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酿酒酵母HOG1基因过量表达载体的构建与转化拟南芥的研究

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酿酒酵母HOG1基因过量表达载体的构建与转化拟南芥的研究

作者：岳华西北农林科技大学

学位级别：硕士

土壤盐碱化是目前影响农作物产量和质量的主要原因之一。分析植物盐胁迫下的耐性反应,寻找耐盐相关基因并揭示其机制,对揭示植物耐逆的机理具有重要的理论意义,而且对于耐盐作物的培育具有重要的实践意义。酵母是一种真核模式生物,同时... 详细信息

土壤盐碱化是目前影响农作物产量和质量的主要原因之一。分析植物盐胁迫下的耐性反应,寻找耐盐相关基因并揭示其机制,对揭示植物耐逆的机理具有重要的理论意义,而且对于耐盐作物的培育具有重要的实践意义。酵母是一种真核模式生物,同时也是一种耐盐微生物,研究其基因表达和信号传导系统的调节机制及离子运输机制对于阐明高等真核生物的耐盐机制具有重要的参考价值。HOG1是酵母中参与耐高渗透压重要的调控因子,酵母中对盐胁迫强烈应答的大多数基因都高度或完全依赖HOG1,但HOG1同源基因在高等植物中的表达及其影响还未见报道。本实验利用PCR的方法成功地克隆到了酿酒酵母HOG1基因,并将其成功转入模式植物拟南芥中,同时研究了HOG1基因在拟南芥中的过量表达,本研究结果对运用基因工程手段有效地提高植物的抗逆性提供了一定的基因资源,同时也为培育高效耐盐植物奠定了基础。取得的主要结果如下: ***1基因的克隆和植物表达载体的构建:以酿酒酵母总DNA为模板,根据NCBI网站上已经公布的HOG1基因(登录号:L06279)设计引物,经PCR扩增到完整的HOG1基因,利用引入的BamH I和Sac I酶切位点,将HOG1基因与植物表达载体pBI121经酶切后的长片段相连接,对重组后的载体进行PCR检测和酶切鉴定,成功构建了新的植物表达载体pBI121-HOG1。将重组质粒通过通过电击转化法导入根癌农杆菌GV3101中,Kan抗性筛选平板,并通过菌落PCR检测,证明重组质粒已转入根癌农杆菌GV3101中。 2.拟南芥的转化及分子生物学检测:通过花序浸润法(Floral Dip)转化拟南芥,并且利用标记基因对转基因植株进行筛选,同时进行分子生物学检测。结果表明:经卡那霉素抗性筛选,获得阳性植株22株,转化效率为2.2%。提取T代抗性苗基因组DNA进行PCR检测,共有19株呈阳性,对获得3个纯合的T代植株进行RT-PCR检测,均可扩增到目的条带。 3.转基因植株的耐盐性分析:为了研究HOG1基因的功能及其与耐盐性的关系,在MS固体培养基中添加不同浓度NaCl(0、50、100、150、200 mM)对转基因拟南芥T代进行耐盐性实验。研究结果表明:随着NaCl浓度增加,转基因株系的萌发率显著高于野生型拟南芥,随着胁迫处理的时间的增加,转基因植株生长状况要明显好于阴性对照植株;对转基因植株T代在土壤中的耐盐性分析表明,转基因植株生长速度快于野生型,受盐毒害的程度较轻。初步证明HOG1基因的转入在一定程度上提高了拟南芥的耐盐能力。

关键词： HOG1基因植物表达载体构建拟南芥转化耐盐性鉴定

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“知情同意”在医法关系中的执持与圆活

湖南师范大学社会科学学报 2004年第1期33卷 61-64页

作者：卢岳华湖南师范大学医学院湖南长沙410081

国务院《医疗事故处理条例》的发布实施,给广大患者赋予了法律层面上的"知情同意"权。这对于维护患者合法权益,改善医患关系,防止医生权力滥用,减少医疗纠纷,无疑会起到积极作用。在具体实施中,从生命伦理学角度对具有自主决定能力的人... 详细信息

