检索结果-南通市图书馆

湖南某规模奶牛场乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析

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中国奶牛 2024年第3期 29-33页

作者：刘伯承史芳杨俊周望平湖南省畜牧兽医研究所长沙410131 湖南省长沙县路口镇农业农村办长沙410142

为明确湖南某规模奶牛场临床型乳房炎病原菌种类及耐药情况,对32份临床型乳房炎患牛乳样进行传统细菌培养、生化试验、16S rDNA核苷酸序列检测和药敏试验。结果共分离鉴定大肠杆菌23株,乳房链球菌12株,肺炎克雷伯氏菌5株,样品检出率分别... 详细信息

为明确湖南某规模奶牛场临床型乳房炎病原菌种类及耐药情况,对32份临床型乳房炎患牛乳样进行传统细菌培养、生化试验、16S rDNA核苷酸序列检测和药敏试验。结果共分离鉴定大肠杆菌23株,乳房链球菌12株,肺炎克雷伯氏菌5株,样品检出率分别为71.9%(23/32)、37.5%(12/32)、15.6%(5/32);药敏试验显示,大部分大肠杆菌和乳房链球菌对青霉素、阿莫西林、头孢他啶、庆大霉素、林可霉素耐药严重,耐药率达50%~86.9%,对亚胺培南、四环素及红霉素较敏感,敏感率达75%~82.6%;肺炎克雷伯氏菌对大部分抗生素耐药程度较低,对亚胺培南、阿米卡星、四环素、红霉素敏感率为100%。建议该养殖场抓好环境卫生、提高生物安全,建立科学、合理治疗方案。

关键词：奶牛乳房炎细菌分离鉴定药敏试验

湖南省部分地区禽致病性大肠杆菌分离鉴定及生物特性分析

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中国动物检疫 2024年第3期41卷 28-37页

作者：刘伯承燕海峰罗阳王慧杨俊陈一峰周望平湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131

为探究湖南省禽致病性大肠杆菌的生物特性,从部分地区规模肉鸡场采集122份病死鸡临床肝脏样品,采用传统细菌培养方法进行分离培养和初步鉴定,利用大肠杆菌持家基因phoA进行PCR扩增,对纯化鉴定后的分离株进行血清型鉴定、种系发育群检测... 详细信息

为探究湖南省禽致病性大肠杆菌的生物特性,从部分地区规模肉鸡场采集122份病死鸡临床肝脏样品,采用传统细菌培养方法进行分离培养和初步鉴定,利用大肠杆菌持家基因phoA进行PCR扩增,对纯化鉴定后的分离株进行血清型鉴定、种系发育群检测、多位点序列分型(MLST)、毒力基因检测、动物致病性试验及耐药性分析。结果显示:共分离出83株禽致病性大肠杆菌,鉴定出15种血清型,其中O2、O1、O78、O14为优势血清型,种系发育群分为B2、B1、A和D群,高致病性株主要来自B2、B1群;MLST分析共得到12种ST型,其中ST95、ST481、ST350为主要ST型;分离株irp2、fyuA、iutA、fimC毒力基因携带率为100%,其中38.55%菌株同时携带irp2、afa、fyuA、iutA、hlyF、iss、papC、fimC毒力基因;雏鸡致病性试验检出高致病性菌株46株(55.42%)、中等致病性菌株31株(37.35%)、低等致病性菌株6株(7.23%);分离株对10种常用抗生素有不同程度耐药,其中对四环素和新生霉素耐药最严重,耐药率分别为96.38%和92.77%。结果表明,湖南省禽致病性大肠杆菌遗传关系整体复杂多态,且致病性较高,耐药广泛,提示该地区应加强对禽大肠杆菌病的防控。

关键词：禽致病性大肠杆菌血清型毒力基因 MLST 耐药性

禽源大肠杆菌荧光定量PCR方法的构建及应用

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湖南畜牧兽医 2024年第1期 31-35页

作者：高艺玮田堯孙少迪牛灵玥文立华杨俊王红兵王慧杜丽飞刘俊琦周望平湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128

