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大鼠胚胎肠神经嵴干细胞的分离培养和诱导分化

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中华小儿外科杂志 2007年第5期28卷 254-257页

作者：周盛轩诸葛启钏叶盛苏志鹏温州医学院附属第一医院创伤外科 325000 温州医学院附属第一医院神经外科

目的探索从大鼠胚胎肠组织获取肠神经嵴干细胞(neural crest stem cells,NCSCs)的可能性;与脑神经干细胞(neural stem cells,NSCs)比较,了解其生物学性状。方法用NSCs的培养液同时进行肠NCSCs和脑NSCs的培养;得到的神经细胞球用神经上... 详细信息

目的探索从大鼠胚胎肠组织获取肠神经嵴干细胞(neural crest stem cells,NCSCs)的可能性;与脑神经干细胞(neural stem cells,NSCs)比较,了解其生物学性状。方法用NSCs的培养液同时进行肠NCSCs和脑NSCs的培养;得到的神经细胞球用神经上皮干细胞蛋白(nestin)进行鉴定,计数NCSCs神经细胞球和NSCs神经细胞球中各自的Nestin阳性细胞比例。NCSCs神经细胞球在胎牛血清诱导分化培养7 d后,用神经元细胞特异性标记神经纤维丝蛋白(NF68)和星形胶质细胞特异性标记神经胶质酸性蛋白(GFAP)对其进行免疫荧光鉴定。结果从大鼠胚胎肠组织成功得到NCSCs,并且形成神经细胞球,Nestin为阳性;分化后细胞为NF68或者GFAP阳性;与NSCs比较,NCSCs能较快形成神经细胞球,其神经细胞球中的Nestin阳性细胞比例(66.75±12.42)%低于NSCs(91.60±5.62)%(P=0.000)。结论肠NCSCs可以从大鼠胚胎肠组织分离培养得到,在体外培养环境下能够增殖,并且具有多向分化潜能。

关键词：神经嵴干细胞细胞分化

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神经干细胞中枢神经系统移植的研究进展

医学综述 2005年第11期11卷 967-969页

作者：周盛轩诸葛启钏温州医学院附属第一医院神经外科浙江温州325000

神经干细胞(neural stem cell)是指只能定向分化为神经系统的三种类型神经细胞(神经元细胞、星形胶质细胞和少枝胶质细胞)的前体细胞,具有自我更新能力和多分化潜能.它不仅存在于动物胚胎时期发育的脑组织中,在成年脑中也有存在.它的来... 详细信息

神经干细胞(neural stem cell)是指只能定向分化为神经系统的三种类型神经细胞(神经元细胞、星形胶质细胞和少枝胶质细胞)的前体细胞,具有自我更新能力和多分化潜能.它不仅存在于动物胚胎时期发育的脑组织中,在成年脑中也有存在.它的来源有:①从神经系统直接分离得到,如胎儿的间脑组织,而成年个体神经干细胞主要位于脑室下区和海马齿状回,另外在皮质、皮质下白质和嗅球也有存在,有报道还可以从视网膜分离得到[1];②可以从胚胎干细胞(ESC)体外培养诱导分化得到,如视黄酸诱导;③骨髓基质细胞(BMSC)在转基因后,特定的体外培养条件可以使其向神经干细胞分化.

关键词：神经干细胞中枢神经系统移植

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颅内富血管肿瘤栓塞治疗的研究进展

国际神经病学神经外科学杂志 2005年第5期32卷 434-438页

作者：周盛轩谭显西诸葛启钏温州医学院附属第一医院神经外科 325000

颅内富血管肿瘤的手术治疗往往会导致术中大出血。在术前或者术中,如果对这些肿瘤进行栓塞治疗,不但可以减少出血,还可以缩短手术时间,最终降低病残率。目前血管内技术不断进步,已在微导管技术辅助下,运用各种不同性质的栓塞剂对脑膜瘤... 详细信息

