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核桃（Juglans regia L.）抗炭疽病基因类似物标记研究

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核桃（Juglans regia L.）抗炭疽病基因类似物标记研究

作者：安海山山东农业大学

学位级别：硕士

核桃炭疽病（anthracnose）是核桃（Juglans regia L.）的主要病害，给核桃生产业造成了严重危害，该病由胶胞炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起。开展核桃抗炭疽病分子辅助选择，选育抗性种质是我国核桃育种的迫切需要。... 详细信息

核桃炭疽病（anthracnose）是核桃（Juglans regia L.）的主要病害，给核桃生产业造成了严重危害，该病由胶胞炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起。开展核桃抗炭疽病分子辅助选择，选育抗性种质是我国核桃育种的迫切需要。本研究根据抗病基因的保守性设计简并引物，研究了核桃NBS、LRR和STK抗病基因类似物标记（resistancegene analogs, RGA），这对于核桃抗炭疽病相关基因克隆和抗炭疽病的分子辅助选择具有重要的现实意义。研究结果如下： 1，根据已知抗病基因的NBS域、LRR域和STK域等保守域设计了8对兼并引物，扩增核桃基因组DNA中的抗病基因类似物。结果显示，3对引物组合P-loop/GLPL、NLRR inv1/inv2和Pto kin1/kin2能够扩增出目的条带。回收目的条带，连接、转化和测序，得到了35个NBS序列、45个STK序列和47个LRR序列，这些RGA标记均与杂交群体的抗病性共分离。 2， NBS类RGA标记：引物P-loop/GLPL扩增出约500bp的DNA片段。BLAST结果显示，所得NBS序列与多个物种的NBS型抗病基因具有较高相似性，核苷酸相似性为67%-88%;氨基酸相似性为46%-73%;35个NBS序列分析表明，所得序列均具有典型的NBS功能域，将其命名为jrRGAPGs，GenBank登录号为: JX646704-JX646738。在35个NBS序列中，有32条具有完整开放阅读框（ORF），推导氨基酸序列分析表明，这32条序列都包含NBS类抗病基因所特有的保守结构域，如P-loop、kinase-2a、kinase-3a和GLPL等。基于核苷酸序列的NJ系统发育树可将NBS序列分为10类;基于推导氨基酸序列的NJ发育树可将其分为TIR和non-TIR两个亚类;在相似系数为0.1时,UPGMA聚类分析也将NBS序列分为10个小组。氨基酸序列相似性表明，核桃NBS序列各小组间相似度为23.1%-75%，与已知抗病基因相应区域相似性为20.6%-51.9%。NBS核苷酸序列多态性（Pi）分析表明，所得NBS序列在其保守功能域的Pi明显低于其它区段，进一步证明了NBS功能域的高度保守性;dN/dS分析表明，大部分核桃NBS序列的dN/dS比值集中在0-0.933＜1，为纯化选择（purifying selection），只有RGAⅧ的dN/dS=1.552＞1为正向选择（positive selection），核桃NBS序列的进化受不同自然选择压力的影响;推导氨基酸的二级及3D模型显示，所得NBS序列具有复杂的骨架结构，其中α螺旋结构（Helices）占53.55%，卷曲结构（Coils）占43.17%，线状结构（Strands）占3.28%。 3，LRR类RGA标记：以NLRR inv1/inv2为引物，PCR扩增获得约500bp和2000bp的DNA片段，回收500bp的目的片段，共得到47条LRR序列，将其命名为jrRGANLs，GenBank登录号为：KF151270-KF151316。BLAST结果显示，所得LRR序列在GenBank中无同源性序列，且47条LRR序列之间也表现出较高的多态性。系统发育分析显示，所得核桃LRR核苷酸序列可划分为多个小组，氨基酸序列系统发育树将其分为两大类3个小组。 4，STK类RGA标记：以Pto kin1/kin2为引物，PCR扩增获得约750bp的DNA片段，对其进行回收、连接转化和测序，共获得45条STK序列，GenBank登录号为：KF151225-KF151269。 BLAST结果显示，所得STK序列与多个物种的蛋白激酶受体具有相似性（89%-93%）。对这45条STK序列的推导氨基酸序列分析表明，这45条STK序列具有8个保守催化结构（I-VIII）。ORF分析表明所得STK序列均含有多个终止子。 5，核桃RGA标记的定位：利用JoinMap3.0软件构建核桃RGA标记与抗病基因位点的连锁遗传图，发现3种不同类型的RGA标记与核桃抗病基因位点相连锁，NBS、LRR、STK标记与R位点的遗传距离分别为16.22cM、24.49cM和3.06cM。

