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2018—2020年福建地区猪瘟病毒E0基因遗传变异分析

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中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 201-207页

作者：戴爱玲张鑫杰林楚云尹会方薛少华刘建奎杨小燕龙岩学院生命科学学院龙岩364000 福建省生猪疫病防控工程技术研究中心龙岩364000 福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室龙岩364000

为了了解2018—2020年福建地区猪瘟病毒流行及遗传变异情况,收集福建省不同地区临床发病猪的血液和肺脏、脾脏、淋巴结等组织样本1464份,采用RT-nPCR的方法对样品进行CSFV检测,对部分CSFV阳性样品E0基因进行克隆测序。结果显示,CSFV总... 详细信息

为了了解2018—2020年福建地区猪瘟病毒流行及遗传变异情况,收集福建省不同地区临床发病猪的血液和肺脏、脾脏、淋巴结等组织样本1464份,采用RT-nPCR的方法对样品进行CSFV检测,对部分CSFV阳性样品E0基因进行克隆测序。结果显示,CSFV总体阳性率为1.9%(29/1464),并获得13株CSFV E0基因序列。同源性分析发现所得13株CSFV E0基因之间的同源性在82.2%-99.7%,其中11株CSFV E0基因与1.1亚型代表毒株HCLV的核苷酸同源性为99.0%~99.9%,与Shimen株的核苷酸同源性94.1%~95.0%;1株与2.1c型参考毒株HNSD-2012核苷酸同源性为98.2%;1株与2.1d亚型毒株CSFV/JPN/2018核苷酸同源性为99.6%。遗传进化分析发现,10株CSFV与HCLV、C-ZJ-2008、Shimen和Brescia处于同一分支,属于1.1亚型;1株CSFV与HNSD-2012等位于同一分支,属于2.1c亚亚型;1株与CSFV/JPN/2018等位于同一分支,属于2.1d亚亚型。氨基酸序列分析发现,13株毒株与HCLV等代表毒株在重要的Rnase活性位点高度保守,其中2株2.1亚型毒株与HCLV毒株相比,其在第35位非关键氨基酸残基上发生由G→E的突变。结果表明福建地区CSFV流行情况趋向多样化,提示仍需加强对CSFV流行及遗传变异的持续监测,为猪瘟的诊断及有效防控奠定基础。

关键词：猪瘟病毒 RT-nPCR E0基因遗传变异

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2020-2022年中国部分地区奶牛乳腺炎大肠杆菌分子流行病学研究

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中国动物传染病学报 2024年

作者：左佳坤连丽燕扶邵东吕朝阳潘子豪于勇王梦迪陈兆国尹会方黄翠琴蒋蔚邹立扣陈伟韩先干苗晋锋龙岩学院生命科学学院中国农业科学院上海兽医研究所塔里木大学动物科学与技术学院四川农业大学资源学院南京农业大学动物医学院

乳腺炎是世界范围内奶牛产业影响最严重的疾病之一，给奶牛养殖业造成了巨大的经济损失。大肠杆菌是导致奶牛乳腺炎重要的病原菌之一，为了解当前中国奶牛乳腺炎源大肠杆菌的分子流行病学特征，本研究通过PCR、测序等技术对实验室保存的... 详细信息

乳腺炎是世界范围内奶牛产业影响最严重的疾病之一，给奶牛养殖业造成了巨大的经济损失。大肠杆菌是导致奶牛乳腺炎重要的病原菌之一，为了解当前中国奶牛乳腺炎源大肠杆菌的分子流行病学特征，本研究通过PCR、测序等技术对实验室保存的2020至2022年中国7个省份158株临床型乳腺炎大肠杆菌分离株的系统进化分群、毒力基因及耐药基因进行鉴定和分析。结果显示，乳腺炎源大肠杆菌共生性群落B1群占比最高，为51.6%（81/158），C次之，为24.1%（38/158），A群和D群较少，分别为11.4%（18/158）和10.1%（16/158），此外有5株大肠杆菌未鉴定到确定进化群；毒力基因检测结果显示ompA、pqqL、astA存在于所有分离株中，其次，lpfA和traT检出率较高，分别为57.6%（91/158）和65.8%（104/158），但缺乏致病性大肠杆菌常见的毒力基因；药敏检测结果显示乳腺炎源大肠杆菌对10种抗生素呈现出不同程度的耐药，其中对四环素（43.0%，68/158）、氨苄西林（38.6%，61/158）、复方新诺明（38.0%，60/158）、和链霉素（38.0%，60/158）的耐药率最高，且39.9%（63/158）的分离株具有多重耐药性；乳腺炎源大肠杆菌携带了多种耐药基因，包括β-内酰胺类耐药基因blaCTX-M、四环素类耐药基因tetA以及磺胺类抗生素耐药基因sul2，其检出率分为17.7%、13.3%、14.6%，且blaCTX-M亚型为blaCTX-M14和blaCTX-M15亚型。本研究结果为我国奶牛乳腺炎源大肠杆菌的分子遗传特性研究提供了基础资料。

