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非洲马瘟病毒NS1蛋白在昆虫细胞中的表达及抗原性分析

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中国兽医科学 2024年第3期54卷 350-356页

作者：户鑫兵王轩莹宋昱庆田占成关贵全苟惠天罗建勋殷宏独军政中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室兰州大学动物医学与生物安全学院甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

非洲马瘟(African horse sickness,AHS)是一种由媒介昆虫传播感染马属动物的病毒性疾病,为了在杆状病毒表达系统中表达AHSVNS1蛋白并评估其作为亚单位疫苗组分的抗原性,本研究参考GenBank上公布的AHSV基因序列,人工合成NS1全长基因序列... 详细信息

非洲马瘟(African horse sickness,AHS)是一种由媒介昆虫传播感染马属动物的病毒性疾病,为了在杆状病毒表达系统中表达AHSVNS1蛋白并评估其作为亚单位疫苗组分的抗原性,本研究参考GenBank上公布的AHSV基因序列,人工合成NS1全长基因序列,利用PCR方法扩增完整的开放阅读框后将其克隆到转座载体pFastBacTMHTb上,将成功构建的重组质粒pFastBac-AHSVNS1转化到DH10Bac感受态细胞中,获得了含有AHSVNS1基因的重组杆粒Bacmid-AHSVNS1,将其转染到Sf9昆虫细胞内获得了表达AHSVNS1蛋白的重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western-blot结果显示,表达的重组AHSV NS1蛋白大小为65 ku,且获得了纯化的重组AHSV NS1蛋白。将其免疫BALB/c小鼠,细胞免疫荧光和Western-blot试验显示获得了特异性的抗AHSV NS1蛋白多克隆抗体,其效价达1∶51 200。流式细胞分析显示,AHSV NS1蛋白免疫小鼠能够刺激CD4+和CD8+T淋巴细胞的增加。上述研究结果表明,AHSV NS1蛋白作为AHSV亚单位疫苗的组成成分具有一定应用前景。本试验实现了AHSV NS1蛋白在昆虫细胞中成功表达并验证其具有良好的抗原性,这为进一步研究AHSV NS1蛋白的生物学功能和亚单位疫苗开发奠定了基础。

关键词：非洲马瘟病毒 AHSV NS1蛋白昆虫细胞表达抗原性

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抗菌型人脐带间充质干细胞的功能鉴定及其对脓毒症小鼠的治疗作用

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抗菌型人脐带间充质干细胞的功能鉴定及其对脓毒症小鼠的治疗作用

作者：宋昱庆第三军医大学

学位级别：硕士

背景和目的脓毒症是由于宿主对细菌等感染的反应失调所导致的危及生命的严重器官功能障碍,病情进展迅速,严重情况下可出现脓毒症休克和多器官功能障碍,致死和致残率高,是临床中危重症病人死亡的主要原因之一。目前临床上对脓毒症多以对... 详细信息

