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PHEV感染致PGRN募集于溶酶体异常的作用机制研究

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PHEV感染致PGRN募集于溶酶体异常的作用机制研究

作者：陈雨竹吉林大学

学位级别：硕士

猪血凝性脑脊髓炎病毒(Porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)为β冠状病毒属成员,自然条件下PHEV可感染仔猪并侵害其中枢神经系统。PHEV也可感染小鼠,其病变特征与感染仔猪后所产生的病变非常相似,因此将其作为PHEV... 详细信息

猪血凝性脑脊髓炎病毒(Porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)为β冠状病毒属成员,自然条件下PHEV可感染仔猪并侵害其中枢神经系统。PHEV也可感染小鼠,其病变特征与感染仔猪后所产生的病变非常相似,因此将其作为PHEV致神经损伤的研究模型。颗粒蛋白前体(Progranulin,PGRN)是一种由Granulin(GRN)基因编码,富含半胱氨酸的分泌型溶酶体蛋白。近年来研究发现,分拣蛋白Sortilin和阳离子非依赖性甘露糖-6-磷酸受体(CI-M6PR)均介导了细胞内外的PGRN向溶酶体传递。PGRN的转运异常会影响溶酶体形态、水解酶活性、调控溶酶体膜组分导致溶酶体功能紊乱。本课题组前期工作发现PHEV在复制过程中通过劫持溶酶体进行病毒粒子的释放,同时提高了PGRN转运至溶酶体的比率,暗示PHEV感染引起的PGRN转运异常在PHEV复制过程中发挥重要作用,然而PHEV影响PGRN募集于溶酶体运输的机制并不清楚。为探究PHEV感染对Sortilin/CI-M6PR分别介导的PGRN靶向溶酶体运输的影响,本实验以PHEV感染神经瘤母(N2a)细胞为模型,通过间接免疫荧光实验(IFA)证实PHEV感染增强PGRN向溶酶体募集且依赖于病毒的活性;利用Western blot、RT-qPCR、IFA检测Sortilin与CI-M6PR在N2a细胞和小鼠脑组织中的表达和分布,结果发现在PHEV感染后CI-M6PR表达显著上调而Sortilin表达显著下调,以及PHEV感染的脑组织中CI-M6PR的分布显著增加而Sortilin的分布显著减少,表明PHEV感染影响Sortilin和CI-M6PR的表达与分布。通过IFA检测、皮尔逊相关系数分析、免疫共沉淀实验发现Sortilin/CI-M6PR分别与PGRN存在相互作用,与未接毒细胞相比,PHEV感染导致两者与PGRN的相互作用增强,提示PHEV感染增强了Sortilin/CI-M6PR介导的PGRN靶向溶酶体运输。此外,为探究Sortilin/CI-M6PR在PHEV感染引起的PGRN转运异常中的作用,本实验应用构建过表达载体、CRISPR/Cas9、RNA干扰等技术,研究Sortilin/CI-M6PR表达的改变对PGRN与LAMP1共定位的影响。结果表明,敲低Sortilin显著抑制了未接毒细胞中PGRN向溶酶体的募集,然而抑制Sortilin表达并不完全抑制PHEV感染引起的PGRN向溶酶体募集增强;进一步研究发现敲低CI-M6PR对PGRN转运的影响与敲低Sotilin后的结果相似;此外,在Sortilin缺失细胞上干扰CI-M6PR后再感染PHEV,结果发现接毒组中溶酶体上的PGRN含量与未接毒组相比无明显变化,表明PHEV促进PGRN募集于溶酶体不是独立依赖于Sotilin或CI-M6PR所介导的一条运输途径,而是这两条途径在PHEV促进PGRN靶向溶酶体运输中均发挥重要作用。最后,为了研究Sotilin/CI-M6PR介导PGRN募集于溶酶体对PHEV复制的影响,首先通过Western blot及RT-qPCR检测PHEV感染PGRN敲除细胞系后病毒含量变化,结果发现PGRN敲除并不影响PHEV在细胞内的复制,但病毒的释放量却显著减少。其次,在干扰Sortilin/CI-M6PR后接种病毒,通过Western blot、RT-qPCR检测发现胞内PHEV的蛋白与转录水平均发生显著下调,表明敲低Sortilin/CI-M6PR能抑制胞内PHEV的复制。而应用PGRN-SORT1抑制剂或PSAP siRNA,在未影响Sortilin/CI-M6PR表达的情况下抑制PGRN靶向溶酶体运输,通过Western blot及RT-qPCR检测发现,与对照处理组相比其胞内病毒的含量未发生变化,而胞外病毒的含量显著减少。以上结果表明Sortilin/CI-M6PR促进PHEV在细胞内的复制,并且Sortilin/CI-M6PR介导的PGRN靶向溶酶体运输并未影响病毒在胞内的复制却能促进病毒的释放。综上所述,本研究发现PHEV感染N2a细胞后通过影响Sortilin/CI-M6PR的表达与分布,并促进Sortilin/CI-M6PR与PGRN的相互作用,增强Sortilin/CIM6PR介导的PGRN靶向溶酶体运输途径;并且PHEV感染促进PGRN募集于溶酶体同时依赖于Sortilin和CI-M6PR分别介导的PGRN靶向溶酶体运输途径,以及这两条途径在PHEV复制过程中并未影响病毒胞内的复制,却能促进病毒的释放,表明Sortilin/CI-M6PR介导PHEV感染引起的PGRN转运异常在PHEV释放过程中发挥

