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A2AR拮抗剂SCH58261对小鼠小胶质细胞OGD/R增殖活化的影响

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A2AR拮抗剂SCH58261对小鼠小胶质细胞OGD/R增殖活化的影响

P-JNK在A_(2A)R敲除新生小鼠HIBD细胞凋亡中的表达研究

2014年浙江省医学会儿科学分会学术年会暨儿内科疾病诊治新进展国家级继续教育学习班

作者：尹水贵陈翔温州医科大学附属第二医院康复医学科

目的:探讨拮抗A2AR表达对小胶质细胞OGD/R后其活化增值情况的影响以及A2AR对小胶质细胞OGD/R的炎症因子TNF-α基因表达的影响。方法:采用购买的小鼠小胶质细胞,进行细胞传代,取培养3-5代的细胞实验,细胞培养至60%0%时,进行体外氧糖剥夺... 详细信息

目的:探讨拮抗A2AR表达对小胶质细胞OGD/R后其活化增值情况的影响以及A2AR对小胶质细胞OGD/R的炎症因子TNF-α基因表达的影响。方法:采用购买的小鼠小胶质细胞,进行细胞传代,取培养3-5代的细胞实验,细胞培养至60%0%时,进行体外氧糖剥夺后复氧复糖模型(oxygen glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)模拟小胶质细胞在体内缺血缺氧状态,分别缺氧缺糖4h、8h、12h后复氧复糖12h,O组(OGD)只缺氧缺糖,M组(OGD/R,Model)缺氧缺糖后复氧复糖12小时,并设相应对照C组(Control),模型前加入经过缺氧预处理的无糖1640及A2AR拮抗剂SCH58261,倒置显微镜下观察细胞形态的改变,细胞爬片后免疫荧光标记Iba-1后荧光显微镜下观察细胞,取出细胞后提取RNA测定A2AR及TNF-αmRNA的表达。结果:O组小胶质细胞突触回缩,细胞变圆、变大,成为阿米巴样活化的小胶质细胞,O8h组表现最为明显。而O24h组细胞出现结构模糊、胞体肿胀、胞浆水肿,不同程度的核深染、细胞核皱缩。这些表现在M组表现较O组不明显。O组小胶质细胞的活力在不同时间点与C组间差异有统计学意义(P0.05)。荧光下Iba-1显红光,因其表达在胞浆内,能清楚显示细胞形态,M组与倒置显微镜下类似,存在个别活化的小胶质细胞,尚不能区分OGD/R后小胶质细胞活化情况。随着时间的变化,A2ARmRNA表达在M与C组之间差异有统计学意义(P0.05)。M各组不同时间点TNF-αmRNA的表达增加,其表达与C组差异有统计学意义(P<0.01 P<0.05),并在MC8h组表达最明显(P<0.01)。MC组与MS组之间,MS表达较MC组减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:A2AR拮抗可减少小胶质细胞OGD/R后TNF-αmRNA的表达,提示A2AR拮抗后通过下调小胶质细胞活化后的炎症反应而起到抑制脑组织进一步损伤,从而促进其神经功能恢复的作用。

关键词：小胶质细胞 OGD/R SCH58261 A2AR 小胶质细胞活化

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中国应用生理学杂志 2013年第2期29卷 187-192页

作者：范海玲尹水贵娄普任素伟黄胜陈翔温州医学院温州医学院附属第二医院育英儿童医院浙江温州325027

目的:探讨腺苷A2A受体(A2AR)敲除的新生小鼠在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区磷酸化c-jun氨基末端激酶(P-JNK)激活的动态变化及其与神经细胞凋亡的关系。方法:参照经典Rice-Vannucci法建立7日龄新生小鼠HIBD模型。A2AR敲除(KO)小鼠... 详细信息