背景和目的脓毒症是由于宿主对细菌等感染的反应失调所导致的危及生命的严重器官功能障碍,病情进展迅速,严重情况下可出现脓毒症休克和多器官功能障碍,致死和致残率高,是临床中危重症病人死亡的主要原因之一。目前临床上对脓毒症多以对症及支持治疗为主,尚无特效疗法。脓毒症发病的病理生理机制复杂,是多系统、多环节共同作用的结果。在细菌和内毒素等始动因素的作用下,机体大量释放细胞因子和趋化因子等炎性介质。各内源性因子相互作用形成网络效应,引起炎症反应的级联放大,造成凝血、免疫、内分泌等多系统及器官的损伤及功能失调。既往一些针对脓毒症病理过程中单一因素或单一环节进行调控的努力均宣告失败,提示脓毒症的治疗应从控制感染、减少毒素、平衡炎症、修复组织等方面综合考量。多项动物实验显示,间充质干细胞可以通过平衡炎症反应、调节免疫状态、改善器官功能、降低细菌负荷等途径而提高脓毒症模型动物的生存率,显示了干细胞在脓毒症治疗方面的巨大潜力。杀菌/通透性增加蛋白(BPI)是一类带有正电荷的抗菌肽,可以竞争性拮抗LBP,与革兰阴性菌外膜上的LPS结合,增加细菌外膜通透性,造成菌体裂解死亡,也可以与游离的LPS结合而消除LPS的活性。LL-37具有广谱的抗菌作用,对革兰阴性菌和革兰阳性菌均具有较强杀菌能力。它既能够与LPS结合,也可以与CD14分子结合,从而阻止LPS-CD14复合物的形成,阻断LPS诱导的炎症反应的发生。我们实验室在前期研究中构建了融合蛋白BPI-LL37/LL37-BPI,然后以慢病毒为基因递送载体,制备可以分泌该两种融合蛋白的功能增强型人脐带间充质干细胞(BPI-LL37-hUC-MSCs、LL37-BPI-hUC-MSCs,以下简写为BL-h UC-MSCs、LB-hUC-MSCs)。本篇研究将从体外功能鉴定和在体动物实验两方面证实该功能增强型人脐带间充质干细胞的功能。方法采用流式细胞仪术检测两种干细胞BL-hUC-MSCs、LB-h UC-MSCs的表面CD29、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达情况,并将两种干细胞向成骨、成软骨、脂肪方向诱导分化,以鉴定其三系分化能力。收集两种抗菌型干细胞的条件培养基,与LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞共培养,ELISA法检测上清中的炎症因子水平,然后通过抑菌实验鉴定这两种条件培养对多种细菌生长的抑制作用,并采用鲎试验法检测这两种条件培养基对内毒素的中和效果。盲肠结扎穿孔法建立小鼠脓毒症模型,根据术后联用抗生素时间的不同,将该模型分为A、B两个子模型,A模型于术后6 h联用抗生素,B模型于术后24 h联用抗生素。两个子模型均分为sham组、PBS治疗组(PBS组)、h UC-MSCs治疗组(WT组),BLhUC–MSCs治疗组(BL组),术后3 h,PBS组经尾静脉注射0.2 mlPBS,WT组注射等体积的h UC-MSCs悬液(7.5×105 mL-1),BL组注射等体积的BL-h UC-MSCs悬液(7.5×105 mL-1)。术后观察各组小鼠一般状况,绘制术后120 h生存率曲线。术后48 h收集B模型各组小鼠的血清,生化检验评价肝、肾及胰腺功能,ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10水平,HE染色评估小鼠肝、肾、肺组织病理变化,免疫组化染色检查小鼠肝、肾、脾及肺组织cleaved-caspase-3蛋白的表达情况。结果第一部分:***-h UC-MSCs与LB-hUC-MSCs表面标记物中CD29、CD44、CD90的阳性率和CD34、CD45的阴性率均大于95%,CD105阳性率降低,在部分细胞表达量减少;***-hUC-MSCs与LB-hUC-MSCs均可以向成骨、成软骨和脂肪细胞方向诱导分化;***-h UC-MSCs和LB-h UC-MSCs的条件培养基可以降低巨噬细胞炎症因子的表达;***-h UC-MSCs和LB-h UC-MSCs的条件培养基对多种细菌的生长产生抑制作用;***-h UC-MSCs和LB-h UC-MSCs的条件培养基对内毒素可以起到中和作用。第二部分:1.A模型中,h UC-MSCs对生存率的改善要优于BL-h UC-MSCs;B模型中BL-hUC-MSCs对生存率的改善要优于h UC-MSCs;***-h UC-MSCs移植可以降低血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的水平;***-h UC-MSCs移植可以降低血清中丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、淀粉酶、肌酐和尿素等指标的水平;***-h UC-MSCs移植可以改善肝脏、肾脏和肺受损的组织结构;***-hUC-MSCs移植可以减少肝脏、肾脏、脾脏及肺cleaved-caspase-3蛋白的表达。结论1.构建的抗菌型干细胞BL-h UC

