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红毛丹提取物老鹳草素对TGF-β诱导的人肾小管上皮细胞上皮-间质转化的改善作用

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现代食品科技 2024年

作者：常秀亭陈彩炼罗小菊寇力丹程燕海南省检验检测研究院食品检验检测中心国家市场监管重点实验室(热带果蔬质量与安全) 海南大学药学院重庆市万州食品药品检验所

探讨红毛丹果皮中提取的老鹳草素（Geraniin,GER）对TGF-β1诱导的人肾小管上皮（HK-2）细胞上皮-间质转化（Epithelial mesenchymal transition,EMT）的改善作用。从红毛丹果皮中提取并纯化GER，采用CCK-8细胞毒性实验检测不同浓度的GE... 详细信息

探讨红毛丹果皮中提取的老鹳草素（Geraniin,GER）对TGF-β1诱导的人肾小管上皮（HK-2）细胞上皮-间质转化（Epithelial mesenchymal transition,EMT）的改善作用。从红毛丹果皮中提取并纯化GER，采用CCK-8细胞毒性实验检测不同浓度的GER对细胞活力的影响，筛选出最佳使用浓度。实验将HK-2细胞分为五组，分别为对照组、TGF-β1诱导组（10 ng/m L TGF-β1）、TGF-β1+GER组（5、10、20μg/m L）。蛋白质印迹（Western blot）和细胞免疫荧光检测细胞上皮间质转化的关键因子α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的表达水平。检测细胞内活性氧（ROS）、线粒体膜电位（MMP）以及细胞三磷酸腺苷（Adenosine triphosphate,ATP）的含量变化，评估GER对线粒体功能损伤程度的影响。与模型组相比，GER高剂量组E-cadherin的蛋白水平极显著增加128.36%（P<0.01）,Vimentin蛋白水平极显著降低47.78%（P<0.01）。免疫荧光结果显示GER可降低α-SMA的蛋白水平，清除TGF-β1诱导的HK-2细胞产生的过量的ROS，明显改善了MMP的降低并使ATP含量显著增加24.01%（P<0.05）。综上所述，研究发现GER可能通过改善线粒体功能障碍和降低氧化应激水平进而抑制了TGF-β1诱导的HK-2细胞发生EMT。

关键词：老鹳草素上皮-间充质转化线粒体功能障碍氧化应激

海南即食鲜切果蔬肠杆菌科细菌污染及产ESBLs菌株耐药性研究

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中国热带医学 2024年

作者：谢作蓉常秀亭朱梦寇力丹杨穗珊海南省检验检测研究院食品检验检测中心国家市场监管重点实验室(热带果蔬质量与安全)

目的　了解海南地区即食鲜切果蔬中肠杆菌科细菌的污染分布、产ESBLs菌株的耐药性、耐药基因赋存情况与耐药基因分型，为即食鲜切果蔬食品卫生安全控制及耐药菌风险防控提供参考。方法　采集市售常见即食鲜切果蔬样品，对肠杆菌科细菌... 详细信息

目的　了解海南地区即食鲜切果蔬中肠杆菌科细菌的污染分布、产ESBLs菌株的耐药性、耐药基因赋存情况与耐药基因分型，为即食鲜切果蔬食品卫生安全控制及耐药菌风险防控提供参考。方法　采集市售常见即食鲜切果蔬样品，对肠杆菌科细菌进行定量检测，通过肠道菌增菌肉汤进行增菌、ESBL显色培养基进行选择性分离培养，对获得的产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）耐药肠杆菌采用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统进行鉴定和药敏测试，通过PCR检测耐药基因，并对产物进行测序以确定耐药基因型别。结果　427份即食鲜切果蔬样品中，肠杆菌科细菌污染量在1.30～6.86 log10CFU·g-1之间，从中筛选得到产ESBLs的肠杆菌，主要为49株肺炎克雷伯菌（污染率11.48%）和38株大肠埃希氏菌（污染率8.90%）。这些菌株存在多重耐药性，其中产ESBLs肺炎克雷伯菌对氨苄西林和头孢唑啉耐药率均为100%，对头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟的耐药率分别为73.46%、81.63%、73.46%，对复方新诺明的耐药率则有79.59%，产ESBLs大肠埃希氏菌对氨苄西林、头孢唑林、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟均表现为耐药，对复方新诺明的耐药率则有52.63%。耐药基因检测结果显示，β-内酰胺类耐药基因blaCTX-M、磺胺类耐药基因sulII和的可移动元件整合酶基因intI在产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希氏菌中的检出率分别为57.14%和84.21%、75.51%和68.42%、91.84%和86.84%，β-内酰胺类耐药基因型为CTX-M-1、CTX-M-9和TEM-1，未检测出CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-25及SHV型。结论　本研究结果表明即食鲜切果蔬受产ESBLs肠杆菌科细菌污染，且产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希氏菌分离株多重耐药情况较为普遍，耐药基因水平转移风险较高，建议对“环境-食品-人”全链条环节中重视即食鲜切果蔬中耐药菌的污染，避免其通过食物链成为耐药基因的传播媒介，危害人类健康。

