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骨痹合剂干预大鼠膝骨性关节炎模型介导软骨下骨代谢机制研究

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骨痹合剂干预大鼠膝骨性关节炎模型介导软骨下骨代谢机制研究

作者：周柏健云南中医学院

学位级别：硕士

目的:复制一种与人类膝骨性关节炎发病过程相似的去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨性关节炎模型。并从组织病理、蛋白、基因水平探讨骨痹合剂对该模型软骨下骨代谢的可能作用机制。方法:选择孕期15日的合格健康SD大鼠12只,放入不同的笼... 详细信息

目的:复制一种与人类膝骨性关节炎发病过程相似的去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨性关节炎模型。并从组织病理、蛋白、基因水平探讨骨痹合剂对该模型软骨下骨代谢的可能作用机制。方法:选择孕期15日的合格健康SD大鼠12只,放入不同的笼内饲养,待幼鼠出生。在幼鼠出生后第10天,选取80只健康无畸形的幼鼠,按体重大小排序后随机分成四组:空白对照组(去双前肢直立联合Hulth法大鼠KOA模型组)、生理盐水组、氨糖美辛组、骨痹合剂组,每组20只。四组均在腹腔麻醉下行去除双前肢手术,手术后置于原母鼠饲养笼内继续饲养,在去除双前肢四个月(大鼠4月龄)后右膝关节行Hulth法手术,手术后置于原笼内继续饲养一个月。大鼠5月龄时给予药物干预一个月,骨痹合剂组按5ml/Kg/d,在8点、18点给予骨痹合剂灌胃;氨糖美辛组给予氨糖美辛肠溶片20mg/Kg/d,置于同体积的蒸馏水中待其融化摇匀后,在8点、18点给予灌胃;生理盐水组按5ml/Kg/d,在8点、18点予以生理盐水灌胃;持续干预4周;空白对照组仅正常饮食,不做任何干预。大鼠6月龄时麻醉处死各组大鼠,取右膝关节行-80℃冷冻保存。部分标本通组织病理分析行HE染色及软骨下骨组织形态计量学分析;部分标本采用western blot的方法,检测各组大鼠膝关节软骨下骨中COL-Ⅰ、OPG、RANK的蛋白表达情况;部分标本采用RT-PCR的方法,检查测各组大鼠膝关节软骨下骨中COL-Ⅰ、IL-1β、IL-6、ALP、OPG、RANK的m RNA表达情况。结果:1.右膝关节HE染色的软骨下骨组织形态计量学统计结果显示:氨糖美辛组和骨痹合剂组其软骨下骨骨小梁体积比与空白对照组和生理盐水组比较明显升高P﹤0.05,差异有统计学意义;空白对照组的软骨下骨骨小梁体积比与生理盐水组比较略有降低P﹥0.05,差异无统计学意义;氨糖美辛组的软骨下骨骨小梁体积比与骨痹合剂组相比略有降低P﹥0.05,差异无统计学意义;*** blot法检测各组大鼠膝关节软骨下骨组织结果显示:四组的OPG蛋白表达含量,骨痹合剂组含量最高并且与生理盐水组比较有统计学意义;四组中RANK蛋白表达含量,骨痹合剂组含量最低并且与生理盐水组和氨糖美辛组比较均有统计学意义;四组的COL-Ⅰ蛋白表达含量,骨痹合剂组含量最高并且与生理盐水组、空白对照组及氨糖美辛组比较差异都具有统计学意义;***-Time PCR法检测各组大鼠膝关节软骨下骨基因结果显示:四组的OPG m RNA相对表达量,骨痹合剂组含量最高并且与生理盐水组、空白对照组及氨糖美辛组比较差异都具有统计学意义;四组的ALP m RNA相对表达量,骨痹合剂组含量高生理盐水组、空白对照组低于氨糖美辛组并且骨痹合剂组与生理盐水组的差异具有统计学意义;四组的RANK m RNA相对表达量,骨痹合剂组含量低于生理盐水组、空白对照组高于氨糖美辛组并且骨痹合剂组与生理盐水组、空白对照组的差异均有统计学意义;四组的COL-Ⅰm RNA相对表达量,骨痹合剂组含量最高并且与生理盐水组、空白对照组比较差异均具有统计学意义,与氨糖美辛组比较差异无统计学意义;四组的IL-6 m RNA相对表达量,骨痹合剂组含量低于生理盐水组、空白对照组高于氨糖美辛组并且骨痹合剂组与生理盐水组、空白对照组的差异均具有统计学意义,与氨糖美辛组比较差异无统计学意义;四组的IL-1βm RNA相对表达量,骨痹合剂组含量低于生理盐水组、空白对照组高于氨糖美辛组并且骨痹合剂组与生理盐水组、空白对照组的差异均具有统计学意义,与氨糖美辛组比较差异无统计学意义。结论:骨痹合剂可以降低软骨下骨组织中IL-1βm RNA、IL-6 m RNA的表达,减轻炎症反应,下调软骨下骨组织中RANK m RNA,并上调OPG m RNA、ALP m RNA、COL-Ⅰm RNA的表达,调整骨代谢并促进软骨下骨的修复,可能是骨痹合剂以此为部分机制而发挥延缓SD大鼠膝骨性关节炎软骨下骨退变进程的作用。