关键词：核桃（Juglans regia L.）抗病基因同源序列核苷酸结合位点富亮氨酸重复丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶

核桃NBS类抗病基因类似物的序列特征及其与炭疽病的抗性

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中国农业科学 2014年第2期47卷 344-356页

作者：安海山杨克强山东农业大学林学院作物生物学国家重点实验室

【目的】利用同源序列法分离核桃的NBS(Nucleotide binding site)类抗病基因类似物,为核桃抗炭疽病分子辅助育种及抗病基因的克隆提供基础。【方法】以35个核桃优系为试材,利用接种法鉴定供试材料对炭疽病的抗性;根据已知植物抗病基因... 详细信息

【目的】利用同源序列法分离核桃的NBS(Nucleotide binding site)类抗病基因类似物,为核桃抗炭疽病分子辅助育种及抗病基因的克隆提供基础。【方法】以35个核桃优系为试材,利用接种法鉴定供试材料对炭疽病的抗性;根据已知植物抗病基因的保守结构域P-loop和GLPL设计简并引物,以核桃优系的基因组DNA为模板,通过PCR扩增NBS类抗病基因同源序列片段,并分析所得NBS类抗病基因类似物与核桃优系炭疽病抗性的关系;利用BLASTN/X程序对所得NBS序列在GenBank数据库中进行同源性搜索;利用MEGA 5.2及DNAman 7.0等软件对其进行序列相似性分析和系统进化研究。【结果】35个供试核桃优系中,有20个优系为抗炭疽病类型(R),其相对抗性指数在0.63—0.82;有5个优系为中抗类型(M),相对抗性指数在0.27—0.56;有10个为感病类型(S),相对抗性指数在0.00—0.21。PCR结果显示,从20个抗炭疽病优系的基因组扩增得到20条NBS类抗病基因类似序列;而在其它15个优系(5个中抗优系和10个感病优系)中未扩增到条带,表明核桃NBS序列与炭疽病抗性相关联。BLASTN显示,所得NBS序列在核苷酸水平与GenBank中已知的核桃NBS序列(jrRGAPGs)存在89%—100%同源性,与其它物种NBS序列的同源性在69%以上;BLASTX显示,所得NBS序列与已知核桃NBS抗病蛋白同源性为77%—99%,与其它物种的NBS抗病蛋白同源性在49%—66%。氨基酸序列多重比对分析表明,所得核桃NBS序列均包含有抗病基因所具有的典型功能域,如P-loop、kinase-2、kinase-3和GLPL等,在典型功能域的核苷酸多态性(Pi)明显低于非保守区,有较高保守性。系统发育分析表明,在核苷酸水平上可将所得核桃优系的NBS序列区分为7类,在氨基酸水平上可分TIR和non-TIR两大类7个亚类;所得核桃NBS序列非同义替换率(dN)和同义替换率(dS)的比值dN/dS在0.00—0.95,为纯化选择。氨基酸序列相似性表明核桃优系不同NBS亚类间的相似度为28.3%—63.5%,与已知抗病基因相应区域的氨基酸相似性为22.0%—48.5%。【结论】核桃NBS类抗病基因类似物与炭疽病抗性相关联,NBS序列与其他物种抗病基因有较高同源性,包含抗病基因保守的功能域,在进化上为纯化选择。

