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阿托伐他汀下调活性caspase-9／caspase-3的表达抑制H2O2诱导的血管内皮细胞凋亡

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中华医学杂志 2012年第24期92卷 1711-1714页

作者：徐哲荣姚航平李素军吴薇珍杨云梅浙江大学医学院附属第一医院老年病科杭州310003 传染病诊治国家重点实验室

目的探讨阿托伐他汀在过氧化氢（H2O2）诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用，以及内在分子机制。方法采用H2O2（100μmol／L）损伤ECV-304细胞18h建立细胞凋亡模型，予以不同浓度阿托伐他汀（0．1、1和10μmol／L）预处理2h，利用荧光显微... 详细信息

目的探讨阿托伐他汀在过氧化氢（H2O2）诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用，以及内在分子机制。方法采用H2O2（100μmol／L）损伤ECV-304细胞18h建立细胞凋亡模型，予以不同浓度阿托伐他汀（0．1、1和10μmol／L）预处理2h，利用荧光显微镜观察细胞形态变化，MTT检测细胞活性，流式细胞技术测定凋亡细胞比例，最后采用Western印迹方法检测活性片段caspase-3和caspase-9的表达。结果H2O2损伤导致ECV-304细胞发生明显的凋亡形态学改变，细胞活性显著下降，凋亡细胞比例高达50．71％。经过不同浓度阿托伐他汀预处理后，细胞活性明显恢复，凋亡细胞比例显著减少（39．45％、20．53％和7．83％）。Western印迹检测发现，H2O2损伤组caspase-3和caspase-9活性片段表达非常明显，阿托伐他汀预处理后，两者表达水平下降，并且呈现明显的剂量依赖性。结论阿托伐他汀具有抑制H2O2诱导的血管内皮细胞凋亡的作用，并且这一作用呈现剂量依赖性；caspase-9／caspase-3活性片段表达水平降低与阿托伐他汀的这一保护作用有关。

关键词：细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶阿托伐他汀血管内皮细胞

β-榄香烯增强阿克拉霉素对HL-60细胞诱导凋亡作用及其机制研究

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中华血液学杂志 2009年第12期30卷 821-824页

作者：郑翠苹童向民姚航平杨军徐杰蔡小平刘珍温州市第二人民医院血液化疗科 325000 浙江大学医学院附属第一医院血液学研究所

目的研究β-榄香烯增强阿克拉霉素对白血病细胞系HL-60细胞的诱导凋亡作用，探讨β-榄香烯联合阿克拉霉素抗白血病的作用机制。方法以不同浓度阿克拉霉素（0．05、0．10、0．25μg／ml）单独作用HL-60细胞，和以不同浓度β-榄香烯（10... 详细信息

目的研究β-榄香烯增强阿克拉霉素对白血病细胞系HL-60细胞的诱导凋亡作用，探讨β-榄香烯联合阿克拉霉素抗白血病的作用机制。方法以不同浓度阿克拉霉素（0．05、0．10、0．25μg／ml）单独作用HL-60细胞，和以不同浓度β-榄香烯（10、20、40μg/ml）联合小剂量阿克拉霉素（0．10μg／ml）作用20h，分别用流式细胞术、Western blot法、竞争ELISA法等检测细胞凋亡率，环氧化酶（COX）-2、NF—κB和前列腺素E2（PGE2）的表达.结果小剂量的阿克拉霉素（0．05～0．10μg／ml）对HL-60细胞的凋亡及其COX-2、NF—κB和PGE2的表达均无明显影响。小剂量的阿克拉霉素与β-榄香烯联合作用后，可促进HL-60细胞的凋亡，β-榄香烯10～40μg／ml联合阿克拉霉素0．10μg/ml处理后，HL-60细胞凋亡率为（8．97±0．14）％～（34．90±2．72）％，明显高于40μg/ml β-榄香烯单独作用组的（8．07±0．36）％，并抑制COX-2、NF—κB和PGE2的表达，这种作用与β-榄香烯浓度呈正相关。结论β-榄香烯可增强阿克拉霉素对HL-60细胞的诱导凋亡作用，并抑制COX-2和PGE2的表达，这种作用可能是通过抑制NF—κB活性而实现。

关键词：榄香烯阿克拉霉素 HL-60细胞细胞凋亡

血管紧张素Ⅱ调控人脐静脉内皮细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体

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浙江大学学报（医学版） 2002年第5期31卷 326-330页

作者：张磊黄元伟姚航平浙江大学医学院附属第一医院浙江杭州310003 浙江大学医学院免疫学研究所浙江杭州310031

目的 :研究血管紧张素 (Ang )对人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体 (LOX- 1)基因转录和蛋白表达的影响。方法 :将不同浓度 Ang (10 -5mol/ L～ 10 -10 mol/ L)与人脐静脉内皮细胞系 (HUVECs)共孵育 2 4 h,将 10 -6mol/ L A... 详细信息