关键词： KOA大鼠模型骨痹合剂软骨下骨

桂枝芍药知母汤治疗膝关节骨性关节炎研究概况

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中国民族民间医药 2017年第11期26卷 63-65页

作者：何瑞建杨成旭王鼎周柏健李帆冰云南中医学院云南昆明650500 云南省中医医院云南昆明650021

桂枝芍药知母汤为仲景《金匮要略》中治疗风湿历节的经方,具有鲜明的特色与理论。文章系统地总结该方治疗膝关节骨性关节炎的研究概况,以期为临床上治疗膝关节骨性关节炎提供一定参考。

关键词：桂枝芍药知母汤膝关节骨性关节炎研究进展

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基于大数据的线上线下混合式教法设计

中文科技期刊数据库（全文版）教育科学 2022年第8期 1-4页

作者：王汉其张中宝周柏健邵秋瞳广东水利电力职业技术学院机电一体化专业广东广州510000

随着互联网技术的日新月异以及线上教育教学的持续发展,教学资源越来越丰富,面对庞大的教学数据,传统的教学方法暴露出的问题越来越多,因此利用大数据的新型教学方法的研究是很有意义的。本文针对现有问题,提出了一种基于大数据的线上... 详细信息

随着互联网技术的日新月异以及线上教育教学的持续发展,教学资源越来越丰富,面对庞大的教学数据,传统的教学方法暴露出的问题越来越多,因此利用大数据的新型教学方法的研究是很有意义的。本文针对现有问题,提出了一种基于大数据的线上线下混合式教法设计,该设计方案包括:教法理念设计、教法方案设计以及教法实施过程和方法,本方案具有鲜明的特色和创新。该教法的设计可以有效地避免传统教法在大数据时期的问题,为新时期教法改革提供理论依据。

关键词：大数据教法改革线上线下混合式教学

李帆冰主任医师治疗膝关节骨性关节炎经验举隅

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中国民族民间医药 2017年第10期26卷 84-85页

作者：何瑞建杨晨旭王鼎周柏健李帆冰云南中医学院云南昆明650500 云南省中医医院云南昆明650021

经络循行是针灸学最核心,也是最具特色的内容,李帆冰主任采用六经辨证的思想对膝骨性关节炎(KOA)辨证论治,取得一定疗效,通过本文希望对KOA的治疗方法提供一种新的思路。

