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抗菌肽17BIPHE2抑制金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌生物被膜作用的研究

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抗菌肽17BIPHE2抑制金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌生物被膜作用的...

作者：回丽媛宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的研究抗菌肽17BIPHE2单独使用及联合抗生素对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)生物被膜的抑制作用,并初步探讨抗菌肽17BIPHE2作用细菌后对生物被膜相关基因转录水平的影响,为治... 详细信息

目的研究抗菌肽17BIPHE2单独使用及联合抗生素对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)生物被膜的抑制作用,并初步探讨抗菌肽17BIPHE2作用细菌后对生物被膜相关基因转录水平的影响,为治疗金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌生物被膜相关感染及药物研发提供了一个新思路。方法1.采用刚果红平板测试法(金黄色葡萄球菌)和结晶紫染色法评估受试菌形成生物被膜的能力;2.微量肉汤稀释法和琼脂平板测试法测定金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC);3.利用生物被膜早期黏附实验观察17BIPHE2单独使用及联合抗生素对生物被膜黏附阶段的影响;4.利用生物被膜形成抑制实验观察17BIPHE2单独使用及联合抗生素对生物被膜形成阶段的影响;5.通过扫描电子显微镜(SEM)观察17BIPHE2单独使用及联合抗生素是否具有清除成熟阶段生物被膜的作用;6.采用激光共聚焦激光扫描显微镜(LSCM)观察17BIPHE2是否具有杀伤成熟铜绿假单胞菌生物被膜内细菌的作用;7.利用Real-Time PCR分析17BIPHE2作用细菌后对生物被膜相关基因转录水平的影响。结果1.经刚果红平板测试法和结晶紫染色法评估临床分离株SA 05具有较强形成生物被膜能力,临床分离株SA 07不具有形成生物被膜的能力;经结晶紫染色法评估临床分离株PA 03具有较强的形成生物被膜能力,临床分离株PA 07不具有形成生物被膜的能力;2.17BIPHE2对金黄色葡萄球菌MIC值为8μmol/L,1/2×MIC就可以有效抑制浮游菌的生长。17BIPHE2对铜绿假单胞菌MIC值为48μmol/L,亚抑菌浓度也可以有效抑制浮游菌的生长。17BIPHE2联合抗生素使用较单一使用MIC值均有所下降;3.单独使用17BIPHE2在金黄色葡萄球菌黏附阶段抑制率为40%,17BIPHE2联合抗生素使用较单独使用抗生素其抑制效果有所提升。单独使用17BIPHE2在铜绿假单胞菌黏附阶段抑制率为60%,17BIPHE2联合抗生素使用与上述结果相似,较单独使用抗生素抑制率有所提高;4.在金黄色葡萄球菌生物被膜形成阶段17BIPHE2单独使用抑制率达到35%,而在铜绿假单胞菌生物被膜形成阶段17BIPHE2单独使用抑制率达到80%。值得注意的是,17BIPHE2在1/4×MIC也可以显著抑制两种细菌产生生物被膜。17BIPHE2联合抗生素结果显示较单独使用抗生素其抑制生物被膜产生能力均有所提高;5.经扫描电子显微镜观察,17BIPHE2在1/4×MIC浓度即可促进金黄色葡萄球菌成熟生物被膜消散,1×MIC生物被膜消散同时细菌黏附量有所下降,联合万古霉素促进生物被膜消散同时细菌胞质大量外泄。17BIPHE2促进铜绿假单胞菌成熟生物被膜消散效果与上述结果相似,亚抑菌浓度即可促进铜绿假单胞菌生物被膜消散;随着药物浓度提高细菌黏附量急剧下降,并且呈现剂量依赖关系。当17BIPHE2浓度达到1×MIC时细菌完整形态几乎消失,生物被膜消散同时细胞质外泄;抗菌肽联合环丙沙星清除生物被膜作用尤为显著;6.采用激光共聚焦扫描显微镜观察单独17BIPHE2处理铜绿假单胞菌生物被膜后发现,随着药物浓度的提高,细菌黏附量逐渐下降,死菌数逐渐增多,并且呈现明显的剂量依赖关系。当抗菌肽浓度提升至1×MIC,活菌数和死菌数均明显下降。17BIPHE2联合抗生素处理组较单独使用抗生素处理组细菌黏附量显著下降,杀菌作用明显提高;***-Time PCR结果表明,随着17BIPHE2浓度提高,金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌生物被膜相关基因在转录水平表达量均出现不同程度的抑制,且高浓度处理组抑制作用更为明显。结论抗菌肽17BIPHE2具有良好的抑制金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌生物被膜黏附、聚集作用,并可促进成熟生物被膜消散。17BIPHE2辅助抗生素抗生物被膜作用进一步提高。17BIPHE2可以有效抑制生物被膜相关基因的转录,这将为治疗由金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌生物被膜引起的相关感染提供了一个新思路。