目的 :研究血管紧张素 (Ang )对人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体 (LOX- 1)基因转录和蛋白表达的影响。方法 :将不同浓度 Ang (10 -5mol/ L～ 10 -10 mol/ L)与人脐静脉内皮细胞系 (HUVECs)共孵育 2 4 h,将 10 -6mol/ L Ang 与 HUVECs作用不同时间 (0、3、6、12、2 4、36、4 8h)后 ,用细胞酶联免疫法和半定量 RT- PCR分别检测 LOX- 1蛋白和 m RNA表达。结果 :10 -5mol/ L～ 10 -10 mol/ L Ang 作用 2 4 h,使内皮细胞LOX- 1蛋白表达的 OD值与对照组相比显著增加 (P0 .0 5 )。用10 -6mol/ L Ang 作用 HUVECs不同时间 ,发现共孵育 3h后 ,内皮细胞 L OX- 1m RNA的表达和 L OX- 1蛋白表达的 OD值与对照组相比都有显著增加 (P<0 .0 0 1) ;随着时间延长 ,LOX- 1m RNA的表达至 2 4 h左右达最高峰 ;LOX- 1蛋白表?

关键词：血管紧张素Ⅱ 血管内皮血凝素样氧化低密度脂蛋白受体

静脉吸毒致HIV-1感染者合并HCV亚型分析的初步研究

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静脉吸毒致HIV-1感染者合并HCV亚型分析的初步研究

Combination of small interfering RNAs mediates greater inhibition of human hepatitis B virus replication and antigen expression

2005年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：陈亮姚航平吴南屏浙江大学附属第一医院传染病研究所浙江大学附属第一医院传染病研究所浙江大学附属第一医院传染病研究所

HCV感染在我国是除乙肝病毒外引起肝炎、肝硬化的重要病原体。HIV-1感染的蔓延是20世纪以来全球关注的最严重的公共卫生问题。由于HCV和HIV-1有着共同的传播途径,因此它们的混合感染问题也引起人们越来越多的重视。HCV混合HIV-1感染中HC... 详细信息

HCV感染在我国是除乙肝病毒外引起肝炎、肝硬化的重要病原体。HIV-1感染的蔓延是20世纪以来全球关注的最严重的公共卫生问题。由于HCV和HIV-1有着共同的传播途径,因此它们的混合感染问题也引起人们越来越多的重视。HCV混合HIV-1感染中HCV基因亚型的分布情况国外已有

关键词： HCV HIV-1 感染者静脉吸毒亚型分析初步研究

来源： cnki会议评论

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Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2005年第4期6卷 236-241页

作者：陈喆许则丰叶景佳姚航平郑树丁佳逸 Cancer Institute Second affiliated hospital School of Medicine Zhejiang University Hangzhou 310009 China Immunology Institute School of Medicine Zhejiang University Hangzhou 310031 China

Objectives: To evaluate the inhibitory effect mediated by combination of small interfering RNAs (siRNAs) targeting different sites of hepatitis B virus (HBV) transcripts on the viral replication and antigen expression in vitro. Methods: (1) Seven siRNAs targeting surface (S), polymerase (P) or precore (PreC) region of HBV genome were designed and chemically synthesized. (2) HBV-producing HepG2.2.15 cells were treated with or without siRNAs for 72 h. (3) HBsAg and HBeAg in the cell culture medium were detected by enzyme-linked immunoadsorbent assay. (4) Intracellular viral DNA was quantified by real-time PCR (Polymerase Chain Reaction). (5) HBV viral mRNA was reverse transcribed and quantified by real-time PCR. (6) The change of cell cycle and apoptosis was determined by flow cytometry. Results: Our data demonstrated that synthetic small interfering RNAs (siRNAs) targeting S and PreC gene could efficiently and specifically inhibit HBV replication and antigen expression. The ex- pression of HBsAg and HBeAg and the replication of HBV could be specifically inhibited in a dose-dependent manner by siRNAs. Furthermore, our results showed that the combination of siRNAs targeting various regions could inhibit HBV replication and antigen expression in a more efficient way than the use of single siRNA at the same final concentration. No apoptotic change was observed in the cell after siRNA treatment. Conclusion: Our results demonstrated that siRNAs exerted robust and specific inhibi- tion on HBV replication and antigen expression in a cell culture system and combination of siRNAs targeting different regions exhibited more potency.

关键词： Hepatitis B virus Combination of siRNAs HBV replication Antigen expression

厚朴酚抑制CFP-10、ESAT-6及ESAT-6/CFP-10融合蛋白诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症因子表达

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厚朴酚抑制CFP-10、ESAT-6及ESAT-6/CFP-10融合蛋白诱导的人肺泡...

