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肾综合征出血热并发急性呼吸困难388例分析

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江苏医药 1999年第6期25卷 478-478页

作者：范浩朱孔霞赣榆县人民医院 222100

自1980年～1997年收治肾综合征出血热(HFRS)3020例,其中388例并发急性呼吸困难,占12.85%.为引起临床重视,现将结果报告如下.

关键词：肾综合征出血热并发症呼吸困难病例分析

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机能实验课中TBL教学法的应用初探

课程教育研究 2015年第22期 237-238页

作者：周艳芳李明勇王槐高孔霞李彬彬郭向华顾帝水张湘宁广东医学院病理生理学教研室

探讨TBL教学法在机能实验课中的应用,发现其能增强学生学习的主动性,提高教学效果,但是也存在缺陷。

关键词：实验课 TBL教学

PEP-1肽介导人过氧化氢酶转导入人脐静脉内皮细胞

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郧阳医学院学报 2007年第1期26卷 9-12,F0003页

作者：姚玲玲王家宁黄永章陈龙郭凌郧孔霞郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所

目的:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株(CRL-1730),研究PEP-1肽介导人过氧化氢酶穿透细胞的能力。方法:构建原核表达质粒pET15b-PEP-1-CAT,将其在基因工程菌中表达出N端带有6个组氨酸“标签”(His-tag)的重组蛋白,并通过金属螯合亲和... 详细信息

目的:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株(CRL-1730),研究PEP-1肽介导人过氧化氢酶穿透细胞的能力。方法:构建原核表达质粒pET15b-PEP-1-CAT,将其在基因工程菌中表达出N端带有6个组氨酸“标签”(His-tag)的重组蛋白,并通过金属螯合亲和层析对其进行纯化,然后将纯化得到的PEP-1-CAT融合蛋白加入体外培养的人脐静脉内皮细胞,通过Western blot来分析其转导能力。结果:测序分析证实,原核表达质粒pET15b-PEP-1-CAT重组成功。SDS-PAGE和Western blot结果表明,PEP-1-CAT在***中获得了高效表达,经Ni2+-NTA-树脂柱亲和层析纯化得到了融合蛋白PEP-1-CAT,并在体外检测到其具有特异的过氧化氢酶活性,活性值为77.1 U/g。将其加入到体外培养的内皮细胞培养基中,发现它能以剂量依赖及时间依赖的方式转导入细胞内,并能保持酶活性达48 h。结论:PEP-1-CAT融合蛋白能高效地转导入人脐静脉内皮细胞,为防治各种与氧化应激损伤有关的疾病开辟了新的途径。

关键词：过氧化氢酶 PEP-1肽蛋白转导脐静脉内皮细胞

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细胞穿透肽PEP-1介导过氧化氢酶转导大鼠心肌H9C2细胞

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郧阳医学院学报 2010年第2期29卷 103-107,F0002页

作者：黄光庆王家宁唐俊明郭凌郧郑飞孔霞武汉大学人民医院心内科湖北武汉430060 郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所湖北十堰442000

目的:探索细胞穿透肽PEP-1介导的人过氧化氢酶转导入H9C2细胞的能力。方法:利用基因工程方法表达和纯化His-tag-PEP-1-CAT及His-tag-CAT融合蛋白后,与体外培养的H9C2细胞株共孵育,利用免疫细胞荧光技术和Westernblot检测PEP-1-CAT融合... 详细信息

目的:探索细胞穿透肽PEP-1介导的人过氧化氢酶转导入H9C2细胞的能力。方法:利用基因工程方法表达和纯化His-tag-PEP-1-CAT及His-tag-CAT融合蛋白后,与体外培养的H9C2细胞株共孵育,利用免疫细胞荧光技术和Westernblot检测PEP-1-CAT融合蛋白是否转导入H9C2细胞内;并检测H9C2细胞内的过氧化氢酶活性。结果:制备的PEP-1-CAT融合蛋白纯度为90%以上,其浓度达0.501mg/mL;PEP-1介导的CAT融合蛋白能高效转导入H9C2细胞内,呈时间及剂量依赖性,6h时达峰值;转导入H9C2细胞内的融合蛋白的过氧化氢酶活性亦呈现出时间及剂量依赖的特点。结论:PEP-1-CAT能高效稳定转导入H9C2细胞内,为PEP-1介导的过氧化氢酶防治心肌缺血/再灌注损伤研究奠定基础。

关键词： PEP-1肽过氧化氢酶 H9C2细胞

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