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保加利亚乳杆菌代谢组学样品的前处理研究

保加利亚乳杆菌代谢组学样品的前处理研究

作者：孙茂成东北农业大学

学位级别：硕士

乳酸菌在食品工业中有悠久的历史，已被广泛应用于乳制品、肉制品、青贮饲料、谷物和果蔬等的加工生产中，解析其生理代谢特性对于改善菌株的生产性状具有重要的指导意义。研究其代谢组学需要可靠的、可重现的和全面的分析细胞内具有较... 详细信息

乳酸菌在食品工业中有悠久的历史，已被广泛应用于乳制品、肉制品、青贮饲料、谷物和果蔬等的加工生产中，解析其生理代谢特性对于改善菌株的生产性状具有重要的指导意义。研究其代谢组学需要可靠的、可重现的和全面的分析细胞内具有较宽动力学浓度范围和化学功能各异的代谢产物，这就对从采样、淬灭、代谢产物的提取到代谢物的定量分析这整个实验过程提出了严格的要求。本研究以具有重要工业应用价值的保加利亚乳杆菌为研究对象，构建了小型快速取样装置，筛选了简单、快速的评价淬灭时代谢物泄露的指标，比较了三种淬灭液造成的代谢物泄露情况，并首次尝试了冷热结合提取法。该研究成果可为乳酸菌代谢组学的采样、淬灭和提取研究提供理论依据，从而有助于完善乳酸菌代谢的生理学和遗传学概貌。 1、构建代谢组学快速取样装置本研究构建的自动快速取样装置主要包括空气压缩机，三通电磁阀、微控制器和采样管等。通过控制空气的压力和通气时间，来调整采样体积，采样间隔时间可小于5s。同时，可根据实验需要在收集管内装有淬灭剂和干冰等冷却剂，即可对进入的生物样本进行即时淬灭和快速降温。 2、淬灭方法的比较分析本研究通过分析菌体细胞的完整性和胞内代谢物的泄露率，评价了60%甲醇/水（-40°C）、80%甲醇/水（-40°C）和80%甲醇/甘油（-40°C）三种淬灭方式。由流式细胞实验、OD回收率实验和气质联用（GC-MS）实验发现三种淬灭液都造成了胞内代谢物泄露，但是高浓度的80%冷甲醇/水有助于减轻胞内代谢物泄露的发生。虽然甘油也可以减少胞内代谢物的泄露，但因其难以被除去且掩盖了很多其它的代谢物，并不适于GC-MS分析。另外，酶法检测LDH的实验结果与整体趋势相矛盾，推测LDH可能不适于作为评价代谢物泄露的科学指标。细胞完整性可以作为评价淬灭时代谢物泄露的简便指标。 3、提取方法的比较分析代谢组学提取要求最大程度和最大范围的提取代谢物，从而真实的反映胞内代谢情况。本研究比较了目前常用的冷甲醇液氮冻融法和热乙醇提取法，并尝试了新的提取方法--冷热结合提取法。通过GC-MS检测和多元统计分析，包括PCA，OPLS-DA和差异代谢物，发现冷甲醇法提取氨基酸和短链有机酸类的效率优于热乙醇提取法，热乙醇法提取长链有机酸和糖类的效率优于冷甲醇法，两种提取方法各有自身的提取特点。而新的冷热结合法在提取氨基酸、有机酸类和糖类等方面的效率介于冷甲醇提取法与热乙醇提取法之间，提取其它类代谢物方面超越了冷甲醇液氮冻融和热乙醇法，并保留了冷甲醇提取法和热乙醇法的提取特点。从获得的GC峰数量来看，GC-MS检测到冷热结合法有131个GC峰，超过了冷甲醇法（91个）和热乙醇法（104个）。由此可见，新的冷热结合提取法具有一定优势。

关键词：代谢组学保加利亚乳杆菌淬灭提取 GC-MS

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超高压处理对小根蒜泡菜胀袋及品质的影响

食品科学 2024年

作者：高煜王洁婷王颖地孙茂成长春大学食品科学与工程学院长春大学残障人士智能康复及无障碍教育部重点实验室

预包装小根蒜泡菜的胀袋是贮藏过程中面临的难题之一。本论文利用不同压力（200、300和400 MPa）的超高压（Ultra-High Pressure，UHP）处理真空包装的小根蒜泡菜10 min后，分别在4℃和25℃贮藏25 d。每5 d检测泡菜的胀袋和品质，包括... 详细信息