为建立一种灵敏、准确且快速检测禽源大肠杆菌的方法,根据禽源大肠杆菌uidA基因的一节特异性保守序列设计引物,建立用于禽源大肠杆菌的荧光定量PCR(qPCR)检验方法,并对其各方面进行评价。试验数据表明所建立的qPCR方法的Ct值与标准品在4... 详细信息

为建立一种灵敏、准确且快速检测禽源大肠杆菌的方法,根据禽源大肠杆菌uidA基因的一节特异性保守序列设计引物,建立用于禽源大肠杆菌的荧光定量PCR(qPCR)检验方法,并对其各方面进行评价。试验数据表明所建立的qPCR方法的Ct值与标准品在4.69×10^(2)~4.69×10^(9 )copies/μL范围内存在优良的线性关系,线性相关系数为R2=0.993;该方法标准曲线方程为y=-3.2786x+39.032,熔解曲线表现为单峰,不存在非特异性扩增。对重组质粒标准品的最低检测浓度为4.69×10^(2) copies/μL,是普通PCR方法的1000倍。该方法检测临床样本阳性率为68.3%(41/60),普通PCR阳性检出率为23.3%(14/60),阳性检出率高出45%。此次研究建立的检测禽源大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法可用于禽源大肠杆菌的快速诊断,对于禽大肠杆菌病的监测具有重要意义。

关键词：禽源大肠杆菌 uidA基因实时荧光定量PCR

禽源沙门氏菌荧光定量PCR方法的构建及应用

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湖南畜牧兽医 2024年第1期 41-45页

作者：孙少迪田堯高艺玮牛灵玥杜阳洋王文静钟菊花唐小群刘俊琦周望平湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128

试验旨在建立一种快速检测禽源沙门氏菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR(qPCR)的方法,即根据沙门氏菌invA基因的保守序列设计引物,利用普通PCR方法扩增沙门氏菌invA基因保守基因片段,将其克隆到pMD18-T载体上,将获得的重组质粒pMD18-T-invA作... 详细信息

试验旨在建立一种快速检测禽源沙门氏菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR(qPCR)的方法,即根据沙门氏菌invA基因的保守序列设计引物,利用普通PCR方法扩增沙门氏菌invA基因保守基因片段,将其克隆到pMD18-T载体上,将获得的重组质粒pMD18-T-invA作为标准阳性模板。经qPCR条件优化后,进行特异性、灵敏性和重复性试验。结果显示,所建立的SYBR Green Ⅰ qPCR方法的Ct值与标准品在1.4~1.4×10^(10)拷贝/μL范围内呈良好的线性关系,R2为0.9963,扩增效率为95%,检测下限为1.4拷贝/μL;与大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、痢疾志贺菌、多杀性巴氏杆菌无交叉反应;该方法组内变异系数和组间变异系数均小于2.5%;对44份粪便样本和132份蛋液样本进行qPCR方法和常规PCR方法检测,结果显示该qPCR方法的阳性检出率分别为22.7%(10/44)、0.8%(1/132),常规PCR的阳性检出率分别为9.1%(4/44),0%(0/132)。结果表明:试验成功建立禽源沙门氏菌qPCR检测方法,可为禽源沙门氏菌的快速检测提供技术支撑。

关键词：沙门氏菌 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR invA基因检测

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应用快速ELISA诊断家畜住肉孢子虫病

中国兽医科技 2004年第1期34卷 77-78页

作者：周望平肖兵南张长弓湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131

住肉孢子虫病是人畜共患病之一,其病原住肉孢子虫(Sarcocystis)属原生动物门、孢子虫纲、真球虫目、住肉孢子虫科、住肉孢子虫属.家畜感染住肉孢子虫可引起贫血、消瘦、生产力下降,甚至死亡.目前,关于家畜住肉孢子虫病生前诊断的方法虽... 详细信息

住肉孢子虫病是人畜共患病之一,其病原住肉孢子虫(Sarcocystis)属原生动物门、孢子虫纲、真球虫目、住肉孢子虫科、住肉孢子虫属.家畜感染住肉孢子虫可引起贫血、消瘦、生产力下降,甚至死亡.目前,关于家畜住肉孢子虫病生前诊断的方法虽然很多,但都不太成熟,未能广泛应用于生产.湖南省畜牧兽医研究所与湖南医科大学共同研制的住肉孢子虫病快速ELISA诊断试剂盒经一定范围的扩大试验,效果良好.为进一步推广这项成果,笔者应用该试剂盒检测了湖南省洞庭湖地区具有代表性的华容县、沅江市屠宰水牛、猪的住肉孢子虫感染情况,证明该试剂盒具有快速、准确、敏感性高的特点.

