检索结果-南通市图书馆

基于单细胞RNA测序和空间转录组测序分析矽肺中巨噬细胞差异基因及其功能

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

环境与职业医学 2022年第12期39卷 1350-1358页

作者：周馨蓓张伟巢杰东南大学公共卫生学院/环境医学工程教育部重点实验室江苏南京210009 东南大学医学院生理系江苏南京210009

[背景]单细胞RNA测序技术(scRNA-seq)和空间转录组测序技术的兴起使得肺部疾病得以深入研究,但这两者在矽肺中的研究甚少。[目的]利用scRNA-seq联合空间转录组测序技术探索矽肺巨噬细胞中差异表达基因(DEGs)和潜在诊断基因。[方法]雄性C... 详细信息

[背景]单细胞RNA测序技术(scRNA-seq)和空间转录组测序技术的兴起使得肺部疾病得以深入研究,但这两者在矽肺中的研究甚少。[目的]利用scRNA-seq联合空间转录组测序技术探索矽肺巨噬细胞中差异表达基因(DEGs)和潜在诊断基因。[方法]雄性C57BL/6小鼠(5~6周龄,22~30 g)随机分为4组,即生理盐水(NS)组7 d、NS组56 d、SiO_(2)组7 d及SiO_(2)组56 d,每组各1只。SiO_(2)组小鼠通过气管滴注SiO_(2)悬液(0.2 g·kg^(−1),50 mg·mL^(−1))构建矽肺模型,对照组小鼠给予相同体积NS,第7、56天分别摘取右肺用于scRNA-seq以及左肺用于空间转录组测序。利用主成分分析技术和均匀流形逼近和投影降维,捕获细胞群。应用R语言的Find Markers函数分析两组肺组织中巨噬细胞的DEGs变化,对相应的DEGs进行基因本体富集分析和京都基因与基因组百科全书信号通路分析,同时应用STRING及Cytoscape软件的CytoHubba插件进行蛋白相互作用网络分析,筛选出关键(Hub)基因。运用空间转录组测序探究Hub基因在肺组织切片上的原始位置以及在肺巨噬细胞中的映射。最后验证Hub基因在矽肺病患者肺组织和小鼠矽肺模型中表达水平的关联性以及运用受试者工作特征曲线验证Hub基因诊断效能。体外实验应用细胞活力检测技术,验证SiO_(2)刺激下小鼠巨噬细胞(RAW264.7)活力的变化。[结果]scRNA-seq显示共捕获并定义了20个细胞群。scRNA-seq和空间转录组测序结果显示,与NS组相比,在SiO_(2)组小鼠肺组织中观察到巨噬细胞数量增多且聚集在病灶区。共筛选出97个巨噬细胞DEGs,包括75个上调基因,主要富集于中性粒细胞的趋化和迁移、趋化因子受体结合、肿瘤坏死因子信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用通路、白介素-17信号通路等过程中;22个下调基因,主要富集于晚期内吞体、过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路和酒精性肝病信号通路等过程中。共筛选出2个核心模块和3个Hub基因,包括Ccl2、Ccl7、Ptgs2,scRNA-seq显示与NS组相比,它们在SiO_(2)组的表达水平升高且聚集在新增的巨噬细胞中,空间转录组测序显示它们聚集在炎性伴有结节病灶区;CCL7、PTGS2在矽肺患者肺组织中表达量相较于健康者增高,受试者工作曲线下的面积分别为0.850和0.786。与0 h相比,SiO_(2)刺激下3 h、6 h、12 h RAW264.7细胞活力增强(P<0.05)。[结论]通过生物信息学筛选出了矽肺小鼠肺组织的3个Hub基因(Ccl2、Ccl7、Ptgs2)和2个潜在诊断基因(CCL7、PTGS2)可能是潜在的矽肺早期阶段的分子生物学标志物,对矽肺的发生发展和预后存在一定的影响。

关键词：矽肺单细胞RNA测序空间转录组测序差异表达基因蛋白质互相作用网络富集分析

乡镇综合行政执法改革实践中的问题以及对策研究——以常州市Z镇为例

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

乡镇综合行政执法改革实践中的问题以及对策研究——以常州市Z镇...

