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柞蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达分析

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柞蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达分析

作者：姚立虎安徽农业大学

学位级别：硕士

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是一类广泛存在于生物体内各个组织中的重要的金属酶,它的主要作用是专一性的清除生物体内超氧阴离子自由基(O2-),起到平衡体内的氧自由基的重要作用[1]从而避免了活性氧的堆积造成的对蛋白... 详细信息

超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是一类广泛存在于生物体内各个组织中的重要的金属酶,它的主要作用是专一性的清除生物体内超氧阴离子自由基(O2-),起到平衡体内的氧自由基的重要作用[1]从而避免了活性氧的堆积造成的对蛋白质、脂质、DNA以及其他细胞成分的严重损害[2,3]超氧化物歧化酶(SOD)按照与其结合的金属辅基的不同,主要可分为3种,分别为:Cn/ZnSOD、Mn SOD及Fe SOD[4]。而Cn/ZnSOD又分为两种类型一种是细胞内铜锌超氧化物歧化酶(Cn/ZnSOD);另一种是细胞外形式成为细胞外通信超氧化物歧化酶(ECSOD),二者在催化歧化反应时有着相同的速率与相似的动力学常数[5]。超氧化物歧化酶(SOD)作为生物体内的自由基清洁剂,对它的研究有重要的理论与实际应用价值。在理论意义上说,超氧化物歧化酶的研究为我们更清楚地弄清物种之间的同源性与进化关系提供参考;在实际应用方面,超氧化物歧化酶的研究可极大地促进超氧化物歧化酶在医药卫生,食品工业,化妆品,以及农业等多种领域的应用,从而更好的为人类服务。近年来,已有几种生物的SOD基因得到了成功地克隆、表达及功能分析[6- 8]在绢丝昆虫超氧化物歧化酶的研究中,Yamamoto K(2005)和丛海峰等(2007)先后对家蚕(Bombyx Mori )和野桑蚕(Bombyx Mandarina )的铜锌超氧化物歧化酶的基因(Cu/Zn SOD)进行了序列解析和相关功能研究的报道[9-10]。而到目前为止,柞蚕的SOD基因尚未被解析,本实验采用RT-PCR方法首次克隆获得了柞蚕铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)基因的ORF序列,该序列共编码154个氨基酸,具有Cu/ZnSOD的保守性结构特征。与家蚕(Bombyx mori)、美国白蛾(Hyphantria Cunea)、野桑蚕(Bombyx mandarina)以及果蝇(Drosophila melanogast)Cu/Zn SOD基因的同源性分别是81.5%、81.7%、81.5%、66.7%。另外本实验利用紫外线(UV)对柞蚕蛹进行不同时间照射处理后,发现蛹脂肪体内Cu/ZnSOD的表达存在明显差异,其中照射5 min后基因表达量增加,10 min达最大,15 min时呈下降趋势。本实验的研究为在柞蚕模型中系统研究Cu/ZnSOD基因结构、功能、基因的表达调控机制、以及系统进化提供了有力的条件。

关键词：柞蚕铜锌超氧化物歧化酶基因克隆表达分析

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蒽酮比色法测食品总糖含量的简化研究

食品工业 1992年第3期13卷 40-42页

作者：姚立虎徐茜西南农业大学

1.导言测定食品总糖的方法很多,由Dreywood(1946)提出的蒽酮比色法因灵敏度高,重现性好,试剂省等而在国际国内得以认可,并被列为标准分析法之一。随分光技术的发展,其应用更加广泛。但是,蒽酮比色法因需用葡萄糖纯品制标准曲线而使测... 详细信息

1.导言测定食品总糖的方法很多,由Dreywood(1946)提出的蒽酮比色法因灵敏度高,重现性好,试剂省等而在国际国内得以认可,并被列为标准分析法之一。随分光技术的发展,其应用更加广泛。但是,蒽酮比色法因需用葡萄糖纯品制标准曲线而使测定工作繁琐。由于蒽酮可与单糖、双糖、淀粉等在一定条件下生成绿色物,呈色深浅与浓度成正比,只要比色波长及操作条件不变,则消光值与浓度值间的对应关系不变。利用各种试验及数理统计分析找出这种关系式,即可省去绘制标准曲线的工作,从而简化食品中含糖量的测定方法。

