检索结果-南通市图书馆

中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 47-49页

作者：林菊生梁扩寰宋家武华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所武汉430030

寻找有效的乙型肝炎病毒(HBV)的基因治疗方法,成为当前抗HBV感染的研究热点.新近出现的DN突变体技术(Dominant negative mutant)[1,2],显示出了良好的抗HBV作用苗头.

关键词： HBX-GFP 基因工程 DN突变体瞬时表达乙型肝炎病毒复制实验研究

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利用职权少买多占单位房产如何定性

人民检察 2006年第2X期 35-36页

作者：宋家武孙远峰安徽省固镇县人民检察院

孟某，受某镇政府委派担任镇属某工业开发公司（集体企业）经理。1999年9月，该工业开发公司在所属的沿街土地上建造商住楼一幢，其中有沿街商铺房八间。商铺房后以每间6万元的价格公开对外销售，卖出两间，后孟某和会计陈某及车间主任... 详细信息

孟某，受某镇政府委派担任镇属某工业开发公司（集体企业）经理。1999年9月，该工业开发公司在所属的沿街土地上建造商住楼一幢，其中有沿街商铺房八间。商铺房后以每间6万元的价格公开对外销售，卖出两间，后孟某和会计陈某及车间主任余某商议将其余六间由他们三人购买，其中孟某购三间，余某购二间，陈某购一间，价格均为每间3万元，三人购房后分别办理了个人房屋产权证书。

关键词：中国刑法贪污罪犯罪认定

HBx-GFP DN突变子长期稳定表达抑制2.2.15细胞乙型肝炎病毒基因的表达

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中华传染病杂志 2003年第5期21卷 316-319页

作者：宋家武林菊生孔心涓华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所

目的　探索和寻找更有效的乙型肝炎治疗新的靶点和新的治疗方法 ,研究其抗病毒基因表达作用。方法　运用基因工程技术 ,建立了HBx GFP及其作对照的表达野生X蛋白、绿色荧光蛋白 (GFP)的长期稳定表达细胞克隆 ,Northernblot检测细胞内的... 详细信息

目的　探索和寻找更有效的乙型肝炎治疗新的靶点和新的治疗方法 ,研究其抗病毒基因表达作用。方法　运用基因工程技术 ,建立了HBx GFP及其作对照的表达野生X蛋白、绿色荧光蛋白 (GFP)的长期稳定表达细胞克隆 ,Northernblot检测细胞内的乙型肝炎病毒相关基因RNA转录 ,应用RIA检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg表达 ,观察对乙型肝炎病毒基因表达的影响。结果所构建的X GFP突变子 ,Xwt,GFP质粒均能在 2 .2 .15细胞株中稳定高效表达并使细胞上清液中HBsAgHBeAg表达水平分别较 2 .2 .15组的 ( 10 1± 5.5)ng/ml、 ( 12 1± 8.6)ng/ml显著降低为平均( 7.6± 11.5)ng/ml、 ( 3 5± 3 .5)ng/ml (P <0 .0 1) ,细胞内的病毒 3 .5kb ,2 .1kb及 2 .4kb的RNA与各对照组比较均有显著降低 ,以 2 .1kb及 2 .4kb的mRNA下降最为显著。结论　乙型肝炎X基因DN突变子X GFP能显著抑制乙型肝炎病毒基因转录和S ,C基因的表达。提示。

关键词： HBx-GFP DN突变子 2.2.15细胞乙型肝炎病毒基因表达基因转录

pRev X-GFP DN突变体抑制HepG2 2.2.15细胞乙型肝炎病毒复制的实验研究

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中华肝脏病杂志 2004年第7期12卷 392-394页

作者：宋家武林菊生孔心涓梁扩寰华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所武汉430030

目的建立pRev X-GFP及其作对照的表达野生X蛋白、绿色荧光蛋白的长期稳定表达细胞克隆,进一步研究以乙型肝炎病毒(HBV)X基因作为治疗靶,运用DN突变体技术,进行抗HBV的稳定表达对抗HBV复制的作用。方法运用基因工程技术,分别以逆转录... 详细信息

