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应用活细胞工作站测量大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后细胞体积的研究

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中国脊柱脊髓杂志 2019年第4期29卷 356-363页

作者：宋君来李满孙麟马迅吕聪贺亚军李圆山西医科大学附属大医院骨科太原市030032 山西医科大学第二医院神经内科太原市030001 山西医科大学基础医学院太原市030001

目的:探讨应用活细胞工作站测量大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后细胞体积的效果。方法:取新生24h内Sprague-Dawley乳鼠,取出乳鼠脊髓采用胰酶消化及差速粘附法分离大鼠脊髓星形胶质细胞,并进行体外扩增培养。将第4代成熟的... 详细信息

目的:探讨应用活细胞工作站测量大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后细胞体积的效果。方法:取新生24h内Sprague-Dawley乳鼠,取出乳鼠脊髓采用胰酶消化及差速粘附法分离大鼠脊髓星形胶质细胞,并进行体外扩增培养。将第4代成熟的星形胶质细胞进行氧糖剥夺/复氧处理,并分为4组:A组(不做糖氧剥夺及复氧处理),B组(糖氧剥夺6h,复氧12h),C组(糖氧剥夺6h,复氧24h),D组(糖氧剥夺6h,复氧48h)。通过活细胞工作站扫描检测计算各组细胞的体积,利用光镜及透射电镜观察细胞形态和超微结构变化,通过Western blot测定其水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)表达变化来进一步验证活细胞工作站测量细胞体积的准确性。结果:利用活细胞工作站检测体积,与A组细胞2810.19±306.11μm3相比,B组细胞体积4311.53±407.73μm3明显高于A组(P<0.01),C组细胞体积6248.86±702.11μm3为到最大值,D组细胞体积4541.33±503.17μm3,细胞体积较C组有所下降,但仍明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.01)。光镜下观察细胞B组出现肿胀、折光性增强,C组细胞水肿达到高峰,D组水肿虽有缓解,但仍很明显;透射电镜下观察B组可见细胞器开始肿胀,C组细胞肿胀更加明显,出现线粒体嵴发生断裂等表现,D组水肿稍有缓解,但仍很明显。Western blot 结果显示,A组细胞AQP4蛋白表达为(12.37±0.85)%,B组细胞AQP4蛋白表达为(34.17±2.07)%,C组细胞AQP4蛋白表达(43.57±1.75)%,D组细胞AQP4蛋白表达(32.26±1.37)%,与A组细胞相比,B组、C组、D组明显高于A组(P<0.01),与C组细胞相比,B组、D组明显低于C组(P<0.01)。结论:活细胞工作站能较为准确地检测大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后细胞体积,可作为一种常规的检测手段运用于星形胶质细胞体积测量。

关键词：活细胞工作站细胞体积损伤水肿水通道蛋白4

抑制高迁移率族蛋白1减轻大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后的损伤

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中国组织工程研究 2018年第28期22卷 4537-4543页

作者：宋君来李满孙麟马迅吕聪贺亚军山西医科大学附属大医院骨科山西省太原市030032 山西医科大学第二医院神经内科山西省太原市030001

背景:既往对于抑制大鼠体内高迁移率族蛋白1(high mobility group protein,HMGB1)的释放改善脊髓功能的恢复较多,但对于体外培养脊髓星形胶质细胞,抑制HMGB1改善细胞氧糖剥夺/复氧的损伤研究尚少。目的:探讨抑制大鼠脊髓星形胶质细胞HM... 详细信息

背景:既往对于抑制大鼠体内高迁移率族蛋白1(high mobility group protein,HMGB1)的释放改善脊髓功能的恢复较多,但对于体外培养脊髓星形胶质细胞,抑制HMGB1改善细胞氧糖剥夺/复氧的损伤研究尚少。目的:探讨抑制大鼠脊髓星形胶质细胞HMGB1后减轻细胞氧糖剥夺/复氧的损伤作用。方法:星形胶质细胞从新生SD大鼠脊髓提取,分离,培养鉴定。实验分两部分:第一部分实验,体外培养大鼠脊髓原代星形胶质细胞,对细胞行氧糖剥夺/复氧处理,实验分组:对照组,正常培养;氧糖剥夺6 h/复氧6,12,24 h组。第二部分实验,星形胶质细胞分组:对照组,正常培养;氧糖剥夺6 h/复氧24 h组;特异性RNA干扰组;非特异性RNA干扰组;丙酮酸乙酯组。利用Western blot和ELISA法检测各部分实验各组星形胶质细胞HMGB1的表达和释放量,利用乳酸脱氢酶的漏出率和MTT法检测细胞的损伤和存活率,光镜下观察细胞损伤后细胞形态结构的变化。结果与结论:(1)脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后,HMGB1蛋白表达及分泌升高(P<0.01),且复氧至24 h时达到最高值(P<0.01);特异性RNA干扰组及丙酮酸乙酯组HMGB1的表达量明显降低,提示特异的HMGB1shRNA和丙酮酸乙酯能有效抑制HMGB1表达;(2)细胞氧糖剥夺/复氧后,乳酸脱氢酶漏出率均明显增加,细胞存活率降低(P<0.01),复氧至24 h时损伤最为严重(P<0.01)。与氧糖剥夺6 h/复氧24 h组相比,特异性RNA干扰组及丙酮酸乙酯组细胞的乳酸脱氢酶漏出率明显下降;(3)光镜下观察细胞在氧糖剥夺/复氧后,细胞出现肿胀,分解等损伤变化,而特异RNA干扰和丙酮酸乙酯组细胞损伤明显减轻;(4)结果提示,HMGB1在脊髓星形胶质细胞损伤发生与发展中起到关键性的作用,且抑制HMGB1后能减轻氧糖剥夺/复氧对大鼠脊髓星形胶质细胞的损伤作用。