关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒颗粒蛋白前体溶酶体分拣蛋白阳离子非依赖性甘露-6-磷酸受体

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禅意文化视角下竹笙茶院空间景观设计研究

禅意文化视角下竹笙茶院空间景观设计研究

作者：李楠竹山东建筑大学

学位级别：硕士

作为中国传统美学的璀璨明珠,禅宗美学其心性本体论的范畴对中华人文内涵、地域文脉的传承、人与空间的情感共鸣产生了深远的影响。禅的美学智慧来源于儒家、道家和佛教的美学,它所蕴含的顿悟见性的审美思维,尊重自然、注重内在的艺术... 详细信息

作为中国传统美学的璀璨明珠,禅宗美学其心性本体论的范畴对中华人文内涵、地域文脉的传承、人与空间的情感共鸣产生了深远的影响。禅的美学智慧来源于儒家、道家和佛教的美学,它所蕴含的顿悟见性的审美思维,尊重自然、注重内在的艺术境界直接或间接地影响着人们对设计的审美。然而,尽管“禅”与“茶”作为两种独特的文化形态,但在现有文献中,从禅宗美学中禅意文化特征的意境角度,对茶室与茶庭院空间环境的景观设计方面进行的细致学术研究仍显不足。这导致禅意文化茶院空间景观中存在着缺乏民族独特性、同质化严重、美学内涵流失和精神空间匮乏等问题,对于禅意文化下茶院空间景观的美学设计的优化仍有诸多工作需要深挖。本文基于禅意文化视角,对于禅意文化导向下竹笙茶院空间景观设计研究具有重要的意义,目前需要对禅意文化的视角进行探究。为解决茶院空间景观的设计,选取了禅意文化作为理论基础进行研究。全文共分为六个部分,第一部分,主要介绍了本文研究背景和研究目的,提出了从禅茶时代的美学内涵、建设实践到禅茶文化的氛围体验诉求的设计手段,引出了对当代茶院空间景观设计变迁的研究内容,选取了研究禅意文化中简朴观、虚实之美、自然之美、意境之美作为茶院空间景观设计的创新性和可行性,以及技术路线等内容。第二部分,基于理论部分着重探讨禅意文化与茶院空间景观设计的理论基础,分析了禅意文化概念、禅的思想理论、禅意文化美学思想等,以及茶院空间景观设计的理论研究和禅意文化对中国传统茶院空间景观的艺术表现形式。第三部分,通过分析禅意文化与茶院空间景观的研究应用,阐述了二者之间的关系,以及在禅意文化影响下当代茶院空间景观构成要素及设计方法等内容,本文从禅意文化的角度对茶院空间景观设计的审美价值、地域文化价值、生态文明价值和社会价值,需要对茶院空间设计中存在的问题进行下一步发展。第四部分,从茶院空间景观设计的基础调研和问题探究入手,本文采用了实地调研进行问卷调研,利用题项中信度与效度分析,结合KMO与巴特利特检验、因子方差等技术手段进行问卷调研数据中对于禅意文化对茶院空间景观设计中验证。详细分析了乡村基础概况、乡村茶院现状和调研情况,为后续章节的设计策略提供了基础和依据。第五部分,结合上述对茶院空间景观设计的需求,围绕禅意文化理论基础下茶院空间景观设计策略展开,探讨了禅意文化在茶院景观设计中的植入、设计原则和意义,并提出了具体的设计策略,以回归自然的生态理念、少即是多的审美理念和顿悟人本思想的哲学理念为指导。最后两部分,则以日照市巨峰镇作为本次竹笙茶院景观设计实践为例,展开了具体的景观设计主题思路、总体布局和专项设计,将理论应用于实践中,总结了研究成果并展望未来可能的发展方向,为相关领域的研究和实践提供了有益的参考,旨在提升设计的审美、文化和生态效益,为乡村空间发展和文化传承做出贡献。

