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荜茇总生物碱对6-羟基多巴胺致帕金森病大鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用研究

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中国中药杂志 2014年第9期39卷 1660-1665页

作者：郑丽王浩巴寅颖刘浩龙王萌郭未蔚吴霞杨慧首都医科大学中医药学院北京100069 首都医科大学北京神经科学研究所北京100069

目的:探讨荜茇总生物碱(PLA)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)致帕金森病(PD)大鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用及其可能的机制。方法:采用脑立体定位单侧纹状体注射6-OHDA建立大鼠PD模型,将PD大鼠随机分为PLA组(PLA50 mg·kg-1·d-1),美多巴组(... 详细信息

目的:探讨荜茇总生物碱(PLA)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)致帕金森病(PD)大鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用及其可能的机制。方法:采用脑立体定位单侧纹状体注射6-OHDA建立大鼠PD模型,将PD大鼠随机分为PLA组(PLA50 mg·kg-1·d-1),美多巴组(美多巴50 mg·kg-1·d-1)及模型组,每组15只,每日灌胃给药1次,连续6周。另随机选取15只大鼠在纹状体仅注射生理盐水作为假手术组。采用阿朴吗啡(APO)诱导的大鼠旋转及转棒实验进行行为学观察,酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化检测大鼠黑质中TH阳性细胞数及纹状体中TH阳性纤维密度,用分光光度法检测大鼠黑质及纹状体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的含量。结果:帕金森病大鼠在APO诱导后出现明显的旋转行为,且在转棒上的滞留时间缩短,黑质区TH阳性细胞数及纹状体TH阳性纤维密度明显减少,组织内SOD,GSH-Px,CAT的活力降低,NOS的活力升高,MDA,NO含量升高,GSH含量降低,总抗氧化能力明显降低。PLA能明显改善PD大鼠的行为学异常,增加黑质区TH阳性细胞数及纹状体TH阳性纤维密度,提高组织内SOD,GSH-Px,CAT的活力,降低NOS的活力,降低MDA和NO含量,提高GSH含量,总抗氧化能力明显提高。结论:荜茇总生物碱对6-OHDA致PD模型大鼠的黑质细胞具有保护作用,其机制可能与抗氧化活性有关。

关键词：帕金森病荜茇生物碱 6-羟基多巴胺抗氧化

HPLC法同时测定鬼箭羽药材中4种有效成分的含量

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药物分析杂志 2010年第6期30卷 991-994页

作者：巴寅颖张兰珍石任兵北京中医药大学中药学院北京100102

目的：建立高效液相色谱法测定鬼箭羽药材中4种主要有效成分儿茶素、去氢双儿茶素A、香橙素和柚皮素的含量。方法：采用DiamonsilTMC18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱（0-35min,9∶9∶82→17.... 详细信息

目的：建立高效液相色谱法测定鬼箭羽药材中4种主要有效成分儿茶素、去氢双儿茶素A、香橙素和柚皮素的含量。方法：采用DiamonsilTMC18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱（0-35min,9∶9∶82→17.5∶17.5∶65）,流速1mL·min-1,检测波长280nm（儿茶素、香橙素和柚皮素）、380nm（去氢双儿茶素A）,柱温30℃。结果：儿茶素、去氢双儿茶素A、香橙素和柚皮素线性范围分别为0.428~3.424μg（r=0.9998）,0.255~1.53μg（r=0.9992）,0.0788~0.630μg（r=0.9996）,0.026~0.208μg（r=0.9996）;平均加样回收率（n=6）分别为100.5%（RSD=3.5%）,101.5%（RSD=2.3%）,97.33%（RSD=1.1%）,97.81%（RSD=2.7%）。结论：9批样品测定结果表明本法简便、准确,重复性好,可用于鬼箭羽药材中儿茶素等4种成分的含量测定。

关键词：鬼箭羽高效液相色谱儿茶素去氢双儿茶素A 香橙素柚皮素

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鬼箭羽药材的指纹图谱

中国实验方剂学杂志 2013年第13期19卷 103-107页

作者：巴寅颖张兰珍石任兵首都医科大学中医药学院北京100069 北京中医药大学北京100102

目的:建立鬼箭羽药材HPLC指纹图谱,对谱图中主要色谱峰进行指认,并比较不同部位药材指纹图谱的异同。方法:采用DiamonsilTMC18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1 ***-1,检测波长254 nm,柱温30... 详细信息

目的:建立鬼箭羽药材HPLC指纹图谱,对谱图中主要色谱峰进行指认,并比较不同部位药材指纹图谱的异同。方法:采用DiamonsilTMC18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1 ***-1,检测波长254 nm,柱温30℃。采用《中药色谱指纹图谱相识度评价系统2004 A版》软件进行相似度评价,计算9批药材相似度。结果:通过对9批不同产地鬼箭羽药材指纹图谱的研究,标定出23个共有色谱峰,其中8个共有峰得到指认。利用HPLC指纹图谱相似度评价软件评价,9批药材的相似度在0.824～0.957,其中6批药材相似度>0.900。鬼箭羽不同药用部位的HPLC色谱图有较大差异。结论:不同产地鬼箭羽药材质量存在一定差异,但大部分具有较好相似性。不同药用部位成分有较大差异,应结合临床疗效规范品种和用药部位,并制定相关质量控制标准。

