检索结果-南通市图书馆

可诱导表达BMP4的正常来源及隐睾特异性iPSCs的建立及分化研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华小儿外科杂志 2022年第1期43卷 71-77页

作者：王新杰李爽王敏周君梅上海交通大学附属儿童医院上海市儿童医院生物样本库 200040

目的建立可诱导表达骨形态发生蛋白质4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)的正常来源及隐睾特异性诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs),比较两者体外定向分化的差异,为研究部分隐睾患儿成年后不育的原因提供具有人... 详细信息

目的建立可诱导表达骨形态发生蛋白质4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)的正常来源及隐睾特异性诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs),比较两者体外定向分化的差异,为研究部分隐睾患儿成年后不育的原因提供具有人类遗传背景的体外研究模型。方法①建立可诱导表达BMP4的正常来源及隐睾特异性iPSCs,将正常来源iPSCs作为对照组,隐睾特异性iPSCs作为隐睾组;利用多西环素(doxycycline,Dox)进行诱导,筛选出BMP4表达量最高的细胞株;②将外源性添加BMP4的正常来源iPSCs作为外源性添加BMP4组(外源组),将Dox内源诱导BMP4表达的正常来源iPSCs作为Dox内源诱导BMP4表达组(内源组),此两组共同作为实验组;在细胞形态和基因表达水平比较实验组两组间BMP4因子诱导效果的差异;③通过Dox诱导BMP4的表达、双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)、全反式维甲酸(all trans retinoid acid,ATRA)组成的三步法诱导分化方案,逐步诱导人的正常来源及隐睾特异性iPSCs向生精细胞方向分化,在基因及蛋白水平进行检测,比较两株细胞在分化过程中的差异。结果①经Dox诱导后,在正常来源及隐睾特异性iPSCs两株细胞中均可检测到BMP4表达明显升高、同时多能性基因OCT4的表达均呈明显下降趋势,与d0相比差异具有统计学意义,其中对照组的3#细胞株与隐睾组的5#细胞株在Dox诱导后BMP4表达量最高;②与外源组相比,内源组的细胞株形态变化更为均一、同步,BMP4的基因表达量更高,两组间的差异具有统计学意义;③在向生精细胞诱导分化过程中,对照组及隐睾组细胞的DAZL和PRDM1的表达量在两组之间的差异均无统计学意义;隐睾组的VASA、SYCP3、ACROSIN和TEKT1的表达量于诱导d14和d21时均明显低于对照组,两组之间的差异具有统计学意义。免疫染色结果显示:DAZL的阳性率在对照组和隐睾组细胞间的差异无统计学意义;隐睾组的VASA和SYCP3的阳性率于诱导d14和d21时均明显低于对照组,ACROSIN的阳性率于诱导d21时明显低于对照组,差异均具有统计学意义。结论本研究为部分隐睾患儿成年后不育的原因提供了具有人类遗传背景的体外研究模型,为未来的进一步研究奠定了良好基础。

关键词：隐睾诱导多能干细胞可诱导表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物样本的常用保存方式及效果

中华病理学杂志 2016年第11期45卷 807-810页

作者：王敏李倩吕志宝陈方周君梅上海交通大学附属儿童医院上海市儿童医院中心实验室 200040 上海交通大学附属儿童医院上海市儿童医院普外科 200040 上海交通大学附属儿童医院上海市儿童医院泌尿外科 200040

生物样本是医学研究的重要资源，病理学组织和细胞样本是临床常见的生物样本，主要来源于临床手术、活检、穿刺等操作，可通过制备切片、涂片以及提取生物大分子，用于病理诊断及医学研究。样本是医学研究的基础，其质量在很大程度上决... 详细信息

生物样本是医学研究的重要资源，病理学组织和细胞样本是临床常见的生物样本，主要来源于临床手术、活检、穿刺等操作，可通过制备切片、涂片以及提取生物大分子，用于病理诊断及医学研究。样本是医学研究的基础，其质量在很大程度上决定着研究结果的准确性和可靠性。随着基因组学、转录组学以及蛋白质组学等研究手段的飞速进步，各种分析技术对生物样本的质量也提出了更高的要求［1-2］。

关键词：生物样本保存方式医学研究临床手术生物大分子蛋白质组学病理诊断基因组学

人羊水来源干细胞参与小鼠损伤肌肉修复的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国修复重建外科杂志 2011年第7期25卷 842-847页

