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马立克氏病疫苗毒和野毒PCR鉴别检测方法的建立及猫疱疹病毒重组毒的构建

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马立克氏病疫苗毒和野毒PCR鉴别检测方法的建立及猫疱疹病毒重组...

作者：周冬玉华中农业大学

学位级别：硕士

马立克氏病(Marek’s disease,MD)是由马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)引起的肿瘤性疾病,具有较高的发病率和死亡率,严重危害了家禽养殖业。接种疫苗是防控马立克氏病的有力手段,但是马立克氏病病毒毒力不断增强,现有疫苗... 详细信息

马立克氏病(Marek’s disease,MD)是由马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)引起的肿瘤性疾病,具有较高的发病率和死亡率,严重危害了家禽养殖业。接种疫苗是防控马立克氏病的有力手段,但是马立克氏病病毒毒力不断增强,现有疫苗无法提供完全的保护力。新研发的疫苗虽然能有效防控超强毒力毒株的感染,但是目前的检测技术无法对新研发的疫苗毒和野毒进行区分,市场上亟需新的检测技术为诊断马立克氏病病毒、辅助净化鸡群提供支持。猫疱疹病毒(feline herpesvirus,FHV-I)所致的猫上呼吸道疾病是临床中常见的一种严重的、高度的接触性传染病,常与其他猫病共同危害猫群的生命安全。目前临床上针对多数猫病均未有免疫效果较好的疫苗,疱疹病毒作为新型疫苗研发的工具载体有较好的免疫保护效果和市场应用前景,因此构建猫疱疹病毒重组疫苗对猫用疫苗的研发具有重大意义。基于此,本研究建立了区分马立克氏病疫苗毒和野毒的PCR鉴别检测技术,构建了带有细菌人工染色体元件的猫疱疹病毒重组毒。具体研究结果如下:***疫苗毒和野毒的PCR鉴别检测方法的建立本研究对NCBI Gen Bank数据库上所发表的140余株马立克氏病病毒株序列进行了全基因组分析,确定了马立克氏病CVI988和814疫苗毒相较于野毒(MDV-I)在meq基因位置有177 bp的碱基插入,新研发的疫苗株SC9-1与野毒株相比缺失了meq基因,r MDV-MS-△meq相较于野毒缺失了meq基因的前半部分的468 bp的碱基序列。基于此设计引物并对引物反应条件进行优化,最终建立了区分马立克氏病CVI988、814、SC9-1、r MDV-MS-△meq疫苗毒和野毒的PCR检测方法。以MDV-Ⅰ、814疫苗毒、鸡传染性贫血病毒(CIAV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)、禽白血病病毒(ALV)、鸡包涵体肝炎(IBH)、禽流感病毒(IAV)、新城疫病毒(NDV)、鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组为模板进行特异性实验,结果显示仅有MDV-Ⅰ、814疫苗毒有特异性扩增;以MDV-I和814疫苗毒为模板并设置阴性对照进行敏感性检测,结果显示本方法灵敏度均为0.01 ng/μL;以MDV-I和814疫苗毒为模板并设置阴性对照进行重复性检测,结果显示3次重复扩增结果稳定;使用本方法对临床样本进行符合率检测,结果显示本方法阳性样品符合率100%,阴性样品符合率100%。以上结果表明,本研究建立的区分马立克氏病野毒和疫苗毒的PCR检测方法特异性强,灵敏性良好,扩增结果稳定,临床样品检测符合率高。湖南某地种鸡场某3周龄鸡在1日龄免疫后仍表现出疑似马立克氏病的神经症状,但不确定是由野毒还是疫苗毒引起。应用本方法对病死鸡进行诊断,将扩增出的野毒和疫苗毒目的片段分别送测序以验证本方法的准确性。测序结果显示扩增出的目的片段分别与MDV-Ⅰ和疫苗毒株相一致,表明该方法可用于诊断MDV-I并与CVI988、814疫苗株以及SC9-1、r MDV-MS-△meq新研发的疫苗株相区分。2.猫疱疹病毒重组毒(rFHV-g G/EGFP)的构建本研究旨在利用CRISPR-Cas9技术精准切割病毒g G基因并利用同源重组将g G替换成BAC相关元件获得重组的猫疱疹病毒。首先,利用慢病毒包装系统构建了表达靶向g G基因sg RNA的CRFK-Cas9细胞系(CRFK-Cas9-sg G),将含有g G基因两端同源臂的BAC转移载体转染该细胞后,同时以MOI=0.1的感染剂量感染FHV-I,收取细胞盲传后,挑选在Eco-gpt压力筛选下带有绿色荧光的重组病毒。结果表明,CRISPR-Cas9技术的协同作用下于第二次盲传时便获得了重组毒。为了确定该重组毒的正确性,通过PCR鉴定以及将该重组毒基因组转染至真核细胞进行验证,并进一步分析该重组毒的体外生长特性以及遗传稳定性。结果表明,PCR能扩增出与预期相符的目的条带且测序结果与参考序列一致,转染真核细胞能拯救出具有感染性的病毒粒子,表明该病毒正确克隆至BAC载体;该重组毒的体外生长特性与野毒没有明显差异,体外增殖也具有遗传稳定性,表明BAC元件插入猫疱疹病毒基因组US3以及US6之间不影响其体外培养及增殖的基本特性。综上所述,本研究建立了区分马立克氏病CVI988、814以及SC9-1、r MDV-MS-△meq疫苗毒和野毒的PCR检测方法,并将其进行初步应用,可作为新型检测技术进一步开发利用,为马立克氏病的诊断以及鸡群净化提供技术支持。同时构建了带有细菌人工染色体(BAC)元件的猫疱疹病毒重组荧光毒,为猫用疫苗研发建立反向遗传操作平台奠定基础。