关键词：住肉孢子虫病人畜共患病家畜病原快速ELISA诊断试剂盒血清水牛猪

产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的多重PCR检测方法构建

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湖南畜牧兽医 2023年第6期 25-28页

作者：牛灵玥王慧杨俊杜丽飞刘俊琦周望平湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙430131 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128

为了建立一种可同时检测禽产肠毒素大肠杆菌(ETEC)和沙门氏菌(Salmonella)的多重PCR方法,针对产肠毒素大肠杆菌致病基因Hly E、沙门氏菌特异基因inv A的基因保守区域合成两对特异性引物(目的片段为550 bp和825 bp),通过优化反应条件建... 详细信息

为了建立一种可同时检测禽产肠毒素大肠杆菌(ETEC)和沙门氏菌(Salmonella)的多重PCR方法,针对产肠毒素大肠杆菌致病基因Hly E、沙门氏菌特异基因inv A的基因保守区域合成两对特异性引物(目的片段为550 bp和825 bp),通过优化反应条件建立多重PCR检测方法,并反复验证分析其特异性、灵敏性和重复性,同时应用该方法对临床样本进行初步应用。结果显示:该方法可从同一样品中同时特异性扩增产肠毒素大肠杆菌Hly E基因、沙门氏菌inv A基因目的条带,对其他菌株均不能扩增出目的条带;检测沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌的灵敏度分别为0.078 ng/μL和0.78 ng/μL,且重复性良好。用建立的多重PCR方法对采集的59份粪便样品进行检测,分别检出产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的样本为13份和7份,同时携带产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的样本检出7份。该方法特异性、灵敏性、重复性良好,为鉴别诊断这两种细菌所致鸡腹泻病提供了一种快速准确的检测途径。

关键词：鸡腹泻性疾病大肠杆菌沙门氏菌多重PCR

娟×荷F_1牛与荷斯坦牛耐热性、抗病力及生产性能的比较研究

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饲料研究 2018年第5期41卷 82-87页

作者：何芳刘海林罗阳浣成周望平湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131

研究旨在通过对娟珊×荷斯坦杂交1代奶牛(以下称娟×荷F1牛)和荷斯坦奶牛耐热性、抗病力及生产性能的比较,分析两种奶牛在高温高湿环境条件的适应性和生产能力,为湖南及南方地区良种奶牛选育提供参考和依据。试验结果表明:(1)高温高湿... 详细信息

研究旨在通过对娟珊×荷斯坦杂交1代奶牛(以下称娟×荷F1牛)和荷斯坦奶牛耐热性、抗病力及生产性能的比较,分析两种奶牛在高温高湿环境条件的适应性和生产能力,为湖南及南方地区良种奶牛选育提供参考和依据。试验结果表明:(1)高温高湿条件下,娟×荷F1牛的最高直肠温度和平均直肠温度分别比荷斯坦牛低0. 6℃和0. 4℃;相同温湿度条件下,环境对娟×荷F1牛和荷斯坦牛组间呼吸频率影响差异不显著(P>0. 05),但是夏季高温环境下组内奶牛呼吸次数均极显著高于正常状态(P0. 05),其中乳脂率高9. 47%,体细胞数较荷斯坦牛低16. 36%(P>0. 05); 305天平均产奶量比荷斯坦牛低568 kg(P>0. 05),但4%校正奶两种牛基本一致。综上表明,娟×荷F1牛可以作为高温高湿地区奶牛群的主要品种,适合在湖南以及南方地区进一步推广和研究。

关键词：耐热性抗病力生产性能娟×荷F1牛荷斯坦牛

饲粮中颗粒与粉状石粉比例对笼养蛋鸭产蛋性能、蛋品质、血清生化指标及胫骨指标的影响

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动物营养学报 2019年第11期31卷 5039-5045页