作者：马晓荣张胜利尚亚峰高同斌王雪陈方周君梅上海交通大学附属上海市儿童医院中心实验实上海200040 上海交通大学附属上海市儿童医院小儿泌尿外科上海200040 上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科上海200040

目的研究人羊水来源干细胞(human amniotic fluid colony derived stem cells,hAFCSCs)是否参与小鼠肌肉损伤修复过程,探讨应用hAFCSCs治疗肌肉损伤的方法及可行性。方法 B超引导下穿刺抽取人孕中期羊水,体外分离、培养得到hAFCSCs,取第... 详细信息

目的研究人羊水来源干细胞(human amniotic fluid colony derived stem cells,hAFCSCs)是否参与小鼠肌肉损伤修复过程,探讨应用hAFCSCs治疗肌肉损伤的方法及可行性。方法 B超引导下穿刺抽取人孕中期羊水,体外分离、培养得到hAFCSCs,取第6～8代细胞备用,同时提取总RNA行RT-PCR鉴定干细胞相关基因。取16只6～8周龄Nod/Scid小鼠,体重20～24 g,利用心肌毒素联合X线照射建立双侧胫骨前肌肌肉损伤模型,右侧胫骨前肌内注射hAFCSCs(3.3×107个/mL)30μL作为实验组,左侧胫骨前肌同法注射等量完全培养液(含15%FBS、18%Chang B、2%Chang C、1%青链霉素、1%L-谷氨酰胺的α-MEM培养基)作为对照组。细胞移植术后2、4周各处死小鼠8只,取材行肝细胞生长因子受体(c-Met)、成肌调节因子(Myf-5)、层粘连蛋白(Laminin)、结蛋白(Desmin)与人特异性细胞核有丝分裂器(NuMa)组织免疫双重荧光染色观察。结果原代hAFCSCs培养5～7 d后可见细胞克隆形成;8～10 d后可挑取细胞形态均一的克隆进行稳定传代,6～8代后可获得足量的干细胞。RT-PCR检测示所获得hAFCSCs体外扩增培养至第6代仍表达干细胞相关基因。细胞移植术后2周免疫双重荧光染色示,实验组胫骨前肌内检测到NuMa表达,未检测到hAFCSCs表达肌源性细胞相关表型;术后4周,实验组胫骨前肌内检测到NuMa表达,部分细胞同时表达NuMa和c-Met、Myf-5,部分肌纤维同时表达NuMa和Desmin、Laminin。术后2、4周,对照组胫骨前肌均未检测到NuMa表达。结论 hAFCSCs体外培养后移植到小鼠肌肉损伤部位,可参与损伤肌肉的修复过程。

关键词：人羊水来源干细胞细胞治疗骨骼肌损伤小鼠

我院生物样本库“一病一卡”管理制度的建立与应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医院管理杂志 2013年第11期29卷 866-867页

作者：吴静顾怡珺周君梅上海市儿童医院上海交通大学附属儿童医院 200040

当今，转化医学已广受关注并进入迅猛发展的时期。而医学标准化、高质量的人类疾病生物样本库是极其珍贵的资源，是基础与临床研究的源头，是实现转化医学的核心环节。我国政府虽十分重视生物样本库的建设，但目前其尚处于初创阶段，各... 详细信息

当今，转化医学已广受关注并进入迅猛发展的时期。而医学标准化、高质量的人类疾病生物样本库是极其珍贵的资源，是基础与临床研究的源头，是实现转化医学的核心环节。我国政府虽十分重视生物样本库的建设，但目前其尚处于初创阶段，各家样本库大多存在管理混乱、缺乏标准化操作流程等问题。如何解决这些问题，并进一步对样本库进行规范化建设和管理，至关重要。我院于2011年底开始筹建生物样本库，同时开始建立相关标准化管理制度和技术规范。我院为综合性儿童医院，各系统病种繁多，样本的采集几乎涉及每一个临床科室。为了从源头上保证样本的质量，我们在样本的采集阶段建立了“一病一卡”的管理制度，保证了样本采集、运送和接收过程的科学化和标准化。试用近1年来，反响颇佳，现总结如下。一、“一病一卡”

关键词：生物样本管理制度标准化操作综合性儿童医院应用转化医学样本采集人类疾病

利用人胚胎干细胞和人羊水干细胞的神经分化模型建立体外神经毒性测试的实验研究(英文)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