关键词：马立克氏病病毒Ⅰ型疫苗毒聚合酶链式反应猫疱疹病毒细菌人工染色体

ESG视角下CX公司负面事件的市场反应研究

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ESG视角下CX公司负面事件的市场反应研究

作者：周冬韵重庆理工大学

学位级别：硕士

目前我国的经济发展开始迈入高速增长向高质量发展的新阶段,高质量发展模式下的经济发展遵循的是健康、有序与可持续,所以,关注环境、社会、治理问题的ESG理念逐渐受到重视,成为企业实现可持续发展中至关重要的因素。其中,“E”与环保... 详细信息

目前我国的经济发展开始迈入高速增长向高质量发展的新阶段,高质量发展模式下的经济发展遵循的是健康、有序与可持续,所以,关注环境、社会、治理问题的ESG理念逐渐受到重视,成为企业实现可持续发展中至关重要的因素。其中,“E”与环保企业的基因高度匹配,环保企业在环境治理方面本应是“绩优生”,然而,我国的一些环保上市公司却为了追求短期经济效益,放任企业粗放发展,频繁被爆出污染环境及公司治理失效等负面事件,对企业、生态环境和经济社会的发展都造成了极大的危害。在此背景下,本文选择上市环保企业CX公司作为案例企业。该企业近年来连续发生超标排放污染物、中标违约和财务造假等ESG相关负面事件,且事件发生后,CX公司股价持续下跌,业绩连年亏损,损害了投资者的利益。采用事件研究法对不同类型负面事件对市场反应的影响进行研究,旨在为我国上市公司的ESG管理提供决策支持。首先,本文系统地梳理了ESG信息披露、负面事件和不同类型负面事件的市场反应三个方面的相关文献,并详细阐述了信号传递理论、委托代理理论和有效市场理论等相关理论,为后续案例分析提供了理论基础;其次,本文在对CX公司的环境污染事件、社会责任事件和公司治理事件进行了概述后,先是对这三起事件分别进行了短期的市场反应分析和整个ESG负面事件期的长期市场反应分析,接着对负面事件的市场反应结果进行了综合对比分析。最后,通过对CX公司在ESG建设力度、投资者因负面事件对企业丧失信心以及政府惩戒力度三个方面的研究,深入探讨CX公司负面事件市场反应的成因并为其提供了有针对性的对策建议。本研究发现,CX公司的三起负面事件均对市场反应造成了消极影响,严重程度从高到低的排序为:社会责任事件、公司治理事件和环境污染事件。同时,CX公司在环境、社会和公司治理方面的投入和表现存在明显不足,政府对不同类别的ESG负面事件施加的监管与处罚措施也呈现一定的差异性。基于上述结论,从企业、投资者和政府三个层面提出相关建议:加大企业的ESG建设力度、培养投资者的ESG责任投资意识和加强政府对ESG的管制力度。

关键词： ESG 环保企业负面事件市场反应

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液晶在气体传感领域的研究进展

液晶与显示 2024年第3期39卷 369-383页

作者：周冬刘永军哈尔滨工程大学物理与光电工程学院光纤集成光学教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150001