关键词：食品糖测定蒽酮比色法

表儿茶素没食子酸酯及表没食子儿茶素没食子酸酯单体的化学氧化研究

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食品与发酵工业 1997年第5期23卷 21-25页

作者：姚立虎 HarryE.Nursten 西南农业大学食品科学学院重庆630716 雷丁大学食品科技系

试验对两种多酚类物质进行化学氧化，并利用高效液相色谱对其氧化产物进行了分析。同时，试验中还对来自表没食子儿茶素没食子酸酶（EGCG）的氧化产物及存在于红茶中的相应产物进行技层析，所流出的高聚合某红素成分在所用介质中的溶解... 详细信息

试验对两种多酚类物质进行化学氧化，并利用高效液相色谱对其氧化产物进行了分析。同时，试验中还对来自表没食子儿茶素没食子酸酶（EGCG）的氧化产物及存在于红茶中的相应产物进行技层析，所流出的高聚合某红素成分在所用介质中的溶解性相对较差，有别于以前类似的研究报道。在相同的氧化体系中，表儿茶素没食子酸酯（ECG）的表现不同于表没食子儿茶素没食子酸酯，表明其在该试验所选定的化学氧化条件下为相对稳定。表没食子儿茶素没食子酸酷氧化产物的高效液相色谱峰十分明显，在对红茶汤的HPLC分析中，大部分色谱峰都可以找到其对应峰。因此，该试验对类黄酮化学的研究提供了一个简便的实验方法。

关键词：食品化学多酚类物质酶促氧化氧化红茶

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绿茶冲泡动态研究

食品科学 1992年第1期13卷 3-6页

作者：姚立虎陈颖程昌建西南农业大学食品学系

成品绿茶中水浸出物,多酚类与氨基酸的含量取决于原料品种中这些成分的量．它们在绿茶冲泡时的溶出动态受品种影响显著,溶出动态变化与品种中成分含量的变化相一致．咖啡碱溶出不随品种变化而变化．泡茶水温升高,多酚类与咖啡碱的溶出... 详细信息

成品绿茶中水浸出物,多酚类与氨基酸的含量取决于原料品种中这些成分的量．它们在绿茶冲泡时的溶出动态受品种影响显著,溶出动态变化与品种中成分含量的变化相一致．咖啡碱溶出不随品种变化而变化．泡茶水温升高,多酚类与咖啡碱的溶出呈直线上升;8℃时,它们已大部分溶出,此温度下水浸出物可溶出96% ,氨基酸溶出随冲泡温度与时间的变化甚微。冲泡时间对水浸出物、多酚类,咖啡碱的溶出作用显著,时间延长,则溶出增多,5分钟已溶出大部分,1O分钟时溶出过程进入饱和态．泡茶水量的增多对各种成分的溶出均无明显影响,说明各种成分溶出动态在试验条件下不受溶液中本身浓度降低的影响．因此,绿茶冲泡过程中各有效成分的溶出动态主要受品种、水温及泡茶时间的影响,当3g绿茶样加入水量为100ml以上冲泡时,各成分溶出动态与水量增加无关．

关键词：绿茶冲泡溶出动态

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红碎茶浸泡动态研究

食品与发酵工业 1993年第4期19卷 39-44页

作者：姚立虎程昌建陈颖刘英西南农业大学食品学系

不同贮期的红碎茶可溶成分溶出状况有较大变化。水浸出物的溶出动态可代表这些成分溶出的综合动态,动态平衡点为3g,250ml,90℃,10min,与泡茶时间呈显著正相关,但试验范围内的平衡不受它因子干扰。多酚类浸出达平衡态为3g,250ml,90℃,5m... 详细信息

不同贮期的红碎茶可溶成分溶出状况有较大变化。水浸出物的溶出动态可代表这些成分溶出的综合动态,动态平衡点为3g,250ml,90℃,10min,与泡茶时间呈显著正相关,但试验范围内的平衡不受它因子干扰。多酚类浸出达平衡态为3g,250ml,90℃,5min,溶出与温度呈显著正相关,但水量及泡茶时间仅对平衡有微弱影响。咖啡碱溶出在3g,250ml,80℃,7min条件下达到平衡状态,其溶出与泡茶水量呈显著正相关,泡茶水温及时间对平衡有一定程度的影响。茶黄素的浸出在3g,150ml,100℃,10min时达平衡态,溶出与温度呈显著正相关,与泡茶时间有一定关系,但在试验条件下不受任何它因子影响。茶红素溶出与泡茶时间及水量呈显著负相关,3g,100ml,90℃,3min时即达动态平衡,受贮期影响显著,受泡茶温度一定程度的影响。