关键词：抗菌肽 17BIPHE2 金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌生物被膜

抗菌肽17BIPHE2对金黄色葡萄球菌生物被膜的抑制作用

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微生物学通报 2017年第4期44卷 872-880页

作者：回丽媛李军朱明星王秀青宁夏医科大学临床医学院检验系宁夏银川750004 宁夏医科大学科技中心宁夏银川750004

【目的】研究抗菌肽17BIPHE2单独使用及联合抗生素对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)生物被膜的抑制作用。【方法】采用刚果红平板测试法和结晶紫染色评估受试菌形成生物被膜的能力;微量肉汤稀释法和琼脂平板测试法测定金黄色葡... 详细信息

【目的】研究抗菌肽17BIPHE2单独使用及联合抗生素对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)生物被膜的抑制作用。【方法】采用刚果红平板测试法和结晶紫染色评估受试菌形成生物被膜的能力;微量肉汤稀释法和琼脂平板测试法测定金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);利用抑制金黄色葡萄球菌黏附实验和生物被膜形成抑制实验观察17BIPHE2单独使用及联合抗生素对生物被膜黏附阶段和形成阶段的影响;通过扫描电子显微镜(SEM)观察17BIPHE2单独使用及联合抗生素对成熟生物被膜的清除作用。【结果】17BIPHE2的MIC为8μmol/L,1/2×MIC就可以有效抑制浮游菌的生长。单独使用17BIPHE2在细菌黏附阶段抑制率为40%,在生物被膜形成阶段抑制率达到35%。17BIPHE2联合抗生素使用较单独使用抗生素其抑制率均有所下降。生物被膜成熟阶段17BIPHE2于1/4×MIC浓度即可促进生物被膜崩解,1×MIC生物被膜崩解同时细菌黏附量有所下降,联合万古霉素促进生物被膜崩解同时细菌胞质大量外泄。【结论】抗菌肽17BIPHE2具有良好的抑制金黄色葡萄球菌生物被膜作用,联合抗生素其抗生物被膜作用进一步提高。这将为治疗由金黄色葡萄球菌生物被膜引起的相关感染提供了一个新思路。

关键词：抗菌肽 17BIPHE2 金黄色葡萄球菌生物被膜

抗菌肽17BIPHE2对人肺腺癌细胞A549的抑制作用

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肿瘤防治研究 2017年第10期44卷 659-664页

作者：李军回丽媛战仕胜王秀青宁夏医科大学临床医学院医学检验系银川750004 宁夏医科大学总医院外科学研究室银川750004

目的探讨抗菌肽17BIPHE2对人肺腺癌细胞A549的抑制作用及其作用机制。方法 MTT法检测0~40μmol/L的抗菌肽17BIPHE2对A549细胞增殖的影响;流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Real-time PCR和Western blot检测Bax、Bcl-2的表达变化;... 详细信息

目的探讨抗菌肽17BIPHE2对人肺腺癌细胞A549的抑制作用及其作用机制。方法 MTT法检测0~40μmol/L的抗菌肽17BIPHE2对A549细胞增殖的影响;流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Real-time PCR和Western blot检测Bax、Bcl-2的表达变化;透射电子显微镜观察细胞超微结构变化。结果 17BIPHE2可抑制A549细胞的增殖,其IC50值为34.33μmol/L,同时20、25、30、35、40μmol/L的17BIPHE2对A549细胞的生长抑制率分别为(1.8±2.7)%、(6.1±2.1)%、(24.6±4.6)%、(55.2±1.1)%、(76.3±1.2)%。与对照组相比,25、35μmol/L的17BIPHE2处理24h的A549细胞凋亡率显著增高(P<0.05),细胞核呈现固缩,染色质深染,线粒体嵴断裂,内质网肿胀等凋亡细胞的特征。Bax的表达上调(P<0.05),Bcl-2的表达受到抑制(P<0.05),Bax/Bcl-2比值升高。结论17BIPHE2可能是通过上调Bax表达,下调Bcl-2表达诱导A549细胞凋亡,抑制其增殖。

关键词：抗菌肽17BIPHE2 肺腺癌 A549细胞凋亡

抗菌肽17BIPHE2通过阻滞肺腺癌A549细胞周期促进其凋亡

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现代预防医学 2018年第2期45卷 314-318+351页

作者：李军战仕胜回丽媛王秀青宁夏医科大学临床医学院唐山工人医院检验科沧州中心医院检验科宁夏医科大学总医院外科学研究室

目的探讨抗菌肽17BIPHE2抑制人肺腺癌A549细胞增殖机制。方法 MTT比色法检测0;0μmol·L-1的抗菌肽17BIPHE2对A549细胞和正常肺上皮BEAS-2B细胞增殖的影响;流式细胞仪检测17BIPHE2对A549细胞细胞周期、线粒体膜电位、细胞内钙离子的影响... 详细信息