基于液晶的气体传感器是一个新兴的研究领域。液晶本身具有化学多样性、可逆的分子排列和固有的自组装能力,可以满足传感器高灵敏度、快速响应、低能耗和选择性等要求。随着相关研究的深入,液晶气体传感方法也不断被完善。本文回顾了近... 详细信息

基于液晶的气体传感器是一个新兴的研究领域。液晶本身具有化学多样性、可逆的分子排列和固有的自组装能力,可以满足传感器高灵敏度、快速响应、低能耗和选择性等要求。随着相关研究的深入,液晶气体传感方法也不断被完善。本文回顾了近几年基于液晶的气体传感技术,讨论了现有液晶气体传感技术的检测方法,主要包括向列相液晶的气体检测方法和胆甾相液晶的气体传感方法。向列相液晶的气体传感包括功能化基板的液晶膜传感、特性几何形貌的液晶传感和液晶液滴传感方法。胆甾相液晶的气体传感主要包括聚合物胆甾相液晶膜的气体传感、液晶液滴传感、基于光纤的气体检测以及纤维素气体传感。最后对液晶气体传感的应用和发展进行了阐述。

关键词：气体传感向列相液晶胆甾相液晶

SLC12A3基因新型纯合突变导致的Gitelman综合征合并2型糖尿病家系追踪

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中华糖尿病杂志 2024年第2期16卷 248-253页

作者：周冬祺唐诗韵陈秋四川泰康医院中医科成都610213 成都中医药大学附属医院GCP中心成都610072 成都中医药大学附属医院内分泌科成都610072

该文报道1例新型纯合突变导致的Gitelman综合征合并2型糖尿病成人患者的诊疗经过。患者为46岁男性,主因"头晕乏力3个月"入院,入院后通过基因检测证实患者为SLC12A3基因C.1567G>A纯合突变。此突变是一种错义突变,将编码蛋白的第523个氨... 详细信息

该文报道1例新型纯合突变导致的Gitelman综合征合并2型糖尿病成人患者的诊疗经过。患者为46岁男性,主因"头晕乏力3个月"入院,入院后通过基因检测证实患者为SLC12A3基因C.1567G>A纯合突变。此突变是一种错义突变,将编码蛋白的第523个氨基酸残基从丙氨酸改变为苏氨酸,互补DNA测序显示该突变导致外显子12异常剪接,会使得终止密码子过早出现并影响钠氯共转运蛋白。该基因突变导致的慢性顽固性电解质紊乱会进一步引发血糖异常和胰岛功能受损。患者诊断为Gitelman综合征合并2型糖尿病,主要治疗为长期口服氯化钾和门冬氨酸钾镁口服液。经过随访,患者在补充钾镁口服药物后血糖及胰岛功能可以得到一定的恢复。患者来自于拥有10个亲生姊妹的家庭中,研究进一步追踪患者直系亲属相同位点的基因情况,为Gitelman综合征临床表型和基因型相关性提供更全面的临床证据。

关键词：糖尿病,2型 Gitelman综合征新型纯合突变家族随访

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财务风险的分析与防范

现代经济信息 2012年第24期 315-315页

作者：周冬玉渤海大学

财务风险是指公司在各项财务活动中由于各种难以预料和无法控制的因素,导致企业蒙受损失的机会和可能。从财务风险的不同特征,风险在企业外部、内部产生的原因,从资产负债等各方面分析财务风险的客观存在,无法消除,只得对财务风险进行... 详细信息

财务风险是指公司在各项财务活动中由于各种难以预料和无法控制的因素,导致企业蒙受损失的机会和可能。从财务风险的不同特征,风险在企业外部、内部产生的原因,从资产负债等各方面分析财务风险的客观存在,无法消除,只得对财务风险进行相应的防范,通过树立风险意识,把不断变化的财务管理宏观环境进行认真分析和研究,加强财务管理人员对财务风险的客观性的认识,实施债务重组,提高财务决策的科学水平,建立财务风险预警系统等方式,将其控制在一个合理的、可接受的范围之内,从而使公司达到可持续发展的目的。