颅内富血管肿瘤的手术治疗往往会导致术中大出血。在术前或者术中,如果对这些肿瘤进行栓塞治疗,不但可以减少出血,还可以缩短手术时间,最终降低病残率。目前血管内技术不断进步,已在微导管技术辅助下,运用各种不同性质的栓塞剂对脑膜瘤、血管母细胞瘤和颈静脉球瘤等颅内富血管肿瘤进行栓塞治疗。研究结果显示,栓塞治疗在颅内富血管肿瘤治疗中起重要辅助作用。

关键词：颅内富血管肿瘤栓塞栓塞剂富血管肿瘤栓塞治疗颅内术中大出血血管母细胞瘤血管内技术颈静脉球瘤

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顽固性癫痫的外科治疗

实用医学杂志 2005年第2期21卷 148-150页

作者：潘进钱张晓微周盛轩温州医学院附属第一医院神经外科 325000

目的:探讨术中在皮质和深部脑电图监测下顽固性癫痫的致痫灶定位及术式选择。方法:38例患者根据术前致痫灶的定位和术中皮质及深部电极的监测,分别采用不同的术式:(1)单纯致痫灶切除2例;(2)多软膜下横切术(multiplesubpialtransection,M... 详细信息

目的:探讨术中在皮质和深部脑电图监测下顽固性癫痫的致痫灶定位及术式选择。方法:38例患者根据术前致痫灶的定位和术中皮质及深部电极的监测,分别采用不同的术式:(1)单纯致痫灶切除2例;(2)多软膜下横切术(multiplesubpialtransection,MST)8例;(3)致痫灶切除+MST18例;(4)前颞叶、杏仁核-海马切除5例,神经导航下选择性杏仁核-海马切除1例;(5)胼胝体切开+MST+皮质热灼4例。结果:38例患者经3～30个月的随访,满意12例(31.6%),显著改善10例(26.3%),良好6例(15.8%),效差4例(10.5%),无改善6例(15.8%)。总有效率73.7%,治愈率达31.6%。无一例致残或死亡。结论:术中在皮质和深部脑电图监测下,对致痫灶准确的定位和采用不同的术式切除是治疗顽固性癫痫的有效途径。

关键词：切除顽固性癫痫致痫灶术中皮质 MST 脑电图监测定位结论准确

嗅鞘细胞移植对改善大鼠脑出血后神经功能缺损的研究

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嗅鞘细胞移植对改善大鼠脑出血后神经功能缺损的研究

2006年浙江省神经外科学术会议

作者：傅佳峰诸葛启钏周盛轩张宇温州医学院附属第一医院神经外科

目的嗅鞘细胞移植治疗大鼠脑出血,使神经功能缺损得到改善。方法差速贴壁法培养出高纯度的嗅鞘细胞,制作34只大鼠脑出血模型,分三组:第一组10 只为空白组,第二组10只为HBSS移植组,第三组14只为嗅鞘细胞移植组(其中4只在移植细胞中标记ho...

目的嗅鞘细胞移植治疗大鼠脑出血,使神经功能缺损得到改善。方法差速贴壁法培养出高纯度的嗅鞘细胞,制作34只大鼠脑出血模型,分三组:第一组10 只为空白组,第二组10只为HBSS移植组,第三组14只为嗅鞘细胞移植组(其中4只在移植细胞中标记hoechst,观察细胞在大鼠体内生长情况);三组大鼠分别在术后3天,7天,14天,30天用

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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正常灌注压突破综合征