关键词：禅意文化景观设计茶院空间设计

经阴道网片植入盆底重建术术后并发症相关因素研究

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中国科技期刊数据库医药 2024年第10期 0119-0122页

作者：周寒王潇连诗瑜周勤重庆医科大学附属第一医院重庆400042

探讨经阴道网片植入盆底重建术术后并发症发生的相关危险因素。方法纳入2021.01-2022.01期间于重庆医科大学附属第一医院就诊且行TVM盆底重建术的患者共143例开展研究,依据是否发生并发症分为两组,收集两组年龄、产次、体质量指数(body... 详细信息

探讨经阴道网片植入盆底重建术术后并发症发生的相关危险因素。方法纳入2021.01-2022.01期间于重庆医科大学附属第一医院就诊且行TVM盆底重建术的患者共143例开展研究,依据是否发生并发症分为两组,收集两组年龄、产次、体质量指数(body mass index,BMI)、是否患糖尿病、是否主动或被动吸烟,是否有盆底手术史、子宫切除状态、术后性生活开始时间、术后是否遵医嘱应用雌激素、术前雌激素水平、手术时间及出血量等多方面资料,开展Logistic回归分析,获得TVM盆底重建术术后并发症发生的独立危险因素。结果 143例患者共31例发生术后并发症,发生率为21.6%;并发症分布为阴道流血流液14例,慢性疼痛12例,性生活不适12例,网片暴露8例,术后新发尿路症状7例。单因素显示:两组体质量指数、糖尿病史、是否吸烟、是否过早开始性生活、术后是否遵医嘱使用雌激素相比,有统计学差异(P1)。结论 TVM盆底重建术有一定术后并发症风险,与术后过早开始性生活,术后未遵医嘱使用雌激素,体质量指数≥25kg/m2,合并糖尿病关系密切,需要加强关注及做好预防,减少手术相关并发症的发生。

关键词：盆底重建术网片植入并发症影响因素

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全面构筑一体化现代物流体系问题探讨

商业经济研究 2024年第20期 95-97页

作者：封竹一上海东海职业技术学院上海200241

在世界经济发生深刻变化、国内国际物流供应链竞争日益加剧的形势下,构建一体化现代物流体系、加快物流强国建设显得更为紧迫。基于这样的背景,如何全面构筑一体化现代物流体系,推动物流业高质量发展,加快建设和完善现代流通体系,确保... 详细信息

