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绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆

中国兽医学报 2012年第5期32卷 788-792页

作者：任卫青陈亮和小娥何俊丹王新庄河南农业大学牧医工程学院河南郑州450001

从胚胎发育阶段、饲养层和培养体系等方面对影响绵羊类ES细胞分离、克隆效率的因素进行探讨。结果显示:致密桑葚胚和囊胚的ICM增殖率高于囊胚和孵化囊胚。绵羊类ES细胞在同源绵羊胎儿成纤维细胞(SEF)上生长比较缓慢,最终传代次数也低于... 详细信息

从胚胎发育阶段、饲养层和培养体系等方面对影响绵羊类ES细胞分离、克隆效率的因素进行探讨。结果显示:致密桑葚胚和囊胚的ICM增殖率高于囊胚和孵化囊胚。绵羊类ES细胞在同源绵羊胎儿成纤维细胞(SEF)上生长比较缓慢,最终传代次数也低于小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)组。培养液中同时添加胎牛血清(FBS)和Knock-out血清替代品(KSR),绵羊类ES传至7代,添加了碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)后,最高可传至8代,而单纯添加KSR或FBS,分别传至4代和5代。对类ES细胞进行AKP染色、核型分析、体外分化试验,证实分离的类ES细胞符合ES细胞的主要特征,而且表达多潜能性细胞因子Nanog。由此认为,致密桑葚胚和囊胚更适合绵羊类ES细胞的体外分离和培养,而且MEF更适合于绵羊类ES细胞的分离传代,培养液中添加5%FBS和15%KSR,比较适合类ES细胞的分离传代,bFGF对绵羊类ES细胞的增殖具有促进作用。

关键词：绵羊胚胎干细胞分离与培养饲养层克隆

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提高畜牧综合执法的措施

养殖与饲料 2018年第3期17卷 90-91页

作者：和小娥河南省郑州市动物卫生监督所郑州450000

本文主要介绍提高畜牧综合执法的各项措施,坚持日常监管和专项整治相结合,创新机制,完善措施,消除监管盲区,提高监管效率;认真落实日常执法监督制度,完善风险分级、量化管理机制;健全网格化监管责任机制,划片分区、责任到人。有力地推... 详细信息

本文主要介绍提高畜牧综合执法的各项措施,坚持日常监管和专项整治相结合,创新机制,完善措施,消除监管盲区,提高监管效率;认真落实日常执法监督制度,完善风险分级、量化管理机制;健全网格化监管责任机制,划片分区、责任到人。有力地推进了畜牧兽医事业的法制化进程,促进畜牧兽医事业健康快速发展。

关键词：畜牧综合执法监督制度质量安全

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口蹄疫的防治措施

当代畜禽养殖业 2018年第3期 25-26页

作者：和小娥郑州市动物卫生监督所 450000

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物共患的急性热性和高度接触性传染病,可传染几十种偶蹄兽,人也可被感染。其病毒易变异、抵抗力强、传播速度快、致病率高、易感动物广泛,故国际兽疫局将口蹄疫列为动物A类疾病,我国农业部把猪口蹄疫... 详细信息

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物共患的急性热性和高度接触性传染病,可传染几十种偶蹄兽,人也可被感染。其病毒易变异、抵抗力强、传播速度快、致病率高、易感动物广泛,故国际兽疫局将口蹄疫列为动物A类疾病,我国农业部把猪口蹄疫列为一类动物疫病之首。冬春季节是各种疫病的高发期。口蹄疫由于其特殊的病原及流行病学特性,严重危害养殖业的发展。强化冬春季对猪口蹄疫的防控意义重大。