目的探讨抗菌肽17BIPHE2抑制人肺腺癌A549细胞增殖机制。方法 MTT比色法检测0;0μmol·L-1的抗菌肽17BIPHE2对A549细胞和正常肺上皮BEAS-2B细胞增殖的影响;流式细胞仪检测17BIPHE2对A549细胞细胞周期、线粒体膜电位、细胞内钙离子的影响;TUNEL染色和流式细胞仪检测17BIPHE2诱导的A549细胞凋亡。结果抗菌肽17BIPHE2可选择性抑制肺腺癌A549细胞增殖（P<0.05）,对正常肺上皮BEAS-2B细胞无明显抑制作用;A549细胞经不同浓度抗菌肽17BIPHE2处理24 h后,细胞周期阻滞于S期（P<0.05）;同时抗菌肽17BIPHE2能够明显降低A549细胞中线粒体膜电位（P<0.05）,随着17BIPHE2浓度不断增加,A549细胞内钙离子浓度也明显升高（P<0.05）;结论抗菌肽17BIPHE2可能通过阻滞A549细胞细胞周期,降低线粒体膜电位、升高细胞内钙离子浓度从而诱导A549细胞凋亡。

关键词：抗菌肽17BIPHE2 A549细胞细胞周期线粒体膜电位钙离子浓度凋亡

天蚕素A-马盖宁杂合肽对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抑菌机制的研究

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微生物学通报 2016年第3期43卷 601-608页

作者：刘二强陈香君回丽媛朱明星王秀青宁夏医科大学检验学院宁夏银川750004 宁夏医科大学科技中心宁夏银川750004

【目的】研究天蚕素A-马盖宁杂合肽对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)DNA作用的抑菌机制。【方法】利用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)、凝胶阻滞分析、紫外光谱分析、荧光光谱分析的方法。【结果】天蚕素A-马盖宁杂合肽对MRSA的最小抑菌浓... 详细信息

【目的】研究天蚕素A-马盖宁杂合肽对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)DNA作用的抑菌机制。【方法】利用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)、凝胶阻滞分析、紫外光谱分析、荧光光谱分析的方法。【结果】天蚕素A-马盖宁杂合肽对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)为64 mg/L,杂合肽可以在细菌胞内形成累积,并能与体外基因组DNA发生结合作用。同时杂合肽可以引起DNA构象的改变,荧光光谱分析结果表明杂合肽能与溴化乙锭(EB)竞争性地嵌入基因组DNA中,作用方式类似于EB与DNA的结合方式,杂合肽与DNA的结合表现为混合式作用方式。【结论】天蚕素A-马盖宁进入细菌胞内,与MRSA基因组DNA结合,并以混合式作用方式与DNA发生了结合,通过胞内靶向机制发挥抑菌作用。

关键词：天蚕素A-马盖宁杂合肽耐甲氧西林金色葡萄球菌作用机制

新型抗肿瘤杂合抗菌肽的设计、合成及抗肿瘤活性研究

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宁夏医科大学学报 2016年第6期38卷 615-619,封4页

作者：陈香君刘二强回丽媛朱明星王秀青宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学科技中心银川750004

目的探讨新型抗肿瘤杂合抗菌肽的设计、合成及抗肿瘤活性。方法利用抗菌肽数据库(http://***/AP/***)进行抗肿瘤抗菌肽的数据参数分析,筛选出与人类密切相关的抗肿瘤抗菌肽即人中性粒细胞防御素-1(HNP-1)、LL-37和Maximin 1、Dermasepti... 详细信息

目的探讨新型抗肿瘤杂合抗菌肽的设计、合成及抗肿瘤活性。方法利用抗菌肽数据库(http://***/AP/***)进行抗肿瘤抗菌肽的数据参数分析,筛选出与人类密切相关的抗肿瘤抗菌肽即人中性粒细胞防御素-1(HNP-1)、LL-37和Maximin 1、Dermaseptin-B2,经Genbank、DNASTAR、Prot Param、Antheprot生物信息学软件分析序列,截取其活性片段,把其中色氨酸(Trp,W)替换为亮氨酸(Leu,L)、增加两个甘氨酸(Gly,G),其主要目的是增加其净电荷数和亲水性,合成新型杂合肽;采用实时阻抗细胞分析技术(RTCA)和噻唑蓝(MTT)法测试合成的新型杂合肽对肿瘤细胞活力及毒性作用。结果经生物信息学软件分析所得5条杂合肽均属于稳定的阳离子抗菌肽,且具有较好的物理活性;同时杂合肽使肿瘤细胞活力降低并表现出抑制活性。结论成功设计合成了5条具有抗肿瘤活性的新型杂合抗菌肽。