关键词：脓毒症炎症间充质干细胞杀菌/通透性增加蛋白 LL-37 细胞治疗

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出版企业数据资产的概念、分类与建设

科技与出版 2024年第7期 92-102页

作者：杨阳宋昱霖南京大学信息管理学院南京210046 江苏凤凰出版传媒集团南京210009 南京审计大学会计学院南京211815

随着数字经济的快速发展,数据资产将成为推动出版业转型升级的重要资源。本研究界定了数据资产在出版业中的具体特征,按照个体数据资源、业务数据资源、经营数据资源和财务数据资源四种类别对目前出版企业数据进行分类;面对出版企业数... 详细信息

随着数字经济的快速发展,数据资产将成为推动出版业转型升级的重要资源。本研究界定了数据资产在出版业中的具体特征,按照个体数据资源、业务数据资源、经营数据资源和财务数据资源四种类别对目前出版企业数据进行分类;面对出版企业数据资产管理中存在的内驱力不足、产权界定模糊、价值评估困难等问题,提出了增强数据资产建设的主观认识、强化数据基础设施建设、科学制定数据资产建设方案以及紧跟政策导向、借助外部技术智力支撑等建设路径,以期为出版企业数据资产建设提供实践参考。

关键词：数据资产出版数字化转型数据要素数据价值评估

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企业创新活动中外部知识搜索策略选择研究——来自中国制造业企业的经验证据

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科技进步与对策 2024年

作者：宋昱晓余江李博中国科学院科技战略咨询研究院中国科学院大学中丹学院奥尔堡大学材料与制造系中国-丹麦科研教育中心中国科学院大学公共政策与管理学院

外部知识搜索属于开放式创新范畴,当制造业企业难以满足新产品生产所需时,将与供应商、客户、高等院校、科研机构和竞争对手等外部知识源建立联系,寻求外部合作,这些知识源对企业实现价值创造具有重要影响。通过识别与界定制造业企业外... 详细信息

外部知识搜索属于开放式创新范畴,当制造业企业难以满足新产品生产所需时,将与供应商、客户、高等院校、科研机构和竞争对手等外部知识源建立联系,寻求外部合作,这些知识源对企业实现价值创造具有重要影响。通过识别与界定制造业企业外部知识搜索策略,构建企业创新活动(技术创新与流程创新)与外部知识获取策略选择关系框架,以中国制造业企业数据为样本,进行实证研究。结果表明,制造业企业知识获取策略可划分为最小化搜索、沿供应链搜索、多途径搜索、特定科学搜索、特定技术搜索和全面均衡搜索等6种;制造业企业知识搜索策略呈现多样化特征,并在技术创新与流程创新活动中呈现出显著差异性。

关键词：外部知识搜索制造业企业新产品生产企业创新活动无序多分类Logistic回归

复杂软弱煤层条件下高转速大扭矩钻探装备设计及试验研究

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煤矿安全 2024年第6期55卷 200-205页

作者：宋昱播中煤科工西安研究院(集团)有限公司陕西西安710077

复杂软弱煤层的钻孔成孔效果对矿井瓦斯抽采具有重要意义。针对王坡煤矿复杂软弱煤层钻孔施工排渣难、事故率高、成孔难等问题;设计了一种具有高转速、大功率、大扭矩性能的ZDY6000LR型高转速履带式钻机,其最大扭矩6 000 N·m,最大转速4... 详细信息

复杂软弱煤层的钻孔成孔效果对矿井瓦斯抽采具有重要意义。针对王坡煤矿复杂软弱煤层钻孔施工排渣难、事故率高、成孔难等问题;设计了一种具有高转速、大功率、大扭矩性能的ZDY6000LR型高转速履带式钻机,其最大扭矩6 000 N·m,最大转速400 r/min;通过对钻机的布局、动力头、调角机构、给进机身及液压系统的优化设计,确保在施工过程中能够有效地解决在钻进过程中出现的卡钻、塌孔等问题;开发具有强度高、不易崩齿等优点的Ø95/Ø60.3 mm宽翼片插接密封螺旋钻杆,以及具有强度高、断齿风险低等优点的Ø113 mm、Ø120 mm、Ø133mm三角梯齿PDC钻头。在王坡煤矿3 206工作面现场工业性试验表明:该套钻探装备及钻具组合有效解决了施工过程中存在的排渣难、喷孔顶钻等问题,提高了钻孔成孔率,百米以上钻孔成孔率超过70%,为矿井本煤层瓦斯抽采提供了重要支撑。

