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高温噬菌体裂解酶TSPpgh的抑菌作用研究

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高温噬菌体裂解酶TSPpgh的抑菌作用研究

作者：嵇歆彧昆明理工大学

学位级别：硕士

M23家族蛋白酶具有内肽酶和酰胺酶活性,能降解细菌细胞壁肽聚糖,作为新型的蛋白类抗生素倍受关注。部分噬菌体裂解酶属M23家族蛋白酶,能高效地裂解多重耐药性细菌,使其有望应用于取代传统的抗生素治疗。本文在已获得腾冲热海栖热菌噬菌... 详细信息

M23家族蛋白酶具有内肽酶和酰胺酶活性,能降解细菌细胞壁肽聚糖,作为新型的蛋白类抗生素倍受关注。部分噬菌体裂解酶属M23家族蛋白酶,能高效地裂解多重耐药性细菌,使其有望应用于取代传统的抗生素治疗。本文在已获得腾冲热海栖热菌噬菌体TSP4基因组的基础上,分析此噬菌体裂解酶基因的基本特征,对裂解酶基因进行克隆表达,同时探索利用高温酶热稳定性高的特点,建立基于菌体热裂解的重组裂解酶快速纯化方法,并通过抑菌活性和AFM观察评价纯化后裂解酶的活性。最后将裂解酶用可溶性淀粉吸附制备成酶制剂,定期评价酶制剂的酶活变化。为了探索裂解酶的裂解机理,本文分别利用革兰氏阴性菌大肠杆菌、革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌的肽聚糖,与裂解酶进行反应,研究其对肽聚糖的吸附特征,通过液质联用分析裂解酶水解肽聚糖的位点,并进一步通过对裂解酶基因的定点突变,验证裂解酶的活性位点及特征。为了探索裂解酶的抑菌效果,本文通过致死率分析及电镜观察,评价裂解酶对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和多重耐药肺炎克雷伯氏菌的抑菌效果。并通过在小鼠身上制造了皮肤伤口,定殖耐药金黄色葡萄球菌随后用TSPpgh对局部进行治疗,探索裂解酶在治疗多重耐药金黄色葡萄球菌在外伤感染中的作用。结果表明,栖热菌噬菌体TSP4裂解酶TSPpgh属于M23肽酶家族,推测motif HXXXD和HXH为TSPpgh的活性位点,并进行了突变验证。将裂解酶基因TSPpgh克隆表达后,得到分子量19 KDa的重组蛋白。通过对诱导表达后的发酵液升温至55℃并维持20分钟,能使细胞破裂并变性沉淀去除掉绝大多数表达菌株大肠杆菌的蛋白,从而实现裂解酶的快速纯化,结合高密度发酵技术,发酵液中裂解酶浓度可达2 mg/mL。裂解酶对金黄色葡萄球菌ATCC 6538的杀菌效率最高,可达90%。通过AFM观察表明,TSPpgh裂解了大肠杆菌BL21(含TSPpgh质粒)和金黄色葡萄球菌的细胞壁,制备的酶制剂在20℃保存一年其酶活能保持75%。裂解酶TSPpgh能够吸附和水解革兰氏阴性菌和阳性菌的肽聚糖,并且能够水解弹性蛋白。通过液质联用分析TSPpgh水解肽聚糖的位点表明,TSPpgh还能够水解糖苷键Glcp-β-1’-6’-Glcp-β-1’-1’,具有糖苷酶的活性。抑菌实验表明,TSPpgh在37℃、酶浓度为68μg/mL的浓度下,裂解酶TSPpgh对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌CMCC(B)50094和大肠杆菌CMCC(B)44102菌株的致死率达90%,对多重耐药肺炎克雷伯氏菌的致死率高达80%以上,部分致死率可达100%;通过SEM观察表明,裂解酶TSPpgh通过裂解作用而实现其杀菌功能。本研究在小鼠身上制造了皮肤伤口,定殖耐药金黄色葡萄球菌2612-1606BL1486,随后用TSPpgh对局部进行治疗。在为期9天的治疗期间,TSPpgh和卡那霉素均快速的促进了伤口愈合。验证了裂解酶TSPpgh在治疗多重耐药金黄色葡萄球菌在外伤感染中的作用。本文建立了高温裂解酶的高效表达和快速纯化方法,结合此裂解酶较广泛的细菌裂解谱、较高的裂解酶活性以及热稳定性,使其具有较好的生产应用前景,其对多重耐药菌良好的杀灭效果,有助于其作为新型的酶抗生素应用于医药研发。