关键词：即食鲜切果蔬肠杆菌科细菌超广谱β内酰胺酶抗生素耐药基因

虾青素对槟榔碱诱导的口腔上皮损伤的保护效应及机制初探

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现代食品科技 2024年

作者：陈琳琳谢金梅张榕芮石宇晴常秀亭谢曦海南大学药学院热带生物资源教育部重点实验室海南大学食品科学与工程学院海南大学生命健康学院

探索虾青素（AST）对槟榔碱（ARC）诱导的口腔上皮损伤的保护效应及其作用机制。建立ARC诱导的大鼠口腔黏膜损伤模型，观察大鼠口腔黏膜组织病理学形态及人早期生长反应因子1(EGR1)的变化。测定ARC诱导的人正常口腔上皮角质（HOK）细胞... 详细信息

探索虾青素（AST）对槟榔碱（ARC）诱导的口腔上皮损伤的保护效应及其作用机制。建立ARC诱导的大鼠口腔黏膜损伤模型，观察大鼠口腔黏膜组织病理学形态及人早期生长反应因子1(EGR1)的变化。测定ARC诱导的人正常口腔上皮角质（HOK）细胞中紧密连接相关蛋白ZO-1和Occludin、线粒体形态、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性氧（mtROS）和EGR1的变化。通过分子对接预测AST与EGR1的结合情况。大鼠口腔黏膜组织病理切片显示，与模型组相比，AST干预组中口腔黏膜上皮变薄、钉突变短症状有所改善，黏膜下相对胶原面积及CollagenⅠ面积显著降低9.84%、23.01%。细胞实验结果显示，AST改善了ARC诱导的HOK细胞ZO-1和Occludin蛋白定位异常、线粒体形态损伤、MMP下降及mtROS生成过多。此外，AST抑制ARC诱导的EGR1高表达，细胞水平上能显著下调24.53%。分子对接结果显示AST与EGR1的对接结合能为-6.8697 kcal/mol，存在两个氢键作用。综上所述，AST可能通过调控EGR1和线粒体功能从而改善ARC诱导的口腔黏膜损伤，有望开发成为保护口腔黏膜的功能性食品。

关键词：虾青素槟榔碱口腔上皮损伤早期生长反应因子1 线粒体功能

20世纪30年代中国思想界对外国教育模式的评介——以《教育杂志》与《中华教育界》为中心进行考察

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20世纪30年代中国思想界对外国教育模式的评介——以《教育杂志》...

作者：常秀亭天津师范大学

学位级别：硕士

《教育杂志》与《中华教育界》是民国时期的两份重要的教育刊物,在近代外国教育理念传入我国的过程中,两份刊物顺应时代的潮流,广泛地将国外各种教育理论、教育方法、教育内容介绍并引入中国,推动了中国近代教育改革的进程,对近代中国... 详细信息