重组腺病毒AdIL-18BP/IL-4基因修饰的胎肝细胞经脾移植对Con-A诱导的肝炎小鼠的保护作用

华东地区第13届中青年呼吸论坛

作者：沈颖姚航平周建英浙江医学高等专科学校临床医学系内科教研室浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室呼吸内科

目的结核病是结核分枝杆菌(MTB)引起的,目前世界上死亡率最高的慢性传染病。和厚朴酚(honokiol,HNK)是传统中药木兰科植物厚朴(Magnolia officinalis)当中纯化出来的具有生物活性的化合物,具有广谱抗菌、抗炎,抗氧化,抗肿瘤及抗血管增...

目的结核病是结核分枝杆菌(MTB)引起的,目前世界上死亡率最高的慢性传染病。和厚朴酚(honokiol,HNK)是传统中药木兰科植物厚朴(Magnolia officinalis)当中纯化出来的具有生物活性的化合物,具有广谱抗菌、抗炎,抗氧化,抗肿瘤及抗血管增生等作用。本文的目的是研究和厚朴酚(HNK)对早期分泌抗原靶蛋白6(ESAT-6)、培养滤液蛋白10(CFP-10)及ESAT-6/CFP-10融合蛋白作为特异性抗原刺激人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)炎症因子表达的抑制作用,探讨结核的免疫病理机制。方法体外培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549细胞,使用MTS法检测HNK(0～80μmol/L)对A549细胞的毒性作用,确定合适的药物实验浓度。以不同浓度的CFP-10、ESAT-6及ESAT-6/CFP-10融合蛋白(0～40μg/ml)为抗原刺激A549细胞,使用ELISA法检测处理后A549表达的IL-8水平,选择最适刺激浓度。将CFP-10、ESAT-6及ESAT-6/CFP-10融合蛋白刺激后的A549细胞与不同浓度的HNK(0～20μmol/L)共同培养24小时后收集培养上清液和细胞,用ELISA法检测各组培养上清液中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α及Rantes的表达水平,分析HNK对各种细胞因子的剂量依赖抑制。结果 20μmol/L及以下浓度的和厚朴酚对A549细胞无明显毒性作用。抗原最适刺激浓度为5μmol/L。CFP-10、ESAT-6及ESAT-6/CFP-10融合蛋白夫人刺激均可显著诱导A549细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α及Rantes表达水平的升高。HNK(0～20μmol/L)可以抑制CFP-10,ESAT-6诱导的炎症因子的表达,并且这种抑制作用呈剂量依赖性。结论和厚朴酚能有效抑制CFP-10,ESAT-6诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞炎性细胞因子的表达,有望在临床肺结核的防治中发挥重要作用。

关键词：

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重组腺病毒AdIL-18BP/IL-4基因修饰的胎肝细胞经脾移植对Con-A诱...

重组β-防御素2多肽对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡的影响

第八届全国免疫学学术大会

作者：钱韵张立煌姚航平浙江大学医学院附属第一医院

目的:观察表达IL-18BP和IL-4的重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞(Ad IL-18BP/IL-4/***2)经脾移植,对Con-A诱导的肝炎小鼠的保护作用。方法:***2小鼠胎肝细胞转染重组腺病毒Ad IL-18BP/IL-4后,ELISA法检测IL-4的表达,Western blot法检测IL-1... 详细信息

目的:观察表达IL-18BP和IL-4的重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞(Ad IL-18BP/IL-4/***2)经脾移植,对Con-A诱导的肝炎小鼠的保护作用。方法:***2小鼠胎肝细胞转染重组腺病毒Ad IL-18BP/IL-4后,ELISA法检测IL-4的表达,Western blot法检测IL-18BP的表达。实验组小鼠经脾移植Ad IL-18BP/IL-4/***2,同时设Lac Z病毒对照组(Ad-Lac Z/***2),***2细胞对照组、模型组及正常对照组。移植10天后Ad IL-18BP/IL-4/***2组、Lac Z病毒对照组、***2细胞对照组及模型组小鼠均注射Con A(15mg/Kg)诱导实验性肝炎。Con-A注射18小时后处死小鼠,留取血清,制备肝组织匀浆液及肝组织石蜡切片。ELISA法检测血清细胞因子(TNF-α,IL-18,IL-4,IL-10,IL-12p70,MCP-1)的表达水平及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平。肝组织HE染色观察炎症浸润及肝细胞变性坏死等。ELISA法检测肝组织匀浆液中细胞因子(TNF-α,IL-18,IL-4,IL-10,IL-12p70,MCP-1)的表达。Western blot法检测肝组织匀浆液中p38,AKT,NFKB,JNK1/2等细胞信号分子表达。结果:Ad-IL-18BP/IL-4在***2小鼠胎肝细胞中表达IL-18BP/IL-4,并能持续14天。经脾移植Ad IL-18BP/IL-4/***2的实验组小鼠血清ALT及AST水平显著低于其他Con-A诱导肝炎对照组,血清及肝组织匀浆液中TNF-α,IL-18,IL-12p70及MCP-1水平显著低于其他Con-A诱导肝炎对照组,而IL-4和IL-10水平显著增高,肝组织炎症细胞浸润及坏死区域减少。同时,经睥移植Ad IL-18BP/IL-4/***2的实验组小鼠的肝组织匀浆液中NF-κB p65,AKT,p38及JNK1-2的磷酸化水平均显著低于其他Con-A诱导肝炎对照组。结论:Ad IL-18BP/IL-4能有效转染至***2小鼠胎肝细胞并表达IL-18BP/IL-4。重组腺病毒Ad IL-18BP/IL-4基因修饰的胎肝细胞经脾移植后,通过抑制NF-κB p65,AKT,p38及JNK1-2活性,显著减轻Con-A诱导的实验性肝炎的炎症反应,抑制Th1类细胞因子表达,促进Th2类细胞因子的分泌。