关键词：核桃炭疽病抗病基因类似物核苷酸多态性系统发育分析

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热电制冷技术进展与展望

制冷学报 2022年第4期43卷 26-34页

作者：曹海山清华大学能源与动力工程系北京100084

热电制冷技术是一种通过珀耳贴效应直接利用电能实现制冷的固态制冷技术。与蒸气压缩式制冷相比,热电制冷具有尺寸任意缩放、无振动、可靠性高和控温精度高等优点。本文从热电制冷的发展简史和基本原理出发,重点介绍了热电材料、制冷机... 详细信息

热电制冷技术是一种通过珀耳贴效应直接利用电能实现制冷的固态制冷技术。与蒸气压缩式制冷相比,热电制冷具有尺寸任意缩放、无振动、可靠性高和控温精度高等优点。本文从热电制冷的发展简史和基本原理出发,重点介绍了热电材料、制冷机结构、功能层界面以及热端散热器等影响热电制冷机性能因素的研究进展,并根据热电制冷的优势特性介绍了热电制冷的应用,最后对热电制冷技术的研究进行了总结和展望。

关键词：热电制冷珀耳贴效应热电材料

企业数字化转型与资本市场信息效率——来自股价同步性的证据

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企业数字化转型与资本市场信息效率——来自股价同步性的证据

作者：郑海山西南财经大学

学位级别：硕士

股价同步性是衡量资本市场信息效率的重要指标,较低的股价同步性意味着股票价格包含了较多公司特质信息,从而资本市场的信息效率也较高。然而,作为新兴资本市场,我国股市中包含了较多的“噪音”,股价同步性水平较高。随着人工智能、区... 详细信息

股价同步性是衡量资本市场信息效率的重要指标,较低的股价同步性意味着股票价格包含了较多公司特质信息,从而资本市场的信息效率也较高。然而,作为新兴资本市场,我国股市中包含了较多的“噪音”,股价同步性水平较高。随着人工智能、区块链、云计算、大数据等数字科学技术的不断涌现,数字化转型正逐步成为企业提高核心竞争力的重要战略选择。数字化有利于提高公司的信息透明度,从而对公司治理产生重要影响。因此,探究企业数字化转型能否将这种积极影响传导到资本市场中,从而提高资本市场信息效率具有重要现实意义。本文以A股上市公司2009―2021年度观测数据为研究样本,探究企业数字化转型对股价同步性的影响。本文首先对股价同步性的影响因素和经济后果、企业数字化转型的内涵概念和经济效应进行了文献梳理,归纳得出:股价同步性的内部影响因素主要包括信息透明度与信息披露、公司治理,外部影响因素主要包括市场信息中介和市场制度建设;企业数字化转型主要会对要素资源和信息效率产生影响。本文采用OLS模型对样本进行回归后发现:企业数字化转型有利于降低股价同步性。随后,为了检验企业数字化转型对股价同步性的降低作用是否具有稳健性,本文采用替换核心解释变量、减少股市异常波动的影响、工具变量法对结论进行稳健性检验。结果表明:当替换核心解释变量的代理指标后,数字化转型对股价同步性依然有显著降低作用;当排除2015中国股灾的异常影响后,本文的结论依然稳健;当采取城市电信业务总量作为工具变量进行内生性检验后,结果同样支持本文的研究结论。进一步地,为了打开企业数字化转型与股价同步性的“机制黑箱”,本文从内部企业创新和外部分析师关注两个渠道进行了中介效应分析。研究结果表明:(1)数字化转型有利于促进企业内部创新,从而降低股价同步性;(2)企业数字化转型有利于增加外部分析师关注,从而降低股价同步性。最后,本文依据企业产权性质、企业两权分离度和企业所属区域对全部样本划分不同的子样本进行异质性分析。研究结果表明:(1)对于非国有企业来说,数字化转型对企业融资约束的缓解程度以及对企业创新行为的激励作用更大,从而在资本市场中得到一个有效的反馈,使公司的股价同步性显著降低;(2)对于两权分离度高的企业来说,数字化转型对提高公司信息透明度和信息披露质量、改善公司治理绩效的作用更大,从而在资本市场中得到一个正向的反馈,降低公司的股价同步性;(3)对于东部地区的企业来说,由于市场制度建设和基础设施建设较为完善,企业数字化转型有一个良好的外部环境,因此对股价同步性的降低作用较为显著。本文从企业数字化转型的视角出发,研究了企业数字化转型对股价同步性的影响,丰富了企业数字化转型与股价同步性的相关研究。进一步地,本文从企业内部创新和企业外部分析师关注两个渠道进行中介效应分析,打开了数字化转型影响股价同步性的“机制黑箱”。并且,本文将企业数字化转型与股价同步性的关系拓展到异质性的企业中,聚焦不同类型企业的影响差异,为政府和企业推进数字化转型提供了新的思考。

