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非洲猪瘟病毒JX21毒株全基因组序列分析和生物学特性研究

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黑龙江畜牧兽医 2023年第23期 1-6,12,125,126页

作者：郭晓盼周鑫韬张艳艳陈腾缪发明扈荣良军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所/农业农村部非洲猪瘟等重大生猪疾病防控重点实验室长春130122

为了明确非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)JX21毒株的基因组变化及其生物学特性,试验采用PCR检测、病毒分离培养、病毒全基因组测序、红细胞吸附试验及动物感染试验等对从江西省某菜市场采样分离到的ASFV自然变异毒株JX21... 详细信息

为了明确非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)JX21毒株的基因组变化及其生物学特性,试验采用PCR检测、病毒分离培养、病毒全基因组测序、红细胞吸附试验及动物感染试验等对从江西省某菜市场采样分离到的ASFV自然变异毒株JX21进行研究。结果表明:与ASFV SY18毒株序列比较,JX21毒株全基因组序列中出现110处碱基差异和8个基因的自然缺失。其中EP402R基因(编码CD2v蛋白)第395位碱基后插入1个碱基“A”,导致翻译提前终止,JX21毒株丧失了红细胞吸附特性。试验组5头健康家猪感染JX21毒株后,28 d内全部死亡,期间均出现较高水平的病毒血症,剖检后均出现ASFV阳性组织,病程较长。说明分离的JX21毒株属于自然变异株,基因组中存在多处变异,其中EP402R基因变异可引起病毒失去红细胞吸附特性,其毒力未见明显减弱,仍为100%致死,但病程延长。

关键词：非洲猪瘟病毒分离鉴定自然变异株血吸附特性毒力

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我国首次非洲猪瘟疫情的发现和流行分析

中国兽医学报 2018年第9期38卷 1831-1832页

作者：陈腾张守峰周鑫韬李楠缪发明张静远刘晔吕宗吉张国军扈荣良军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所吉林长春130122 佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东佛山528231 吉林和元生物工程股份有限公司吉林松原138000

2018年8月3日,农业农村部根据中国动物卫生与流行病学中心（国家外来动物疫病研究中心）的确认,正式发布了发生在辽宁省沈阳市沈北新区的非洲猪瘟疫情通告。疫情确认之前的2018年7月20日,军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所流行病... 详细信息

2018年8月3日,农业农村部根据中国动物卫生与流行病学中心（国家外来动物疫病研究中心）的确认,正式发布了发生在辽宁省沈阳市沈北新区的非洲猪瘟疫情通告。疫情确认之前的2018年7月20日,军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所流行病学课题组收到辽宁省沈阳市某技术服务部门送检的病猪脾脏、淋巴结、肾脏等样品和过去一段时间疫情的描述。

关键词：非洲猪瘟非洲猪瘟病毒中国

新型冠状病毒S蛋白RBD区的重组猫疱疹病毒的构建及鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2022年第23期 72-77,135页

作者：王凤杰周鑫韬齐宇韩桪蒋依倩陈腾扈荣良吉林农业大学长春130118 中国农业科学院长春兽医研究所长春130122

为了开发一种猫用新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组猫疱疹病毒活载体疫苗,试验以猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-Ⅰ)为病毒载体,采用同源重组技术将亲本病毒FHV-Z的gI和gE基因替换为SARS-CoV-2刺突蛋白(S蛋白)的受体结合域(RBD)和增强型绿色荧光蛋白(E... 详细信息

为了开发一种猫用新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组猫疱疹病毒活载体疫苗,试验以猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-Ⅰ)为病毒载体,采用同源重组技术将亲本病毒FHV-Z的gI和gE基因替换为SARS-CoV-2刺突蛋白(S蛋白)的受体结合域(RBD)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP蛋白)串联表达盒;利用Overlap PCR方法构建包含RBD-EGFP串联表达盒的重组质粒pUC19-RBD-EGFP,并用该重组质粒与FHV-Z基因组共同转染F81细胞,通过有限稀释法和绿色荧光病变灶筛选完成重组病毒rFHV-RBD的纯化;经PCR、测序、间接免疫荧光试验(IFA)和Western-blot方法分析重组病毒rFHV-RBD;用1×10^(7.0)TCID_(50)/mL的重组病毒rFHV-RBD滴鼻免疫猫,利用ELISA方法监测免疫后第0,7,14,21天猫体内特异性抗RBD抗体变化情况。结果表明:试验成功拯救了重组病毒rFHV-RBD,该重组病毒连续传代15代仍能检测到RBD-EGFP串联表达盒,遗传稳定性较好,重组病毒rFHV-RBD的生长特性与亲本病毒FHV-Z无明显差异,能够在重组病毒感染的F81细胞中正确表达S-RBD蛋白,滴鼻免疫猫后第21天特异性抗RBD抗体极显著升高(P<0.01)。说明试验获得的重组病毒rFHV-RBD具有良好的免疫原性,可用于开展猫新型冠状病毒肺炎疫苗的研究。