预包装小根蒜泡菜的胀袋是贮藏过程中面临的难题之一。本论文利用不同压力（200、300和400 MPa）的超高压（Ultra-High Pressure，UHP）处理真空包装的小根蒜泡菜10 min后，分别在4℃和25℃贮藏25 d。每5 d检测泡菜的胀袋和品质，包括胀袋情况、呼吸强度、乳酸脱氢酶活性、pH值、亚硝酸盐含量、硬度、色差、微生物以及感官评价。结果表明，在两种贮藏温度下，对照（CK）组在贮藏前5 d均出现了胀袋，而所有UHP处理后的均未胀袋；与CK组相比，UHP处理后小根蒜的呼吸强度和乳酸脱氢酶活性显著下降（P＜0.05）。再者，在两种贮藏温度下，UHP处理抑制了小根蒜泡菜pH下降，降低了亚硝酸盐含量以及色差的L*值和b*值（P＜0.05）。菌落总数和乳酸菌随着UHP压力增大而逐渐减少，而霉菌和酵母菌在超过200 MPa时无法检出。UHP处理对小根蒜泡菜的硬度无显著影响（P＞0.05）。此外，由感官评价结果可知，UHP处理的泡菜酸味适中，而对颜色、风味和质地的影响不显著（P＞0.05）。综上，UHP可以有效控制小根蒜泡菜胀袋，且对其品质影响较小。

关键词：小根蒜泡菜超高压处理胀袋

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乳酸菌代谢组学研究进展

微生物学通报 2012年第10期39卷 1499-1505页

作者：孙茂成李艾黎霍贵成孟祥晨东北农业大学乳品科学教育部重点实验室东北农业大学食品学院黑龙江哈尔滨150030

代谢组学作为系统生物学的重要分支,近年来在微生物研究领域受到广泛关注,并取得了重要进展。目前乳酸菌代谢组学正日益成为研究的热点,就乳酸菌代谢组学研究中有关样品的制备、分析鉴定和数据分析等涉及的主要方法进行概述,并介绍一些... 详细信息

代谢组学作为系统生物学的重要分支,近年来在微生物研究领域受到广泛关注,并取得了重要进展。目前乳酸菌代谢组学正日益成为研究的热点,就乳酸菌代谢组学研究中有关样品的制备、分析鉴定和数据分析等涉及的主要方法进行概述,并介绍一些乳酸菌代谢组学应用的典型实例,对乳酸菌代谢组学研究中潜在的问题和未来发展趋势进行讨论。

关键词：乳酸菌代谢组学应用

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额外补硒与预防慢性疾病的关系

卫生研究 2015年第5期44卷 867-870页

作者：孙茂成左丽丽富校轶王舒然吉林医药学院公共卫生学院吉林132013

硒对人体健康至关重要,主要以硒蛋白的形式在体内发挥生物功能,其中抗氧化是其最重要的功能之一。许多慢性疾病的发生都与机体的氧化损伤有关。因此,达到了推荐摄入量之后而额外补硒被认为可以预防多种慢性疾病,例如癌症。然而从现存的... 详细信息

硒对人体健康至关重要,主要以硒蛋白的形式在体内发挥生物功能,其中抗氧化是其最重要的功能之一。许多慢性疾病的发生都与机体的氧化损伤有关。因此,达到了推荐摄入量之后而额外补硒被认为可以预防多种慢性疾病,例如癌症。然而从现存的研究来看,没有足够的证据表明额外补硒具有预防慢性疾病的作用。本文重点讨论了额外补硒与预防癌症、糖尿病、心血管疾病和男性不育的关系,额外补硒也许不但不能预防这些疾病,反而可能给健康带来负面影响。总之,在对额外补硒效果没有最后定论之前,只要满足机体对硒的需求即可,从而避免增加健康风险。