在世界经济发生深刻变化、国内国际物流供应链竞争日益加剧的形势下,构建一体化现代物流体系、加快物流强国建设显得更为紧迫。基于这样的背景,如何全面构筑一体化现代物流体系,推动物流业高质量发展,加快建设和完善现代流通体系,确保产业链供应链的安全稳定,成为各地方和物流企业面对的重要任务。本文分析了我国现代物流业发展现状和构筑一体化现代物流体系面临的问题和挑战,重点围绕持续建设完善物流基础设施补齐物流短板、不断深化物流业提质增效升级持续拓展现代物流服务领域、加快物流业数字科技赋能推动智能化绿色化发展、加快推动国际物流网络化发展、优化现代物流发展营商环境等方面提出了对策措施。

关键词：现代物流体系一体化提质增效

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间离与沉浸:从活动影像的运动模式看国产动画电影的转型

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电影文学 2024年第16期 64-69页

作者：黄秋儒王韧竹江南大学设计学院江苏无锡214122

活动影像的运动模式具有电影性和动画性两种不同的运动倾向,迪士尼动画和吉卜力动画分别是这两种运动倾向的代表。以两种运动倾向为基础,国产动画在活动影像的运动模式上也有着转型和发展趋势。早期国产美术电影有着动画性运动倾向,同... 详细信息

活动影像的运动模式具有电影性和动画性两种不同的运动倾向,迪士尼动画和吉卜力动画分别是这两种运动倾向的代表。以两种运动倾向为基础,国产动画在活动影像的运动模式上也有着转型和发展趋势。早期国产美术电影有着动画性运动倾向,同时将民族元素融入其中,形成独特的“间离效果”,使当时的国产动画电影在世界动画中自成一派。当下的国产动画电影更多地向迪士尼动画学习,以电影性运动倾向为主,同时在设计、叙事和内涵等方面也存在着模仿国外动画电影的痕迹。基于此,结合对商业市场、动画本体和运动模式的分析,需要国产动画电影再一次的转型以实现更好的发展。

关键词：活动影像运动模式国产动画电影间离效果

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AGI视域下养老服务高质量发展技术解决方案初探

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社会保障评论 2024年第3期8卷 90-107页

作者：丁元竹中共中央党校(国家行政学院)社会和生态文明教研部

本文从社会学、社会保障和人工智能技术开发的视角,分析了中国养老服务面临的各种问题,并提出了通用人工智能(AGI)机器人开发的数据、模型和算力设想。在人工智能技术迅速发展的背景下,本文旨在启迪那些负责任的科学家和技术人员,基于... 详细信息

本文从社会学、社会保障和人工智能技术开发的视角,分析了中国养老服务面临的各种问题,并提出了通用人工智能(AGI)机器人开发的数据、模型和算力设想。在人工智能技术迅速发展的背景下,本文旨在启迪那些负责任的科学家和技术人员,基于中国养老服务的实际需求,开发能够助力老年人生活的AGI。文章还旨在帮助他们思考如何构建与AGI机器人开发相适应的数据系统和算力设施,以使人工智能技术能够助力应对当前及未来一段时间内中国养老服务领域所面临的挑战。同时,本文也期望在社会保障体系建设与人工智能技术之间,以及社会保障学科与人工智能学科之间搭建联系与合作的桥梁。

关键词：高质量养老服务 AGI机器人技术路径

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RVG多肽修饰埃洛石纳米管在阿尔兹海默症中的作用研究

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RVG多肽修饰埃洛石纳米管在阿尔兹海默症中的作用研究

作者：闫怡竹安徽医科大学

学位级别：硕士

PS-MPs和DEHP联合暴露通过NO/iNOS/NF-κB通路诱导小鼠结肠上皮细胞自噬的作用机制研究

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中国畜牧兽医 2024年 4678-4689页

作者：艾婧竹徐世文东北农业大学动物医学学院

【目的】探究聚苯乙烯微塑料（PS-MPs）和邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）联合暴露通过NO/iNOS/NF-κB通路诱导小鼠结肠上皮细胞（MCEC）自噬的作用机制。【方法】依据CCK-8法测定的PS-MPs和DEHP对MCEC的半数抑制浓度(IC50),将MCE... 详细信息