关键词：噬菌体裂解酶TSPpgh 多重耐药性细菌杀菌活性肽聚糖降解

基于匮乏成本的应急物资政企合作储备与运输策略研究

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系统工程理论与实践 2024年第5期44卷 1603-1614页

作者：樊彧邵建芳王熹徽中国科学技术大学管理学院国际金融研究院合肥230026

近年来,我国自然灾害频发,对人民群众的生命财产安全造成极大威胁.实践证明,政企合作储备与运输应急物资有利于更好地备灾、救灾.尽管我国的政企合作已经初具规模,但是无论是研究还是实践中,这些合作主要考虑的仍然是双方的成本,忽视了... 详细信息

近年来,我国自然灾害频发,对人民群众的生命财产安全造成极大威胁.实践证明,政企合作储备与运输应急物资有利于更好地备灾、救灾.尽管我国的政企合作已经初具规模,但是无论是研究还是实践中,这些合作主要考虑的仍然是双方的成本,忽视了灾民长时间缺乏应急物资所产生的痛苦,而减轻这种痛苦恰好是应急物流的根本目的,是应急物流与商业物流的本质区别,有利于更好地贯彻“以人为本”的救灾理念.为此,本文引入匮乏成本,用以衡量灾民因缺乏应急物资而产生的痛苦,并以此为基础针对以下核心问题进行了研究与探索:1)在考虑异质化运输条件的情况下,如何确定应急物资的储备量以及价格以保证政府与企业达成双赢?2)不同的应急物流情境(不同的应急物资、需求分布以及匮乏成本权重)会对政企合作造成怎样的影响?为解决上述研究问题,本文建立了基于斯塔克伯格博弈的政企合作模型,并通过数值算例以及敏感度分析,对模型的可行性进行了验证.本文通过引入匮乏成本,提出了由于长时间物资匮乏造成的灾民痛苦的衡量工具,拓宽了政企合作应急物流的研究思路,有利于践行“以人为本”的思想,为实际应急物流运作提供模型工具与理论基础.

关键词：应急物流匮乏成本政企合作储备与运输异质化交通运输条件斯塔克伯格博弈

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中华民族现代文明的内涵辨析、演进规律及世界意义

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马克思主义研究 2024年 45-55页

作者：嵇睿中国人民大学马克思主义学院

中华民族现代文明作为人类历史上一种崭新的文化生命体,实现了对中华文明突出特性的创新性发展,即从文明基因、文明主张、文明逻辑、文明理念和文明图景五大方面的内涵更新。中华文明在现代转化中始终遵循着特定的发展规律,正是在“一... 详细信息

中华民族现代文明作为人类历史上一种崭新的文化生命体,实现了对中华文明突出特性的创新性发展,即从文明基因、文明主张、文明逻辑、文明理念和文明图景五大方面的内涵更新。中华文明在现代转化中始终遵循着特定的发展规律,正是在“一般性与特殊性的辩证统一”“创新性与继承性的交融互通”以及“合规律性与合目的性的有机结合”过程中实现了自身现代意蕴的创生和呈示。建设中华民族现代文明作为“新的文化使命”的重要组成部分,体现了对世界文明发展的深切关怀,为促进各民族国家文明互鉴贡献了中国智慧、为跨越全球文明发展藩篱提供了中国经验、为终结资本主义西式“文明”提供了中国力量、为开创人类文明新形态作出了中国贡献。

关键词：中华文明中华民族现代文明世界意义

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北魏元氏墓志碑别字研究

南京艺术学院学报（美术与设计） 2024年第1期 21-26页

作者：朱沈彧南京艺术学院美术学院江苏南京210013

北朝碑版墓志中存有大量异体字、俗体字、别字,一般将之统称为碑别字。本文通过对北魏元氏墓志中众多碑别字的归纳与总结,将其分为简化与繁化、汉字构件的混用与替换、汉字构件的移位、文字隶定所产生的异体字四类,将碑别字置入文字发... 详细信息