关键词：乳腺炎大肠杆菌系统进化分群毒力基因耐药基因

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运用DNA条形码技术对蛇类进行鉴别

湖南农业大学学报(自然科学版) 2023年

作者：李晓冰方来杉陈洪博吴琼尹会方林秀娇李焰龙岩学院生命科学学院福建省南平市延平区农业农村局福建省预防兽医学与兽医生物技术重点实验室

为了探讨DNA条形码技术在蛇类物种鉴定的可行性，收集GenBank数据库中蛇类7329 条细胞色素b基因(Cyt b)序列，通过比对修剪，最终获得4665条蛇类Cyt b序列，对种内和种间遗传距离进行计算和遗传进化分析，结果表明：1) 4665条蛇类Cyt b... 详细信息

为了探讨DNA条形码技术在蛇类物种鉴定的可行性，收集GenBank数据库中蛇类7329 条细胞色素b基因(Cyt b)序列，通过比对修剪，最终获得4665条蛇类Cyt b序列，对种内和种间遗传距离进行计算和遗传进化分析，结果表明：1) 4665条蛇类Cyt b保守位点95个，变异位点616个，简约性信息位点558个，且碱基(A+T)含量高于碱基(G+C)含量；Cyt b序列单倍型数目为1517，单倍型多样性为 0.992 2、核苷酸多样性为0.168 52，平均核苷酸差异36.063。2) 基于Kimura 2–Parameter模型计算出的种内遗传距离平均为3.3%，种间遗传距离平均为19.96%，蛇类种内遗传距离远小于种间遗传距离。3) 蛇类物种种内存在亚种和复合体，其遗传距离在6.3%以上，大于种内平均遗传距离。4)互为姐妹群蛇类物种的种间遗传距离较近，如，Atractus dunni、A. iridescen和 A. occidentali种间遗传距离为0～6.8%，低于种间平均遗传距离。综上，DNA条形码技术可以用于蛇类的物种鉴定，并能识别出蛇类中的亚种、复合体以及姐妹物种。

关键词：蛇细胞色素b基因 DNA条形码技术遗传距离物种鉴别

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沙门菌多重PCR检测方法的建立及其应用

中国家禽 2022年第1期44卷 102-107页

作者：李师莹魏晓锋尹会方连丽燕蒋蔚陈兆国韩先干宋小凯中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 南京农业大学江苏南京210095 上海实验动物研究中心上海200241 龙岩学院福建龙岩364000

为鉴定临床上常见的3种沙门菌血清型,针对特异性基因invA(沙门菌属)、sdfI(肠炎沙门菌)、Stm4495(鼠伤寒沙门菌)和SPUL-2693(鸡白痢沙门菌)设计引物,利用标准菌株通过优化体系成功建立了沙门菌的四重PCR检测方法。结果显示:该方法特异性... 详细信息

为鉴定临床上常见的3种沙门菌血清型,针对特异性基因invA(沙门菌属)、sdfI(肠炎沙门菌)、Stm4495(鼠伤寒沙门菌)和SPUL-2693(鸡白痢沙门菌)设计引物,利用标准菌株通过优化体系成功建立了沙门菌的四重PCR检测方法。结果显示:该方法特异性好,敏感性高(检测下限:基因组为500 pg/mL,菌液为103cfu/mL);利用建立的检测方法从上海、山东、安徽和辽宁的临床病料分离出63株沙门菌,其中33株为肠炎沙门菌,9株为鼠伤寒沙门菌,2株为鸡白痢沙门菌,其余19株为沙门菌其他血清型。研究表明,该四重PCR检测方法可以准确且高效地检测肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌,为兽医临床沙门菌快速检测提供技术支撑。

关键词：多重PCR 肠炎沙门菌鼠伤寒沙门菌鸡白痢沙门菌

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1例犬子宫蓄脓的诊断与治疗

畜牧与兽医 2013年第12期45卷 121-122页

作者：尹会方张玉巧龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000

1病例情况患犬为1只12岁龄未绝育之雌性西施犬，体重4．85kg，体温39．4℃，心跳速率110次／分，呼吸频率33次／分。家族病史不详，有完整疫苗及定期体内外驱虫预防记录。

关键词：西施犬子宫蓄脓治疗诊断呼吸频率绝育体重体温

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一例犬腹股沟疝气的诊断与治疗

中国畜牧兽医 2013年第12期40卷 190-193页

作者：尹会方卢显涛龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000

腹腔脏器经腹股沟环脱出至腹股沟外侧皮下形成局限性隆起,称为腹股沟疝。2012年,接诊了1只4岁的雌性巴哥犬,临床检查结果显示左右大腿内侧各有1肿块,据检查结果初步怀疑为腹股沟疝。结合X光、B超检查和血液检查确定该犬患有腹股沟疝。... 详细信息

腹腔脏器经腹股沟环脱出至腹股沟外侧皮下形成局限性隆起,称为腹股沟疝。2012年,接诊了1只4岁的雌性巴哥犬,临床检查结果显示左右大腿内侧各有1肿块,据检查结果初步怀疑为腹股沟疝。结合X光、B超检查和血液检查确定该犬患有腹股沟疝。在征得畜主同意后,采用手术治疗和术后综合性护理措施,愈后良好。