【目的】探究聚苯乙烯微塑料（PS-MPs）和邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）联合暴露通过NO/iNOS/NF-κB通路诱导小鼠结肠上皮细胞（MCEC）自噬的作用机制。【方法】依据CCK-8法测定的PS-MPs和DEHP对MCEC的半数抑制浓度(IC50),将MCEC分为5组:对照组、PS-MPs组、DEHP组、联合组和抑制组,各组MCEC分别用培养基及含有200μg/L PS-MPs、100μmol/L DEHP、200μg/L PS-MPs+100μmol/L DEHP、200μg/L PS-MPs+100μmol/L DEHP+5 nmol/L硼替佐米（PS-341）的培养基处理24 h后,采用生化试剂盒检测NO含量及iNOS活性,通过MDC法检测自噬小体,利用免疫荧光染色、实时荧光定量PCR和Western blotting检测自噬,以及NO/iNOS/NF-κB通路相关基因的mRNA和蛋白表达水平。【结果】PS-MPs和DEHP均可抑制MCEC的活力,且IC50分别为2 315μg/L和1 477μmol/L。与对照组相比,PS-MPs、DEHP、联合组细胞中NO含量、iNOS活性及NO/iNOS/NF-κB通路相关基因的mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）,MDC法与免疫荧光染色的荧光强度均显著增强（P<0.05）,MCEC的自噬相关基因（Beclin1、ATG5、LC3-B）的mRNA和蛋白表达水平显著上调（P<0.05）;PS-341可显著缓解PS-MPs和DEHP对MCEC暴露引起的上述检测指标的变化。【结论】联合暴露于PS-MPs和DEHP可激活iNOS,使NO含量激增,上调NO/iNOS/NF-κB通路,从而诱导小鼠结肠上皮细胞自噬。

关键词：聚苯乙烯微塑料(PS-MPs) 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP) NO/iNOS/NF-κB通路小鼠结肠上皮细胞(MCEC) 自噬

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含瓦斯煤破裂信号的量子优化降噪模型

电子测量与仪器学报 2024年

作者：付华刘雨竹周文铮辽宁工程技术大学电气与控制工程学院

为剔除含瓦斯煤破裂信号采集过程中夹杂的扰动噪声，提出一种基于改进量子群算法(IQPSO)优化变分模态分解(VMD)的含瓦斯煤破裂信号量子优化降噪模型。针对VMD受限于分解个数和惩罚参数的选取进而影响降噪效果，采用IQPSO算法优化VMD参... 详细信息

为剔除含瓦斯煤破裂信号采集过程中夹杂的扰动噪声，提出一种基于改进量子群算法(IQPSO)优化变分模态分解(VMD)的含瓦斯煤破裂信号量子优化降噪模型。针对VMD受限于分解个数和惩罚参数的选取进而影响降噪效果，采用IQPSO算法优化VMD参数寻优过程，在QPSO算法中引入决策权重系数和自适应控制因子，提高算法粒子决策自适应性和参数搜索能力。利用参数优化的VMD算法分解含瓦斯煤破裂信号，计算各信号分量的有效相关系数来辨识噪声临界点，采用小波变换处理高频噪声并重构剩余分量得到降噪后的含瓦斯煤破裂信号。通过仿真信号和现场实测信号将降噪模型与EMD、VMD、PSO-VMD、SSA-VMD、GWO-VMD模型进行降噪效果对比。实验结果表明，提出模型处理后信号的信噪比提升20%以上、均方根误差降低至0.03以下，能量占比在90%以上，三项指标均优于其他降噪模型，自适应性和分解效率较强，能够有效保留信号局部特征，对现场复杂信号具有更好的降噪效果。

关键词：含瓦斯煤降噪模型变分模态分解量子粒子群参数优化