关键词：数字化转型股价同步性信息不对称信息效率

新中国初期长沙市失业人员救济研究（1949-1953）

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新中国初期长沙市失业人员救济研究（1949-1953）

作者：林海山华中师范大学

学位级别：硕士

长沙市解放之后,处于破旧立新的特殊历史时期,在新旧矛盾交织之下,失业问题尤为复杂,失业救济成为党在城市工作的重要内容。在不同阶段政府救济的对象是不同的,从失业工人延伸到失业知识分子、城市贫民、家庭妇女等群体,通过将失业人员... 详细信息

长沙市解放之后,处于破旧立新的特殊历史时期,在新旧矛盾交织之下,失业问题尤为复杂,失业救济成为党在城市工作的重要内容。在不同阶段政府救济的对象是不同的,从失业工人延伸到失业知识分子、城市贫民、家庭妇女等群体,通过将失业人员纳入体制内和持续的意识形态灌输,扩大了工人阶级的队伍。由政府主导的失业救济既是解决失业问题的过程,也是党在城市中塑造自己阶级基础的过程。为解决失业问题,长沙市政府将失业工人救济从一般性的社会救济中独立出来,逐渐建立起了失业救济专项制度。其中失业工人救济委员会及其执行机构失业工人救济处,为失业救济提供了组织保障;失业登记制度为失业救济提供了信息保障;失业救济基金制度主要通过地方自筹和政府拨款来筹集救济资金,为失业救济提供物质保障。这些制度并非一成不变,而是在实践中根据政治和社会环境的变化,不断调整和完善的。同时,作为过渡性的失业救济体系,在施行中具备较大的弹性空间。具体的失业救济工作与失业救济制度的构建是同时进行的,具体措施包括单纯救济、以工代赈、还乡生产、生产自救、转业训练、介绍就业等。单纯救济是由政府直接发给钱粮,如何将粮食准确的发到需要的人手中是困扰救济处的一个难题。以工代赈是救济失业人员的主要方式,工赈中的工人工资、思想教育及相关的管理问题集中展现了失业救济的复杂面貌。还乡生产中还乡与进城的矛盾贯穿工作的始终,城乡劳动力市场的分割在逐渐酝酿。转业训练有政治、文化、业务技术三种训练班,既独立又相互关联。生产自救是政府期望在解决失业困难的同时又能创造社会财富的一种理想救济方式,但实际情况与设想有很大差异。介绍就业与国家用工制度改革紧密相连,在介绍就业的过程中政府、用人单位和失业工人三者的关系被重新建构。失业救济工作带有浓厚的政治色彩,政治动员和意识形态宣传始终相伴左右,它是实现救济目标的工具,也是实现政治目标的手段。长沙市政府根据中央指示结合当地实际情况,构建起了以政府为主导的失业救济体系,多管齐下对失业人员进行救济,稳定了失业工人的情绪与社会秩序,在增强了失业人员对新政权的认同感的同时,进一步将工人阶级与国家政权结合在一起。从长远的角度看还为失业保险制度的建立奠定了基础。同时,失业救济中的不足和消极影响也不应被忽略。