关键词：红碎茶浸泡动态

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结合肤色分割与手形匹配算法的静态手势检测

信息通信 2013年第4期26卷 4-6页

作者：杨磊隋云衡姚立虎长安大学信息工程学院陕西西安710064

着重研究了在特定环境中,如有人脸、类肤色对象以及无意义手势干扰下,通过结合自适应肤色分割模型和基于Hu矩的手形匹配的方式,实现静态手势的分割。由于该算法易受到人脸的干扰,所以在此之前通过人脸检测追踪技术,预先将人脸用黑色的... 详细信息

着重研究了在特定环境中,如有人脸、类肤色对象以及无意义手势干扰下,通过结合自适应肤色分割模型和基于Hu矩的手形匹配的方式,实现静态手势的分割。由于该算法易受到人脸的干扰,所以在此之前通过人脸检测追踪技术,预先将人脸用黑色的圆形或矩形替代。在肤色分割基础之上的基于Hu矩的手形匹配算法,可以排除类肤色的对象和无意义的手势。实验结果表明,该方法能够解决上述环境下的手势检测问题。

关键词：静态手势检测自适应肤色分割模型 Hu不变矩手形匹配算法

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茶汤密度与茶叶质量

福建茶叶 1988年第3期 25-27页

作者：姚立虎宋丽郝逸红吴祥鸿刘勋西南农业大学基础部西南农业大学食品学系西南农业大学食品学系教师

前言茶汤密度即茶汤的比重,指单位体积的茶汤在20℃时的重量与同体积之水在4℃时的重量之比。在制糖工业、酒精工业中,比重已用于测定固形物或主要成分的含量;蕃茄制品可由比重查出固形物含量。类似情况,不一而足。所以比重或密度可以... 详细信息

前言茶汤密度即茶汤的比重,指单位体积的茶汤在20℃时的重量与同体积之水在4℃时的重量之比。在制糖工业、酒精工业中,比重已用于测定固形物或主要成分的含量;蕃茄制品可由比重查出固形物含量。类似情况,不一而足。所以比重或密度可以反映溶液的浓度(溶质的多少),并与溶液浓度呈一定比例关系。根据比重的这一特性,我们

关键词：茶汤水浸出物密度

茶叶膳食纤维在冲泡过程中和模拟人胃环境下的溶出动态

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茶叶科学 1993年第1期13卷 79-80页

作者：姚立虎陈善书邓小云邓春霞胡敏西南农业大学食品学系重庆630716 霍恩海姆大学食品工程研究所

膳食纤维(Dietary fibre)是指不能为人体消化系统或其中的酶类消化和吸收的以食物多糖类为主体的高分子物质的总称,它包括水溶性的植物胶质、粘质、部分半纤维素等和水不溶的纤维素、半纤维素、木质素等。近半个世纪以来的研究表明,膳... 详细信息

膳食纤维(Dietary fibre)是指不能为人体消化系统或其中的酶类消化和吸收的以食物多糖类为主体的高分子物质的总称,它包括水溶性的植物胶质、粘质、部分半纤维素等和水不溶的纤维素、半纤维素、木质素等。近半个世纪以来的研究表明,膳食纤维对肥胖病、肠癌、糖尿病等多种人体疾病具有预防与抑制作用^([1-3]),被列为第六营养素^([4])。

关键词：红茶浸出率冲泡胃环境

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丝素降血糖效果的初步研究

蚕业科学 2007年第3期33卷 496-498页

作者：周炎刘朝良姚立虎魏国清穆莉汪中小尹志亮孙辉安徽农业大学生命科学学院合肥230036

以高血糖小白鼠为实验动物,测定了丝素粉、丝素溶液的降血糖效果。用等量丝素粉、丝素溶液及降血糖药剂盐酸二甲双胍片灌胃的高血糖小白鼠的餐后血糖值,在4周后分别下降了13.81%、16.33%、18.41%。与已经开发利用的化学降血糖药剂盐酸... 详细信息

以高血糖小白鼠为实验动物,测定了丝素粉、丝素溶液的降血糖效果。用等量丝素粉、丝素溶液及降血糖药剂盐酸二甲双胍片灌胃的高血糖小白鼠的餐后血糖值,在4周后分别下降了13.81%、16.33%、18.41%。与已经开发利用的化学降血糖药剂盐酸二甲双胍片相比,丝素降血糖的效果也比较明显。研究结果可为蚕丝资源的综合利用和开发人体降血糖保健食品提供试验数据。

关键词：丝素降血糖动物实验小白鼠