关键词：硒额外补硒癌症糖尿病心血管疾病男性不育

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新氢压缩机密封的改进

压缩机技术 1999年第3期 8-9页

作者：孙茂成大庆油田化工总厂

通过计算和试验，确定了填充聚四氟乙烯材料密封环的径向和轴向间隙，并采用填充尼龙材料制造出了阻流环和节流环。经在新氢压缩机上安装使用，其密封效果和使用寿命取得了满意的效果，经济效益良好。

关键词：新氢压缩机密封无油润滑密封加氢精制装置

构建社会化支撑环境落实“首要标准”的几点思考

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中国监狱学刊 2009年第5期24卷 43-45页

作者：孙茂成江苏省连云港监狱江苏省灌云县222225

刑释人员重新犯罪是多方面因素交织、综合影响的结果，社会歧视、就业无门等仍是其主要诱因。针对此，需通过健全制度，完善接茬帮教安置：对接轨制，营造尊重人权和宽容包含的社会氛围等对策来控制减少刑释人员重新犯罪。

关键词：刑释人员重新犯罪社会因素对策

电影《阿凡达》发行权侵权案评析——国内首例蓝光DVD音像制品发行权侵权案

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中国发明与专利 2011年第7期8卷 87-88页

作者：孙茂成上海天闻律师事务所

案情简介詹姆斯·卡梅隆执导的电影《阿凡达》（Avatar），全球票房超过27亿美元，历史排名第一，在第82届奥斯卡金像奖上获得9项提名并最终赢得3项大奖。其3D技术引领了全球电影制作新技术的革命热潮。原告上海泰盛文化传播有限公司（... 详细信息

案情简介詹姆斯·卡梅隆执导的电影《阿凡达》（Avatar），全球票房超过27亿美元，历史排名第一，在第82届奥斯卡金像奖上获得9项提名并最终赢得3项大奖。其3D技术引领了全球电影制作新技术的革命热潮。原告上海泰盛文化传播有限公司（以下简称泰盛公司）斥巨资从美国20世纪福克斯公司购买了电影《阿凡达》中国大陆地区的独家音像版权（包括VCD、DVD等）。

关键词：蓝光DVD 电影制作音像制品侵权案发行国内中国大陆地区 3D技术

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中小学校后勤社会化后食品卫生现状与思考

中国卫生监督杂志 2001年第6期8卷 257-258页

作者：孙茂成江苏省盱眙县卫生防疫站 211700

为了解中小学校后勤服务社会化以后食品卫生等状况 ,我们采用如下方法进行调查 :现场查看、填写调查表、从业人员卫生知识问卷考试及调查师生的满意程度。调查表明 5 9%的学校无卫生管理组织 ,74 .7%无卫生制度 ,62 .5 %未参与校内食品... 详细信息

为了解中小学校后勤服务社会化以后食品卫生等状况 ,我们采用如下方法进行调查 :现场查看、填写调查表、从业人员卫生知识问卷考试及调查师生的满意程度。调查表明 5 9%的学校无卫生管理组织 ,74 .7%无卫生制度 ,62 .5 %未参与校内食品卫生管理。“两证”持有率分别为 4 1.8%和 35 .5 % ,食品、餐具、饮用水合格率分别为 5 7.8%、 4 6.9%、 2 8.6%。提示应强化中小学校后勤服务社会化后的卫生管理 ;加大卫生监督与执法的力度 ,努力提高中小学校食品卫生质量。

关键词：学校后勤社会化食品卫生

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食品生产经营过程中“索证”状况调查

江苏预防医学 2002年第3期13卷 33-35页

作者：孙茂成盱眙县卫生防疫站江苏盱眙211700

(下称)第二十五条规定,食品生产经营者采购食品及其原料,应按照国家有关规定索取检验合格证或者化验单.规定了索证的范围和要求.为了解我县城乡食品生产经营过程中索证的现状及其影响索证的因素,制定相应的措施和对策.我们手2001年8～1... 详细信息

(下称)第二十五条规定,食品生产经营者采购食品及其原料,应按照国家有关规定索取检验合格证或者化验单.规定了索证的范围和要求.为了解我县城乡食品生产经营过程中索证的现状及其影响索证的因素,制定相应的措施和对策.我们手2001年8～12月对城区和部分乡镇政府所在地的食品生产经营单位进行抽样调查,现将调查情况报告如下.

关键词：调查食品生产经营索证卫生监督