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白细胞介素2(IL2)是一种具有广泛生物活性的细胞因子，它能够有效地提高机体的免疫功能。目前已证实，牛白细胞介素2(Bovine IL2,BOIL2)在牛的多种疾病预防与治疗中具有很好的作用。因此，研究利用基因工程的方法，在真核系统中表达牛白细胞介素2具有一定的经济价值和理论意义。巴斯德毕赤酵母目前已经成为分子生物学研究中，表达外源蛋白的一种重要工具。它不仅具有原核生物生长快、表达量高、操作简便的特点，又具备高等真核细胞的翻译后加工和修饰功能，所以此系统得到了广泛地应用。以利用含有强启动子P和α-factor信号肽序列的巴斯德毕赤酵母载体pPICZαA，构建出BOIL2基因的重组质粒pPICZαA-BoIL2。线性化的重组表达载体转化到巴斯德毕赤酵母X-33及KM71H中。筛选Zeocin高抗性酵母菌株，甲醇诱导目的蛋白表达。SDS-PAGE和Western blot鉴定表明，BOIL2以融合蛋白形式在胞内表达，但没能分泌到胞外。因为目的蛋白的C端带His-tag，故可用镍柱进行亲合层析纯化目的蛋白。利用IL2依赖性的小鼠CTLL2细胞检测纯化后融合蛋白的生物活性，结果表明没有切除信号肽的融合蛋白无生物活性。为探讨不同的信号肽对目的蛋白分泌的影响，本研究利用连续延伸PCR的方法构建了含有牛白细胞介素2天然信号肽的表达载体pPICZB-NS。为提高Kex2对α-factor的切割效率，又构建了保留Glu-Ala重复子的重组表达载体pPICZαA-MG。再进行重组菌株的转化和高抗性的筛选，甲醇诱导蛋白表达。但在上清中仍检测不到目的蛋白，目的蛋白仍以融合蛋白的形式存在于胞内。总之，本研究通过不同构建策略的表达载体的构建，实现了目的蛋白在真核体系中的表达，但以融合蛋白的形式存在于胞内，通过不同信号肽和信号肽加工位点的构建，探讨了影响目的蛋白有效分泌的原因。

关键词：牛白细胞介素2,毕赤酵母,信号肽,连续延伸PCR

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长春浩月清真肉业股份有限公司现代肉牛产业综合加工项目可行性研究

长春浩月清真肉业股份有限公司现代肉牛产业综合加工项目可行性研...

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作者：孙红立吉林大学

学位级别：硕士

改革开放以来，我国肉类生产的快速发展，为中西式肉制品的发展从原料到市场提供了广阔的空间，我国肉制品加工业进入了一个崭新的发展时期。目前，皓月公司作为牛肉生产加工出口基地。已经成为亚洲最大、中国第一的肉牛产业集团。皓月... 详细信息