关键词：复杂软弱煤层高转速履带钻机插接密封螺旋钻杆瓦斯抽采成孔率

瑞马唑仑与右美托咪定用于老年腰椎手术患者的临床研究

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中国临床药理学杂志 2024年第7期40卷 968-972页

作者：李国芳宋昱首都医科大学附属北京潞河医院麻醉科北京101149 徐州医科大学附属医院麻醉科江苏徐州221006

目的比较甲苯磺酸瑞马唑仑注射剂和盐酸右美托咪定注射液用于老年腰椎手术患者的临床疗效及安全性。方法将行腰椎手术老年患者按队列法分为对照组和试验组。于麻醉诱导前的10 min,对照组通过微量注射泵泵注1.0μg·kg^(-1)右美托咪定,... 详细信息

目的比较甲苯磺酸瑞马唑仑注射剂和盐酸右美托咪定注射液用于老年腰椎手术患者的临床疗效及安全性。方法将行腰椎手术老年患者按队列法分为对照组和试验组。于麻醉诱导前的10 min,对照组通过微量注射泵泵注1.0μg·kg^(-1)右美托咪定,试验组静脉推注0.2mg·kg^(-l)瑞马唑仑。在麻醉诱导后,对照组右美托咪定速率调整为0.5μg·kg^(-1)·h^(-1)持续泵注,试验组瑞马唑仑速率调整为0.5mg·kg^(-l)·h^(-l)持续泵注,2组均于手术结束前1h停止泵注。2组患者的静脉诱导药均为舒芬太尼+依托咪酯+罗库溴铵,麻醉维持用药均为丙泊酚+瑞芬太尼。比较2组患者的苏醒质量、围术期血流动力学、炎症指标,以及不良事件的发生情况。结果试验组和对照组分别入组53例和58例。试验组和对照组的意识恢复时间分别为(6.83±4.53)和(6.86±3.71)min,拔管时间分别为(8.62±5.92)和(8.81±5.23)min,麻醉后监测治疗室停留时间分别为(38.36±6.80)和(39.36±6.27)min,在统计学上差异均无统计学意义(均P>0.05)。在手术开始后1h,试验组和对照组的平均动脉压分别为(71.91±5.15)和(68.88±4.84)mmHg,心率分别为(68.51±5.62)和(61.93±5.88)次/分;在手术结束时,试验组和对照组的平均动脉压分别为(73.08±5.78)和(70.74±6.25)mmHg,心率分别为(69.49±5.15)和(64.91±7.84)次/分,在统计学上差异均有统计学意义(均P0.05)。结论与右美托咪定相比,瑞马唑仑不影响老年腰椎手术患者的苏醒质量,对血流动力学影响较小,同时能显著降低炎症水平,且不增加术后不良事件的发生率。

关键词：瑞马唑仑注射剂右美托咪定注射液腰椎手术老年患者安全性评价

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基于一种新型优化模型的频谱感知分簇算法

无线电通信技术 2024年

作者：柴思灼宋昱王树彬内蒙古自治区无线电监测站内蒙古大学计算机学院内蒙古大学电子信息工程学院

为了缓解频谱资源紧缺的现状，认知无线传感器网络（Cognitive Radio Sensor Network， CRSN）得到了深入研究。切尔诺贝利灾难优化器(Chernobyl Disaster Optimizer， CDO)作为一种新型优化模型，具有收敛性能较强、结构简单和需要调... 详细信息