作者：巢杰明南京林业大学

学位级别：硕士

行政执法能力既是国家治理体系完善与否的体现,又是决定政府法治现代化能力的关键性因素。自党的十八大以来,乡镇综合行政执法改革是我国全面深化改革的重点,也成为政府治理的难点。为了有效解决乡镇长期存在的大责小权、权责分离等问题... 详细信息

行政执法能力既是国家治理体系完善与否的体现,又是决定政府法治现代化能力的关键性因素。自党的十八大以来,乡镇综合行政执法改革是我国全面深化改革的重点,也成为政府治理的难点。为了有效解决乡镇长期存在的大责小权、权责分离等问题,近年来,常州市Z镇全面实施综合行政执法改革工作,涉及的领域多、影响的范围广泛,逐渐形成常州市Z镇自有的综合行政执法改革固有模式,因此,本文以常州市Z镇的综合行政执法改革实践为研究对象,深入综合行政执法改革实践中的问题及应对策略。论文从理论层面探讨了行政执法、乡镇综合行政执法改革的核心概念,以新公共服务理论和公共选择理论作为研究乡镇综合行政执法改革实践的理论基础,深入剖析了常州市Z镇综合行政执法改革的实践过程,通过实地调查和访谈,详细展现了该镇的执法改革背景、改革思路、改革历程和改革的主要做法。研究发现,常州市Z镇在改革过程中,积极构建新的执法模式,推进执法重心下移,充实综合行政执法专业力量,构建社会监督机制等方面取得了显著成效。但在实践中仍存在以下问题:执法与监管的权责不对等、执法权力下放后指导监督不足、深化综合行政执法改革的进程缓慢、综合行政执法数字化、信息化建设薄弱等,主要是由于整体谋划不够、科学管理意识不强、法律法规尚不完善、科技赋能执法作用未完全体现等因素导致的。据此,论文提出了改革的完善对策,包括:厘清权责边界关系、从“质”上提升综合行政执法的能力、解放思想观念,完善法律体系、完善综合行政执法信息化建设等。常州市Z镇行政综合行政执法改革的初衷和本质就是解决基层执法的弊端,希望后期深化综合行政执法改革时能结合农村农业发展特色,建立健全该镇的综合行政执法体系,不断提升综合行政执法的办事效率,实现群众满意度和获得感的不断提升,切实享受综合行政执法改革的成果,同时也希望通过本研究为其他乡镇综合行政执法改革实践提供参考。

关键词：乡镇综合行政执法综合行政执法改革行政执法

基于单细胞转录组测序探索FABP5在矽肺纤维化中Ⅱ型肺泡上皮细胞的特异性表达

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

环境与职业医学 2022年第10期39卷 1089-1094页

作者：杨少奇史晓妮成于思巢杰东南大学公共卫生学院/环境医学工程教育部重点实验室江苏南京210000 东南大学医学院生理学系江苏南京210000

[背景]矽肺是由于长期吸入大量游离的二氧化硅(SiO_(2))颗粒所致,探讨其机制可以为矽肺纤维化的治疗提供新的方向。[目的]本研究着重探讨脂肪酸结合蛋白5(FABP5)在SiO_(2)诱导的矽肺模型中的表达及发挥的作用。[方法]结合前期单细胞转... 详细信息

[背景]矽肺是由于长期吸入大量游离的二氧化硅(SiO_(2))颗粒所致,探讨其机制可以为矽肺纤维化的治疗提供新的方向。[目的]本研究着重探讨脂肪酸结合蛋白5(FABP5)在SiO_(2)诱导的矽肺模型中的表达及发挥的作用。[方法]结合前期单细胞转录组测序结果,利用生物信息分析技术对小鼠肺泡上皮细胞进行分群并探索FABP5的表达模式;采用空间转录组学技术探索fabp5的分布模式。小鼠气管滴注SiO_(2)建立矽肺纤维化模型,设置4个组别:生理盐水(normal saline,NS)7 d组、NS 56 d组、SiO_(2)7 d组、SiO_(2)56 d组。SiO_(2)处理小鼠肺上皮细胞系(MLE-12)建立矽肺体外模型。在动物整体水平,利用组织免疫荧光实验检测上皮细胞的标志物(E-Cad)和FABP5的蛋白水平;在体外水平,利用MLE-12验证细胞模型中fabp5 mRNA表达变化和蛋白水平变化。[结果]单细胞转录组测序结果及空间转录组测序结果显示在小鼠矽肺病灶区域Ⅱ型肺泡上皮细胞中fabp5 mRNA表达上调,伴随着组织免疫荧光蛋白水平升高,且与E-Cad存在共定位现象。同时SiO_(2)刺激诱导MLE-12细胞中fabp5 mRNA表达升高至1.58倍和蛋白水平上升至2倍,差异均具有统计学意义(P<0.05)。[结论]在肺纤维化模型的肺泡上皮细胞中,FABP5的蛋白水平上升,提示FABP5可能参与上皮细胞在肺纤维化病理进程。