改革开放以来，我国肉类生产的快速发展，为中西式肉制品的发展从原料到市场提供了广阔的空间，我国肉制品加工业进入了一个崭新的发展时期。目前，皓月公司作为牛肉生产加工出口基地。已经成为亚洲最大、中国第一的肉牛产业集团。皓月的建设，展示了我省农业产业化、农业工业化、农业现代化的成果。本项目充分利用当地肉牛养殖的良好基础和劳动力资源优势及吉林省长春皓月清真肉业股份有限公司从事肉牛育肥、屠宰、精加工的有利条件，促进当地工业、农业发展，拓宽生产经营之路的好项目。该项目原材料供应充足，产品市场前景广阔，工艺技术水平高，生产成本低，经济效益和社会效益好，有较强的抗风险能力。各项指标均达到国内先进水平，这对提高我国的肉牛饲养屠宰以及精深加工水平和改善人民生活，促进当地工业、农业的进一步发展和农民不断致富具有重要意义。论文主要研究的内容如下：第一章项目的提出：皓月公司属大型股份制企业，也是外向型企业。于1998年始建，全部从国外引进先进设备和工艺。是国内肉类企业二十强之一，是农业产业化的重点龙头企业。产品品种多，出口创汇名列前茅。本章重点介绍了项目提出的原因。首先从“三农问题”出发，此问题是中国全面建设小康社会的难题。要解决三农问题，只靠政府扶持是不行的，而是要在政府扶持基础上大力发展一批农业产业化的重点龙头骨干企业;其次详细地在玉米、畜牧业、肉类、养殖业、牛源、饲料、饲养、肉制品、化肥以及牛肉的附属产业皮革工业、生物制品、有机肥等多方面进行分析研究，这些行业不但能给皓月带来丰厚的利润，也能促进经济结构由二元向三元转变，由此产生牛肉加工的必要性;最后介绍了加工项目的发展状况。第二章市场需求分析：从肉牛加工项目的先进性、一体化、外向型、高科技、符合国际质量标准、社会效益大等特点出发，对国内外牛肉市场的现状进行分析与预测，同时随着我国肉食结构的逐步调整，以猪肉为主向以牛肉为主方向转变，养牛总量已跃居世界第三位。人们越来越重视牛肉的质量，使得优质牛肉的市场非常广阔。为了满足现代人对健康绿色食品的追求，在管理上严格执行HACCP标准，从而消费安全卫生的绿色肉类食品。在通往国外的销售渠道上，贸易额很大，因此产品在国际市场上前景十分乐观。根据以上市场需求分析状况，设计产品方案，建立符合市场需求的销售方针。第三章项目建设地点、规模与资源研究：项目根据本地气象条件和拟建地点概况，在原有建筑物的基础上进行扩建，达到新增规模要求。本项目所需的原材料多数可就地购买，供应充足。第四章工程技术可行性分析：本章明确列出工程的组成。要生产出高质优良的产品，经过此次生产技术改造达到降低产品生产成本，显著提高公司经济效益，增强市场竞争力的目的。在供水、供电、供热、排水及其它设施方面，均可满足项目的要求。环境保护、安全防护和劳动卫生也是项目必须考虑的因素。本项目按照“三废”排放标准，严格遵守《建筑设计防火规范》，执行国家各项职业安全卫生标准。第五章公司组织与用工可行性：公司组织是在董事会领导下的总经理负责制。依据生产规模，确定劳动人员定额，并采取长期和短期的培训方式，对生产技术人员和管理人员进行培训，合格后才上岗工作。第六章综合加工项目的经济分析：资金是一个项目成功与否的关键因素。对本项目的总投资进行估算，资金一部分自筹，一部分由国家扶持和银行贷款。并对总成本进行核算，利润估算等。综上所述，该项目建成投产后，可以综合利用当地资源优势，满足国内牛肉市场的需求，使长春皓月公司龙头企业进一步发展壮大，为畜牧业健康发展打下坚实基础，为我省牛系列开发工程项目顺利实施铺平道路，将改变当地以农为主的产业结构，实现以牧为主的转变，由粮经二元结构向粮经饲三元结构转变，由粗放型经营向集团化经营转变;将项目实施地建成畜牧发达、农业高效、农民富裕的生态畜牧经济区，既带动农民脱贫致富奔小康，又解决下岗工人及当地待业青年就业。因此，该项目在我省未来的国民经济发展中起着举足轻重的作用，是一个社会效益、经济效益比较可观的项目。

关键词：肉牛产业加工项目可行性研究经济分析

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组织承诺理论研究述评

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情报科学 2010年第11期28卷 1741-1745页

作者：马飞孔凡晶孙红立吉林大学管理学院吉林长春130022 东北师范大学图书馆吉林长春130024

组织承诺自20世纪60年代提出以来,逐渐成为组织行为和人力资源领域的一个重要概念和研究热点。本文沿着组织承诺的含义、组织承诺的结构、组织承诺的前因变量以及后果变量的脉络,采用文献研究方法综述组织承诺理论,对组织承诺理论的研... 详细信息

组织承诺自20世纪60年代提出以来,逐渐成为组织行为和人力资源领域的一个重要概念和研究热点。本文沿着组织承诺的含义、组织承诺的结构、组织承诺的前因变量以及后果变量的脉络,采用文献研究方法综述组织承诺理论,对组织承诺理论的研究现状进行评析,指出组织承诺近期研究成果并提出今后研究的空间。