为了缓解频谱资源紧缺的现状，认知无线传感器网络（Cognitive Radio Sensor Network， CRSN）得到了深入研究。切尔诺贝利灾难优化器(Chernobyl Disaster Optimizer， CDO)作为一种新型优化模型，具有收敛性能较强、结构简单和需要调节的参数少等优点。为了提高CRSN能效，延长CRSN的生存周期，本文提出了一种基于量子切尔诺贝利灾难优化器的频谱感知分簇算法(Quantum Chernobyl Disaster Optimizer-based Spectrum Aware Clustering Algorithm， QCDOC)。QCDOC算法的主要目标是通过最小化节点之间的通信距离来提高网络的生存周期。QCDOC通过为CDO引入量子旋转门和量子非门来增强其搜索能力，并且采用二进制种群编码以使其适用于簇头选举问题。QCDOC在设计适应度函数时考虑了节点剩余能量、距离和频谱可用性，提高了算法的能效。实验表明，与对比算法相比，QCDOC算法具有更长的生存周期、更多的数据传输量和更均衡的网络能耗。

关键词：认知无线传感器网络分簇切尔诺贝利灾难优化器

体卫融合高质量发展的基本目标、现实困境及其纾解策略

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武汉体育学院学报 2024年第4期58卷 38-43页

作者：肖海婷宋昱高艺嘉惠州学院体育学院广东惠州516007 上海体育大学经济管理学院上海200438 武汉体育学院研究生院湖北武汉430079

体卫融合高质量发展是服务健康中国建设的重要支柱。运用文献资料法、逻辑分析法等方法,从发展目标、困境及其纾解策略方面探骊我国体卫融合高质量发展的问题。新发展阶段,体卫融合高质量发展目标是以普惠发展促进深度融合、创新发展促... 详细信息

体卫融合高质量发展是服务健康中国建设的重要支柱。运用文献资料法、逻辑分析法等方法,从发展目标、困境及其纾解策略方面探骊我国体卫融合高质量发展的问题。新发展阶段,体卫融合高质量发展目标是以普惠发展促进深度融合、创新发展促进优质融合、长效发展保障持续健康效应三个维度;其主要现实困境体现在文化环境缺失,素养良莠不齐;部门利益博弈,集成效应不强;行业壁垒高,资源融合不充分;发展模式单一,产业建设滞后;监管体系缺失,质量缺乏保障。聚焦目标导向和问题导向,提出体卫融合高质量发展的纾解策略:筑牢精准有力的制度保障,强化科学发展的理念认同,完善协同融通的运行机制,探索均衡优质的资源配置,推进蓬勃繁荣的市场建设。

关键词：体卫融合健康中国高质量发展基本目标现实困境纾解策略

受欺负纵向预测社会攻击:冷酷无情的中介作用

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心理与行为研究 2024年第2期22卷 274-281页

作者：朱文凤刘宋昱田雪教育部人文社会科学重点研究基地天津师范大学心理与行为研究院天津300387 天津师范大学心理学部天津300387 学生心理发展与学习天津市高校社会科学实验室天津300387

受欺负是影响社会攻击的重要环境变量,但其影响社会攻击的心理机制仍不清楚。本研究采用纵向研究设计,使用受欺负量表、冷酷无情量表、社会攻击量表对940名大学生进行两次问卷调查。结构方程模型被用来探究受欺负、冷酷无情和社会攻击... 详细信息

受欺负是影响社会攻击的重要环境变量,但其影响社会攻击的心理机制仍不清楚。本研究采用纵向研究设计,使用受欺负量表、冷酷无情量表、社会攻击量表对940名大学生进行两次问卷调查。结构方程模型被用来探究受欺负、冷酷无情和社会攻击的关系。结果发现,受欺负(T1)可以正向预测六个月后的冷酷无情(T2)和社会攻击(T2);冷酷无情(T1)可以正向预测六个月后的社会攻击(T2);受欺负(T1)通过冷酷无情(T2)影响社会攻击(T2)。

关键词：受欺负冷酷无情特质社会攻击结构方程模型