关键词：脂肪酸结合蛋白5 矽肺单细胞转录组测序空间转录组测序

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

离心洗涤SO^2—4

电源技术 1991年第6期15卷 46-47页

作者：巢杰

T-bet:脓毒症免疫失衡中Th17细胞的新型调节分子

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中华重症医学电子杂志 2023年第3期9卷 280-285页

作者：高超巢杰邱海波江苏省重症医学重点实验室东南大学附属中大医院重症医学科南京210009 东南大学医学院生理学系南京210009

脓毒症免疫失衡中Th17细胞发挥重要作用,作为具有高度可塑性的细胞群体,Th17细胞已经被证明内部存在表达多种特征性转录因子的亚群(如表达T-bet的Th1样Th17细胞等),可能在不同诱导条件下产生不同的转分化结局。转录因子T-bet作为Th1细... 详细信息

脓毒症免疫失衡中Th17细胞发挥重要作用,作为具有高度可塑性的细胞群体,Th17细胞已经被证明内部存在表达多种特征性转录因子的亚群(如表达T-bet的Th1样Th17细胞等),可能在不同诱导条件下产生不同的转分化结局。转录因子T-bet作为Th1细胞分化的驱动者,近年来被证明可以通过阻断Rorc基因的反式激活,抑制Th17细胞分化。因此,T-bet的表达水平在一定程度上可以决定Th17细胞的转分化方向,尤其是在多种感染性疾病模型中,T-bet敲除促进Th17细胞分化,增强了免疫应答水平,且敲除T-bet能有效降低小鼠流感病毒-细菌二次感染模型的病死率。但另一方面,小鼠Th17细胞中特异性敲除T-bet影响Th17至Th1转分化,导致脓毒症小鼠肾脏细菌载量增加。上述看似对立的现象提示,T-bet作为Th1、Th17细胞分化中的“桥梁性”分子,在免疫调节中究竟是增强“保护性免疫反应”还是加剧“病理性免疫反应”或许与更复杂的生理机制相关。本文通过介绍转录因子T-bet在Th17细胞分化中的作用,对T-bet这一关键分子在机体免疫应答中的特殊功能进行讨论,为脓毒症等感染性疾病提供新的免疫学思考视角。

关键词：脓毒症免疫失衡 T-bet Th17细胞

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

联苯胺荧光分光光度法测定一氧化氮合酶活力

中国药科大学学报 2002年第2期33卷 134-137页

作者：巢杰陈丁丁高利忠夏彩霞中国药科大学药理学研究室南京210009

目的 :建立联苯胺荧光分光光度法测定一氧化氮合酶 (NOS)活力的方法。方法 :采用联苯胺荧光分光光度法测定生物样品中 NOS在单位时间内生成的一氧化氮 (NO)量来计算 NOS活力。结果 :联苯胺荧光分光光度法测出的 NOS活力与文献报道基本... 详细信息

目的 :建立联苯胺荧光分光光度法测定一氧化氮合酶 (NOS)活力的方法。方法 :采用联苯胺荧光分光光度法测定生物样品中 NOS在单位时间内生成的一氧化氮 (NO)量来计算 NOS活力。结果 :联苯胺荧光分光光度法测出的 NOS活力与文献报道基本一致。结论 :联苯胺荧光分光光度法具有简便、迅速和重现性好的特点 ,适合于大批量组织器官样品中的

关键词：荧光分光光度法联苯胺一氧化氮合酶一氧化氮活力测定

外泌体在肺相关疾病中的诊治作用及其分子机制研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

东南大学学报（医学版） 2022年第5期41卷 725-730页

作者：丁旭张浩天杨凯哲王哲张宇成于思巢杰东南大学医学院生理学系江苏南京210009

外泌体是由细胞分泌释放到细胞外基质的纳米级膜性囊泡,其由脂质双层膜包裹。外泌体富含细胞特异的蛋白质、脂类以及核酸等多种生物活性物质,参与多种疾病的病理生理过程,可作为细胞间的重要信息载体,广泛参与细胞间的信息传递。近年来... 详细信息