目的建立pRev X-GFP及其作对照的表达野生X蛋白、绿色荧光蛋白的长期稳定表达细胞克隆,进一步研究以乙型肝炎病毒(HBV)X基因作为治疗靶,运用DN突变体技术,进行抗HBV的稳定表达对抗HBV复制的作用。方法运用基因工程技术,分别以逆转录病毒载体pRev TRE为载体,构建表达野生型HBV X蛋白,GFP蛋白和X与GFP融合的X-GFP融合蛋白的质粒,并分别导入乙型肝炎的转基因细胞株HepG22.2.15细胞(简称2.2.15细胞)中,并通过长期的潮霉素抗性选择,获得能稳定表达DN蛋白的2.2.15细胞克隆。应用dot blot检测细胞上清液及细胞中HBV DNA,Southern blot检测细胞内HBV复制中间体,以观察其表达对HBV病毒复制的影响。结果所构建的pRev X-GFP突变体、pRev Xwt、pRev GFP质粒均能在2.2.15细胞株中稳定高效表达。pRev X-GFP高效表达后,能有效地抑制或阻断细胞内HBV核酸合成及其分泌入细胞上清液。定量聚合酶链反应结果显示,pRev X-GFP组的平均每毫升HBV DNA浓度较2.2.15细胞组分别下降1.0～1.8lg值,对细胞内外dot blot结果进行图像分析,其灰度值仅为对照2.2.15细胞组的7.9％,Southern blot分析则发现,X基因DN突变体对HBV复制中间体rcDNA、ssDNA及dsDNA的形成有全面抑制作用。结论 pRev X-GFP DN突变体具有显著抑制HBV复制作用。

关键词： pRev X-GFP DN突变体 HepG2 2.2.15细胞乙型肝炎病毒复制实验

IL-28B基因多态性-丙型肝炎个体化治疗的新起点

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世界华人消化杂志 2012年第2期20卷 119-124页

作者：李沛元姚蓝郭波宋家武中山大学附属第五医院消化内科广东省珠海市519000 中山大学附属第五医院急诊科广东省珠海市519000 中山大学附属第五医院内分泌科广东省珠海市519000

众所周知,个体基因的差异在慢性丙型肝炎患者的治疗中有重要的影响.2009-08/201001,世界上4个独立的全基因关联研究发现白介素28B的基因型与长效干扰素-利巴韦林的治疗效果相关联.同时证实,rs8099917和rs12979860的单核苷酸多肽性(singl... 详细信息

众所周知,个体基因的差异在慢性丙型肝炎患者的治疗中有重要的影响.2009-08/201001,世界上4个独立的全基因关联研究发现白介素28B的基因型与长效干扰素-利巴韦林的治疗效果相关联.同时证实,rs8099917和rs12979860的单核苷酸多肽性(single nucleotide polymorphisms,SNP)与抗病毒治疗的持续病毒应答率(sustained virological response,SVR)联系最为密切.本综述旨在阐述白介素28B多态性与丙型肝炎治疗效果、丙型肝炎病毒自发清除及分子流行病学特点、部分药物不良反应之间的联系.这些研究提示我们,在不久的将来,一个以白介素28B基因型为基础的个体化治疗时代将会来到.

关键词：丙型肝炎病毒白介素28B 基因多态性个体化治疗

基因芯片监测拉米夫定致乙型肝炎病毒耐药突变的临床研究

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中华肝脏病杂志 2003年第6期11卷 361-363页

作者：宋家武林菊生孔心涓梁扩寰广东省珠海市中山大学第五附属医院消化科珠海519000 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所

目的研究基因芯片技术在监测拉米夫定致乙型肝炎病毒(HBV)耐药突变中的临床意义。方法应用前瞻性方法,对20例经拉米夫定治疗和10例未治疗的乙型肝炎患者观察18个月,以聚合酶链反应扩增血清HBV,应用已研发的4位点拉米夫定耐药检测芯片监... 详细信息

目的研究基因芯片技术在监测拉米夫定致乙型肝炎病毒(HBV)耐药突变中的临床意义。方法应用前瞻性方法,对20例经拉米夫定治疗和10例未治疗的乙型肝炎患者观察18个月,以聚合酶链反应扩增血清HBV,应用已研发的4位点拉米夫定耐药检测芯片监测YMDD相关突变。结果基因芯片技术监测能有效分辨野生型和突变型HBV。HBV的耐药突变随用药时间延长,突变率显著增加(x^2=6.6 9,P<0.01),突变类型以M539V+L515M为主,次之为M539I。HBV在YMDD突变后,继续应用拉米夫定对突变型病毒无效。结论在应用拉米夫定时需要定期检测YMDD突变,常规的HBV DNA定性技术与基因芯片相比,可能会出现结论偏差,后者是最好的方法之一。出现耐药突变后,继续使用拉米夫定对耐药株无效,应停用或更换其它治疗方案。

关键词：基因芯片监测拉米夫定乙型肝炎病毒耐药突变临床研究

检测拉米夫定耐药位点基因芯片的研制及其应用初探

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中华检验医学杂志 2003年第2期26卷 83-85页

作者：宋家武林菊生孔心涓梁扩寰中山大学第五附属医院消化科珠海519000 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所

目的　研发检测拉米夫定耐药的基因芯片进行临床拉米夫定致乙型肝炎病毒 (HBV)耐药相关基因突变的监测。方法　 ( 1)将HBVYMDD区 4个突变位点为靶的 16条寡核苷酸探针 ,用GMS 417芯片点样仪固定在经特殊处理的玻片上。待检HBV突变相关... 详细信息