《教育杂志》与《中华教育界》是民国时期的两份重要的教育刊物,在近代外国教育理念传入我国的过程中,两份刊物顺应时代的潮流,广泛地将国外各种教育理论、教育方法、教育内容介绍并引入中国,推动了中国近代教育改革的进程,对近代中国教育的近代化发挥了重要的作用,同时也是研究近代中国教育史的重要史料。通过《教育杂志》与《中华教育界》有关20世纪30年代国外教育理念的介绍,分析民国思想界对于外国教育理念的认知,进而折射出20世纪30年代外国教育理念在中国的传播与影响。20世纪30年代,中国思想界在《教育杂志》和《中华教育界》发表了大量有关外国教育模式的文章。诸多论者通过对外国中小学教师情况、青年训练模式以及儿童保护事业三方面的详细介绍,加深了中国思想界对同时期外国教育模式的认识,同时亦在一定程度上促进了中国思想界对中国教育问题的反思。首先,在外国中小学教师情况方面,诸多论者较多关注英国、美国、法国、德国、苏联以及日本等国的教师职前培养情况,苏联和墨西哥有关教师进修方面的情况,英国、美国、法国、德国、苏联以及日本在职教师的正薪制度、退休金制度及其他优待政策的情况,以及美国、德国有关教师素养理论方面的情况。其次,在外国青年训练模式方面,诸多论者更多地倾向于德国、意大利、日本、苏联等国的青年训练的组织及目的,同时更多地关注德国、意大利、苏联、日本等国的青年训练活动的情况。最后,在儿童保护事业方面,诸多论者更多关注英国、美国和日本有关保护儿童健康的法律条文,英国有关儿童劳动限制及保障儿童教育权的法律条文,苏联、法国、美国、英国、日本等国有关保护乳幼儿的措施情况,以及德国、美国、英国、日本在保护虚弱儿童的措施方面的情况。诸论者对外国教育模式的认知亦在一定程度上启发了中国思想界的相关观念。

关键词：《教育杂志》《中华教育界》中小学教师问题青年训练问题儿童保护事业问题

海南省桶装饮用水中铜绿假单胞菌耐药性、T3SS毒力基因分布与同源性分析

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中国热带医学 2023年第12期23卷 1307-1312页

作者：杨穗珊朱梦常秀亭罗小菊寇力丹王彬谢作蓉海南省食品检验检测中心国家市场监管重点实验室(热带果蔬质量与安全)海南海口570311

目的对海南省桶装饮用水中铜绿假单胞菌的耐药性及Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)毒力基因携带情况进行调查,在菌株核糖体分型基础上探讨其与样品来源及毒力基因之间的关系,为桶装饮用水的安全监管、污染溯源调查及耐药菌... 详细信息

目的对海南省桶装饮用水中铜绿假单胞菌的耐药性及Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)毒力基因携带情况进行调查,在菌株核糖体分型基础上探讨其与样品来源及毒力基因之间的关系,为桶装饮用水的安全监管、污染溯源调查及耐药菌临床治疗提供数据基础。方法使用VITEK 2 Compact全自动微生物药敏系统对分离得到的55株铜绿假单胞菌进行耐药性分析,通过PCR法扩增T3SS毒力基因ExoU、ExoS、ExoT、ExoY,并应用RiboPrinter全自动微生物基因指纹鉴定系统对分离菌株进行鉴定分型及聚类同源性分析。结果药敏结果显示,桶装饮用水中分离的铜绿假单胞菌菌株处于较低耐药水平,但仍然发现1株多重耐药铜绿假单胞菌,对亚胺培南、环丙沙星、头孢吡肟均耐药。T3SS毒力基因分布表现为4种基因型组合,分别为ExoT^(+)/ExoY^(+)/ExoS^(+)/ExoU^(-)(45.45%,25/55)、ExoT^(+)/ExoY^(+)/ExoS^(-)/ExoU^(+)(34.55%,19/55)、ExoT^(+)/ExoY^(-)/ExoS^(-)/ExoU^(+)(18.18%,10/55)、ExoT^(+)/ExoY^(+)/ExoS^(+)/ExoU^(+)(1.82%,1/55)。菌株核糖体分型共分为6个亚型,各亚型包含菌株数分别为24、1、25、1、3、1,占比分别为43.64%、1.82%、45.45%、1.82%、5.45%和1.82%,以亚型Ⅰ和亚型Ⅲ的菌株占主要优势,亚型Ⅰ菌株主要的T3SS基因型为ExoT^(+)/ExoY^(+)/ExoS^(-)/ExoU^(+),占比66.67%(16/24),亚型Ⅲ菌株主要的T3SS基因型则为ExoT^(+)/ExoY^(+)/ExoS^(+)/ExoU^(-),占比88%(22/25)。结论T3SS分泌系统呈现多个毒力基因协同表达的特点,各菌株亚型与毒力基因型存在一定的关联性,通过对两者之间的关系探讨对桶装饮用水铜绿假单胞菌污染溯源、生产控制、临床治疗具有一定的指导意义,初步积累了本地桶装饮用水中铜绿假单胞菌株库及药敏数据。

关键词：铜绿假单胞菌桶装饮用水耐药性毒力基因同源性

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一株黄瓜源肠集聚性大肠埃希氏菌耐药及生长预测模型分析

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食品安全质量检测学报 2022年第18期13卷 5917-5923页