关键词：六经辨证膝骨性关节炎骨痹病

SiC_p/Al复合材料超声振动辅助切削研究现状与进展

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工具技术 2019年第9期53卷 3-8页

作者：周柏健牛秋林李鹏南邱新义湖南科技大学

阐述了SiCp/Al复合材料在切削过程中存在的一些问题,从SiCp/Al复合材料超声振动辅助加工中的刀具材料与刀具磨损、切屑与切削力以及表面质量三个方面概述了SiCp/Al复合材料切削加工的研究现状,对促进SiCp/Al复合材料高效切削加工的措施... 详细信息

阐述了SiCp/Al复合材料在切削过程中存在的一些问题,从SiCp/Al复合材料超声振动辅助加工中的刀具材料与刀具磨损、切屑与切削力以及表面质量三个方面概述了SiCp/Al复合材料切削加工的研究现状,对促进SiCp/Al复合材料高效切削加工的措施进行了总结。

关键词：超声振动辅助切削刀具磨损切削力表面质量

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碳纤维增强树脂基复合材料钻孔技术研究进展

工具技术 2019年第1期53卷 3-7页

作者：刘枭鹏李树健周柏健马继英湖南科技大学

碳纤维增强树脂基复合材料(CFRP)因性能优异,在航空航天领域的应用越加广泛,对其二次成形加工质量要求越来越高。本文综述了近年来碳纤维复合材料切削机理与钻孔工艺方法、刀具磨损机理、钻孔缺陷和损伤产生机理及其控制等方面的研究现... 详细信息

碳纤维增强树脂基复合材料(CFRP)因性能优异,在航空航天领域的应用越加广泛,对其二次成形加工质量要求越来越高。本文综述了近年来碳纤维复合材料切削机理与钻孔工艺方法、刀具磨损机理、钻孔缺陷和损伤产生机理及其控制等方面的研究现状和进展,分析了存在的问题和新的挑战,并对CFRP钻孔技术的研究进行了展望。

关键词： CFRP 数值模拟刀具技术制孔质量钻削工艺

独活寄生汤对膝骨性关节炎退变软骨细胞Aggrecan和Collagen Ⅹ mRNA表达的影响

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中华中医药杂志 2018年第11期33卷 5125-5129页

作者：李具宝何瑞建高焕焕韦佳佳彭文潘侯刚蒯永丽李骥征周柏健张伟强向俊宜云南省中医医院昆明650021 云南中医学院昆明650500

目的:观察独活寄生汤血清对膝骨性关节炎退变软骨细胞Aggrecan和Collagen X mRNA表达的影响。方法:选择6例患者标本均来源于云南省中医医院骨科膝骨性关节炎住院患者,行手术截取的新鲜退变软骨组织,采用组织块法培养原代细胞;MTT法检测... 详细信息

目的:观察独活寄生汤血清对膝骨性关节炎退变软骨细胞Aggrecan和Collagen X mRNA表达的影响。方法:选择6例患者标本均来源于云南省中医医院骨科膝骨性关节炎住院患者,行手术截取的新鲜退变软骨组织,采用组织块法培养原代细胞;MTT法检测传代第一代细胞生长情况,并绘制生长曲线;制备独活寄生汤大鼠含药血清;均取传代第一代的退变软骨细胞,配制5%、10%、20%独活寄生汤含药血清及相应体积比浓度的生理盐水血清作为对照;MTT法检测不同浓度的独活寄生汤血清对退变软骨细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR检测不同给药时间点各组退变软骨细胞Aggrecan和Collagen Ⅹ mRNA的表达。结果:退变软骨细胞传代第一代生长曲线见传代第8天时细胞增殖达到顶峰,故选择细胞传代第8天为给药干预时间点;与含同体积比的生理盐水血清组比较,不同浓度的独活寄生汤血清可对退变软骨细胞增殖产生促进作用(P<0.01),尤以10%独活寄生汤血清更为明显(P<0.05);与含同体积比生理盐水血清组比较,不同时间点的5%、10%、20%独活寄生汤血清干预后的退变软骨细胞Aggrecan mRNA的表达均上调(P<0.01),Collagen Ⅹ mRNA的表达均下调(P<0.01),且以10%独活寄生汤血清组的作用最为明显(P<0.05)。结论:独活寄生汤可能通过调节退变软骨组织的胶原及其蛋白多糖的表达而产生延缓膝骨性关节炎退变软骨组织的部分作用。