关键词：犬腹股沟疝气诊断治疗

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地方本科院校微生物学课程教学改革探索

微生物学通报 2014年第4期41卷 759-763页

作者：郑新添杨小燕尹会方黄翠琴龙岩学院生命科学院预防兽医学与生物技术福建省高校重点实验室福建龙岩364012

微生物学是生命科学类专业重要基础课程之一,该课程应用性强。为了更好地实现地方本科院校应用型人才培养目标,本文结合我市产业特点及课程现状,对微生物学课程的理论、实验、实践教学及师资培养等环节尝试了一些改革探索,取得了一定的... 详细信息

微生物学是生命科学类专业重要基础课程之一,该课程应用性强。为了更好地实现地方本科院校应用型人才培养目标,本文结合我市产业特点及课程现状,对微生物学课程的理论、实验、实践教学及师资培养等环节尝试了一些改革探索,取得了一定的成效。

关键词：微生物学教学改革地方院校应用型人才

丁酸梭菌和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能及血液指标的影响

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中国饲料 2019年第20期 33-36页

作者：尹会方姚志翔杨守深龙岩学院福建龙岩364012 广东德兴食品股份有限公司广东汕头515133 南京金桔饲料有限公司江苏南京210000

文章旨在评价丁酸梭菌和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能及血液指标的影响。试验选择21日龄断奶仔猪100头,随机分为4组,预饲期5 d。之后,试验1、2组按照4.0×108 CFU/kg的剂量分别在对照组饲粮的基础上添加丁酸梭菌和地衣芽孢杆菌,试验... 详细信息

文章旨在评价丁酸梭菌和地衣芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能及血液指标的影响。试验选择21日龄断奶仔猪100头,随机分为4组,预饲期5 d。之后,试验1、2组按照4.0×108 CFU/kg的剂量分别在对照组饲粮的基础上添加丁酸梭菌和地衣芽孢杆菌,试验3组饲粮中添加4.0×108 CFU/kg的丁酸梭菌+4.0×108 CFU/kg的地衣芽孢杆菌,试验为期30 d。试验结果:试验2、3组仔猪末重较对照组分别提高5.9%、7.1%(P0.05),试验3组ADG较试验1组提高9.0%(P0.05);试验3组T-AOC、GSH-Px浓度较对照组均提高8.9%(P<0.05)。试验组仔猪血清中球蛋白浓度较对照组分别提高10.9%、12.9%、16.3%(P<0.05),白蛋白/球蛋白分别降低9.1%、12.9%、16.3%(P<0.05)。此外,试验组仔猪血清中免疫因子浓度较对照组升高,试验2、3组IgG浓度分别提高8.7%、12.2%(P<0.05),IgA浓度提高7.3%、11.4%(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加丁酸梭菌和地衣芽孢杆菌均能促进仔猪生长,提高其免疫功能,两者同时添加效果最好。

关键词：丁酸梭菌地衣芽孢杆菌断奶仔猪生长性能血液指标免疫功能

银杏叶复方制剂对小鼠急性毒性和细胞毒性研究

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东北农业大学学报 2014年第8期45卷 79-83页

作者：李焰林香燕张继欣尹会方龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000 福建省高校预防兽医学重点实验室福建龙岩364000

文章旨在研究银杏叶复方制剂对小鼠急性毒性和细胞毒性的影响，以确保临床用药安全。结果表明，①急性毒性试验以半数致死量（LD50）和最大耐受量（MTD）为指标，用40 g·kg-1体重剂量的银杏叶复方制剂灌胃，7 d后小鼠未发生死亡，再在... 详细信息

文章旨在研究银杏叶复方制剂对小鼠急性毒性和细胞毒性的影响，以确保临床用药安全。结果表明，①急性毒性试验以半数致死量（LD50）和最大耐受量（MTD）为指标，用40 g·kg-1体重剂量的银杏叶复方制剂灌胃，7 d后小鼠未发生死亡，再在小鼠可接受的最大容积下，给小鼠灌服日累积剂量为120 g·kg-1体重的银杏叶复方制剂进行MTD试验，7 d后处死观察其病理变化。②分别用形态学观察法和MTT法进行细胞毒性试验，用细胞维持液将100 g·L-1银杏叶复方制剂原液稀释成2-n（n为1-8）8个稀释度，测试银杏叶复方制剂在鸡胚成纤维细胞（CEF）的体外培养中的最大安全质量浓度（TC0）。结果表明，银杏叶复方制剂LD50〉40 g·kg-1体重，MTD〉120 g·kg-1体重，小鼠无一例出现死亡，剖检未见明显肉眼可见的病理变化，说明药物毒性很小，临床使用安全。在形态学观察法中，银杏叶复方制剂在高浓度时未表现细胞毒性，在MTT法中银杏叶复方制剂对CEF的最大安全质量浓度为0.78 g·L-1。

关键词：银杏叶复方小鼠急性毒性鸡胚成纤维细胞细胞毒性