猪细小病毒TaqMan实时定量荧光PCR方法的建立与应用

作     者：唐银保 李丽薇 周艳君 郭子强 刘佳晨 王树茂 王安冉 李佳乐 杨倩 李兆龙 高飞 

作者机构：南京农业大学动物医学院 中国农业科学院上海兽医研究所 扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2024年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划课题(2022YFD1800804 2021YFD1801401 2022YFD1800305) 国家自然科学基金项目(32072861 31941017) 上海市自然科学基金项目(21ZR1476900 20ZR1469600) 

主　　题：猪细小病毒 VP2蛋白 TaqMan实时定量荧光PCR 

摘      要：猪细小病毒(PPV)是引起母猪生殖障碍的主要病原体之一。为创建检测PPV的快速而准确的诊断方法，通过对PPVVP2基因的保守序列进行设计，本实验室制备出了一种新型的TaqMan探针，它能够实现实时荧光定量PCR检测。经过多次实验，其结果显示所创建的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品质粒在1×1010～1×102copies/μL具有良好的线性关系，其回归方程为y=－3.4162x+39.28，相关系数R2=0.99，斜率为-3.4162，标准曲线灵敏性高，其检测拷贝数下限为1×101copies/μL，标准曲线的重复性良好，组内与组间变异系数均小于0.9864％，并且该方法在实际临床样品检测中可行。上述结果表明，创建的方法可用于猪细小病毒病的诊断。