作者：黄璇李闯张旭蒋桂韬胡艳周望平戴求仲湖南省畜牧兽医研究所动物营养与饲养技术研究室长沙410131 中国农业科学院麻类研究所长沙410205 湖南家禽安全生产工程技术研究中心长沙410128

本试验旨在研究饲粮中颗粒与粉状石粉比例对笼养蛋鸭产蛋性能、蛋品质、血清生化指标及胫骨指标的影响。试验选取29周龄、体重相近的临武鸭200羽,随机分为5个组,每组5个重复,每个重复8羽。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组分别饲喂含100%... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中颗粒与粉状石粉比例对笼养蛋鸭产蛋性能、蛋品质、血清生化指标及胫骨指标的影响。试验选取29周龄、体重相近的临武鸭200羽,随机分为5个组,每组5个重复,每个重复8羽。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组分别饲喂含100%粉状、25%颗粒+75%粉状、50%颗粒+50%粉状、75%颗粒+25%粉状和100%颗粒石粉的饲粮(各组钙水平均为3.52%)。试验期63 d。结果表明:1)Ⅲ组和Ⅳ组合格蛋率显著高于Ⅰ组(P0.05)。由此可见,饲粮中颗粒与粉状石粉比例可改变蛋鸭的合格蛋率和蛋壳强度,进而影响血清钙含量以及AKP活性。综合考虑各项指标,在保证饲粮钙水平一致的情况下,产蛋高峰期笼养蛋鸭饲粮中以75%颗粒+25%粉状形式添加石粉为宜。

关键词：颗粒石粉笼养蛋鸭产蛋性能蛋品质胫骨质量

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牛源肠聚集性大肠杆菌的分离鉴定

中国兽医杂志 2022年第6期58卷 45-51页

作者：刘伯承王慧刘俊琦杜丽飞周望平陈一峰冯小花杨俊湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131 湖南鑫广安农牧股份有限公司湖南长沙410100

为了探究犊牛腹泻死亡的原因,本试验采集死亡犊牛胸腔液、肝脏组织、肠组织和粪便样品共4份,进行细菌分离培养、生化鉴定、16S rDNA测序。以1株肝脏样品分离的纯化菌为供试菌株进行小鼠致病性试验、毒力基因检测和药物敏感性试验,并用ME... 详细信息

为了探究犊牛腹泻死亡的原因,本试验采集死亡犊牛胸腔液、肝脏组织、肠组织和粪便样品共4份,进行细菌分离培养、生化鉴定、16S rDNA测序。以1株肝脏样品分离的纯化菌为供试菌株进行小鼠致病性试验、毒力基因检测和药物敏感性试验,并用MEGA 6.0软件构建系统进化树。结果显示,从4份样品中分离的4株病原菌与大肠杆菌生长形态及生化特征一致,分离率为100%;16S rDNA序列与GenBank中大肠杆菌同源性为98%;肝脏样品分离菌命名为HCDE/17-1,其可在12 h内致小鼠死亡,用改良寇氏法计算其半数致死量(LD_(50))为1.38×10^(7) CFU/mL,毒力基因检测结果显示,astA、aggR基因呈阳性,表明该菌属致泻性大肠杆菌亚群肠聚集性大肠杆菌;药敏试验结果显示,分离株HCDE/17-1对庆大霉素、头孢唑林、苯唑西林、多西环素、复方新诺明、恩诺沙星、克林霉素等12种抗菌药高度耐药,对氯霉素、红霉素敏感;系统进化树结果显示,分离株HCDE/17-1与GenBank中10个大肠杆菌代表株形成2个大的分支,与菌株O112ab∶H8(登录号:CP062910.1)在同一个小的分支上,亲缘关系较近。结果表明,分离株HCDE/17-1为一种毒力较强的肠聚集性大肠杆菌,对抗菌药呈多重耐药,该菌可能是引起犊牛腹泻的主要原因,日常需加强监测,防止疫情流行。

关键词：肠聚集性大肠杆菌 16S rDNA 小鼠致病性试验毒力基因系统进化树