关键词：失业问题失业救济新中国初期长沙

西湖凹陷上部杂色泥岩井壁失稳研究和钻井液优化

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钻井液与完井液 2024年第2期41卷 205-214页

作者：张海山中海石油(中国)有限公司上海分公司上海200335

东海西湖凹陷部分区块在Φ311.15 mm井段钻遇龙井组、花港组杂色泥岩地层时,频繁发生起下钻阻卡、倒划眼困难等复杂情况,严重影响井下安全和作业时效。室内采用X射线衍射、扫描电镜、压汞法、抗压强度测试等方法对地层岩性组构特征、力... 详细信息

东海西湖凹陷部分区块在Φ311.15 mm井段钻遇龙井组、花港组杂色泥岩地层时,频繁发生起下钻阻卡、倒划眼困难等复杂情况,严重影响井下安全和作业时效。室内采用X射线衍射、扫描电镜、压汞法、抗压强度测试等方法对地层岩性组构特征、力学特性以及其他物理化学性能进行试验,研究井壁岩石失稳机理,表明杂色泥岩本身极具失稳特性。模拟现场条件,试验研究现场油基钻井液封堵和井壁稳定能力、钻井液润湿性能对岩屑井壁黏附和润滑性的影响,发现影响杂色泥岩起下钻遇阻的主控因素是钻井液胶结封堵稳定井壁能力和钻井液润湿性能不够。针对地层特性和钻井液性能不足,制定油基钻井液稳定井壁优化对策,强化钻井液封堵固壁性,提高地层承压能力;优选钻井液乳化剂,提高体系高温稳定性和润湿性。优化后的油基钻井液体系能够有效封堵泥岩微纳米孔缝,提高井壁稳定性,提高泥饼润滑性,可降低起下钻阻卡风险。现场应用表明,钻井过程中井壁稳定,起下钻、下套管等均顺利,与邻井相比起下钻效率提升96%~353%,取得了良好的应用效果,有效解决了西湖凹陷上部杂色泥岩地层井壁失稳问题。

关键词：泥岩地层井壁稳定胶结封堵井壁强化油基钻井液

MnOy@La1-xCaxMnO3复合陶瓷制备及其物性研究

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MnOy@La1-xCaxMnO3复合陶瓷制备及其物性研究

作者：王海山昆明理工大学

学位级别：硕士

全髋关节置换治疗陈旧性化脓性髋关节炎遗留关节畸形的疗效分析

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全髋关节置换治疗陈旧性化脓性髋关节炎遗留关节畸形的疗效分析

作者：蔺海山石河子大学

学位级别：硕士

目的:评估人工全髋关节置换术(THA)治疗陈旧性化脓性髋关节炎遗留髋关节畸形的可行性及安全性,随访观察早期临床疗效、影像学结果和术后并发症发生情况。方法:本研究为未设立对照组的单中心回顾性病例观察研究,收集自2014年8月至2020年... 详细信息