北朝碑版墓志中存有大量异体字、俗体字、别字,一般将之统称为碑别字。本文通过对北魏元氏墓志中众多碑别字的归纳与总结,将其分为简化与繁化、汉字构件的混用与替换、汉字构件的移位、文字隶定所产生的异体字四类,将碑别字置入文字发展史维度中,结合书、刻两方面的实际探讨碑别字产生的原因,并关照当下书法创作与审美。

关键词：元氏墓志碑别字类别成因

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北疆文化在构建中华文明统一性中的历史意义

内蒙古社会科学 2024年第2期45卷 31-37页

作者：刘志彧内蒙古大学内蒙古呼和浩特010021

中华民族共同体的形成经历了几千年的历史变迁。在这漫长的历史进程中,“统一性”一直是中华文明的突出特性。在古代少数民族政权的更迭中,在其制度建设及文化的相互借鉴与吸收中,逐渐形成了以中华文明为底蕴的丰富多彩的北疆历史文化... 详细信息

中华民族共同体的形成经历了几千年的历史变迁。在这漫长的历史进程中,“统一性”一直是中华文明的突出特性。在古代少数民族政权的更迭中,在其制度建设及文化的相互借鉴与吸收中,逐渐形成了以中华文明为底蕴的丰富多彩的北疆历史文化和社会生活。北疆文化作为中华文明的有机组成,其物质文化、制度文化、精神文化在不断的丰富与发展中始终蕴涵着中华文明的统一性。北疆文化的提出不仅是对内蒙古文化发展规律的深刻把握,更是马克思主义基本原理同中华优秀传统文化相结合在内蒙古现代化建设中的具体践行。在中华文明延绵不断的赓续中,北疆文化在构建中华文明的统一性中发挥着不可替代的重要作用。

关键词：中华民族共同体统一性连续性民族交融北疆文化

中华民族现代文明的内涵辨析、演进规律及世界意义

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马克思主义研究 2024年第5期 45-55页

作者：嵇睿中国人民大学马克思主义学院北京100872

中华民族现代文明作为人类历史上一种薪新的文化生命体,实现了对中华文明突出特性的创新性发展,即从文明基因、文明主张、文明逻辑、文明理念和文明图景五大方面的内涵更新。中华文明在现代转化中始终遵循着特定的发展规律,正是在“一... 详细信息

中华民族现代文明作为人类历史上一种薪新的文化生命体,实现了对中华文明突出特性的创新性发展,即从文明基因、文明主张、文明逻辑、文明理念和文明图景五大方面的内涵更新。中华文明在现代转化中始终遵循着特定的发展规律,正是在“一般性与特殊性的辩证统一”“创新性与继承性的交融互通”以及“合规律性与合目的性的有机结合”过程中实现了自身现代意蕴的创生和呈示。建设中华民族现代文明作为“新的文化使命”的重要组成部分,体现了对世界文明发展的深切关怀,为促进各民族国家文明互鉴贡献了中国智慧、为跨越全球文明发展藩篱提供了中国经验、为终结资本主义西式“文明”提供了中国力量、为开创人类文明新形态作出了中国贡献。

关键词：中华文明中华民族现代文明世界意义

考虑政府间协同与信息资源共享的灾害应急响应策略及仿真分析

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系统工程理论与实践 2024年

作者：朱安琪王熹徽樊彧中国科学技术大学管理学院中国科学技术大学管理学院国际金融研究院

信息化、网络化的快速发展和城市化进程的加快使得突发灾害事故影响的广度和深度不断增加，而作为响应各类灾害的有效措施和重要保障，政府间协同仍然存在着权责划分不清，资源共享受阻，利益协调不合理等多个痛点问题. 鉴于此， ... 详细信息