国务院《医疗事故处理条例》的发布实施,给广大患者赋予了法律层面上的"知情同意"权。这对于维护患者合法权益,改善医患关系,防止医生权力滥用,减少医疗纠纷,无疑会起到积极作用。在具体实施中,从生命伦理学角度对具有自主决定能力的人理应原则坚持,但对一些无自主决定能力的患者,或心理极度脆弱乃至绝望的患者,或不愿接受知情同意而又可能伤及他人、影响社会的群体,就需要区分不同对象、不同场合,运用不同方式,在相关法律法规的框架范围内加以灵活掌握和圆通运用,从而避免对患者对他人对社会产生不利后果。

关键词：医法关系知情同意权医疗事故处理条例患者原则性灵活性可行性分析

走近彭州“南大门”──彭州市致和乡采访记实

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农村经济 1996年第7期 33-34页

作者：岳华富

走近彭州“南大门”──彭州市致和乡采访记实“我们有信心、有决心把彭州的南大门建设好，管理好，使她真正成为彭州市的“脸面”。一见面，不足４０岁的乡党委书记陈道顺和乡长潘太伟这样告诉我们。地处彭州市南郊的致和乡，辖２５个... 详细信息

走近彭州“南大门”──彭州市致和乡采访记实“我们有信心、有决心把彭州的南大门建设好，管理好，使她真正成为彭州市的“脸面”。一见面，不足４０岁的乡党委书记陈道顺和乡长潘太伟这样告诉我们。地处彭州市南郊的致和乡，辖２５个行政村２３６个合作社，幅员面积３９...

关键词：彭州市采访记家俱厂村党支部书记高等级公路农村劳动力合作社共同致富饮水工程发展战略

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原子吸收光谱法测定花粉中的微量元素

光谱学与光谱分析 2007年第8期27卷 1640-1643页

作者：梁保安付华峰许昌学院化学系河南许昌461000

采用中温灰化样品,6 mol·L^-1HNO3浸取灰化物,用LaCl3和CsCl消除相关干扰,应用标准曲线法在同一溶液中利用空气-乙炔火焰原子吸收光谱法测定花粉中Zn,Cd,Fe,Mn,Pb,Mg,Cu,K,Ca和Na共10种元素含量。结果表明,花粉含有丰富的Zn,Mg,K,Ca,N... 详细信息

采用中温灰化样品,6 mol·L^-1HNO3浸取灰化物,用LaCl3和CsCl消除相关干扰,应用标准曲线法在同一溶液中利用空气-乙炔火焰原子吸收光谱法测定花粉中Zn,Cd,Fe,Mn,Pb,Mg,Cu,K,Ca和Na共10种元素含量。结果表明,花粉含有丰富的Zn,Mg,K,Ca,Na以及Fe,Mn,Cu,有害元素Pb的含量很低,Cd未检出。以野霍香花粉为例,详细研究确定了合适的样品处理及消除干扰条件,考察了方法的准确度和精密度。在选定的条件下,花粉中各元素间相互不干扰,可在同一份制备液中进行10种元素的分别测定。方法的加标回收率在93.4%-112.0%之间,相对标准偏差在0.3%-2.6%之间（n=5）,测定结果准确可靠。

关键词：火焰原子吸收光谱法微量元素花粉

初中阶段流动学生数学学习兴趣的现状及原因分析——以成都高新区九年一贯制学校为例

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初中阶段流动学生数学学习兴趣的现状及原因分析——以成都高新区...