关键词：新型冠状病毒刺突蛋白受体结合域猫疱疹病毒Ⅰ型免疫原性

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基于大数据的产品色彩设计

包装工程 2019年第14期40卷 228-235页

作者：刘蓓贝张融陈旭周鑫韬张铭杰李书龙北京航空航天大学北京100191 北京唯极科技有限公司北京100107 南昌理工学院南昌330006

目的采用大数据技术,研究大数据时代下产品色彩的设计方法,探究大数据与产品色彩设计结合的价值,为设计提供新的思路和方向,从而创新性地提升产品色彩设计的效率。方法从大数据的角度出发,通过数据采集技术从互联网上得到大量的原始数据... 详细信息

目的采用大数据技术,研究大数据时代下产品色彩的设计方法,探究大数据与产品色彩设计结合的价值,为设计提供新的思路和方向,从而创新性地提升产品色彩设计的效率。方法从大数据的角度出发,通过数据采集技术从互联网上得到大量的原始数据,批量地对数据进行降噪处理,得到有效数据,在将有效数据可视化显示后,深入地对图表数据进行分析,从中挖掘出产品色彩设计的相关规律,从而形成一套行之有效的产品色彩设计方法,并结合大数据技术的应用和发展趋势,探讨两者结合的重要意义。结论大数据在数据挖掘和趋势预测上具有极大的优势,将其与产品色彩设计相结合,为设计师提供一种在产品色彩设计中解决问题的新思路,可以优化产品色彩的设计流程,协助设计师更好、更快地设计出满足目标消费群体需求的产品。

关键词：大数据数据处理颜色提取数据分析产品色彩

狂犬病病毒CVS-11株间隔区缩短的缺失株构建及特性研究

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黑龙江畜牧兽医 2019年第19期 73-77,180页

作者：杨金金陈腾张艳艳齐宇周鑫韬米丽娟张守峰扈荣良吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所长春130122

为了探究狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)基因间隔区对狂犬病病毒生物学特性的影响,试验以狂犬病病毒CVS-11株为母本株,将其基因间隔区碱基均替换为胞嘧啶和胸腺嘧啶,分段扩增后与真核表达载体进行同源重组,运用反向遗传技术进行重组病... 详细信息

为了探究狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)基因间隔区对狂犬病病毒生物学特性的影响,试验以狂犬病病毒CVS-11株为母本株,将其基因间隔区碱基均替换为胞嘧啶和胸腺嘧啶,分段扩增后与真核表达载体进行同源重组,运用反向遗传技术进行重组病毒拯救,经过菌液PCR鉴定和直接免疫荧光检测获得重组病毒rCVS11-2222。结果表明:重组病毒基因组稳定,重组病毒rCVS11-2222在细胞中的复制表现出与CVS-11株相似的特点;小鼠存活率显著降低。说明狂犬病病毒CVS-11株基因间隔区的缩短增强了原毒株的致病力。

关键词：狂犬病病毒基因间隔区反向遗传病毒拯救重组病毒致病性

伪狂犬病病毒TK/gI/gE三基因缺失株的构建

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黑龙江畜牧兽医 2018年第17期 13-17,25,230页

作者：周鑫韬刘晔田宇飞张艳艳杨金金阮晓凤张守峰扈荣良吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所长春130122

为了构建伪狂犬病病毒（PRV）TK/gI/gE三基因缺失重组病毒,试验以PRV-JL14作为母本株,将其基因组与转移载体进行同源重组后,以增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）作为标记基因进行筛选,先后敲除gI、gE和TK基因大部分序列,获得重组病毒PRV-... 详细信息

