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采样方法对花岗岩风化土室内测试抗剪强度指标的影响

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工程勘察 2024年第7期52卷 27-33页

作者：苏再非周艳君广东省有色地质环境中心广州510080 广东有色工程勘察设计院广州510080

准确获取花岗岩风化土的物理力学参数指标及分布是勘察工作的主要任务。通过分析传统采样方法中每一个环节和操作技术,发现传统样品在采取封装、运输及制作环节中对样品存在严重扰动情形。为此设计并制造了原位环刀采样器以解决以上问题... 详细信息

准确获取花岗岩风化土的物理力学参数指标及分布是勘察工作的主要任务。通过分析传统采样方法中每一个环节和操作技术,发现传统样品在采取封装、运输及制作环节中对样品存在严重扰动情形。为此设计并制造了原位环刀采样器以解决以上问题,通过试验和工程应用表明原位环刀采样器采取花岗岩土样具有以下优点:原位环刀采样器采取花岗岩风化土样,获取的物理力学指标较传统方法更接近真值;原位环刀采样器实现岩土测试试件的采样与制样一次性完成,室内无需进行二次制样;原位环刀采样器的小体积采样和循环使用,消除了石蜡、胶带、铝皮等一次性样品封装材料的使用,降低了60%以上的室内固体垃圾;降低了现场工人的操作难度,提高了样品密封性,对样品结构具有非常好的保护作用。

关键词：环刀花岗岩指标含水量抗剪强度

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猪繁殖与呼吸综合征病毒糖蛋白5的研究进展

中国动物传染病学报 2024年

作者：王安冉王桂花王树茂段宏勇姜一峰周艳君李丽薇高飞山东农业大学动物科技学院中国农业科学院上海兽医研究所江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）是具经济意义的病原体之一，临床可引起母猪繁殖障碍和仔猪呼吸系统疾病。糖蛋白5（glycoprotein 5，GP5）是由PRRSV ORF5基因编码的高度糖基化... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）是具经济意义的病原体之一，临床可引起母猪繁殖障碍和仔猪呼吸系统疾病。糖蛋白5（glycoprotein 5，GP5）是由PRRSV ORF5基因编码的高度糖基化囊膜蛋白，具有良好的免疫原性，可诱导机体产生中和抗体。GP5也是PRRSV结构蛋白中最易变异的区域之一，常用于遗传进化分析，又在病毒入侵、吸附和增殖过程中发挥重要作用。因此，针对GP5的研究对PRRSV诊断、预防和控制以及新型疫苗的开发具有重要意义。本文综述了GP5在遗传变异、病毒感染复制、中和抗体、病毒毒力、疫苗开发和临床检测方面的研究进展，为深入理解PRRSV致病机制和制定防控策略提供了有意义的理论基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 遗传变异中和抗体疫苗开发

猪繁殖与呼吸综合征病毒作为外源基因表达活载体的研究进展

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中国兽医科学 2024年第6期54卷 816-823页

作者：王树茂王桂花王安冉段宏勇姜一峰周艳君高飞李丽薇山东农业大学动物科技学院中国农业科学院上海兽医研究所江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

自美国（1987年）和欧洲（1990年）首次分离猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）以来，该病毒在全球流行已超过30年。直至今日，PRRSV仍然不断变异和进化，在我国的流行态势尤其复杂，在后非洲猪瘟时代仍然是影响养猪业的最具经济意义的病... 详细信息

自美国（1987年）和欧洲（1990年）首次分离猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）以来，该病毒在全球流行已超过30年。直至今日，PRRSV仍然不断变异和进化，在我国的流行态势尤其复杂，在后非洲猪瘟时代仍然是影响养猪业的最具经济意义的病原体之一。目前，市售疫苗包括传统灭活病毒疫苗（KV）和改良活病毒疫苗（MLV）。然而，PRRSV的疫苗预防和控制尚未完全实现。当前迫切需要开发一种安全、有效、通用的基因工程疫苗。基于PRRSV感染性克隆反向遗传平台表达外源基因，包括标记基因、免疫增强基因或其他病毒抗原基因，构建重组PRRSV疫苗、基因缺失疫苗、广谱通用疫苗等成为了研究的热点。在此，我们综述了近年来PRRSV作为病毒活载体表达外源基因的研究进展及其在新型基因工程疫苗开发中的潜在应用前景。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 基因工程疫苗感染性克隆外源基因

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A型塞内卡病毒VP1蛋白的抗体制备及鉴定

中国兽医科学 2024年

作者：李佳乐郭子强罗梦唐银保帅文娜李丽薇周艳君姜一峰童武童光志丛雁方高飞中国农业科学院上海兽医研究所广西大学动物科学技术学院南京农业大学动物医学院扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心青岛动保国家工程技术研究中心有限公司