作者：岳华四川师范大学

学位级别：硕士

近年来,随着国家对于基础教育均衡化的不断推进,教育公平的重视程度与日俱增,基础教育发展的内外环境得到了显著改变。成都作为重要的人口迁入地,每年都会涌入大量的流动人口,妥善解决好这部分群体子女——流动学生的受教育问题不仅具... 详细信息

近年来,随着国家对于基础教育均衡化的不断推进,教育公平的重视程度与日俱增,基础教育发展的内外环境得到了显著改变。成都作为重要的人口迁入地,每年都会涌入大量的流动人口,妥善解决好这部分群体子女——流动学生的受教育问题不仅具有重要的教育意义,也具有现实的社会价值。初中数学具有较强的逻辑性、思维性、抽象性,是容易出现学习困难,导致学习兴趣障碍的学科。对于学习基础相对薄弱,学习环境相对较差的流动学生,更是容易产生数学学习的不适性,出现学习兴趣不足等问题。因此,如何根据初中数学的学科特色,从初中流动学生学情出发,着力提升其数学学习兴趣,有利于提升数学课堂教学质量,改进数学教学效果,促进流动学生学习力的提升与综合素养发展。基于此,以四川省成都高新区九年一贯制初中为例,通过调查研究与个案访谈相结合的方式,对初中流动学生学习兴趣现状进行了研究,发现:1.相对于当地学生,初中流动学生的数学学习兴趣略低。男生的数学学习兴趣高于女生,但稳定性低于女生。学生的数学学习兴趣随年级升高而递减,毕业年级的学习兴趣最低。不同家庭照养方式的学生数学学习兴趣存在差异,其他人员照看的学生学习兴趣最低。不同学习成绩的学生的学习兴趣存在较大差异。2.课堂教学、学习行为、家庭环境、学校管理对于流动学生的数学学习情趣存在显著影响,其中92.8%的比例可以通过以上自变量予以解释。而在其中教师的教学方法、专业素养,学生的认识水平、同伴组织,家庭的教养方式、亲子关系又发挥着显著影响。3.较高比例的流动学生不能全面认识到数学学习的工具价值与教育意义,提升数学学习兴趣的主动性存在欠缺,对于能否结合初中生实际提升数学学习兴趣的动力不足。从着眼学生学情,改进教学方法;转化学习认知,完善学生组织;创新管理思路,增强支持力度;密切亲子关系,提升家教水平等方面提出具体实施策略,促进初中生学习兴趣提升。笔者结合工作思考与管理经验,将数学学习兴趣的相关问题呈现出来,有利于提出针对性的教育对策,促进初中流动学生学习兴趣的激发,为其融入崭新学习环境,形成良好的学习与交往习惯,实现以数学学习改进带动整体学习进步提供有力支撑。

关键词：初中数学流动学生学习兴趣

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多功能双螺杆挤出机的开发与应用

中国塑料 1999年第3期13卷 84-86页

作者：王效岳华珍西安理工大学

介绍一种多功能双螺杆挤出机，成功地开发了双螺杆挤出机用传动箱。

关键词：双螺杆挤出机传动箱止推装置塑料挤出成型

不学索尼,学三星关于国内企业推行TPM的探讨

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企业管理 2003年第10期 60-61页

作者：岳华新深圳3A企管顾问公司

国内企业都面临着严峻的挑战:管理落后,设备陈旧,员工素质普遍偏低等,而这一系列的病症怎样才能除掉?大家都期盼着一套行之有效的管理办法问世,中国的企业家在迷茫中探索。于是出现了这样的现象:有的向日本的索尼学习,有的向韩国三星学... 详细信息

国内企业都面临着严峻的挑战:管理落后,设备陈旧,员工素质普遍偏低等,而这一系列的病症怎样才能除掉?大家都期盼着一套行之有效的管理办法问世,中国的企业家在迷茫中探索。于是出现了这样的现象:有的向日本的索尼学习,有的向韩国三星学习,还有的向美国的GE公司学习……在众多的管理方法中,适合中国企业的是哪一种呢?

关键词：三星公司 TPM 企业管理全面生产管理

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