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甲氰菊酯和代谢物3-PBA在土壤中的吸附、迁移及对蚯蚓的毒性效应研究

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甲氰菊酯和代谢物3-PBA在土壤中的吸附、迁移及对蚯蚓的毒性效应...

作者：唐灿西南大学

学位级别：硕士

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黄酮类醛糖还原酶抑制剂的研究进展

时珍国医国药 2009年第6期20卷 1470-1471页

作者：黄伟唐灿西华大学生物工程学院四川成都610039

醛糖还原酶是多元醇通路中的关键限速酶,高血糖浓度下,此通路代谢旺盛,与糖尿病并发症的发生和恶化有密切关系。醛糖还原酶抑制剂(ARIs)是治疗糖尿病并发症的重要药物之一,可通过抑制糖代谢的多元醇通路中的限速酶——醛糖还原酶的活性... 详细信息

醛糖还原酶是多元醇通路中的关键限速酶,高血糖浓度下,此通路代谢旺盛,与糖尿病并发症的发生和恶化有密切关系。醛糖还原酶抑制剂(ARIs)是治疗糖尿病并发症的重要药物之一,可通过抑制糖代谢的多元醇通路中的限速酶——醛糖还原酶的活性,减少体内山梨醇的蓄积,从而预防和延迟糖尿病并发症的发生和发展。文章详细综述了黄酮类醛糖还原酶抑制剂的筛选方法、对AR作用机制结构特点等,并对其发展前景进行了展望。

关键词：糖尿病并发症醛糖还原酶抑制剂黄酮类化合物

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金钱、八卦与亿万富翁

作者： (女)唐灿

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上清软胶囊的质量标准研究

药物分析杂志 2007年第9期27卷 1437-1440页

作者：黄巍左玲玲唐灿成都中医药大学成都610074 西华大学成都610039

目的:建立上清软胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱法对处方中黄芩等5味药材进行定性鉴别,采用反相高效液相色谱法对黄芩苷的含量进行测定。结果:在薄层色谱中可检出特征斑点;高效液相色谱法测定,黄芩苷进样量在0.06～0.48μg范围内线... 详细信息

目的:建立上清软胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱法对处方中黄芩等5味药材进行定性鉴别,采用反相高效液相色谱法对黄芩苷的含量进行测定。结果:在薄层色谱中可检出特征斑点;高效液相色谱法测定,黄芩苷进样量在0.06～0.48μg范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率(n=9)为102.3%。结论:本法操作简便、准确,重复性好,可作为该制剂的质量控制标准。

关键词：上清软胶囊黄芩苷质量标准

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传奇李开复

绿原酸对PTSD大鼠行为学的改善效应及机制研究

作者：唐灿

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绿原酸对PTSD大鼠行为学的改善效应及机制研究

作者：唐灿重庆理工大学

学位级别：硕士

创伤后应激障碍(Post-traumatic stress disorder,PTSD)是一种在经历自然灾害、家庭暴力或战斗有关的创伤后发展起来的长期延迟性精神障碍。PTSD的发病机制复杂,与海马神经元凋亡、氧化应激及炎症等有关。目前临床多使用抗抑郁药和抗焦... 详细信息