关键词：鬼箭羽高效液相色谱指纹图谱质量控制

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不同产地夏枯草药材HPLC特征图谱

中华中医药杂志 2012年第5期27卷 1418-1420页

作者：秦雯巴寅颖张兰珍石任兵北京城市学院北京100094 北京中医药大学北京100102

目的:建立夏枯草药材高效液相色谱(HPLC)特征图谱分析方法,为科学评价夏枯草药材质量提供参考。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-0.1%的磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长210nm,柱温:30℃。所得不同样... 详细信息

目的:建立夏枯草药材高效液相色谱(HPLC)特征图谱分析方法,为科学评价夏枯草药材质量提供参考。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-0.1%的磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长210nm,柱温:30℃。所得不同样品的特征图谱用相似度评价软件进行相似度分析,用SPSS进行聚类分析。结果:建立了夏枯草的特征图谱,分析了10个产地夏枯草药材的HPLC特征图谱,经相似度分析,确定了29个色谱峰为夏枯草药材特征峰,指认了其中的8个共有峰。结论:该方法简便、准确、重现性好,研究结果初步说明了不同产地夏枯草药材的差异与相似性,为夏枯草的质量评价和质量控制提供了参考。

关键词：夏枯草高效液相色谱法特征图谱产地

RP-HPLC测定夏枯草不同部位熊果酸和齐墩果酸含量

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药物分析杂志 2009年第9期29卷 1547-1549页

作者：张兰珍巴寅颖季思伟姜艳艳郭亚健北京中医药大学中药学院北京100102

目的:建立RP-HPLC法同时测定夏枯草不同部位中熊果酸和齐墩果酸含量。方法:采用SHIMADZUVP-ODS柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-甲醇-水-醋酸铵(69∶16∶15∶1)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长210nm。结果:熊果酸、齐墩果酸进样量分别... 详细信息

目的:建立RP-HPLC法同时测定夏枯草不同部位中熊果酸和齐墩果酸含量。方法:采用SHIMADZUVP-ODS柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-甲醇-水-醋酸铵(69∶16∶15∶1)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长210nm。结果:熊果酸、齐墩果酸进样量分别在0.780～6.240μg及0.756～6.048μg范围内线性关系良好,熊果酸、齐墩果酸平均回收率(n=6)分别为99.2%(RSD=0.69%)和99.1%(RSD=1.2%)。结论:本法简便、准确、灵敏,重复性好,可用于夏枯草不同部位熊果酸和齐墩果酸的含量测定。

关键词：夏枯草不同部位熊果酸齐墩果酸 HPLC

芪红水煎剂化学成分的HPLC-FT-ICR-MS快速表征与HPLC多成分的含量测定

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世界科学技术-中医药现代化 2020年第2期22卷 392-399页

作者：肖然谢丽媛于萍巴寅颖吴霞首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室北京100069 北京卫生职业学院北京101101

目的采用高效液相色谱串联高分辨傅立叶变换离子回旋共振质谱(High performance liquid chromatography tandem high resolution Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry,HPLC-FTICR-MS)技术对芪红水煎剂的化学成分进行快速表征,建立高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)对芪红水煎剂中多成分进行含量测定,分析黄芪、水红花子配伍对主要成分溶出的影响,完善其质量控制。方法HPLC-FT-ICR-MS采用电喷雾离子化源(Electrospray ionization source,ESI)负离子模式检测,根据高分辨数据及二级质谱信息结合对照品数据及相关文献对芪红水煎剂化学成分进行快速鉴定;芪红水煎剂中6种主要成分的HPLC含量测定采用Venusil MP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-0.5%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长254 nm和290 nm。结果对芪红水煎剂提取物中的26个化学成分进行表征,其中9个成分来源于水红花子,17个成分来源于黄芪。与单味药相比,芪红水煎剂中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、N-反式-阿魏酰酪胺、槲皮素的煎出量均明显增加(P0.05)。结论该方法可快速对芪红水煎剂中的主要成分进行定性分析,所建多成分含量测定方法可以反映水红花子和黄芪共煎后对主要成分溶出率的影响,为进一步研究其配伍规律提供理论依据。

关键词：芪红水煎剂液质联用高效液相色谱法成分表征含量测定

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鬼箭羽中黄酮类化学成分研究

中草药 2012年第2期43卷 242-246页

作者：巴寅颖刘倩颖石任兵张兰珍北京中医药大学中药学院北京100102 国家中医药管理局中药经典名方有效物质发现重点研究室北京100102

目的对鬼箭羽Euonymus alatus中的黄酮类成分进行研究。方法利用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离并鉴定了13个化合物,其中二氢黄酮及其苷类4个:... 详细信息