目的:探讨腺苷A2A受体(A2AR)敲除的新生小鼠在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区磷酸化c-jun氨基末端激酶(P-JNK)激活的动态变化及其与神经细胞凋亡的关系。方法:参照经典Rice-Vannucci法建立7日龄新生小鼠HIBD模型。A2AR敲除(KO)小鼠及同窝野生型(WT)小鼠80只,设假手术(S)组,模型组(M)分1 d,3 d,7d,共8小组。采用三种发育反射(翻正反射、趋地反射和悬崖逃避反射)对小鼠进行短期神经功能评定,苏木精-伊红(HE)染色、尼氏染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法观察敲除A2AR对新生小鼠HIBD后神经细胞凋亡的影响,免疫组化检测P-JNK阳性细胞的表达。结果:敲除A2AR加重HIBD模型小鼠神经功能缺损、脑组织病理学损伤,增加神经细胞凋亡;HIBD后缺血侧海马CA1区P-JNK阳性细胞的表达迅速增加,与S组比较均有显著差异(P0.05);直线相关分析表明新生小鼠HIBD后神经细胞凋亡与P-JNK阳性细胞的表达呈显著正相关(r=0.837,P<0.01)。结论:敲除A2AR增加新生小鼠HIBD神经细胞的凋亡及加重脑损害的过程,其作用机制可能与早期P-JNK的持续激活有关。

关键词：腺苷A2A受体敲除磷酸化c-jun氨基末端激酶细胞凋亡缺氧缺血性脑损伤

A2AR基因敲除对小鼠脑缺血再灌注后SVZ区星形胶质细胞激活的影响

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中国细胞生物学学报 2013年第8期35卷 1110-1118页

作者：娄普黄婷婷冯小敏尹水贵黄托夫陈江帆陈翔温州医学院附属第二医院康复科温州325027 美国波士顿大学医学院波士顿02215

通过研究腺苷A2A受体(A2A receptor,A2AR)基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后侧脑室下区(subventricular zone,SVZ)星形胶质细胞(astrocyte,Ast)数目及形态的影响,为腺苷类药物在脑卒中类疾病中的应用提供实验依据。采用大脑中动脉栓塞... 详细信息

通过研究腺苷A2A受体(A2A receptor,A2AR)基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后侧脑室下区(subventricular zone,SVZ)星形胶质细胞(astrocyte,Ast)数目及形态的影响,为腺苷类药物在脑卒中类疾病中的应用提供实验依据。采用大脑中动脉栓塞法(middle cerebral artery occlu-sion,MCAO)复制局灶性脑缺血再灌注模型,动物分为假手术组(S)和模型组(M),其中M组根据基因类型分为A2AR基因敲除模型组(MKO)和A2AR基因野生模型组(MWT),MKO组和MWT组根据再灌注时间都分为1 d组、3 d组和7 d组,S组分为A2AR基因敲除假手术组(SKO)和A2AR基因野生假手术组(SWT),共8组;对实验小鼠进行神经行为学评分,脑组织用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triph-enyltetrazolium chloride,TTC)染色观察脑梗死灶,苏木素伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察脑组织大体形态,以及应用免疫荧光法观察SVZ区Ast的特异性标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillaryacidic protein,GFAP)表达。结果显示,所有M组小鼠在脑缺血再灌注后均出现神经功能缺损症状,神经行为学评分显示MKO 3 d组低于MKO 1 d组(P<0.05);TTC显示M组小鼠脑组织均有白色梗死灶;免疫荧光结果显示S组小鼠SVZ区域仅有少量Ast表达,M组表达明显增多,MKO 7 d组Ast表达量低于MWT 7 d组(P<0.05);Ast表达与神经行为学评分呈显著负相关(r=–0.621,P<0.01)。结果证明,A2AR基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后,在急性期能够减轻肢体活动障碍,在恢复期能够调控Ast的激活,减少胶质瘢痕形成,是其促进后期神经再生的可能因素之一。

关键词：腺苷A2A受体脑缺血再灌注星形胶质细胞侧脑室下区小鼠

0～6月龄脑瘫高危儿血清NSE表达特点及临床价值

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0～6月龄脑瘫高危儿血清NSE表达特点及临床价值

0～6个月龄脑瘫高危儿血清NSE表达特点及临床价值

2014年浙江省医学会儿科学分会学术年会暨儿内科疾病诊治新进展国家级继续教育学习班

作者：尤玉慧崔志慧尹水贵杨华陈翔温州医学院附属第二医院康复医学科

目的探讨0-6月龄脑瘫高危儿血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)表达特点及其在临床中的应用价值。方法通过ELISA法检测95例0-6月龄脑瘫高危儿血清NSE浓度,采用Bayley婴幼儿发育量表(Bayley Scales ofInfant Develop... 详细信息