创伤后应激障碍(Post-traumatic stress disorder,PTSD)是一种在经历自然灾害、家庭暴力或战斗有关的创伤后发展起来的长期延迟性精神障碍。PTSD的发病机制复杂,与海马神经元凋亡、氧化应激及炎症等有关。目前临床多使用抗抑郁药和抗焦虑药进行治疗,但副作用较多。中药作为一种天然药物,毒副作用小,且具有多靶点的作用特点,在治疗PTSD方面具有潜在优势。绿原酸(Chlorogenic acid,CGA)是一种富含于杜仲、金银花等植物中的多酚酸,具有免疫保护、抗氧化和抗炎等特性。此外,CGA还具有神经保护特性,能有效提高注意力和学习记忆能力,并具有改善情绪的作用。推测,CGA对PTSD样行为具有潜在调控作用。基于此,本课题拟通过观察CGA对PTSD大鼠的行为学、海马病理组织形态、凋亡、突触可塑性以及炎症等方面的影响,初步探讨CGA对PTSD大鼠行为学的改善效应及其潜在的分子机制,为PTSD的药物研发和临床治疗提供参考。主要研究内容:***大鼠动物模型制备及分组PTSD大鼠动物模型通过单次延长应激(Single-prolonged stress,SPS)法获得。SPS造模2周使动物渡过应激期后通过腹腔注射低、中、高不同浓度的CGA,同时以舍曲林(Sertraline,Ser)为阳性对照。具体实验分组如下:(1)正常对照(Control)组;(2)PTSD(SPS)组;(3)低剂量[SPS+CGA(15mg/kg)]组;(4)中剂量[SPS+CGA(30mg/kg)]组;(5)高剂量[SPS+CGA(60mg/kg)]组;(6)阳性对照[SPS+Ser(10mg/kg)]组。2.行为学检测采用旷场(Open field,OF)、高架十字迷宫(Elevated plus maze,EPM)、Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)行为学实验,检测不同剂量的CGA对PTSD大鼠行为学的改善效应。3.海马组织病理学检测为探讨不同剂量的CGA对PTSD大鼠海马神经元的保护作用,采用HE、Nissl染色观察不同剂量的CGA对PTSD大鼠海马区神经元的形态和数目的影响。4.海马神经元凋亡检测为探讨CGA对PTSD大鼠海马神经元凋亡的影响,采用WB和IF技术检测各组大鼠海马区凋亡相关因子Bcl-2、Bax蛋白的表达情况以及各组大鼠海马区成熟神经元标志物MAP-2、神经元标志物Neu N蛋白的表达水平。5.海马神经炎症检测为探讨CGA对PTSD大鼠海马神经炎症的影响及对Nrf2/NF-κB信号通路的调控作用,采用WB方法检测各组大鼠海马区Nrf2/NF-κB信号通路相关分子NQO-1、Nrf2、HO-1、p-NF-κB p65、NF-κB p65、p-IκB-α、IκB-α的表达情况,并使用IF或WB方法检测每一组大鼠海马区小胶质细胞(Microglia,MG)标志物Iba1的表达水平以及炎症因子COX-2和i NOS的表达水平。6.海马突触可塑性检测为探讨CGA对PTSD大鼠海马突触可塑性的影响,采用IF或WB方法检测各组大鼠海马区p-CREB/CREB、PSD95和Synapsin I蛋白的表达情况,并采用Golgi-Cox染色观察海马DG区突触结构的变化情况、树突的复杂程度以及树突棘密度。实验结果:1.通过SPS法成功制备了PTSD大鼠动物模型。行为学检测结果显示,CGA给药后能够显著地改善PTSD大鼠的焦虑抑郁样行为和空间学习记忆能力。2.病理组织水平检测结果表明,CGA对PTSD大鼠海马区神经元的分布和形态具有较好的改善作用,能有效缓解PTSD大鼠海马区的病理损伤,具有一定的神经保护作用。3.凋亡相关蛋白检测结果表明,CGA能够上调成熟神经元标志物MAP-2、神经元标志物Neu N和Bcl-2蛋白的表达,同时下调促凋亡因子Bax的表达,从而抑制海马神经元的凋亡,发挥海马神经元的保护作用。4.突触可塑性检测结果表明,CGA能够上调PSD95和Synapsin I蛋白的表达,同时上调p-CREB/CREB蛋白的表达,进而改善突触可塑性。此外,CGA可以较好的恢复了PTSD大鼠海马DG区神经元树突的复杂性,增加了树突棘密度,说明CGA能够改善PTSD大鼠海马突触可塑性。5.海马神经炎症相关蛋白的WB检测结果显示,经过CGA给药干预后,CGA能有效抑制PTSD大鼠海马区的炎症反应,具体表现在显著抑制了小胶质细胞的过度激活即小胶质细胞标志物Iba1的表达下调,以及炎症相关因子COX-2和i NOS蛋白表达水平。***2/NF-κB信号通路检测结果显示,通过CGA给药干预能够抑制SPS诱导的PTSD大鼠NF-κB信号通

关键词：创伤后应激障碍绿原酸神经元凋亡突触可塑性神经炎症

N-酰基-L-硒代蛋氨酸衍生物的合成、细胞毒性评价及初步药动学研究

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N-酰基-L-硒代蛋氨酸衍生物的合成、细胞毒性评价及初步药动学研究

作者：唐灿武汉轻工大学

学位级别：硕士

硒元素是一种重要的微量元素,在各种生物体内发挥着不可替代的作用,它与生命体的各种生理功能有着非常紧密的联系。20世纪中期以来,科学家们对于硒元素的探索越来越深入,人们意识到硒元素对于生物体的健康作用非常显著,有机硒产品的开... 详细信息