关键词：组织承诺文献研究法文献评析

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浅谈美国企业教育

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国外情报科学 1996年第4期14卷 50-52页

作者：姜明涛李向军孙红立吉林工业大学

成人教育体系的扩大与完善,是世界范围内教育制度改革的趋向之一。从封闭式的“一次性教育”过渡到开放式的“终生教育”,已经形成一种世界发展趋势。国外专家预测:21世纪将进入世界性的“教育世纪”。美国作为科技发达的国家,历来非常... 详细信息

成人教育体系的扩大与完善,是世界范围内教育制度改革的趋向之一。从封闭式的“一次性教育”过渡到开放式的“终生教育”,已经形成一种世界发展趋势。国外专家预测:21世纪将进入世界性的“教育世纪”。美国作为科技发达的国家,历来非常重视企业教育。美国的企业把企业教育培训工作纳入了企业人力资源管理系统,具有明确的目标性、系统性、多样性、开放性和社会性。

关键词：美国企业教育企业管理

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高校工会工作信息化建设和管理创新的思考

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中文科技期刊数据库（全文版）经济管理 2016年第12期 97-99页

作者：孙红立吉林大学管理学院吉林长春130022

随着高等教育教学改革的不断深化,高校工会工作管理模式也必须满足教育教学改革新形势下的需要而实施信息化调控。本文以高校工会工作的地位、性质和主要任务为切入点,并结合当前高校工会工作的特点分析其的发展趋势;从工作实际出发探... 详细信息

随着高等教育教学改革的不断深化,高校工会工作管理模式也必须满足教育教学改革新形势下的需要而实施信息化调控。本文以高校工会工作的地位、性质和主要任务为切入点,并结合当前高校工会工作的特点分析其的发展趋势;从工作实际出发探究建立健全各种工作机制的重要意义,以及当前高校工会工作信息化管理的优势和特点,笔者就如何更好地利用信息化网络系统提升高校工会工作的力度和质量进行了剖析,为促进高校工会工作达到教职工的满意度取得了可观的效果。。

关键词：工会工作信息化网络系统控制

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白细胞介素-1受体拮抗蛋白和白细胞介素-10联合基因转染人骨关节炎软骨细胞的研究

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中华实验外科杂志 2007年第11期24卷 1407-1410页

作者：芮云峰王友张晓玲孙红立曲志虎戴尅戎上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科 200011 中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所 200025

目的探讨逆转录病毒载体PLXRN介导的人白细胞介素-1受体拮抗蛋白(hIL- 1Ra)和白细胞介素-10(hIL-10)联合基因转染在人骨关节炎(OA)关节软骨细胞中稳定表达的可行性。方法构建含目的基因的表达载体PLXRN-IL-1Ra和PLXRN-IL-10,经酶切及测... 详细信息

目的探讨逆转录病毒载体PLXRN介导的人白细胞介素-1受体拮抗蛋白(hIL- 1Ra)和白细胞介素-10(hIL-10)联合基因转染在人骨关节炎(OA)关节软骨细胞中稳定表达的可行性。方法构建含目的基因的表达载体PLXRN-IL-1Ra和PLXRN-IL-10,经酶切及测序鉴定正确后单个或联合转染人OA软骨细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内目的基因的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中hIL-IRa和ML-10蛋白表达量的水平。结果酶切和测序表明获得了与预期结果一致的PLXRN-IL-1Ra和PLXRN-IL-10真核表达载体。稳定转染软骨细胞后,RT-PCR检测到了细胞内hIL-1Ra和hIL-10 mRNA片段。ELISA检测发现基因转染组均有相应的一定量的ML-1Ra和ML-10表达,单个基因转染组中分别为(60.47±15.13)和(19.73±4.10)ng/L;联合基因转染组为(67.15±11.47)和(16.76±9.96)ng/L。未转染组及PLXRN空质粒转染组均无hIL-1Ra和hIL-10表达,基因转染组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论逆转录病毒载体PLXRN介导的hIL-1Ra和hIL-10联合基因可有效地感染人OA关节软骨细胞并获得稳定表达,为将表达hIL-1Ra和hIL-10目的基因的人OA软骨细胞用于OA基因治疗提供了依据。

关键词：白细胞介素-1受体白细胞介素-10 基因转染骨关节炎软骨细胞

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