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人CXCR4转基因细胞的构建与单克隆抗体的研制及其生物学功能的研究

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人CXCR4转基因细胞的构建与单克隆抗体的研制及其生物学功能的研究

作者：周时勇苏州大学

学位级别：硕士

CXCR4(CD184)分子属趋化因子家族，人CXCR4基因由由Feng等人于1996年发现并命名为Fusin，后来又被称为LESTR或HUMSTR，人CXCR4基因位于染色体2q21区，编码由352个氨基酸组成的蛋白质，是高度保守的7次跨膜受体。CXCR4通过与其唯一的配体... 详细信息

CXCR4(CD184)分子属趋化因子家族，人CXCR4基因由由Feng等人于1996年发现并命名为Fusin，后来又被称为LESTR或HUMSTR，人CXCR4基因位于染色体2q21区，编码由352个氨基酸组成的蛋白质，是高度保守的7次跨膜受体。CXCR4通过与其唯一的配体SDF-1α构成SDF-1α／CXCR4反应轴而发挥生物学功能。CXCR4分子具有广泛的表达谱，主要表达在外周血的CD26lowCD45RA+CD45RO-T淋巴细胞，B淋巴细胞，树突状细胞，内皮细胞和巨核细胞表面。CXCR4分子在免疫细胞、造血细胞的迁移和归巢中发挥重要的调节作用，而且参予神经系统的发育、血管发生、组织损伤修复和再生等。近年来许多研究发现大多肿瘤细胞也表达CXCR4，且肿瘤细胞表达CXCR4与其向组织侵润和转移相关。随着CXCR4分子的生物学功能和信号传导的分子机制的进一步研究，使其成为一个理想的生物干预靶分子，针对CXCR4分子的阻断剂将有更广阔的临床应用前景。因此，CXCR4转基因细胞的构建、CXCR4分子拮抗剂的研制及其在SDF-1α／CXCR4信号传导中的阻断作用的研究将为肿瘤的治疗提供有力的途径。 1．人CXCR4基因的克隆及转基因细胞的构建本研究通过RT-PCR方法，从人外周血单个核细胞(PBMC)的总RNA中扩增出编码人CXCR4全长的cDNA片段，通过基因克隆技术，将其插入逆转录病毒载体pEGZ-Term。进一步采用脂质体转染技术将重组表达载体与辅助病毒载体共转染包装细胞293T，用其培养上清感染L929细胞72h后，经Zeocin筛选出稳定表达CXCR4分子的L929细胞株(L929／CXCR4)。经体外长期传代和液氮反复冻存和复苏，转基因细胞生长良好，并稳定表达CXCR4。构建的L929／CXCR4转基因细胞能在SDF-1α作用下介导迁移。 2．分泌鼠抗人CXCR4单抗的杂交瘤细胞株的制备利用上述构建的转基因细胞L929／CXCR4为免疫原，免疫BALB／c小鼠，采用B淋巴细胞融合技术，将反复免疫后的小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2／0进行细

关键词： CXCR4 SDF-1α 稳定表达迁移单克隆抗体肿瘤阻断

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天然锰砂调控溴代酚类化合物的生成与机制

天然锰砂调控溴代酚类化合物的生成与机制

作者：周时洋浙江工业大学

学位级别：硕士

溴代酚类化合物如溴酚(BPs)、羟基化多溴联苯醚/羟基化多溴联苯(OH-PBDE/PBBs)广泛存在于各种环境介质中,其来源引起了人们关注。多数研究表明,溴代酚类化合物可来自生物的代谢过程。然而,非生物过程是否也能够生成这类化合物还有待研... 详细信息

溴代酚类化合物如溴酚(BPs)、羟基化多溴联苯醚/羟基化多溴联苯(OH-PBDE/PBBs)广泛存在于各种环境介质中,其来源引起了人们关注。多数研究表明,溴代酚类化合物可来自生物的代谢过程。然而,非生物过程是否也能够生成这类化合物还有待研究。本论文探索了在Br—存在条件下天然锰砂氧化转化苯酚生成溴代酚类化合物的过程与机制。主要研究内容如下:(1)采用氮吸附比表面积仪、扫描电子显微镜/能谱仪和X射线能谱仪对天然锰砂表面进行了表征。结果表明,天然锰砂拥有较大的比表面积,表面主要呈结节状和片状,其主要成分为Mn2O3、MnO2和Fe2O3。(2)运用气相色谱-质谱联用仪对生成的产物进行定性和定量分析。结果表明,天然锰砂能够快速催化氧化Br—和苯酚发生加溴反应生成4-溴酚(4-BP)、2,4-二溴酚(2,4-DBP)和2,4,6-三溴酚(2,4,6-TBP);同时还检测到2′-OH-BDE-68、6-OH-BDE-25和2,2′-OH-BB-80等11种OH-PBDE/PBBs等主要产物。(3)通过产物的结构和种类提出了BPs和OH-PBDE/PBBs可能生成机理。天然锰砂催化氧化Br—生成溴系亲电试剂HOBr/Br2,苯酚再与亲电试剂发生亲电加成反应在生成溴酚(BPs);OH-PBDE/PBBs可能来自于天然锰砂对BPs的进一步氧化而生成的溴苯氧自由基之间的耦合反应。例如,2,4-DBP通过一个电子转移而被天然锰砂氧化生成的溴苯氧自由基之间发生碳氧(C-O)和碳碳(C-C)耦合反应便能分别生成2′-OH-BDE-68和2,2′-OH-BB-80。增加初始反应Br—、苯酚浓度都能够促进Mn2+的释放和每种溴代产物的生成;增加反应初始pH值对不同的溴代产物生成影响不同,但是溴代化合物的总量随着p H的增大而增加。鉴于Br—、苯酚和天然锰矿在土壤及沉积物中的广泛存在性,天然锰砂催化氧化Br—和苯酚生成BPs和OH-PBDE/PBBs可能是自然环境中BPs和OH-PBDE/PBBs非生物生成途径之一。