本研究旨在制备A型塞内卡病毒（SVA）VP1的多克隆抗体，并用重组病毒rPRRSV-SVA-VP1和真核质粒pcDNA3.1-VP1-Myc进行验证。首先对VP1序列进行优化分析，合成序列后插入克隆载体中，构建原核表达质粒pET-VP1，并转化至感受态E.coli BL21... 详细信息

本研究旨在制备A型塞内卡病毒（SVA）VP1的多克隆抗体，并用重组病毒rPRRSV-SVA-VP1和真核质粒pcDNA3.1-VP1-Myc进行验证。首先对VP1序列进行优化分析，合成序列后插入克隆载体中，构建原核表达质粒pET-VP1，并转化至感受态E.coli BL21（DE3）细胞，经IPTG诱导后，获得重组VP1蛋白。将该重组蛋白免疫新西兰大白兔，制备获得重组VP1蛋白的多克隆抗体。此外，利用本团队构建并保存的能够稳定表达SVA VP1蛋白的重组病毒rPRRSV-SVA-VP1感染Marc-145细胞后，用上述制备的VP1多克隆抗体进行验证。结果显示，pET-VP1在大肠杆菌中于37 ℃经1 mmol/L的IPTG诱导12 h，成功表达约37 ku目的蛋白；Western-blot结果显示，制备的多克隆抗体能特异性识别VP1蛋白；间接免疫荧光试验表明，制备的多克隆抗体能够特异性识别rPRRSV-SVA-VP1感染Marc-145细胞后表达的VP1蛋白和真核质粒pcDNA3.1-VP1-Myc转染至293T细胞后表达的VP1蛋白。上述结果表明，本研究制备的VP1多克隆抗体具有良好的反应性和特异性，为SVA血清学检测方法的建立以及SVA VP1蛋白的生物学功能的研究奠定了基础。

关键词： A型塞内卡病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒 VP1蛋白多克隆抗体原核表达活病毒载体

白介素15蛋白的抗体制备及其在猪繁殖与呼吸综合征病毒活载体中的表达

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中国动物传染病学报 2024年

作者：郭子强李佳乐罗梦唐银保帅文娜李丽薇周艳君童武姜一峰童光志高飞中国农业科学院上海兽医研究所广西大学动物科学技术学院南京农业大学动物医学院扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心上海市兽医生物技术重点实验室

本研究旨在制备IL15多克隆抗体，并使用质粒pCDNA3.1-IL15和重组病毒rPRRSV-IL15进行验证。首先构建原核表达质粒pET-IL15，经IPTG诱导后，利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析，利用纯化后得到的IL15重组蛋白三次免疫兔... 详细信息

本研究旨在制备IL15多克隆抗体，并使用质粒pCDNA3.1-IL15和重组病毒rPRRSV-IL15进行验证。首先构建原核表达质粒pET-IL15，经IPTG诱导后，利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析，利用纯化后得到的IL15重组蛋白三次免疫兔后制备多克隆抗体。同时，利用反向遗传操作技术将IL15基因插入高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株vHuN4-F112的感染性克隆中，拯救获得能够稳定表达IL15蛋白的重组病毒rPRRSV-IL15。接着，将表达IL15蛋白的质粒pCDNA3.1-IL15转染HEK 293T细胞，rPRRSV-IL15感染MARC-145细胞和PAMs后，用上述制备的抗体进行验证。结果显示，制备的IL15多克隆抗体具有良好的反应性和特异性，能够识别和结合转染了pCDNA3.1-IL15质粒和感染了rPRRSV-IL15重组病毒的细胞中的IL15蛋白，为进一步研究IL15蛋白的生物学功能以及其在免疫调节中的作用奠定了重要基础，重组病毒rPRRSV-IL15也是新型免疫增强型PRRSV弱毒疫苗研制的一种尝试。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒活载体 IL15蛋白多克隆抗体

猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA依赖的RNA聚合酶功能研究进展

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中国兽医科学 2024年第5期54卷 674-679页

作者：段宏勇唐超智王树茂王安冉姜一峰周艳君高飞李丽薇河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory synd,rPoRmReS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus,PRRSV)引起的一种重要猪病毒性传染病,其主要临床特征是母猪繁殖障碍和生长肥育猪呼吸系统疾病,给全球养猪业造成巨大... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory synd,rPoRmReS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus,PRRSV)引起的一种重要猪病毒性传染病,其主要临床特征是母猪繁殖障碍和生长肥育猪呼吸系统疾病,给全球养猪业造成巨大损失。Nsp9是PRRSV的一种非结构蛋白,由于其RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)功能,在PRRSV的复制和毒力中发挥着重要作用。Nsp9序列高度保守,并包含T细胞表位,对未来疫苗的开发具有重要意义。Nsp9在PRRSV感染过程中,特别是基因组RNA复制和转录中,成为病毒与宿主蛋白相互作用的中心。本文就Nsp9在病毒遗传变异、病毒毒力、与其他病毒蛋白及宿主蛋白相互作用影响病毒复制、宿主免疫调节、抗病毒药物及疫苗研发等方面的研究进展进行综述。本综述可为PRRSV的防控提供新的思路和策略。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp) 病毒复制病毒毒力疫苗研发

