灶癌的PTMC患者,需要考虑PTMC伴对侧叶微小癌的可能性,在一些高危患者中,选择甲状腺全切除术可能更为合适。

关键词：甲状腺微小乳头状癌对侧叶微小癌甲状腺全切除术

表皮生长因子受体信号通路调控E-cadherin表达影响喉癌细胞增殖和侵袭的机制

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2015年第1期22卷 14-20页

作者：黎景佳叶进庄士民杨新明李仕晟中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科广东广州510630 中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉头颈外科湖南长沙413000

目的探讨表皮生长因子受体(epidermal grow th factor receptor,EGFR)信号通路调控喉癌细胞E-cadherin表达并影响细胞增殖、侵袭等生物学行为的机制。方法采用外源性的EGFR激动剂表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和EGFR酪氨... 详细信息

目的探讨表皮生长因子受体(epidermal grow th factor receptor,EGFR)信号通路调控喉癌细胞E-cadherin表达并影响细胞增殖、侵袭等生物学行为的机制。方法采用外源性的EGFR激动剂表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和EGFR酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼干预体外培养喉癌Hep-2细胞,检测细胞增殖、周期、凋亡、迁移力和侵袭力及相关蛋白表达改变。结果 EGF呈时间和浓度依赖性促进喉癌细胞增殖,并使喉癌细胞G1期比例减少而S期比例增加,细胞迁移距离及侵袭能力明显增加;厄洛替尼呈时间和浓度依赖性抑制喉癌细胞增殖,并导致喉癌细胞G1期比例增加而S期比例减少,同时增加细胞凋亡率,细胞迁移距离及侵袭能力均明显低于对照组。Western blot检测发现EGF干预使喉癌细胞E-cadherin表达下调而Vimentin表达上调,而厄洛替尼干预后喉癌细胞E-cadherin表达上调,Vimentin表达下调。结论小分子酪氨酸激酶抑制剂阻断EGFR信号通路导致喉癌Hep-2细胞E-cadherin表达上调,并抑制细胞增殖和侵袭转移能力。

关键词：肿瘤,鳞状细胞受体,表皮生长因子细胞增殖肿瘤浸润上皮钙黏蛋白

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颈深部筋膜间隙感染诊治体会

中国耳鼻咽喉头颈外科 2015年第3期22卷 138-141页

作者：黎景佳叶进庄士民常利红王涛陈愈彬中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科广东广州510630

目的探讨颈深部筋膜间隙感染的临床表现和诊断治疗方法。方法回顾性分析2012年1月~2014年8月我院耳鼻咽喉头颈外科收治的105例颈深部间隙感染患者的临床资料,总结其发病特征和诊治策略。结果 105例颈深部间隙感染患者中,70例行脓肿切开... 详细信息

目的探讨颈深部筋膜间隙感染的临床表现和诊断治疗方法。方法回顾性分析2012年1月~2014年8月我院耳鼻咽喉头颈外科收治的105例颈深部间隙感染患者的临床资料,总结其发病特征和诊治策略。结果 105例颈深部间隙感染患者中,70例行脓肿切开引流,4例行脓肿穿刺抽液,31例行静脉抗生素消炎治疗,仅2例颈深部多筋膜间隙感染患者分别并发呼吸困难、纵隔感染,所有患者均治愈出院。结论颈深部筋膜间隙感染一经确诊脓肿形成,应及时切开引流,根据药敏试验结果选用合适抗生素,控制基础疾病及严重并发症。

关键词：颈软组织感染扁桃体周脓肿引流术咽旁间隙脓肿