关键词：溴酚羟基化多溴联苯醚天然锰砂催化氧化

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布洛芬片与胶囊溶出度考察

中国药学杂志 1991年第8期26卷 486-487页

作者：傅敏尔周时泓杭州市药品检验所

布洛芬国内生产多数为糖衣片,胶囊则开始有少量生产。对其片剂溶出度考察曾有报道,但不同剂型的溶出度速率差别如何未见报道。笔者对国内外4家药厂6个批号的糖衣片和胶囊进行了溶出度测定,现报道如下。

关键词：异丁苯丙酸片剂胶囊溶出度

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中国最空间

作者：周时奋

来源：南通市图书馆图书评论

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全国大学生英语类赛事指南 1版

桡骨远端骨折非手术治疗后骨短缩的相关因素分析

丛书名：本书受中国人民大学解放军战略支援部队信息工程大学校级项目 (基于竞赛驱动的大学英语第二课堂研究) 资助项目编号为JCYJ2019B015

2021年

作者：董伟周时娥作

本书主要介绍了各类英语竞赛的比赛信息，包括各种比赛时间、举办单位、比赛规则、备赛技巧、参考资料网站和公众号等。全书包括七个部分：全国大学生英语竞赛、英语演讲比赛、英语辩论赛、模拟联合国会、英汉翻译赛事、全国英语阅读写... 详细信息

ISBN: (纸本)9787313240194

本书主要介绍了各类英语竞赛的比赛信息，包括各种比赛时间、举办单位、比赛规则、备赛技巧、参考资料网站和公众号等。全书包括七个部分：全国大学生英语竞赛、英语演讲比赛、英语辩论赛、模拟联合国会、英汉翻译赛事、全国英语阅读写作大赛以及高校其他常见赛事。本书较为齐全地总结了英语竞赛种类，每种竞赛种类下又列举不同的赛事，能使广大喜欢英语竞赛的师生迅速了解到什么时间段有什么比赛、了解比赛的规则、如何备赛参赛等实用信息。本书适合全国所有专业的大学生以及对英语类赛事感兴趣的人士阅读。

关键词：英语竞赛高等学校中国

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桡骨远端骨折非手术治疗后骨短缩的相关因素分析

作者：周时中南京中医药大学

学位级别：硕士

目的本课题通过研究桡骨远端骨折非手术治疗后骨短缩的发生率,对可能引起桡骨短缩的相关因素进行分析,并提出相应的预防措施,为临床治疗此类骨折提供参考。方法收集2012年3月—2016年7月桡骨远端骨折经非手术治疗87例病人作为研究对象,... 详细信息

目的本课题通过研究桡骨远端骨折非手术治疗后骨短缩的发生率,对可能引起桡骨短缩的相关因素进行分析,并提出相应的预防措施,为临床治疗此类骨折提供参考。方法收集2012年3月—2016年7月桡骨远端骨折经非手术治疗87例病人作为研究对象,患者在治疗满6周后依据影像学检查是否发生桡骨短缩,将其分为短缩组和对照组,观察桡骨短缩的发生率,使用单因素筛选及多因素Logistic回归对可能引起桡骨短缩的相关因素进行分析,其中相关因素包括年龄、性别、骨折的类型、非手术治疗方式、合并骨质疏松等。结果(1)本研究87例患者中有50例患者经非手术治疗后桡骨短缩,骨短缩的发生率为57.47%。(2)单因素分析结果显示,短缩组与对照组在性别上差异无统计学意义(P>0.05);短缩组与对照组在年龄、骨折的类型、非手术治疗方式、合并骨质疏松这些相关因素上差异均具有统计学意义(P<0.05)。(3)多因素Logistic回归分析显示,骨折的类型作为独立影响因素对桡骨远端骨折非手术治疗后桡骨短缩的发生有显著影响(P<0.05)。结论桡骨远端骨折非手术治疗后桡骨短缩的发生率较高,骨折的类型为非手术治疗后桡骨短缩发生的独立因素。在对桡骨远端骨折患者行非手术治疗时应对桡骨短缩展开综合性的分析评估,对于关节面破坏较为严重的桡骨远端骨折应适当延长固定时间或行手术治疗以降低骨短缩的发生率。

关键词：桡骨远端骨折非手术治疗桡骨短缩相关因素