关键词：膝骨性关节炎退变软骨细胞独活寄生汤 Aggrecan Collagen Ⅹ

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神经根型颈椎病内服中药应用情况文献分析

北京中医药 2018年第5期37卷 449-452页

作者：贾涛董卓谦李骥征杨晨旭周柏健马献伟王鼎彭文潘侯刚蒯永丽韦佳佳高焕焕张伟强李具宝云南省中医医院骨伤科昆明650021 云南中医学院临床医学院昆明650500

目的探讨神经根型颈椎病内服中药的用药规律。方法检索近十年文献中中药内服治疗神经根型颈椎病的文献,按照统一的纳入标准、排除标准,合并和删除重复文献,分析神经根型颈椎病的中药内服用药规律。结果从498篇有效文献中总结出使用频率... 详细信息

目的探讨神经根型颈椎病内服中药的用药规律。方法检索近十年文献中中药内服治疗神经根型颈椎病的文献,按照统一的纳入标准、排除标准,合并和删除重复文献,分析神经根型颈椎病的中药内服用药规律。结果从498篇有效文献中总结出使用频率最多的前10味中药依次是:葛根、川牛膝、川芎、黄芪、甘草、当归、白芍、怀牛膝、桂枝、羌活;使用频率最高的前10个药对依次是:葛根配桂枝,黄芪配川芎,当归配黄芪,川芎配当归,桂枝配白芍,白芍配甘草,桂枝配桑枝,桂枝配羌活,赤芍配红花,黄芪配防风。结论近十年文献中治疗神经根型颈椎病内服中药功效主要以解肌生津、活血化瘀、补肝肾强筋骨、益气养血、温经通脉、祛风散寒为主。药对主要以补益肝肾、强筋壮骨、益气活血和散寒除湿为主。

关键词：神经根型颈椎病中药内服药对文献研究

2002—2012年中药治疗腰椎间盘突出症用药规律探讨

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北京中医药 2016年第9期35卷 874-876页

作者：李亚军李骥征侯刚杨晨旭蒯永丽马献伟王鼎周柏健彭文潘何瑞建韦佳佳高焕焕张伟强李具宝甘肃中医药大学定西校区定西743000 云南中医学院第一附属医院骨科昆明6500000

目的探讨近10年发表的文献中治疗腰椎间盘突出症的中药用药规律。方法运用万方、维普、CNKI数据库对中药治疗腰椎间盘突出症的中文文献进行检索,采用分层聚类统计方法分析治疗腰椎间盘突出症使用频次前20味的中药间可能存在的规律。结... 详细信息

目的探讨近10年发表的文献中治疗腰椎间盘突出症的中药用药规律。方法运用万方、维普、CNKI数据库对中药治疗腰椎间盘突出症的中文文献进行检索,采用分层聚类统计方法分析治疗腰椎间盘突出症使用频次前20味的中药间可能存在的规律。结果中药治疗腰椎间盘突出症的药物主要有:祛风除湿药(伸筋草、桑寄生、独活、透骨草、羌活、威灵仙、防风、川乌、木瓜、草乌),活血化瘀药(红花、牛膝、川芎、没药、乳香),行气药(香附),补益药(当归、熟地黄),温阳药(肉桂)。结论治疗腰椎间盘突出症用药以祛风除湿、活血化瘀类为主,配合补血、补阴、温阳、行气之品,从而达到祛邪与扶正兼顾的治疗效果。

关键词：腰椎间盘突出症中药用药规律文献