外泌体是由细胞分泌释放到细胞外基质的纳米级膜性囊泡,其由脂质双层膜包裹。外泌体富含细胞特异的蛋白质、脂类以及核酸等多种生物活性物质,参与多种疾病的病理生理过程,可作为细胞间的重要信息载体,广泛参与细胞间的信息传递。近年来,越来越多的研究指出外泌体在一些肺部炎症性疾病的发病进展中发挥着重要作用,如急性呼吸窘迫综合征、支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等,故外泌体有望作为这些疾病的新型诊断标志物及生物治疗靶点。本文作者综述了外泌体在肺相关疾病中作用的研究进展。

关键词：外泌体肺部疾病发病机制诊断治疗综述

PPP2R3A通过调控p53的表达促进矽肺肺纤维化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2022年第4期53卷 490-497页

作者：史晓妮杨少奇成于思巢杰东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室南京210009 东南大学医学院生理学系南京210009

矽肺是世界范围内较严重的职业病之一,其发病机制尚未完全阐释清楚。蛋白磷酸酶2A(PP2A)具有调节肿瘤信号通路、细胞发育进程及细胞周期的功能,PP2A的调节亚基B与核心酶结合,导致PP2A全酶复合物的组织表达特异性和底物特异性。蛋白磷酸... 详细信息

矽肺是世界范围内较严重的职业病之一,其发病机制尚未完全阐释清楚。蛋白磷酸酶2A(PP2A)具有调节肿瘤信号通路、细胞发育进程及细胞周期的功能,PP2A的调节亚基B与核心酶结合,导致PP2A全酶复合物的组织表达特异性和底物特异性。蛋白磷酸酶2A调节亚基B″α(PPP2R3A)是PP2A调节亚基B″中的一个亚基,是细胞增殖的调节因子,但目前的研究尚不清楚PPP2R3A在肺纤维化中所发挥的作用。本研究采用气管滴注二氧化硅(SiO_(2),250 mg/kg)构建肺纤维化模型;采用5 ng/mL TGF-β1刺激人肺成纤维细胞(HPF-a)构建纤维化相关的细胞模型;qRT-PCR实验检测Ppp2r3a转录水平;免疫荧光和蛋白免疫印迹实验检测蛋白水平;采用CCK-8实验检测细胞活力;划痕实验检测细胞迁移能力。实验结果表明,SiO_(2)模型组小鼠出现矽结节且胶原沉积明显,PPP2R3A在肺脏成纤维细胞中表达上升,可以影响细胞的活力和迁移能力,且可能通过调控p53信号通路的表达促进肺纤维化的进程。本研究为肺纤维化的防治提供了新的思路。

关键词： PPP2R3A 矽肺肺纤维化二氧化硅 p53信号通路

腺苷对L-甲状腺素诱发的大鼠肥厚左室心肌中NO含量及NOS活力的影响

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2002年第4期33卷 335-338页

作者：陈丁丁巢杰高利忠李薇王友群中国药科大学药理学研究室南京210009

目的　研究腺苷 (Adenosine,Ade)对 L-甲状腺素 (L-thyroxine,L-Thy)诱发的大鼠缺血性肥厚左室心肌中一氧化氮 (NO)含量和一氧化氮合酶 (NOS)活力的影响。方法　 NO含量和 NOS活力采用联苯胺荧光分光光度法测定。结果　 L-Thy诱发的肥... 详细信息

目的　研究腺苷 (Adenosine,Ade)对 L-甲状腺素 (L-thyroxine,L-Thy)诱发的大鼠缺血性肥厚左室心肌中一氧化氮 (NO)含量和一氧化氮合酶 (NOS)活力的影响。方法　 NO含量和 NOS活力采用联苯胺荧光分光光度法测定。结果　 L-Thy诱发的肥厚左室心肌中的 NO含量比正常对照组显著下降 ,Ade 5 ,1 0 mg· kg- 1·d- 1 ig3 d后 ,可使 NO含量恢复到正常水平。与正常对照组相比 ,L-Thy诱发的肥厚左室心肌中诱导型 NOS(i NOS)活力显著升高 ;结构型 NOS(c NOS)活力显著下降。 Ade 1 0 mg· kg- 1 · d- 1 ig 3 d后 ,i NOS活力比病理组显著下降。Ade5 ,1 0 mg·kg- 1·d- 1 ig3 d后 ,c NOS活力均可恢复至正常水平。结论　Ade通过恢复 L-Thy诱发的大鼠肥厚左室心肌中的 c NOS活力 ,降低 i NOS活力 ,升高 NO含量 ,发挥心肌保护作用。Ade对实验性甲亢大鼠缺血性肥厚左室的治疗作用部分是通过 NO通路实现的。

关键词：腺苷 L-甲状腺素一氧化氮一氧化氮合酶心肌肥厚动物实验