目的探讨0-6月龄脑瘫高危儿血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)表达特点及其在临床中的应用价值。方法通过ELISA法检测95例0-6月龄脑瘫高危儿血清NSE浓度,采用Bayley婴幼儿发育量表(Bayley Scales ofInfant Development,BSID)分析患儿智力和运动发育水平,统计学方法分析患儿血清NSE浓度与发育水平的相关性。结果 1.0-6月龄脑瘫高危儿组血清NSE浓度显著高于与对照组(t=19.44,P水平较女性患儿明显(P水平,可以作为0-6月龄脑瘫高危儿早期临床筛查的参考指标。

关键词：高危儿血清神经元特异性烯醇化酶 Bayley婴幼儿发展量表脑瘫

来源： cnki会议评论

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医学研究杂志 2013年第6期42卷 98-101页

作者：尤玉慧崔志慧尹水贵杨华陈翔温州医学院附属第二医院康复医学科 325027

目的探讨06个月龄脑瘫高危儿血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)表达特点及其在临床中的应用价值。方法通过ELISA法检测95例06个月龄脑瘫高危儿血清NSE浓度,采用Bayley婴幼儿发育量表(Bayley scalesof infant devel... 详细信息

目的探讨06个月龄脑瘫高危儿血清神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)表达特点及其在临床中的应用价值。方法通过ELISA法检测95例06个月龄脑瘫高危儿血清NSE浓度,采用Bayley婴幼儿发育量表(Bayley scalesof infant development,BSID)分析患儿智力和运动发育水平,统计学方法分析患儿血清NSE浓度与发育水平的相关性。结果(1)06个月龄脑瘫高危儿组血清NSE浓度显著高于与对照组(t'=19.44,P水平较女性患儿明显(P水平,可以作为06个月龄脑瘫高危儿早期临床筛查的参考指标。

关键词：高危儿血清神经元特异性烯醇化酶 Bayley婴幼儿发展量表脑瘫

单唾液酸四己糖神经节苷脂联合Bobath疗法对痉挛型脑性瘫痪患儿的疗效

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中国实用神经疾病杂志 2016年第10期19卷 38-40页

作者：郭春光张惠佳胡继红周平秋颜华尹水贵刘超宇湖南省儿童医院康复一科长沙410007

目的观察单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)联合Bobath疗法治疗痉挛型脑性瘫痪患儿的疗效。方法选取2013-03—2015-03我院收治痉挛型脑性瘫痪患儿56例为研究对象,采用随机数字法随机分为研究组(29例)和对照组(27例);2组患儿均给予Bobath干... 详细信息

目的观察单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)联合Bobath疗法治疗痉挛型脑性瘫痪患儿的疗效。方法选取2013-03—2015-03我院收治痉挛型脑性瘫痪患儿56例为研究对象,采用随机数字法随机分为研究组(29例)和对照组(27例);2组患儿均给予Bobath干预技术,研究组在此基础上给予GM1治疗,2组患儿治疗前后进行粗大运动功能评估(GM-FM)与格赛尔发育量表(GDS)评估。结果治疗后2组患儿卧位和翻身能区、坐位能区、爬和跪能区、站立能区和行走与跑、跳能区评分均出现显著升高(P<0.05),研究组评分均显著高于对照组(P<0.05);治疗后2组患儿适应性、粗大运动、精细运动、语言和个人社交评分出现显著升高(P<0.05),且研究组患儿适应性、粗大运动、精细运动、语言和个人社交评分均显著高于对照组(P<0.05)。结论 GM1联合Bobath疗法治疗痉挛型脑性瘫痪患儿具有明显的疗效,值得临床推广。

关键词：脑性瘫痪 Bobath疗法单唾液酸四己糖神经节苷脂

重复注射A型肉毒毒素联合康复训练治疗痉挛型双瘫的疗效观察

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中国医师杂志 2015年第10期17卷 1565-1567页

作者：郭春光张惠佳胡继红颜华周平秋尹水贵刘超宇苏珍辉湖南省儿童医院康复中心长沙410007

目的探讨重复注射A型肉毒毒素（BTX-A）配合康复训练对痉挛型双瘫患者下肢肌张力、粗大运动功能影响.方法 60例痉挛型双瘫患者分为观察组和对照组各30例,两组均进行运动训练、物理疗法、矫形器配戴、治疗初首次注射肉毒毒素,观察组患... 详细信息