信息化、网络化的快速发展和城市化进程的加快使得突发灾害事故影响的广度和深度不断增加，而作为响应各类灾害的有效措施和重要保障，政府间协同仍然存在着权责划分不清，资源共享受阻，利益协调不合理等多个痛点问题. 鉴于此，本研究基于演化博弈理论构建了考虑信息资源共享和物资共享的灾害应急响应策略选择模型，从微观的角度分析影响政府间协同的外部因素 (如灾情特征、区域位置) 和内部因素 (如合作效率、救援效益、利益协调等) ，以及纵向政府信息共享平台建设对横向政府间应急协同的引导效果，从而分析比较有无共享平台建设的横向政府的策略选择和演化路径. 基于粤港澳大湾区案例的数值分析可以得到如下结果和政策建议: (1) 信息共享平台在一定程度上可以提高横向政府间信息共享效率，进一步促进双方的合作协同. (2) 外部因素对横向政府间的合作影响显著，灾害较严重或距离较远不易合作. 另外，双方政府往往不会满足对方的全部需求，需要综合考虑物资合作协调量. (3) 利益分配的形式影响横向政府间协同，分配双方需要综合考虑灾情、收益和成本等外部和内部因素分配物资与收益，增加政府间合作可能性. (4) 信息共享平台的可追溯性能够为纵向政府提供更合理的激励、补贴和惩罚政策，促进了横向政府间的权责划分并避免应急管理的“失灵困境”. 建议横向政府间在灾害准备阶段建立完善的应急预案与合作评估机制，基于内部和外部因素制定合适的利益分配机制，并进行定期演练以提高双方合作效率. 而纵向政府应积极推进信息共享平台建设，利用区块链等信息技术完善共享流程与监查制度并设置合理的惩罚和激励机制，从而促进政府间协同下灾害应急的高效响应.

关键词：政府间协同应急管理演化博弈信息资源共享

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中国传统大菊叶片形态的数量化定义与分类

植物学报 2021年第1期56卷 10-24页

作者：宋雪彬高康黄河刘芷兰戴思兰嵇彧北京市林木分子设计育种高精尖创新中心北京林业大学园林学院国家花卉工程技术研究中心花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室城乡生态环境北京实验室北京100083 青岛农业大学园林与林学院青岛266109

中国传统大菊品种叶片形态变异丰富,然而至今仍未对其进行科学的定义和分类,无法有效利用这些形态性状进行品种鉴定和叶形遗传解析。利用数量化分析方法对植物形态进行定义和分类,是植物性状遗传解析的前提。对436个中国传统大菊品种的2... 详细信息

中国传统大菊品种叶片形态变异丰富,然而至今仍未对其进行科学的定义和分类,无法有效利用这些形态性状进行品种鉴定和叶形遗传解析。利用数量化分析方法对植物形态进行定义和分类,是植物性状遗传解析的前提。对436个中国传统大菊品种的24个叶形性状进行重新定义及观测,通过相关性分析确定了8个相对独立的性状,用变异系数及主成分分析等数量化分析方法筛选出叶长/叶宽、叶片最宽处所在位置/叶长、右下裂片长/右下叶脉长、右下裂片长/右下裂片宽及叶柄长/全叶长5个相对独立且关键的叶部性状。利用这5个性状,通过Q聚类分析,最终将菊花(Chrysanthemum×morifolium)叶片分为16种叶型。研究结果为菊花品种鉴定提供了有效的叶部评价标准,并建立了中国传统菊花品种叶片数量化定义和分类体系,也为观赏植物复杂性状的解析提供了新方法。

关键词：中国传统大菊叶片形态形态特征数量化定义分类

菜市“沉浮”:北京蔬菜供销政策变迁(1954—1962)

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北京档案 2024年第3期 63-68页

作者：王子彧中国政法大学马克思主义学院

中华人民共和国成立后,随着经济的恢复与发展,北京市人口数量不断增多,北京蔬菜供销存在供应不足、季节性短缺、某一蔬菜品种滞销现象等问题。为解决蔬菜供销过程中存在的问题,响应“为首都服务”的口号,北京市委市政府对于蔬菜供销政... 详细信息

中华人民共和国成立后,随着经济的恢复与发展,北京市人口数量不断增多,北京蔬菜供销存在供应不足、季节性短缺、某一蔬菜品种滞销现象等问题。为解决蔬菜供销过程中存在的问题,响应“为首都服务”的口号,北京市委市政府对于蔬菜供销政策不断进行改革,从“收购包销”、垄断蔬菜批发到“统购统销”、改造个体菜贩。个体菜贩的生存空间不断被挤压,国家逐渐将蔬菜业纳入国家计划经济轨道,而与此同时,蔬菜自由市场却屡禁不止。

关键词： “统购统销” 供销合作社个体菜贩场外交易