目的:评估人工全髋关节置换术(THA)治疗陈旧性化脓性髋关节炎遗留髋关节畸形的可行性及安全性,随访观察早期临床疗效、影像学结果和术后并发症发生情况。方法:本研究为未设立对照组的单中心回顾性病例观察研究,收集自2014年8月至2020年7月期间在我院行全髋关节置换治疗陈旧性、化脓性髋关节炎18例(18髋)患者临床资料,其中男性9例,女性9例,患者年龄36-76岁,平均51.44±6.94岁。身体质量指数20.50-33.10 kg/m,平均为26.42±2.51 kg/m。儿童或青少年期诊断感染致此次THA置换间隔期30-50年,平均37.5 6±5.22年。术前、术中通过生命体征、实验室检查、影像学检查评估有无活动性或隐匿性感染。收集所有患者围手术期资料及术后1、3、6、12月随访期间资料。随访时通过Harris髋关节功能评分评估术后关节功能;采用视觉模拟评分(VAS)评估术后疼痛缓解情况;采用EQ-5D-5L量表检测患者生命质量;依据随访时患侧髋关节正侧位X线片评估假体位置、稳定性及术后并发症发生情况,依据随访时血清学感染指标监测术后有无感染复发。结果:所有患者术中冰冻病检均为阴性。18例患者均获得随访,随访时间24-35月,平均29.44±2.38个月。采用Kim分型对髋臼及股骨侧的畸形进行分型,其中:Ⅰ型5例,Ⅱ型8例,Ⅲ型5例。既往行冲洗引流或切开清创手术史11例,髋部明显可见窦道合并手术瘢痕8例。术前血清学实验室炎性感染指标检测:红细胞沉降率(Erythrocyte Sedimentation Rate,ESR)、C反应蛋白(C-Reactive Protein,CRP)、降钙素原(Procalcitonin,PCT)、白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)等均在正常范围内。术中无假体周围骨折、血管神经损伤等并发症。术后1例切口脂肪液化,其余均Ⅰ期愈合;1例发生下肢深静脉血栓,给予抗凝后消失。末次随访2例患者Trendelenburg征阳性,其余患者均为阴性。患侧下肢短缩距离由术前1.5-6.0cm,平均4.17±1.24cm改善至术后0-1.5cm,平均0.62±0.41cm;Harris评分由术前平均33.22±5.18提升至术后平均88.73±5.21分,其中优9例、良6例、中3例,优良率为83%。术后髋关节疼痛明显缓解,生命质量提高,VAS评分由术前平均6.78±0.94改善至末次随访1.78±0.65;EQ-5D-5L评分由术前平均0.47±0.05提升至末次随访0.84±0.03;随访期间并发症及影像学评估:2例患者因假体脱位进行翻修手术;1例患者出现坐骨神经刺激症状,保守治疗3月后好转;未观察到髋臼或股骨侧骨溶解、假体松动、假体周围骨折、截骨处不愈合、感染复发或假体周围感染等并发症。结论:人工全髋关节置换术治疗陈旧性化脓性髋关节炎遗留关节畸形的早期临床疗效满意,术前活动性及隐匿性感染的排除,正确的术式及假体选择是避免感染复发、改善髋关节功能、恢复下肢长度、提高临床疗效的关键。

关键词：人工全髋关节置换术感染化脓性髋关节炎髋关节畸形

核心知识教学法在初中历史课堂中的实践——以《苏联社会主义建设成就》一课为例

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课程教材教学研究（教育研究） 2016年第Z6期 48-51页

作者：安海山昆明市第十中学

什么是核心知识?即每个教学活动单元中必须要让学生掌握、理解、探明的主要知识和技能,它处于学科知识结构的中心地位,是整个教学活动的链环,是联系全部教学活动的轴心。核心知识有三个特点:基础性强、知识结构体系化、能有效地促进知... 详细信息

什么是核心知识?即每个教学活动单元中必须要让学生掌握、理解、探明的主要知识和技能,它处于学科知识结构的中心地位,是整个教学活动的链环,是联系全部教学活动的轴心。核心知识有三个特点:基础性强、知识结构体系化、能有效地促进知识的迁移运用。什么是核心知识教学法?即在学科教学过程中,教与学的主体(教师与学生)依据教学目标,紧紧围绕核心知识进行预设、互动、解疑、建构、表达、分享的过程。

关键词：历史课堂战时共产主义政策社会主义工业化教学法