国外医学（脑血管疾病分册） 2005年第5期13卷 378-381页

作者：周盛轩诸葛启钏温州医学院附属第一医院神经外科 325000

正常灌注压突破综合征是脑血管疾病术中或术后的严重并发症。本文就近年来正常灌注压突破综合征的研究进展进行综述,重点探讨其发病机制、预测和预防。

关键词：正常灌注压突破综合征脑血管病症并发症胶质纤维酸性蛋自

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大鼠胚胎神经干细胞的分离培养和分化

医学研究杂志 2006年第2期35卷 63-64页

作者：周盛轩叶盛苏志鹏诸葛启钏温州医学院附属第一医院神经外科 325000

探索大鼠胚胎神经干细胞的分离、培养和传代等方法,并用血清促使分化为神经元细胞、星形胶质细胞和少枝胶质细胞。方法从胚胎大鼠脑组织中分离得到神经干细胞;在无血清条件下,对神经干细胞进行培养、传代;用神经上皮干细胞蛋白(Nestin)... 详细信息

探索大鼠胚胎神经干细胞的分离、培养和传代等方法,并用血清促使分化为神经元细胞、星形胶质细胞和少枝胶质细胞。方法从胚胎大鼠脑组织中分离得到神经干细胞;在无血清条件下,对神经干细胞进行培养、传代;用神经上皮干细胞蛋白(Nestin)对神经干细胞进行鉴定;用免疫荧光方法对分化后神经干细胞进行神经纤维丝蛋白(NF68)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)和半乳糖脑苷脂(GalC)染色。结果成功得到神经干细胞,并且进行多次传代培养。血清能促使其分化成为神经元细胞、星形胶质细胞和少枝胶质细胞。结论大鼠胚胎神经干细胞能够在体外适宜的条件下能大量增生,并且具有多向分化潜能。

关键词：神经干细胞培养增生分化

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神经干细胞在胚胎脑皮质发育过程中的变化

医学研究杂志 2008年第5期37卷 19-22,F0003页

作者：周盛轩诸葛启钏叶盛苏志鹏温州医学院附属第一医院创伤外科 325000 温州医学院附属第一医院神经外科

目的比较3个不同胚胎时期神经干细胞的增生、分化和凋亡等生物学性状,了解胚胎脑皮质发育过程。方法E14、E18和E20胎鼠前脑脑皮质来源的神经干细胞在原代培养后,用BrdU细胞增生检测试剂盒检测增生能力;诱导分化7天后,对细胞分别进行MAP2... 详细信息

目的比较3个不同胚胎时期神经干细胞的增生、分化和凋亡等生物学性状,了解胚胎脑皮质发育过程。方法E14、E18和E20胎鼠前脑脑皮质来源的神经干细胞在原代培养后,用BrdU细胞增生检测试剂盒检测增生能力;诱导分化7天后,对细胞分别进行MAP2和GFAP免疫荧光标记和Hoechst33342核染色,计算MAP2+细胞和GFAP+细胞占Hoechst+细胞的各自比例;用AnnexinV-FITC凋亡试剂盒检测早期凋亡率。结果3组神经干细胞的OD值分别是:E14为1.1771±0.0422(n=22),E18为0.4127±0.0328(n=23),E20为0.2117±0.0456(n=16)(均为P<0.001);E14神经元细胞比例和星形胶质细胞比例分别为:81.96%±4.91%(n=10)和16.63%±4.05%(n=10),E18为27.56%±3.54%(n=10)和58.98%±5.91%(n=10),E20为4.75%±2.39%(n=10)和89.43%±3.40%(n=10)(均为P<0.001);早期凋亡率分别为:E14为41.12%±9.75%(n=8),E18为56.30%±9.35%(n=19),E20为5.74%±3.31%(n=9)(均为P<0.01)。结论神经干细胞的增生能力随着胚胎发育变得越来越弱,而凋亡比例先小后大,最后逐渐变小。神经干细胞分化为神经元细胞的比例随着胚胎发育过程会越来越小,而星形胶质细胞的比例会越来越大。

关键词：神经干细胞增生分化凋亡

成年大鼠嗅粘膜嗅鞘细胞的分离、培养、鉴定及纯化

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成年大鼠嗅粘膜嗅鞘细胞的分离、培养、鉴定及纯化