硒元素是一种重要的微量元素,在各种生物体内发挥着不可替代的作用,它与生命体的各种生理功能有着非常紧密的联系。20世纪中期以来,科学家们对于硒元素的探索越来越深入,人们意识到硒元素对于生物体的健康作用非常显著,有机硒产品的开发与研究也成为了一个热门的课题。硒代蛋氨酸是一种生物相容性较好的有机硒化物,具有广泛的应用前景。然而,硒代蛋氨酸结构简单,应用功能单一,限制了其诸多应用范围。本研究通过对硒代蛋氨酸进行化学修饰,既保留了硒代蛋氨酸的有机硒活性,又扩宽了硒代蛋氨酸在食品、医药、化妆品等领域的应用范围,为硒代蛋氨酸类有机硒化物的开发与应用提供一种新的思路与方法。本论文主要以L-硒代蛋氨酸为基础原料,通过L-硒代蛋氨酸与月桂酰氯和油酰氯的缩合反应和甲酯化反应,对L-硒代蛋氨酸进行结构修饰,得到N-酰基-L-硒代蛋氨酸甲酯衍生物,通过核磁共振氢谱、碳谱以及二维核磁(HSQC、HMBC)谱图确证,并对其主要位置的C、H原子信号进行了详尽的归属。通过对合成反应过程中关键的Schotten-Baumann缩合反应步骤进行正交工艺优化,得出最佳合成反应工艺条件:N-月桂酰基-L-硒代蛋氨酸的最佳反应条件为反应温度为0℃,反应p H为9,反应时间4 h,n(氨基酸):n(月桂酰氯)为2:1,在此反应条件下,平均产率为76.39%。N-油酰基-L-硒代蛋氨酸最佳反应温度为25℃,反应p H为11,反应时间6 h,n(氨基酸):n(月桂酰氯)为2:1,平均反应产率为69.12%。对合成的两种化合物进行了细胞毒性性评价,通过MTT比色法表述两种化合物对于细胞活性的影响,通过试验确证N-月桂酰基-L-硒代蛋氨酸甲酯和N-油酰基-L-硒代蛋氨酸甲酯对人体正常肝细胞(HL-7702)和大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)均无显著的毒性。当两种化合物浓度在0-1920μmol/L时,两种细胞存活率均在75%以上,表明化合物的细胞毒性较小。通过细胞毒性评价确认目标化合物无明显毒性后,选取N-月桂酰基-L-硒代蛋氨酸甲酯进行大鼠血浆药代动力学初步评价,通过开发建立N-月桂酰基-L-硒代蛋氨酸甲酯的定量方法,考察大鼠灌胃给药N-月桂酰基-L-硒代蛋氨酸甲酯后,大鼠体内血药浓度的变化情况和主要的药代动力学参数。建立的方法选择性强、线性范围宽(80～20000 ng/m L)、灵敏度较好(LLOQ为80 ng/m L)。通过分析得出N-月桂酰基-L-硒代蛋氨酸甲酯在雌雄个体之间,存在着明显的吸收差异性,雄性大鼠的吸收速度和吸收量均大于雌性大鼠,并且药物在大鼠血浆达峰较快,半衰期较短,药物进入体内后,主要富集与各个脏器和组织内。通过对N-月桂酰基-L-硒代蛋氨酸甲酯的进行初步的药代动力学评价,为相关或类似的硒代氨基酸衍生物的研究和生物学评价提供思路和相关的探究。

关键词：硒 L-硒代蛋氨酸合成细胞毒性评价药代动力学

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染料木素磷脂复合物的制备及其光谱性质研究

中国药学杂志 2010年第20期45卷 1562-1566页

作者：罗娅君张琦李辉容唐灿绵阳师范学院化学与化学工程学院四川绵阳621000 西南民族大学生命科学与技术学院成都610041

目的为了提高染料木素的生物利用度,制备染料木素磷脂复合物,并对其光谱性质进行研究。方法以染料木素与大豆卵磷脂的结合率为评价标准,对反应溶剂、反应时间、反应物浓度、反应温度和投料比5个因素对结合率的影响进行了考查,利用UV、IR... 详细信息

目的为了提高染料木素的生物利用度,制备染料木素磷脂复合物,并对其光谱性质进行研究。方法以染料木素与大豆卵磷脂的结合率为评价标准,对反应溶剂、反应时间、反应物浓度、反应温度和投料比5个因素对结合率的影响进行了考查,利用UV、IR、XRD、DSC等分析技术对复合物结构进行分析。结果最佳制备条件为:四氢呋喃为反应溶剂,染料木素质量浓度为2 ***-1,投料摩尔比为1∶3,反应时间为3 h,反应温度为50℃,该条件下产物结合率达95.4%。结论磷脂复合物结构不同于单体及物理混合物,染料木素与卵磷脂极性部位经范德华力、氢键等作用结合形成了复合物。