关键词：财务风险定义特征分析防范

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试论强化女图书馆员的成才意识

职业圈 2007年第11X期 173-173,181页

作者：周冬玉包头师范学院图书馆内蒙古包头014030

根据图书馆员女性占多数这一现状,文章分析了女性馆员的职业特点,提出了塑造女性馆员完美人格,强化成都意识对图书馆的事业发展具有重要意义。

关键词：女性图书馆员成才意识图书馆

多尺度特征融合的双阶段Transformer去雨网络

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小型微型计算机系统 2024年

作者：李世平周冬明云南大学信息学院

图像去雨研究旨在提升图像质量，强化视觉感知。现有去雨算法由于通常采用单阶段实现，在去除雨纹干扰的同时会造成无雨背景的信息缺失，导致无法兼顾去雨效果和图像清晰度。为此，本文提出了一种基于Transformer的多尺度、双阶段U型去... 详细信息

图像去雨研究旨在提升图像质量，强化视觉感知。现有去雨算法由于通常采用单阶段实现，在去除雨纹干扰的同时会造成无雨背景的信息缺失，导致无法兼顾去雨效果和图像清晰度。为此，本文提出了一种基于Transformer的多尺度、双阶段U型去雨网络，将去雨任务通过两个分别侧重于雨纹提取和细节修复的子网络逐步完成。第一阶段，引入反投射技术提出了一种特征融合模块，通过迭代逐渐融合不同尺度下的特征信息以弥补U型结构造成的信息缺失。同时，基于Boosting算法提出了一种增强连接的特征提取模块，以增强细节特征，提高输出信噪比。第二阶段，提出了一种细节增强注意力模块对粗糙去雨图像进行细节修复以生成轮廓清晰的无雨图像。实验结果表明，本文提出的算法在合成和真实数据集上都取得了出色的去雨效果，在Rain100H、SPA-data等数据集上相比近期其他优秀去雨算法均有一定程度的指标提升。

关键词：图像去雨 Transformer 多阶段网络多尺度特征融合

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共同所有权会促进企业创新吗?

中央财经大学学报 2024年第8期 57-70页

作者：黄沁雪周冬华暨南大学管理学院江西财经大学会计学院

本文基于2007—2019年中国沪深A股市场机构投资者共同持股上市公司的数据,研究分析了共同所有权与企业创新之间的关系。实证结果表明,共同所有权与企业创新显著正相关,即与未拥有共同机构投资者的企业相比,拥有共同机构投资者的企业创... 详细信息

本文基于2007—2019年中国沪深A股市场机构投资者共同持股上市公司的数据,研究分析了共同所有权与企业创新之间的关系。实证结果表明,共同所有权与企业创新显著正相关,即与未拥有共同机构投资者的企业相比,拥有共同机构投资者的企业创新能力更高。共同所有权主要通过缓解产品市场竞争和降低信息不对称程度从而促进企业创新活动。更进一步地,当共同机构投资者为长期型机构投资者时,共同所有权与企业创新之间正向关系更为显著。相较于位于经济发达地区的上市公司,共同所有权主要提高了位于经济欠发达地区的上市公司的创新水平。本文的研究结论有助于丰富我国共同所有权的相关经济后果研究,为共同所有权与企业创新的联动关系提供了直接的经验证据。

关键词：共同所有权企业创新产品市场竞争信息不对称

投服中心行权会影响企业劳动投资效率吗?——来自中国上市公司的经验证据

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北京工商大学学报（社会科学版） 2024年第4期39卷 88-99页

作者：周冬华徐移兰江西财经大学会计学院江西南昌330013

中证中小投资者服务中心(以下简称“投服中心”)推出的持股行权政策是资本市场的重要制度创新,为解决中小投资者保护难题提供了政策思路。基于2014—2020年中国A股上市公司数据,构建多期双重差分模型检验了投服中心行权对企业劳动投资... 详细信息

中证中小投资者服务中心(以下简称“投服中心”)推出的持股行权政策是资本市场的重要制度创新,为解决中小投资者保护难题提供了政策思路。基于2014—2020年中国A股上市公司数据,构建多期双重差分模型检验了投服中心行权对企业劳动投资效率的影响。研究发现,投服中心行权能够显著提升企业劳动投资效率。机制检验结果显示,投服中心行权通过降低信息不对称和缓解代理问题进而提升企业劳动投资效率。异质性分析结果表明,在劳动投资不足、治理水平较低的企业中,以及行权方式为专项行动、股东大会和网上行权时,投服中心行权对企业劳动投资效率的提升效应显著。进一步研究发现,投服中心行权通过提升劳动投资效率,提高了企业业绩和企业价值。因此,应充分发挥投服中心行权对企业劳动投资效率的提升作用,提高公司治理水平,以保护中小投资者合法权益。

关键词：投服中心持股行权企业劳动投资效率信息不对称代理成本中小投资者保护