关键词：脊髓损伤高迁移率族蛋白质类组织工程星形胶质细胞 HMGB1 细胞损伤氧糖剥夺/复氧干扰丙酮酸乙酯 MTT LDH

“学生身体素质评定与训练系统”的功能与设计

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北京人民警察学院学报 2003年第3期 34-37页

作者：宋君来朱海明邱玉北京人民警察学院警体教研部

为加强学校体育教学管理和解决学生身体素质自我锻炼的问题,北京人民警察学院警体教研部与中国电子进出口公司合作,研究开发了一个“学生身体素质评定与训练”的多功能的计算机软件系统。该系统由七个模块构成,具有信息管理、辅助教学... 详细信息

为加强学校体育教学管理和解决学生身体素质自我锻炼的问题,北京人民警察学院警体教研部与中国电子进出口公司合作,研究开发了一个“学生身体素质评定与训练”的多功能的计算机软件系统。该系统由七个模块构成,具有信息管理、辅助教学和自动给出训练处方的功能,其特点是界面统一,便于操作,运行速度快,录入方式多,统计功能强,可扩展性好。

关键词：计算机软件学生身体素质评定与训练系统系统功能系统方案系统设计

丙酮酸乙酯通过抑制高迁移率族蛋白1减轻大鼠脊髓损伤后水肿及体外氧糖剥夺/复氧后星形胶质细胞肿胀的研究

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中华创伤骨科杂志 2018年第12期20卷 1079-1086页

作者：孙麟马迅刘强冯皓宇霍建忠宋君来吕聪山西医学科学院山西大医院骨科030032

目的研究丙酮酸乙酯(EP)对大鼠脊髓损伤(SCI)后脊髓早期水肿以及体外氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤所致的大鼠脊髓星形胶质细胞水肿的作用。方法建立成年SD大鼠SCI模型,观察经腹腔注射EP抑制高迁移率族蛋白1(HMGB1)后脊髓水含量、HMGB1表达... 详细信息

目的研究丙酮酸乙酯(EP)对大鼠脊髓损伤(SCI)后脊髓早期水肿以及体外氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤所致的大鼠脊髓星形胶质细胞水肿的作用。方法建立成年SD大鼠SCI模型,观察经腹腔注射EP抑制高迁移率族蛋白1(HMGB1)后脊髓水含量、HMGB1表达以及星形胶质细胞活化[胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达]情况。体外培养新生SD大鼠脊髓星形胶质细胞,建立OGD/R模型模拟脊髓损伤后缺血再灌注状态,观察EP对其水肿体积、HMGB1表达、水通道蛋白4(AQP4)表达以及Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路活化的作用。结果SCI后1d大鼠脊髓水含量较12h、3d明显增加,腹腔注射50mg/kg EP较25mg/kg、100mg/kg EP减轻了SCI后脊髓水肿,降低HMGBI表达与星形胶质细胞活化,体外培养的大鼠脊髓星形胶质细胞OGD 6h/R 24h时较OGD 6h/R 6h,OGD 6h/R 12h细胞水肿体积明显增大,12μmol/L EP较6μmol/L EP能够减轻其水肿体积,降低HMGB1及AQP4表达,减少TLR4/NF-κB通路活化,以上比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论EP抑制HMGB1能够减轻大鼠SCI后脊髓早期水肿以及OGD/R所致的体外培养大鼠脊髓星形胶质细胞水肿和AQP4表达。