作者：罗小菊寇力丹杨穗珊朱梦常秀亭谢作蓉海南省食品检验检测中心国家市场监管重点实验室(热带果蔬质量与安全)海口570311

目的考查一株黄瓜源肠集聚性大肠埃希氏菌(enteroaggregative Escherichia coli,EAEC)的耐药情况,并建立其生长预测模型。方法将采集的黄瓜样品进行大肠埃希氏菌的分离和鉴定,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对EAEC... 详细信息

目的考查一株黄瓜源肠集聚性大肠埃希氏菌(enteroaggregative Escherichia coli,EAEC)的耐药情况,并建立其生长预测模型。方法将采集的黄瓜样品进行大肠埃希氏菌的分离和鉴定,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对EAEC特征性毒力基因进行确认,并通过VITEK 2 Compact全自动微生物药敏系统进行18种抗生素的耐药性分析;以分离鉴定的EAEC为研究对象,监测其在4、15、25、35℃贮藏条件下在黄瓜上的生长数据,绘制生长曲线,采用SLogistic模型进行拟合,建立黄瓜中EAEC生长预测模型。结果自黄瓜中分离到一株EAEC,携带aggR和astA毒力基因,对磺胺类药物复方新诺明高度耐药。4、15、25、35℃贮藏条件下EAEC在黄瓜上的生长用SLogistic模型拟合的相关系数都大于0.95,该模型可以有效地反应EAEC在黄瓜上的生长情况。结论黄瓜上存在EAEC污染风险,EAEC的耐药性进一步加剧生食黄瓜的安全风险。通过SLogistic方程可以有效建立不同温度条件下EAEC在黄瓜上的生长预测模型,对生食黄瓜的加工、供餐等过程中食源性致病菌风险控制提供参考依据。

关键词：黄瓜肠集聚性大肠埃希氏菌耐药生长预测模型

5种致泻性大肠埃希氏菌在生菜和圣女果上的生长特性研究

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食品安全质量检测学报 2023年第18期14卷 137-145页

作者：寇力丹朱梦罗小菊常秀亭杨穗珊谢作蓉海南省食品检验检测中心国家市场监管重点实验室(热带果蔬质量与安全)海口570311

目的探究不同温度下5种致泻性大肠埃希氏菌在生菜和圣女果表面的生长特性,为生食蔬果致泻性大肠埃希氏菌的风险控制提供理论基础。方法在不同温度条件下(4、15、25和35℃),在生菜和圣女果表面定量接种5种致泻性大肠埃希氏菌,并定时检测... 详细信息

目的探究不同温度下5种致泻性大肠埃希氏菌在生菜和圣女果表面的生长特性,为生食蔬果致泻性大肠埃希氏菌的风险控制提供理论基础。方法在不同温度条件下(4、15、25和35℃),在生菜和圣女果表面定量接种5种致泻性大肠埃希氏菌,并定时检测样品中的细菌数量;使用Origin 8.5软件拟合生长曲线,建立修正的SGompertz模型和二次多项式模型,对生长情况进行分析。结果修正的SGompertz模型的相关系数R2大于0.98,残差平方和小于0.15476;二次多项式模型评价因子R2大于0.91,偏差因子(bias factor,Bf)在0.90414~1.13815之间,准确因子(accuracy factor,Af)在1.13745~1.84569之间,说明模型拟合效果良好。不同菌株在同种基质上的生长规律基本一致,表现为稳定期菌落数和最大生长速率随温度降低而减少,达到相对最大生长速率所需的时间随温度降低而延长;不同基质上的生长规律存在差异,致泻性大肠埃希氏菌在圣女果上的生长速率极快,最短时间(3~4h)即可到达稳定期;而在生菜上生长更为旺盛,稳定期菌落数最高可达106 CFU/g。结论修正的SGompertz模型可用于预测致泻性大肠埃希氏菌在生菜和圣女果上的生长情况,低温冷藏可有效抑制致泻大肠埃希氏菌在生菜和圣女果中的生长,为进一步降低风险,建议在清洗之后,立即将生食蔬果冷藏储存,并尽快食用。

关键词：致泻性大肠埃希氏菌生菜圣女果温度生长特性

海南酸瓜源植物乳杆菌与壳聚糖复合处理对芒果保鲜效应研究

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食品安全质量检测学报 2023年第18期14卷 146-153页