关键词：流行特性高发期口蹄疫防控

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当前动物产地检疫工作亟需解决的问题及对策

中国兽医杂志 2021年第3期57卷 123-124页

作者：彭志领和小娥张耀腾王建华吴太谦郑州市农业综合行政执法支队河南郑州450000 荥阳市畜牧局河南荥阳450100

2018年,全国发生非洲猪瘟疫情以来,动物检疫工作备受关注,严格依程序开展动物产地检疫工作对于防控动物疫病有着极其重要的意义。全国农业执法体制改革工作至今尚未全面落实,基层官方兽医思想不稳,为产地检疫工作的有序开展增加了障碍,... 详细信息

2018年,全国发生非洲猪瘟疫情以来,动物检疫工作备受关注,严格依程序开展动物产地检疫工作对于防控动物疫病有着极其重要的意义。全国农业执法体制改革工作至今尚未全面落实,基层官方兽医思想不稳,为产地检疫工作的有序开展增加了障碍,各项工作的部署落实难度加大,加之非洲猪瘟疫情防控形势依然严峻,猪肉价格大幅上涨,2020年第1季度消费者物价指数(CPI)同比增长6.4%。如何响应中央的决策部署,通过产地检疫工作提高对动物传染病的防控水平,同时兼顾机构改革对动物检疫工作的影响,已成为农业农村部门直面的重要课题。

关键词：产地检疫工作动物产地检疫非洲猪瘟动物检疫工作官方兽医动物传染病动物疫病疫情防控

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全国动物检疫技能竞赛的几点体会

河南畜牧兽医 2024年第11期45卷 33-35页

作者：李玫毅周英俏和小娥郑州市农业综合行政执法支队河南郑州450053 武陟县农业综合行政执法大队

本文就笔者参赛经历,分析了全国农业行业职业技能大赛(动物检疫检验员)的现场技能操作考核内容,并就现场技能操作考核的六个岗位的基本操作技术要求和注意事项做了深入探讨,以期为有志于参加此类竞赛的同行提供参考。

关键词：动物检疫技能竞赛注意事项体会

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新形势下动物屠宰检疫亟须解决的问题及对策

上海畜牧兽医通讯 2024年第4期 50-53页

作者：李玫毅周英俏和小娥郑州市农业综合行政执法支队河南郑州450053 武陟县农业综合行政执法大队河南焦作454000

随着重塑性改革持续推进,动物检疫机构与人员、职责均发生较大变化。与动物检疫相关的法律法规相继修订出台,为现阶段推进动物屠宰检疫工作提供基本遵循。数字技术快速发展,给动物检疫监督工作带来新的机遇与挑战。新形势下屠宰检疫工... 详细信息

随着重塑性改革持续推进,动物检疫机构与人员、职责均发生较大变化。与动物检疫相关的法律法规相继修订出台,为现阶段推进动物屠宰检疫工作提供基本遵循。数字技术快速发展,给动物检疫监督工作带来新的机遇与挑战。新形势下屠宰检疫工作凸显出人员队伍建设亟待加强、屠宰检疫科学性和准确性有待提高、制度落实不到位、法律法规有待进一步完善、部门衔接不紧密等新问题,由此提出强化队伍建设、提高动物屠宰检疫工作的科学性和准确性、完善法律法规体系建设、加强部门衔接等对策,以期进一步规范屠宰检疫工作,保证畜产品质量安全。

关键词：屠宰检疫重塑性改革新法律法规数字技术问题对策

小鼠ES细胞条件培养基对绵羊类胚胎干细胞克隆、传代的影响

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畜牧兽医学报 2009年第9期40卷 1327-1332页

作者：白昌明王新庄闫颖颖和小娥张静芳河南农业大学牧医工程学院郑州450002 中国科学院动物研究所北京100101 西北农林科技大学动物医学院杨凌712100

本研究以无血清培养基为基础培养液,旨在探求小鼠ES细胞条件培养液(ESCCM)和2种不同饲养层对绵羊类ES细胞分离、克隆效率的影响。绵羊内细胞团从胚胎中分离得到后,分别以小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)和绵羊胎儿成纤维细胞(SEF)为饲养层进行... 详细信息