目的　研发检测拉米夫定耐药的基因芯片进行临床拉米夫定致乙型肝炎病毒 (HBV)耐药相关基因突变的监测。方法　 ( 1)将HBVYMDD区 4个突变位点为靶的 16条寡核苷酸探针 ,用GMS 417芯片点样仪固定在经特殊处理的玻片上。待检HBV突变相关的核酸经过聚合酶链反应(PCR)扩增 ,及用Cy5标记的三磷酸脱氧胞苷进行荧光标记 ,再通过与基因芯片杂交 ,严谨洗涤 ,将非突变的标记片段洗脱后 ,将芯片在GeneTACLSIV扫描仪下进行扫描 ,计算机解读。 ( 2 )应用PCR定点突变技术构建Leu5 15Met,Met5 39Ile ,Met5 39Val和V5 42I 4位点和 4位点的单一突变质粒 ,并将芯片检测结果与测序结果对照 ,以鉴定其特异性。同时 ,用血清标本和质粒的重复检测 ,测定其重复性 ,并对 5 0份拉米夫定治疗血清和慢性HBV感染患者血清进行检测。结果　我们研制的芯片能同时特异性地检测耐药相关单一或多位点突变。其检测与测序的符合率 98%。重复率达 96 %～ 10 0 %。结论本研究制作的 4位点基因芯片 ,既可检测乙型肝炎拉米夫定耐药相关单一碱基突变 ,亦可一次有效检出 4个位点的突变 ,且具有快速、高特异性和可重复性 ,检测结果可靠的优点。

关键词：拉米夫定脱氧核糖核酸突变乙型肝炎病毒基因芯片耐药性

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X蛋白在乙型肝炎病毒生命周期中作用的研究

中华肝脏病杂志 2003年第8期11卷 511-512页

作者：宋家武林菊生华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所

X基因是一种仅存在于嗜肝乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)的基因,至今未在其它逆转录病毒和生物细胞中发现它.由于它的基因结构的特殊性及高度的保守性,提示其在HBV的生物学上具有重要的生物学意义,越来越多的证据表明,它是引起... 详细信息

X基因是一种仅存在于嗜肝乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)的基因,至今未在其它逆转录病毒和生物细胞中发现它.由于它的基因结构的特殊性及高度的保守性,提示其在HBV的生物学上具有重要的生物学意义,越来越多的证据表明,它是引起肝癌的直接病因,还广泛参与宿主细胞的基因表达、反式激活和细胞信号转导过程.

关键词： X蛋白乙型肝炎病毒生命周期作用研究

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肠息肉发生的细胞和分子生物学研究进展

世界华人消化杂志 2006年第30期14卷 2958-2961页

作者：姚蓝宋家武中山大学附属第五医院消化内科广东省珠海市519000

肠息肉是一类从黏膜表面突出到肠腔内的隆起状病变的临床诊断．在最近的研究中陆续证实,其发生和发展的原因和机制,是由于Bmprla,APC,SMAD4,PTEN,STK11等基强突变而使各种细胞信号分子通过影响BMP信号通路,PTEN信号通路及Wnt信号通路所... 详细信息

肠息肉是一类从黏膜表面突出到肠腔内的隆起状病变的临床诊断．在最近的研究中陆续证实,其发生和发展的原因和机制,是由于Bmprla,APC,SMAD4,PTEN,STK11等基强突变而使各种细胞信号分子通过影响BMP信号通路,PTEN信号通路及Wnt信号通路所组成的生长信号调控网络,造成β-catenin在肠干细胞中的过度积聚,使得肠干细胞功能紊乱,导致其自我更新、克隆增殖、分化和凋亡失去平衡的结果．

关键词：肠息肉肠息肉病分子生物学

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当归及当归素对大鼠门静脉压影响的实验研究

中华肝脏病杂志 1996年第3期4卷 158-160页

作者：宋家武李绍白江汉石油管理局中心医院同济医科大学肝病研究所

目的与方法应用直接测定门静脉压的方法，就当归注射液及其主要成份当归素对大白鼠门静脉压影响进行了系列实验研究：比较了当归及当归素对正常大白鼠及四氯化碳致肝硬化后门脉高压的门静脉影响以及长期应用当归和当归素灌胃对肝硬化门... 详细信息

目的与方法应用直接测定门静脉压的方法，就当归注射液及其主要成份当归素对大白鼠门静脉压影响进行了系列实验研究：比较了当归及当归素对正常大白鼠及四氯化碳致肝硬化后门脉高压的门静脉影响以及长期应用当归和当归素灌胃对肝硬化门脉高压形成的预防作用。结果当归注射液能显著降低正常及门脉高压大鼠门静脉压，且起效快，持续时间长，降压幅度大。而当归素则否，虽对门脉高压大鼠门静脉压有显著降压效应。但持续时间短，且有一定反跳作用，对正常大鼠门静脉压却无显著降压作用。通过长期灌胃，当归及当归素均极好预防门静脉高压形成作用，但两者作用机理并完全一致。

关键词：当归当归素门静脉高压