关键词：白细胞介素-18结合蛋白白细胞介素-4 肝炎抗炎

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浙江大学学报（医学版） 2006年第6期35卷 600-604页

作者：徐笑益石卓鲍军明顾伟忠姚航平陈智高敏方向明浙江大学医学院附属邵逸夫医院麻醉科浙江杭州310016 浙江大学医学院附属儿童医院儿科研究所浙江杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所浙江杭州310003 浙江大学医学院附属邵逸夫医院临床实验室浙江杭州310016 浙江大学医学院附属第一医院麻醉科浙江杭州310003

目的:观察重组β-防御素2多肽预处理对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法:SPF级SD大鼠48只随机分成对照组和防御素组,采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症模型,防御素组在CLP前48h经气管插管气道滴注107PFU重组腺病毒(含有β-防御素... 详细信息

目的:观察重组β-防御素2多肽预处理对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法:SPF级SD大鼠48只随机分成对照组和防御素组,采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症模型,防御素组在CLP前48h经气管插管气道滴注107PFU重组腺病毒(含有β-防御素2编码基因),而对照组则同法给予对照腺病毒(不含β-防御素2编码基因)。分别于CLP后0、12、36和72 h处死大鼠,取肺组织,采用透射电镜,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,采用电镜、苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化。结果:TUNEL检测显示,对照组大鼠CLP后12、36和72 h肺组织细胞凋亡指数显著增加(P<0.01);与对照组相比,防御素组CLP后相应时间点肺组织细胞凋亡指数显著降低(P<0.05)。HE染色可见,两组大鼠CLP后12、36和72 h肺泡及肺泡间质充血、水肿,炎症细胞渗出,肺泡腔不同程度狭窄。与对照组相比较,防御素组相应时间点肺组织内炎症细胞渗出减少,间质水肿减轻。结论:重组β-防御素2多肽预处理能抑制脓毒症肺组织的细胞凋亡,对急性肺损伤(AL I)具有保护作用。

关键词：防御素类/治疗应用脓毒症/药物作用脓毒症/病理学细胞凋亡疾病模型,动物肺损伤 β-防御素大鼠

地塞米松抑制小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素-18的表达

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浙江大学学报（医学版） 2001年第5期30卷 201-204页

作者：潘建平姚航平余海浙江大学医学院浙江杭州310031

目的 :研究糖皮质激素 (GC)对小鼠腹腔巨噬细胞 (Mφ) IL-1 8表达的调控作用。方法 :以半定量 RT-PCR法检测经不同浓度地塞米松 (Dex)处理的 Mφ脂多糖 (L PS)诱导的 IL -1 8m RNA的表达 ,以 EL ISA法检测 Mφ培养上清 IL-1 8的含量。结... 详细信息

目的 :研究糖皮质激素 (GC)对小鼠腹腔巨噬细胞 (Mφ) IL-1 8表达的调控作用。方法 :以半定量 RT-PCR法检测经不同浓度地塞米松 (Dex)处理的 Mφ脂多糖 (L PS)诱导的 IL -1 8m RNA的表达 ,以 EL ISA法检测 Mφ培养上清 IL-1 8的含量。结果 :Dex剂量依赖性地抑制 MφL PS诱导的IL-1 8m RNA及其蛋白的表达 ,但 IL-1 8蛋白表达对 Dex抑制作用的敏感性低于其 m RNA的表达。 Dex的此等抑制作用可被糖皮质激素受体拮抗剂— RU486阻断。结论 :GC能抑制 MφL PS诱导的 IL-1 8的表达。

关键词：地塞米松腹腔巨噬细胞白细胞介素-18 小鼠