为了构建伪狂犬病病毒（PRV）TK/gI/gE三基因缺失重组病毒,试验以PRV-JL14作为母本株,将其基因组与转移载体进行同源重组后,以增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）作为标记基因进行筛选,先后敲除gI、gE和TK基因大部分序列,获得重组病毒PRV-ΔgIgE/TK,并将重组病毒在BHK-21细胞中传代培养并绘制其一步生长曲线,同时以不同剂量对小鼠进行攻毒试验。结果表明：TK、gI和gE基因缺失后的重组病毒基因组稳定,在BHK-21细胞中传代培养20代未见突变;与母本株PRV-JL14相比,PRV-Δg IgE/TK在BHK-21细胞中的增殖能力没有降低,且对小鼠的致病力显著降低。说明试验构建的重组病毒PRV-ΔgIgE/TK可以作为猪伪狂犬病的候选疫苗株。

关键词：伪狂犬病病毒基因缺失 TK基因 gI基因 gE基因同源重组

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犬用狂犬病疫苗研究进展

犬用狂犬病疫苗研究进展

第19次全国犬业科技学术研讨会

作者：陈腾张守峰张静远张艳艳周鑫韬扈荣良军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

本文主要概述了我国犬用狂犬病疫苗包括肌注疫苗和口服疫苗的研究现状以及未来发展趋势。

关键词：犬狂犬病疫苗研究进展

来源： cnki会议评论

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中国首例非洲猪瘟诊断研究

病毒学报 2018年第6期34卷 817-821页

作者：王颖缪发明陈腾周鑫韬李楠吕宗吉张静远刘晔张国军张守峰扈荣良军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所长春130122 佛山科学技术学院生命科学与工程学院佛山528231 吉林和元生物工程股份有限公司松原138000

针对我国首次发生的非洲猪瘟(African swine fever,ASF),根据流行特点、临床表现、剖检变化、病原形态和分子生物学特征进行了较为系统的诊断研究。流行特点上,发病猪主要以育肥泔水猪为主,和国外报道的家猪非洲猪瘟流行特点相似;临床... 详细信息

针对我国首次发生的非洲猪瘟(African swine fever,ASF),根据流行特点、临床表现、剖检变化、病原形态和分子生物学特征进行了较为系统的诊断研究。流行特点上,发病猪主要以育肥泔水猪为主,和国外报道的家猪非洲猪瘟流行特点相似;临床表现以高热、呕吐、皮肤发绀为典型,可有便秘或腹泻,粪便带有粘液或便血等症状;剖检以脾脏显著肿大、发黑变脆为典型特征,并伴心、肾、膀胱、小肠、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结出血;电镜观察肝脾组织悬液上清可见大小180～200nm具有多层囊膜结构的病毒颗粒;定性诊断目前以PCR和实时PCR较为可靠。综上认为,临床表现对于非洲猪瘟病例排查具有重要意义;剖检变化尽管不十分特异,但可以缩小排查范围,对确立初步诊断具有重要价值;在完成上述初步诊断基础上,应尽快应用分子生物学技术完成确诊。

关键词：非洲猪瘟(ASF) 疑似诊断确定性诊断

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离体心脏光标测的标准操作规程

中国心脏起搏与心电生理杂志 2024年

作者：周鑫韬张陈陈王云浩严英梅曹嘉慧牛家宽韩梦梦陶艺庆王功新郝国梁河南省医学科学院电生理研究所斯高电生理研究院广州中医药大学中医证候全国重点实验室

光标测技术(optical mapping)可以在非侵入的情况下,提供生物组织电活动的高时空分辨率数据,已成为心脏电生理研究的重要工具。本研究团队参考已有的光标测操作流程,结合长期实践经验,以大鼠离体心脏为示例,建立完整的心脏光标测的标准... 详细信息

光标测技术(optical mapping)可以在非侵入的情况下,提供生物组织电活动的高时空分辨率数据,已成为心脏电生理研究的重要工具。本研究团队参考已有的光标测操作流程,结合长期实践经验,以大鼠离体心脏为示例,建立完整的心脏光标测的标准操作规程,包括心脏离体灌流、荧光染料负载到数据采集和分析,希望为各科研单位的光标测操作提供借鉴。

关键词：光标测心脏离体灌流荧光成像标准操作规程