临床儿科杂志 2011年第2期29卷 101-105页

作者：周君梅张胜利陈方上海市儿童医院上海交通大学附属儿童医院中心实验室上海200040

目的许多药物具有神经毒性,尤其是对于儿童的影响更大。目前常用的药物体内毒性实验既耗时又昂贵。人胚胎干细胞和人羊水干细胞的神经分化有望建立一种理想的用于评价药物神经毒性的体外评估系统。此项研究旨在利用红藻氨酸的神经毒性... 详细信息

目的许多药物具有神经毒性,尤其是对于儿童的影响更大。目前常用的药物体内毒性实验既耗时又昂贵。人胚胎干细胞和人羊水干细胞的神经分化有望建立一种理想的用于评价药物神经毒性的体外评估系统。此项研究旨在利用红藻氨酸的神经毒性验证此系统的可行性。方法单层贴壁状态下,人胚胎干细胞和人羊水干细胞在化学成分明确的诱导条件下向神经细胞诱导。这些细胞经神经细胞特异性的抗体染色证实其特性。诱导得到的神经细胞在不同浓度红藻氨酸的培养液中进行培养和扩增,每代细胞进行计数,绘制细胞的生长曲线。结果人胚胎干细胞和人羊水干细胞均可被高效地诱导为神经细胞;人胚胎干细胞的神经诱导效率高于人羊水干细胞;红藻氨酸对诱导得到的神经细胞具有毒性,其浓度与毒性呈正相关。结论人胚胎干细胞和人羊水干细胞的体外神经分化可作为用于评价药物神经毒性的体外评估系统。

关键词：人胚胎干细胞人羊水干细胞神经分化神经毒性

膀胱组织工程中平滑肌种子细胞来源的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

国际生物医学工程杂志 2010年第5期33卷 297-300,308页

作者：高同斌马晓荣周君梅陈方上海交通大学附属儿童医院小儿泌尿外科 200040 上海交通大学附属新华医院泌尿外科 200092

近年来,组织工程学的蓬勃发展为膀胱替代提供了崭新的思路.其中种子细胞是组织工程膀胱构建及应用研究中的首要环节和基本要素之一.构建膀胱组织工程平滑肌的种子细胞有平滑肌细胞、平滑肌祖细胞、胚胎干细胞和各种组织来源的成体干细... 详细信息

近年来,组织工程学的蓬勃发展为膀胱替代提供了崭新的思路.其中种子细胞是组织工程膀胱构建及应用研究中的首要环节和基本要素之一.构建膀胱组织工程平滑肌的种子细胞有平滑肌细胞、平滑肌祖细胞、胚胎干细胞和各种组织来源的成体干细胞如骨髓来源干细胞、羊水来源干细胞、脂肪来源干细胞等.对膀胱组织工程学种子细胞来源的研究现状进行回顾,并对其研究前景作一展望.

关键词：平滑肌干细胞分化组织工程膀胱

脊髓A1型星形胶质细胞在外周炎性痛中的动态变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验动物学报 2021年第5期29卷 578-584页

作者：李倩李玲玲李爽黄楚天周君梅上海市儿童医院上海交通大学附属儿童医院中心实验室上海200040

目的研究外周炎性痛小鼠痛行为以及脊髓A1型星形胶质细胞的动态变化,为阐明炎性痛的病理机制提供实验基础及理论依据。方法雄性C57BL/6小鼠16只,分为对照组8只和炎性痛组8只。小鼠右侧足底注射完全弗氏佐剂(CFA)建立外周炎性痛模型,对... 详细信息