作者：杨穗珊朱梦常秀亭罗小菊寇力丹谢作蓉海南省食品检验检测中心国家市场监管重点实验室(热带果蔬质量与安全)海口570311

目的从海南酸瓜中筛选具有抑菌活性的植物乳杆菌,并探究其发酵液与壳聚糖复配处理对芒果贮藏品质的影响。方法采用MRS培养基结合生理生化特征从酸瓜中分离植物乳杆菌,通过牛津杯法筛选对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特... 详细信息

目的从海南酸瓜中筛选具有抑菌活性的植物乳杆菌,并探究其发酵液与壳聚糖复配处理对芒果贮藏品质的影响。方法采用MRS培养基结合生理生化特征从酸瓜中分离植物乳杆菌,通过牛津杯法筛选对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌具有抑菌效果的菌株,采用16s rRNA基因序列测定方法对菌株进行确认。以芒果为保鲜对象,分别用菌株发酵液、壳聚糖、菌株发酵液-壳聚糖复配液进行处理,25℃贮藏12 d,每2 d取样,测定好果率、失重率、可溶性固形物、可滴定酸、维生素C(vitamin C,VC)、菌落总数、霉菌和酵母的变化,评价不同处理方式对芒果的保鲜作用。结果从海南传统发酵食品酸瓜中分离得到一株具有抑菌效果的植物乳杆菌R2。菌株发酵液、壳聚糖、菌株发酵液-壳聚糖复配液3种处理方式对芒果均具有保鲜效果,均能有效提高芒果好果率,降低失重率,减缓VC的损失,抑制表面微生物的生长而减缓芒果腐烂,其中菌株发酵液-壳聚糖复配液的保鲜效果最佳。与CK组对比,在贮藏第12 d时,菌株发酵液-壳聚糖复配液处理组的好果率高40%,失重率和可溶性固形物分别降低了4.4%和3.1%,可滴定酸下降趋势减缓,VC的含量为CK组的1.5倍,芒果表面菌落总数、霉菌和酵母菌落数均小于CK组。结论海南酸瓜源植物乳杆菌发酵液结合壳聚糖复配处理能有效保持芒果的贮藏品质,对芒果采摘后保鲜、果实品质保持和食品安全风险控制具有较好的应用价值。

关键词：植物乳杆菌海南酸瓜壳聚糖芒果保鲜

糖脉交泰胶囊调节db/db 2型糖尿病小鼠糖脂代谢的作用与机制

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中药药理与临床 2012年第5期28卷 177-180页

作者：常秀亭谢曦李婕黄河清中山大学药学院广州510006 中山大学实验动物中心广州510006

目的:研究糖脉交泰胶囊对db/db 2型糖尿病小鼠糖脂代谢的作用与机制。方法:随机将db/db 2型糖尿病小鼠分为模型组、糖脉交泰组(1.1g/kg)和吡格列酮组(4mg/kg),每组8只,给予相应的药物治疗4周。实验结束后比较各组空腹血糖值(FBG)、糖化... 详细信息

目的:研究糖脉交泰胶囊对db/db 2型糖尿病小鼠糖脂代谢的作用与机制。方法:随机将db/db 2型糖尿病小鼠分为模型组、糖脉交泰组(1.1g/kg)和吡格列酮组(4mg/kg),每组8只,给予相应的药物治疗4周。实验结束后比较各组空腹血糖值(FBG)、糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)等糖脂代谢指标,比较各组血清胰岛素(INS)浓度及胰岛素抵抗指数、胰岛素敏感指数、超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛含量(MDA)等变化,检测各组肝脏组织中肝糖原含量及葡萄糖激酶蛋白(GCK)和低密度脂蛋白受体(LDLR)等蛋白表达。结果:与模型组比较,糖脉交泰胶囊(1.1g/kg)能显著降低大鼠FBG、GSP、HbA1c、TC、TG等指标的升高(P常(P<0.05);显著提高肝脏中肝糖原含量、GCK及LDLR的蛋白表达(P<0.05)。结论:糖脉交泰胶囊(1.1g/kg)具有明显改善糖脂代谢紊乱的作用,其作用机制与其改善胰岛素抵抗、提高肝脏GCK蛋白表达与肝糖原含量、提高肝脏LDLR蛋白表达等密切相关。

关键词：糖脉交泰胶囊 2型糖尿病胰岛素抵抗氧化应激葡萄糖激酶低密度脂蛋白受体