目的对鬼箭羽Euonymus alatus中的黄酮类成分进行研究。方法利用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离并鉴定了13个化合物,其中二氢黄酮及其苷类4个:柚皮素(1)、香橙素(2)、二氢槲皮素(3)、橙皮苷(4);黄酮及其苷类8个:山柰酚(5)、槲皮素(6)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(7)、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷(9)、金丝桃苷(10)、山柰酚-3,7-二-O-α-L-鼠李糖苷(11)、槲皮素-3,7-二-O-α-L-鼠李糖苷(12);黄烷酮醇类1个:去氢双儿茶素A(13)。结论化合物3、7～9、11、12为首次从该植物中分离得到。

关键词：鬼箭羽黄酮类二氢槲皮素山柰酚-3 7-二-O-α-L-鼠李糖苷槲皮素-3 7-二-O-α-L-鼠李糖苷

HPLC-FT-MS鉴定荜茇总生物碱在大鼠粪便及尿液中的代谢产物

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中国中药杂志 2018年第9期43卷 1798-1805页

作者：许荣蓉刘浩龙陈筱清巴寅颖王星吴霞首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室北京100069 北京市药品检验所中药成分分析与生物评价北京市重点实验室北京100035

研究荜茇总生物碱中主要成分在正常大鼠粪便及尿液的代谢产物,推测其代谢途径。通过灌胃给予大鼠荜茇总生物碱后,收集粪便及尿液并进行预处理,采用高效液相色谱与傅里叶变换离子回旋共振质谱仪联用技术（HPLC-FT-MS）进行检测,根据高分... 详细信息

研究荜茇总生物碱中主要成分在正常大鼠粪便及尿液的代谢产物,推测其代谢途径。通过灌胃给予大鼠荜茇总生物碱后,收集粪便及尿液并进行预处理,采用高效液相色谱与傅里叶变换离子回旋共振质谱仪联用技术（HPLC-FT-MS）进行检测,根据高分辨质谱数据,并与文献对照,推测代谢产物的结构。在大鼠的粪便及尿液中检测到胡椒碱、胡椒新碱、荜茇明宁碱、二氢荜茇明宁碱、墙草碱及其13个代谢产物,进而提示荜茇总生物碱中的主要成分可能在大鼠体内通过Ⅰ相、Ⅱ相代谢反应产生代谢产物,并经粪便及尿液排出体外。为阐明荜茇总生物碱在体内发挥药效的物质基础和作用机制奠定基础。

关键词：荜茇总生物碱粪便尿液代谢产物 HPLC-FT-MS/MS

三七皂苷在大鼠外翻肠囊中的吸收及与P-糖蛋白相互作用研究

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北京中医药大学学报 2011年第12期34卷 836-842页

作者：萨础拉吕航姜艳艳巴寅颖石任兵北京中医药大学中药学院国家中医药管理局中药经典名方有效物质发现重点研究室北京100102 北京市教委中药质量控制技术工程中心

目的研究三七皂苷有效组分中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1在大鼠外翻肠囊模型中的吸收特性及其与P-糖蛋白(P-gp)的相互作用。方法采用HPLC法,建立三七皂苷有效组分中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1在肠液中含量测定方... 详细信息

目的研究三七皂苷有效组分中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1在大鼠外翻肠囊模型中的吸收特性及其与P-糖蛋白(P-gp)的相互作用。方法采用HPLC法,建立三七皂苷有效组分中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1在肠液中含量测定方法。采用大鼠外翻肠囊模型,考察不同时间、不同浓度及不同转运方向对三七皂苷有效组分中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1大鼠小肠吸收和转运的影响,并考察三七皂苷有效组分与P-gp抑制剂维拉帕米(Ver)合用前后,大鼠肠囊内人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1吸收量的变化。分别设空白组、Ver阳性对照组、三七皂苷有效组分高、中、低浓度组,考察三七皂苷有效组分对P-gp底物罗丹明-123(Rho123)转运的影响。结果三七皂苷有效组分中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1在不同时间及不同浓度条件下,对大鼠小肠的吸收和转运均为线性吸收,其回归系数r>0.9,均符合零级吸收速率。三七皂苷有效组分小肠吸收转运明显受到转运方向的影响,浆膜面至黏膜面B-A的转运量明显高于黏膜面至浆膜面A-B。三七皂苷有效组分与Ver合用后,人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1在大鼠小肠中的吸收量显著增加(P<0.05)。三七皂苷有效组分可使P-gp底物Rho123转运量增加,与空白组比较有显著性差异(P<0.05),尤其以三七皂苷有效组分高浓度组最为显著,与Ver阳性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论三七皂苷有效组分中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1在大鼠小肠的吸收和转运均为线性吸收,可认为在大鼠小肠吸收机制为被动转运机制,并具有明显的P-gp底物转运特性及抑制P-gp底物外排作用。

关键词：三七皂苷外翻肠囊 P-糖蛋白高效液相色谱大鼠