关键词：脊髓损伤星形胶质细胞丙酮酸乙酯高迁移率族蛋白1 水通道蛋白4

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关于冶炼精煤计量水分的探讨

煤质技术 2005年第B4期20卷 62-64页

作者：宋君来宋艳华赵旭七煤集团公司选煤处铁东选煤厂七台河市154600

对选煤厂因冶炼精煤计量水分不同引起的经济效益差异进行了分析;并提出统一制定选煤厂精煤计量水分指标的建议对选煤厂因冶炼精煤计量水分不同引起的经济效益差异进行了分析;

关键词：冶炼精煤计量水分选煤厂经济效益

基于.NET Framework的打印系统的设计与实现方法

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内江科技 2018年第11期39卷 33-33,37页

作者：余祖玉李辉宋君来柳春 92919部队信息保障中心 91668部队通信站

在windows应用程序中打印是一项非常重要的功能,以前一直是一个非常复杂的工作,要求使用Win32 API仔细跟踪打印过程,以确保页面被正确地打印。通过采用.NET Framework中的打印组件的方法,实现自定义打印,可以满足越来越复杂的打印需求。

关键词： *** Framework 打印系统 windows应用程序 Win32 API函数设计软件功能

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改造筛选工艺提高经济效益

煤质技术 2004年第4期19卷 33-33,32页

作者：王成海张标贤宋君来七台河矿业精煤(集团)有限责任公司选煤处七台河市154600

通过对新立矿筛选厂改造 ,将原 SL - 13/ 2 - A型螺旋分机筛改为 SL - 13/ 2 - B型螺旋分机筛 ,把原 5 0～ 13mm块煤分成 5 0～ 2 5 mm的中块和 13～ 2 5 mm小块 ,并把 13～ 2 5 mm小块再次手选 ,大幅度降低小块煤含矸和灰分 ,提高了块... 详细信息

通过对新立矿筛选厂改造 ,将原 SL - 13/ 2 - A型螺旋分机筛改为 SL - 13/ 2 - B型螺旋分机筛 ,把原 5 0～ 13mm块煤分成 5 0～ 2 5 mm的中块和 13～ 2 5 mm小块 ,并把 13～ 2 5 mm小块再次手选 ,大幅度降低小块煤含矸和灰分 ,提高了块煤质量 ,实现年增效益 383万元。

关键词：筛选工艺经济效益块煤质量

Toll样受体4/核转录因子-κB通路在氧糖剥夺/复氧所致的大鼠脊髓星形胶质细胞水肿中的作用

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中华实验外科杂志 2019年第1期36卷 44-46页

作者：孙麟马迅冯皓宇宋君来吕聪贺亚军山西医学科学院山西大医院骨科太原030032

目的观察Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB (NF-κB)信号通路在体外氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤所致的大鼠脊髓星形胶质细胞(AS)水肿中的作用。方法培养新生Sprague-Dawley大鼠脊髓AS,建立OGD/R模型,观察OGD/R后脊髓AS水肿体积、水通道蛋... 详细信息

目的观察Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB (NF-κB)信号通路在体外氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤所致的大鼠脊髓星形胶质细胞(AS)水肿中的作用。方法培养新生Sprague-Dawley大鼠脊髓AS,建立OGD/R模型,观察OGD/R后脊髓AS水肿体积、水通道蛋白4(AQP4)、TLR4以及细胞核内NF-κB表达。分别使用TLR4抑制剂(CLI-095)以及NF-κB抑制剂(BAY 11-7082)抑制脊髓AS的TLR4及NF-κB活性,观察两种抑制剂对OGD/R介导的细胞水肿及AQP4表达的影响。结果TLR4抑制剂降低了OGD/R介导的脊髓AS的TLR4活性(0.256±0.028比0.389±0.027,P<0.05)以及NF-κB核转位活化程度(0.229±0.027比0.411±0.032,P<0.05),降低AQP4上调(0.346±0.014比0.470±0.027,P<0.05)及细胞肿胀[(3 953±600) μm3比(5 547.991±837.357) μm3,P<0.05],减轻细胞线粒体肿胀、减少溶酶体数量。NF-κB抑制剂也降低了OGD/R介导的脊髓AS的NF-κB核转位活化程度(0.219±0.022比0.403±0.023,P<0.05),降低AQP4上调(0.306±0.029比0.480±0.020,P<0.05)及细胞肿胀[(4 045.368±549.626) μm3比(2 889.016±656.315) μm3,P<0.05],减轻细胞线粒体肿胀、减少溶酶体数量。结论TLR4/NF-κB通路在OGD/R损伤所致的大鼠脊髓AS水肿形成中发挥重要作用。

关键词：脊髓损伤星形胶质细胞水肿 %11样受体4 核转录因子-κB 水通道蛋白4