目的探讨重复注射A型肉毒毒素（BTX-A）配合康复训练对痉挛型双瘫患者下肢肌张力、粗大运动功能影响.方法 60例痉挛型双瘫患者分为观察组和对照组各30例,两组均进行运动训练、物理疗法、矫形器配戴、治疗初首次注射肉毒毒素,观察组患者间隔6个月后再次进行注射肉毒毒素.治疗前后分别用改良Ashworth量表评定患者下肢肌张力,关节量角器法测量下肢踝关节被动背屈角度、髋关节被动外展角度,粗大运动功能量表（GMFM）评估量表评价粗大运动功能.结果观察组患者的下肢肌张力、踝关节被动背屈角度、髋关节被动外展角度、GMFM量表之总分分值改善情况明显优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论重复注射BTX-A配合康复训练能明显降低痉挛型双瘫患者下肢肌张力,提高患者粗大运动功能.

关键词：肉毒毒素类/投药和剂量运动(Exercise) 康复截瘫/治疗

聪脑通络针法联合言语训练治疗小儿脑瘫伴智力障碍的临床观察

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中医药导报 2016年第18期22卷 74-76页

作者：郭春光张惠佳刘春雷颜华胡继红周平秋刘超宇尹水贵湖南省儿童医院湖南长沙410000

目的:观察聪脑通络针法联合言语训练治疗小儿脑瘫伴智力障碍的临床疗效。方法:将92例患者随机分为针康组和康复组,每组46例。针康组使用聪脑通络针法联合言语训练治疗,康复组使用单纯言语训练治疗。对比两组患儿智力水平及总有效率。结... 详细信息

目的:观察聪脑通络针法联合言语训练治疗小儿脑瘫伴智力障碍的临床疗效。方法:将92例患者随机分为针康组和康复组,每组46例。针康组使用聪脑通络针法联合言语训练治疗,康复组使用单纯言语训练治疗。对比两组患儿智力水平及总有效率。结果:两组治疗后智力水平与治疗前比较,差异均有统计学意义(P水平及总有效率均优于康复组(P<0.05或P<0.01)。结论:聪脑通络针法联合言语训练治疗小儿脑瘫伴智力障碍,在QD评分、临床疗效方面均优于单纯言语训练治疗。

关键词：小儿脑性瘫痪智力障碍头针聪脑通络针法言语训练

重复经颅磁刺激辅助干预发育迟缓儿童临床疗效观察

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中国中西医结合儿科学 2020年第4期12卷 349-353页

作者：何金华周洪涛魏选东袁丽平刘华覃蓉张玲熊裕娟刘超宇尹水贵湖南省儿童医院康复科长沙410007

目的观察重复经颅磁刺激联合综合康复训练干预全面性发育迟缓儿童临床疗效。方法2018年10月至2019年12月于我院康复科进行康复治疗的诊断全面性发育迟缓患儿82例,根据患儿是否配合及家属是否接受rTMS治疗分为观察组45例和对照组37例。... 详细信息

目的观察重复经颅磁刺激联合综合康复训练干预全面性发育迟缓儿童临床疗效。方法2018年10月至2019年12月于我院康复科进行康复治疗的诊断全面性发育迟缓患儿82例,根据患儿是否配合及家属是否接受rTMS治疗分为观察组45例和对照组37例。两组患儿治疗前及治疗3个月后均进行Gesell发育量表及S-S语言发育迟缓评估。并予综合康复训练,观察组在综合康复治疗基础上采用重复经颅磁刺激治疗。比较两组患儿治疗前后Gesell发育量表及S-S语言发育评分变化,比较两组患儿以及观察组不同病情程度及年龄之间临床疗效差别。结果两组患儿治疗后Gesell适应性、精细动作、语言、社交各能区评分及S-S语言发育评分均较治疗前提高,治疗后观察组评分明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组轻度患儿和3~4岁患儿Gesell发育量表评估及S-S语言发育迟缓评估的临床总有效率显著高于中重度及4.1~5岁患儿,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论重复经颅磁刺激能改善全面性发育迟缓患儿的认知及语言能力,尤其是年龄小及病情轻患儿疗效明显。

关键词：全面性发育迟缓重复经颅磁刺激康复干预儿童