关键词：杂合肽抗肿瘤活性抗菌肽合成

天蚕素A-马盖宁杂合肽对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生理代谢影响的研究

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微生物学杂志 2016年第5期36卷 44-50页

作者：刘二强陈香君回丽媛朱明星王秀青兵器工业北京北方医院北京100089 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学科技中心宁夏银川750004

研究天蚕素A-马盖宁杂合肽作用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)后对细胞生理代谢的影响。利用全波长酶标仪测定杂合肽作用MRSA后对DNA、RNA、总蛋白、β-半乳糖苷酶、碱性磷酸酶的影响,利用溶氧电极测定杂合肽对细胞呼吸作用的影响,通... 详细信息

研究天蚕素A-马盖宁杂合肽作用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)后对细胞生理代谢的影响。利用全波长酶标仪测定杂合肽作用MRSA后对DNA、RNA、总蛋白、β-半乳糖苷酶、碱性磷酸酶的影响,利用溶氧电极测定杂合肽对细胞呼吸作用的影响,通过生物发光分析仪检测杂合肽作用细胞后ATP生产的变化。结果显示,杂合肽作用MRSA后对细胞DNA、RNA、总蛋白的合成能力均出现抑制作用。β-半乳糖苷酶、碱性磷酸酶的表达活性同样受到了明显的抑制。杂合肽作用细胞后呼吸作用明显下降,ATP生产能力受到抑制。杂合肽作用细胞后抑制了胞内部分生物大分子的合成能力、胞内酶的表达活性及细胞的能量代谢功能,通过胞内机制发挥了抑菌作用。

关键词：天蚕素A-马盖宁耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生理代谢生物大分子抗菌肽

“自我决定的孤独”:个体化时代青年社交样态背后的“自我逻辑”审思

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内蒙古社会科学 2025年第1期 173-181页

作者：张佳媛林滨中山大学马克思主义学院

“自我决定的孤独”是青年群体在当今时代的新型个体孤独，具有高度“自我意识”的青年个体构筑“自我孤岛”的社交图景主要呈现两个面向：私人情感场域“断离式”的情感封闭和公共社交领域“降级式”的社交样态。青年社交样态的背后是... 详细信息

“自我决定的孤独”是青年群体在当今时代的新型个体孤独，具有高度“自我意识”的青年个体构筑“自我孤岛”的社交图景主要呈现两个面向：私人情感场域“断离式”的情感封闭和公共社交领域“降级式”的社交样态。青年社交样态的背后是“自我脱嵌性”与“自我重嵌性”双重统一的“自我逻辑”的建构过程，既展现了个体化进程中青年基于“自我”视角所作出的社交选择，又突显了青年在个体性与社会性双重维度上的社交诉求。在现代性视角下，“自我逻辑”的建构揭示出现代“自我”在情感逻辑与经济理性逻辑双重纠缠中的情感转向与“自我决定的孤独”的情感悖论，并折射出现代性的吊诡之处。因此，面对青年群体“自我决定的孤独”的情感隐忧，需在观念层面克服理性主义的情感逻辑并关注“情感自我”的建构，在实践层面“重拾附近”并构建“情感共同体”,以此应对现代性“孤独自我”的存在性危机。

关键词： “自我决定的孤独” 社交样态自我逻辑现代性吊诡

典型坦桑尼亚日光石样品的宝石学特征及其砂金效应成因研究

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现代地质 2025年

作者：于丽媛刘迎新中国地质大学(北京)珠宝学院

日光石作为长石族矿物中的一个重要成员，以其独特的砂金效应引起了广泛关注。本文对一块来自坦桑尼亚的日光石样品进行了全面的宝石学分析，采用了多种先进的仪器技术，包括偏光显微镜、X荧光光谱、激光剥蚀-等离子体质谱（LA-ICP-MS... 详细信息

日光石作为长石族矿物中的一个重要成员，以其独特的砂金效应引起了广泛关注。本文对一块来自坦桑尼亚的日光石样品进行了全面的宝石学分析，采用了多种先进的仪器技术，包括偏光显微镜、X荧光光谱、激光剥蚀-等离子体质谱（LA-ICP-MS）、电子探针、X射线粉晶衍射（XRD）、红外光谱和拉曼光谱。研究结果表明，该样品主要由微斜长石组成，确认其为钾长石矿物。标本内部分布有丰富的橙红色、绿色和褐色包裹体，均由赤铁矿构成，这些包裹体沿两组相互垂直的方向以层状形式定向排列，从而形成了显著的砂金效应。此研究不仅揭示了典型坦桑尼亚日光石的矿物组成及其包裹体特征，也为进一步认识其矿物学性质提供了基础性数据支持。

关键词：日光石包裹体长石族矿物砂金效应坦桑尼亚