目的研究外周炎性痛小鼠痛行为以及脊髓A1型星形胶质细胞的动态变化,为阐明炎性痛的病理机制提供实验基础及理论依据。方法雄性C57BL/6小鼠16只,分为对照组8只和炎性痛组8只。小鼠右侧足底注射完全弗氏佐剂(CFA)建立外周炎性痛模型,对照组右侧足底注射相同体积生理盐水。在造模前以及造模后第1、3、5、7天检测小鼠机械刺激缩足阈值(MWT)和辐射热刺激缩爪潜伏期(PWL)的变化。以逆转录聚合酶链反应检测A1、A2型星形胶质细胞标志物在炎性痛不同时程脊髓内的动态表达变化。用免疫荧光法检测小鼠脊髓背角GFAP形态以明确星形胶质细胞激活,同时统计脊髓背角A1型星形胶质细胞标志物C3与GFAP共定位水平。结果炎性痛小鼠造模后患侧MWT、PWL均明显下降,小鼠出现机械性痛觉超敏与热痛觉过敏;且在造模后第3天,脊髓背角GFAP表达开始升高,表达量为1.84±0.10 vs 1.08±0.22(P<0.05);炎性痛第7天,A1型星形胶质细胞标志物Serping1、H2-T23的mRNA水平均显著升高(P<0.05),A2型星形胶质细胞标志物S100a10、Ptx3的mRNA水平降低(P<0.05);炎性痛组小鼠脊髓背角星形胶质细胞内C3的表达增加(P<0.05)。结论炎性痛小鼠脊髓反应性星形胶质细胞向A1型极化增加,提示A1型星形胶质细胞可能参与了炎性痛的发生发展。

关键词：炎性痛 A1型星形胶质细胞反应性星形胶质细胞脊髓小鼠

肥大细胞在先天性巨结肠各表型中的分布及其作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华小儿外科杂志 2014年第7期35卷 495-499页

作者：许灵苍周君梅李会吕志葆上海市儿童医院上海交通大学附属儿童医院普外科200040

目的探讨肥大细胞在先天性巨结肠（Hirschsprung’s disease，HD）各表型中的分布差异，进而研究肥大细胞在HD发病机制中的作用。方法选取2010年3月至2012年9月在上海交通大学附属儿童医院行HD根治术患儿的狭窄段和扩张段肠壁石蜡标本2... 详细信息

目的探讨肥大细胞在先天性巨结肠（Hirschsprung’s disease，HD）各表型中的分布差异，进而研究肥大细胞在HD发病机制中的作用。方法选取2010年3月至2012年9月在上海交通大学附属儿童医院行HD根治术患儿的狭窄段和扩张段肠壁石蜡标本23例。根据病史资料，将其分为常见型12例，长段型6例，全结肠型5例。同时，选取先天性肛门直肠畸形行造瘘术患儿的肠壁石蜡标本13例作为对照组。肥大细胞采用甲苯胺蓝染色和免疫荧光染色。然后，通过显微镜观察并统计HD各表型组及对照组的黏膜层、黏膜下层和肌层中肥大细胞的数量。结果常见型组、长段型组及全结肠型组的狭窄段黏膜层肥大细胞数量（分别为34．5±7．2、42．6±11．1、54．0±4．6）和黏膜下层的肥大细胞数量（分别为21．8±6．1、27．0±6．5、37．2±12．9）均多于自身扩张段及对照组黏膜层肥大细胞数量（分别为24．3±8．3、24．9±8．9、25．4±9．5、25．7±11．1）和黏膜下层的肥大细胞数量（分别为13．8±5．3、14．9±6．9、13．6±6．6、13．7±6．2），差异均有统计学意义（P〈0．05）。对常见型组、长段型组和全结肠型组的狭窄段黏膜层及黏膜下层肥大细胞数量进行两两比较，发现各组黏膜层及黏膜下层的肥大细胞数量存在差异（P〈0．05）。许多肥大细胞存在明显的脱颗粒现象。结论肥大细胞在HD各表型中的分布是有差异的，这也说明肥大细胞可能在HD的发病机制中扮演重要的角色。

关键词：先天性巨结肠肥大细胞发病机制

试论工商部门变更登记中止程序的必要性和可行性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国工商管理研究 2015年第2期 68-72页

作者：周君梅周健江苏省镇江工商局

一、问题的提出：一则案例引发的思考甲公司营业执照登记的股东乙公司和甲公司法定代表人孙某都主张自己是甲公司唯一的股东。登记股东乙公司授权张某试图办理法定代表人变更登记，但法定代表人孙某却说他才是真实股东，不同意变更，并... 详细信息

一、问题的提出：一则案例引发的思考甲公司营业执照登记的股东乙公司和甲公司法定代表人孙某都主张自己是甲公司唯一的股东。登记股东乙公司授权张某试图办理法定代表人变更登记，但法定代表人孙某却说他才是真实股东，不同意变更，并出具司法裁定作为证据证明登记股东不能代表公司。最后工商部门作出暂缓办理变更登记的决定。

关键词：变更登记工商部门可行性法定代表人程序营业执照证据证明公司