本研究以无血清培养基为基础培养液,旨在探求小鼠ES细胞条件培养液(ESCCM)和2种不同饲养层对绵羊类ES细胞分离、克隆效率的影响。绵羊内细胞团从胚胎中分离得到后,分别以小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)和绵羊胎儿成纤维细胞(SEF)为饲养层进行培养。结果在MEF饲养层上,绵羊类ES细胞在ESCCM新培养系统中可稳定传至第10代,而使用基础培养液最多传至5代。而在SEF饲养层上,绵羊类ES细胞在ESCCM新培养系统中仅能传至3代。表明使用ESCCM和MEF能促进绵羊类ES细胞的分离和克隆。对类ES细胞进行核型分析、AKP染色及体外分化能力检测,证实所分离的类ES细胞符合ES细胞的主要特征,而且发现这些类ES细胞可以表达胚胎干细胞关键转录因子Nanog。结果表明,ESCCM可显著提高绵羊类ES细胞的分离克隆效率,原因可能是小鼠ES细胞在生长过程中可能分泌某些重要的细胞因子,从而达到促进绵羊ES细胞增殖的作用。且MEF比SEF更适合于绵羊类ES细胞的分离和传代。

关键词：绵羊类ES细胞小鼠ES细胞条件培养基自我更新

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兔骨髓间充质干细胞的分离培养

河南农业科学 2010年第2期39卷 102-104页

作者：闫颖颖张静芳和小娥王新庄西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

为探讨体外分离及培养扩增兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,无菌采取兔股骨,用含20%FBS的DMEM培养液冲骨髓腔,采用全骨髓细胞贴壁培养法对MSCs进行纯化扩增,倒置显微镜下观察原代及传代细胞的形态、生长情况、绘制细胞生长曲线。结果显... 详细信息

为探讨体外分离及培养扩增兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,无菌采取兔股骨,用含20%FBS的DMEM培养液冲骨髓腔,采用全骨髓细胞贴壁培养法对MSCs进行纯化扩增,倒置显微镜下观察原代及传代细胞的形态、生长情况、绘制细胞生长曲线。结果显示,MSCs为贴壁生长细胞,形态均匀呈纤维样,增殖能力强,多次传代仍能保持其生物学特性。采用全骨髓贴壁培养法能够较好地纯化和扩增MSCs。

关键词：骨髓间充质干细胞体外培养兔

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兔骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究

畜牧兽医学报 2011年第10期42卷 1362-1367页

作者：王新庄和小娥闫颖颖任卫青何俊丹吕婧玉河南农业大学牧医工程学院郑州450002 西北农林科技大学动物医学学院杨凌712100

旨在研究5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞分化的作用及适宜浓度。取兔股骨骨髓,分离并培养骨髓间充质干细胞,用5-Aza定向诱导向心肌样细胞分化。用倒置显微镜、免疫细胞化学法鉴定诱... 详细信息

旨在研究5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞分化的作用及适宜浓度。取兔股骨骨髓,分离并培养骨髓间充质干细胞,用5-Aza定向诱导向心肌样细胞分化。用倒置显微镜、免疫细胞化学法鉴定诱导后的细胞是否能表达心肌特异性蛋白α-横纹肌肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T(Cardiac troponin T,cTnT),计算各组细胞向心肌样细胞的诱导分化率。结果,5-Aza诱导MSCs后,细胞明显变宽,诱导1个月后的MSCs呈长杆状,走向趋于一致,相邻细胞间连接较紧密,相互融合。心肌细胞特异性蛋白α-actin和cTnT呈阳性表达,不同浓度的5-Aza诱导的MSCs心肌细胞特异性蛋白的表达率不一样,其中以10μmol.L-1组表达率最高。5-Aza作用兔MSCs体外培养可以诱导其向心肌样细胞分化,最佳浓度为10μmol.L-1。

关键词：骨髓间充质干细胞 5-氮杂胞苷心肌样细胞兔