猪细小病毒TaqMan实时定量荧光PCR方法的建立与应用

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中国动物传染病学报 2024年

作者：唐银保李丽薇周艳君郭子强刘佳晨王树茂王安冉李佳乐杨倩李兆龙高飞南京农业大学动物医学院中国农业科学院上海兽医研究所扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心福建省农业科学院畜牧兽医研究所

猪细小病毒(PPV)是引起母猪生殖障碍的主要病原体之一。为创建检测PPV的快速而准确的诊断方法，通过对PPVVP2基因的保守序列进行设计，本实验室制备出了一种新型的TaqMan探针，它能够实现实时荧光定量PCR检测。经过多次实验，其结果显... 详细信息

猪细小病毒(PPV)是引起母猪生殖障碍的主要病原体之一。为创建检测PPV的快速而准确的诊断方法，通过对PPVVP2基因的保守序列进行设计，本实验室制备出了一种新型的TaqMan探针，它能够实现实时荧光定量PCR检测。经过多次实验，其结果显示所创建的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品质粒在1×1010～1×102copies/μL具有良好的线性关系，其回归方程为y=－3.4162x+39.28，相关系数R2=0.99，斜率为-3.4162，标准曲线灵敏性高，其检测拷贝数下限为1×101copies/μL，标准曲线的重复性良好，组内与组间变异系数均小于0.9864％，并且该方法在实际临床样品检测中可行。上述结果表明，创建的方法可用于猪细小病毒病的诊断。

关键词：猪细小病毒 VP2蛋白 TaqMan实时定量荧光PCR

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原位环刀采样技术的工程实践与意义

广东土木与建筑 2024年第4期31卷 46-50页

作者：苏再非周艳君王璐佳李景富广东省有色地质环境中心广州510080 广东有色工程勘察设计院广州510080 广东岩石科技有限公司广州510018 广州地铁设计研究院股份有限公司广州510010

准确获取岩土物理力学参数指标及分布是勘察工作的主要任务。通过分析传统采样方法的环节和操作技术,发现其在采取、封装、运输、制作环节对样品存在严重扰动,使用原位环刀采样器采样可以很好的解决以上问题。通过试验和工程应用表明:... 详细信息

准确获取岩土物理力学参数指标及分布是勘察工作的主要任务。通过分析传统采样方法的环节和操作技术,发现其在采取、封装、运输、制作环节对样品存在严重扰动,使用原位环刀采样器采样可以很好的解决以上问题。通过试验和工程应用表明:①原位环刀采样器采取的岩土样,室内测试的物理力学指标较传统方法更接近真值;②原位环刀采样器可广泛应用于颗粒粒径小于5mm的地层中进行采样;③原位环刀采样器实现岩土测试试件的采制一次性完成;④原位环刀采样器采取的标准试样,消除了石蜡、胶带、铝皮等一次性材料的使用,降低室内固体垃圾产量超过60%;⑤降低现场工作操作难度,提高对样品的密封性能及避免结构被扰动。

关键词：环刀土样指标含水量垃圾

复方丹参滴丸联合雷米普利片对糖尿病肾病患者肾功能、P选择素水平及糖脂代谢的影响

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河北中医 2024年第5期46卷 713-716,721页

作者：黄秀丽吴艳付彩雯喻荷淋周艳君四川省遂宁市中心医院内分泌与代谢病科四川遂宁629000

目的观察复方丹参滴丸联合雷米普利片对糖尿病肾病(DN)患者肾功能、P选择素水平及糖脂代谢的影响。方法将88例DN患者按照随机数字表法分为2组,对照组44例予雷米普利片治疗,治疗组44例在对照组治疗基础上予复方丹参滴丸治疗。2组均治疗4... 详细信息

目的观察复方丹参滴丸联合雷米普利片对糖尿病肾病(DN)患者肾功能、P选择素水平及糖脂代谢的影响。方法将88例DN患者按照随机数字表法分为2组,对照组44例予雷米普利片治疗,治疗组44例在对照组治疗基础上予复方丹参滴丸治疗。2组均治疗4周。比较2组治疗前后中医证候评分、肾功能[血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)及尿蛋白排泄率]、糖脂代谢[餐后2 h血糖(2 hPG)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)]、炎症因子[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、P选择素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平及不良反应发生率。结果2组治疗后中医证候各项评分均较本组治疗前降低(P0.05)。结论复方丹参滴丸联合雷米普利片治疗DN可有效提高肾功能,改善糖脂代谢,减轻炎症反应,降低P选择素水平,安全有效。

关键词：糖尿病肾病中西医结合疗法