关键词：染料木素磷脂复合物制备工艺光谱性质

基于胞外多糖和胆盐水解酶的植物乳杆菌降胆固醇机理研究

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基于胞外多糖和胆盐水解酶的植物乳杆菌降胆固醇机理研究

作者：唐灿华南农业大学

学位级别：硕士

随着生活水平的不断提高高血脂症患病人群的数量也逐渐增加。虽然胆固醇具有细胞结构组成、促进脂肪消化、维持内分泌平衡等重要生理功能,但是体内胆固醇含量过高将会对健康造成不利。如何利用微生物在肠道中发挥降胆固醇的作用,以及掌... 详细信息

随着生活水平的不断提高高血脂症患病人群的数量也逐渐增加。虽然胆固醇具有细胞结构组成、促进脂肪消化、维持内分泌平衡等重要生理功能,但是体内胆固醇含量过高将会对健康造成不利。如何利用微生物在肠道中发挥降胆固醇的作用,以及掌握微生物降胆固醇的机理,将对心血管疾病的药物和保健品开发提供思路。研究表明微生物胞外多糖（EPS）具有降胆固醇益生功能,但是微生物EPS产量较低,并具有菌株特异性。此外,乳酸菌降胆固醇的途径众多且机理复杂,除了EPS对胆固醇有一定的吸附作用外,还存在其他的作用机理,例如胆盐水解酶介导的共沉淀作用等。因此,本论文从植物乳杆菌胞外多糖降胆固醇功能、胞外多糖合成关键酶活性、胞外多糖合成关键酶和胆盐水解酶在降胆固醇过程中的基因表达情况等方面的研究来阐述两株降胆固醇能力不同的植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）La-10和La-11的降胆固醇机理。首先,本实验对两株植物乳杆菌发酵产EPS的工艺条件进行单因素优化实验,结果表明:La-10和La-11的最适接种量均为4%;培养基的最适蔗糖含量分别为30 g/L和20 g/L;最适发酵温度均为30℃;最适发酵时间均为30 h。对生成的EPS进行降胆固醇实验,获得了最佳体外降胆固醇实验条件为:La-10和La-11的最适EPS质量浓度均为0.8 g/L;最适吸附时间均为15 h;最适吸附温度分别为30℃和37℃。除此之外本实验还从多个角度比较La-10和La-11的降胆固醇能力差异,结果表明:La-10热灭活的菌体和发酵菌液降胆固醇率分别是6.45%和9.99%,La-11为3.19%和5.79%。此外,本论文通过异源表达实验分析了EPS合成基因簇中两个关键基因UDP-葡萄糖-4-差向异构酶基因（galE3）和引导糖基转移酶基因（cps4E）的表达情况。结果表明:galE3和cps4E表达的蛋白质分子量大小分别约为36 k Da和25 kDa,均为亲水性蛋白质。galE3编码的蛋白质为稳定蛋白质,表达产物纯化效果良好,利用高效液相色谱法（HPLC）分析表明其酶活力高,而cps4E编码的蛋白质为不稳定蛋白质,表达系统有待进一步摸索。经HPLC分析,La-10和La-11的GALE3酶促反应产物浓度分别为0.55 mg/mL和0.30 mg/mL。最后本论文通过荧光定量PCR实验分析了在降胆固醇过程中galE3、cps4E、bsh等基因在转录水平上变化。结果表明:La-10的galE3和cps4E相对表达量上调了3.06倍和3.34倍,La-11的galE3和cps4E的相对表达量上调了3.69倍和4.22倍。La-11的bsh1,bsh2、bsh3相对表达量分别上调了4.58倍、8.77倍、2.25倍,bsh4变化不显著。本实验主要从分子生物学角度了解植物乳杆菌降低胆固醇的机理,证实了降胆固醇机理存在菌株特异性,不同植物乳杆菌菌株可能存在不同的降胆固醇机理。本论文研究将为利用基因工程技术获得高产EPS的菌株以及植物乳杆菌在医学和食品药品等领域上的应用提供实验基础和理论依据。

关键词：胞外多糖 UDP-葡萄糖-4-差向异构酶引导糖基转移酶胆盐水解酶